PCR—SSP基因分型技术在ABO疑难血型定型中的应用

目的研究聚合酶链式反应-特异性序列引物(PC—SSP)基因分型技术在ABO疑难血型鏊定中的应用.方法收集8例来自广东省肇庆市无偿献血者的AB0疑难血型样本,采用正反定型实验、吸收放散试验等一系列血型血清学方法进行检测;提取基因组DNA,并用PCR—SSP基因分型毡术,特异性扩增ABO基因片段,根据有无PCR产物以及产物长度,判断样本的基因型。结果通过凝胶电泳检测PCR反应的特异性

现代检验医学杂志

第2 6卷

第 4期

21 0 1年 7月

JMo a dL bMe, 12, .,uy 2 1 d Vo. 6 No 4 Jl. 0 1

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P R S P基因分型技术 C—S在 AB O疑难血型定型中的应用’陈志忠，扬勋，尚良，廖陈余文潮，梁剑锋，车京霞 (肇庆市中心血站，东肇庆广摘要：的目

56 2 ) 2 00收

研究聚合酶链式反应一异性序列引物 ( C S P)因分型技术在 AB疑难血型鏊定中的应用 .方法特 P—S基 O

集 8来自广东省肇庆市无偿献血者的 AB疑难血型样本，用正反定型实验、收放散试验等一系列血型血清学方法例 O采吸

进行检测；提取基因组 DN并用 P R S P基因分型芯术， A, C—S特异性扩增 A O基因片段，据有无 P R产物以及产物长 B根 C度，断样本的基因型。果通过凝胶电泳检测 P R反应的特异性产物，断样本 1 6号 AB基因型为 A/型，本判结 C判~ O 0样 7 8号为 B O型。,/ 8例疑难 AB基因分型结果与其血型的血清学分型结果吻合。论 O结 AB疑难血型定型的解决是一个 O

复杂的难题， P R S P基因分型是一种方便、而 C—s快速、可靠的技术，对于解决 AB O疑难血型鉴定非常有用。

关键词： O血型；因分型； AB基聚合酶链反应；列特异性引物序中图分类号： 5 . 1文献标志码：文章编号：6 17 1 (0 1 0—5 -3 R4 7 1 B 1 7—4 4 2 1 ) 40 3 0d i1 . 9 9 j i n 1 7—4 4 2 1 . 4 0 7 o:0 3 6/ .s . 6 17 1 . 0 1 0 . 1 s

PCR- SP Ge o y ng App i a i n n ABO p n s r pa i s S n t pi lc to o Ty i g Dic e nc eCHEN h—h n LI Z iz o g, AO n— U CHEN h n -in YU e - h o, ANG in fn Ya g X D, S a g l g, a W n c a LI Ja -e g,CH E Jn - i ( h o ig C n e o d Stto s Gu n d g Z a q n 2 0 0, i a ig xa Z a q n e trBlo a in, a g o h o ig 5 6 2 Chn ) nAb ta t Ob e tv To s

u yt ea p iaino CR- S e o y igtc n lg n ABO y igds r p n is Meh d sr c: j cie t d h p l t f c o P S P g n tpn e h o o yo t pn ice a ce . t o sAB d s r p n is c s sfo 8 d n r h o i gd s r to a g o g p o i c r e e t d b e iss r l g c lt s s O ic e a ce a e r m o o s i Z a q n it i fGu n d n r v n e we e d tc e y s re e o o i e t n c a

icu i g f r r/ e e s y ig a d a s r to/ lto e t Usn h e o c DNA x rce r m a h p rp e a n ldn o wad r v re t pn n b o p in eu in ts . ig t e g n mi e ta td fo e c ei h r lb o d s mp e t e g n t p so h i AB g n r n l s d b o y r s h i e c i n s q e c p cf rme P l o a l, h e o y e ft e r O e ewe e a ay e y p l me a e c a n r a t— e u n e s e i c p i r( CR— o i

S P) PC fa me t r d n ie yg l lcr p o e i. s ls Th e o y e ft ef s ae r ee tdA/ S . R r g nswe eie tf d b e e to h rss Reu t i e eg n tp so h i t6c s sweed tce r

O. e oh rt O c s sw r/ A l f h i A O g n t p sw r o s tn i h eoo i l e ut. o cu in Th t e W a e e eB O. l o er B e o y e e ec n i e tw t t es r lgc s l C n ls t s h ar s oAB d s r p n is s l i g i a c mp e a k ABO e o y i g t c n q e c u d b i l r p d a d a c r t t o . t O ic e a ce o v n s o l x t s: g n t p n e h iu o l e a smp e,a i n c u a e me h d I’

S v r s f li e o v n e y u e u n r s l i g ABO y i g d s r p n is t p n ic e a ce . Ke wo d AB b o d g o p; e o y i g; o y r s h i e c i n; e u n e s e i c p i r y r s: O l o r u g n t p n p l me a e c a n r a t o s q e c p cf rme i

1 1样本来源 8例疑难血型样本均来自肇庆市 .统， B血型的检定是安全、 A O有效输血的前提。以无偿献血者，常规血型鉴定检测中，在主要表现为凝集实验为基础的血清学技术在血型的研究和临床输血实践中功不可没，至今仍然是最重要的技术之一，血型血清学技术具有局限性，正反定型但在出现矛盾等情况下，常见红细胞直接抗球蛋白试验阳性或多凝集、疾病或遗传变异造成的抗原弱表达等原因，需要借助基因分型技术加以鉴定。AB则 O血型基因分型技术， D以 NA为检材的基因分型技术，采用 P R S P技术，用序列特异性引物，常 C—S使 通过 P R反应特异性扩增 AB C O基因片段，据是根否产生 P R产物来指定相应 AB基因。研究成 C O本功地利用 AB基因分型技术解决了疑难 AB血 O O型的鉴定问题。1材料和方法

AB血型是临床输血实践中最重要的血型系 O

正、定型不相符，中血型血清学检测初步怀疑反其

为 A型的共有 6例，样本经正定型检测， 2例肉眼观察与抗 A血清均不出现凝集，经吸收放散实但验检出 A抗原；例在显微镜下可见红细胞与抗一 2A有弱凝集，时吸收放散实验检出 A抗原；同 2例

样本血浆中存在意外抗体干扰反定型实验，清学血方法鉴定推测为 A型。另外经血型血清学方法怀疑为 B型的样本有 2例， 1例样本正定型在显微镜下可见红细胞与抗一 B有弱凝集，同时吸收放散实验检出 B抗原； 1例样本正定型在显微镜下可见红细胞与抗一有弱凝集，不出 B抗原，吸收放散 A检但

实验检出 B抗原。对于这 8例疑难 A O血型定型 B案例，别采集献血者 5mld D A抗凝血 5分 / lE T

基金项目：肇

庆市科技计划项目(目编号：O 9 1 2 )项 20E 84。作者简介：志忠 (9 8,治医师，要从事采供血管理和血液安全研究。陈 1 5一)主主通讯作者：尚良 (9 1,陈 18一)检验技师，学硕士，医主要从事临床输血检验工作和输●安究，e: 60206Emif m 20￣13 O .全研 Tl 30222。—a: u00 6. m 1 lm i C

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