机能学实验设计格式和范例 - 图文

机能学实验设计

实验名称： 外源性PS和内源性PS在肺水肿疗效

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中的比较

一、实验设计的目的意义：实验设计的目的意义，国内外研究现状，存在的问题，解决问题的思路。 目的与意义:复制肺水肿模型，利用直接使用外源性表面活性物质和药物促进内源性表面活性物质释放的方法，比较研究外源性PS和内源性PS在肺水肿中的治疗作用。本实验的目的即在于探讨外源性PS能否在肺水肿的防治中作为一种较为理想的内源性PS不足的替代药物，为临床上治疗肺水肿的联合用药提供一种新思路，具有十分重要的意义。 国内外研究现状：任何原因引起肺泡表面活性物质（PS）减少或灭活，均可使肺泡表面张力增加，肺泡过度缩小甚至萎陷，间质负压加大，继而诱发或加重间质及肺泡水肿，临床体外循环后发现，肺含水量的明显增加与内源性PS活性降低有显［1］著的相关性。肺泡表面活性物质（PS）具有降低肺泡表面张力，维持肺泡稳定性，防止肺胞萎缩，调节肺顺应性，阻止肺毛细血管内液体渗入肺间质和肺泡内，促进肺水的清除等重要生理功能。据相关文献报道，外源性PS能够在一定程度上抑制肺［2］水肿的发生。张更荣等观察了气管内滴注外源性PS治疗家兔急性肺水肿的疗效， ［3］ 发现伤肺肺含水量明显减少、存活时间显著延长。同样应用外源性PS治疗大鼠肺水肿、肺出血实验中也发现肺泡内蛋白质渗出显著减少，肺体指数降低，肺含水［4.5］量显著降低，肺水肿程度减轻 。诸多资料显示，外源性PS疗法可能成为有效治疗肺水肿的综合措施之一。外源性PS治疗可减轻肺水肿程度，抑制肺水肿形成。 目前，内源性PS的产生机制国内已经研究的很透彻了，PS与肺泡Ⅱ型上皮细胞共同构成了PS系统，该系统异常与肺部损伤密不可分，它既是肺损伤的结果，同时也是肺损伤过程中的重要内在因素。肺泡Ⅱ型上皮细胞是合成表面活性物质的主要场所，细支气管非纤毛上皮细胞（Clara细胞）也能分泌少量的PS物质。PS在细胞内质网中合成，通过某种机制转运到高尔基复合体和多囊泡体，然后转运到板层体储存，板层体通过胞吐作用分泌入肺泡腔。肺水肿可导致表面活性物质减少、功能缺 ［6］陷。那么，就目前，一部分药物具有直接恢复肺泡Ⅱ型上皮细胞的生理功能，使其分泌肺泡表面活性物质增多，以达到辅助治疗肺水肿的作用，如：肾上腺糖皮质激素，内皮素-1，盐酸氨溴索等，而其中盐酸氨溴索具有可促进肺表面活性物质的分泌的作用，而对肺水肿没有其他干扰的治疗作用。 结合本实验的目的，即探讨外源性PS能否在肺水肿的防治中作为一种较为理想的内源性PS不足的替代药物。利用直接使用外源性表面活性物质和药物促进内源性表面活性物质释放的方法，看那种更具有临床使用价值。 存在的问题：目前市场上已有外源性的PS使用，主要用于新生儿呼吸窘迫综合征的治疗。外源性PS目前只局限在实验室证明有治疗肺水肿的作用，还未查见广泛用于临床。 解决问题的思路：用快速滴注生理盐水制作动物试验性肺水肿模型。对肺水肿动物分别行外源性PS灌入气管治疗和促内源性表面活性物质释放药，灌入气管治疗，并作实验对照和空白对照。

参考文献： [1] 邢泉生，张善通，陈张根，等.体外循环影响内源性表面活性物质的机制．上海医科大学学报，1999，26(1)：1—3． [2]徐建洪 周继红 杨军民.表面活性物质在创伤性肺水肿的作用.中华现代临床医学杂志 2004年5月 第2卷 第5B期 [3]张更荣 王雁 曹勇. 肺表面活性物质防治急性肺水肿作用的实验.江西医学院学报1996；36(1)：17-20 [4] 金IIb立，徐锦，孙家娥，等．应用不同配方磷脂预防大鼠肺出血和肺水肿的研究．中华儿科杂志，1997，35(2)：71—73． [5] 郑珊，张文颖，孙波，等．一氧化氮治疗小肠缺血再灌注所致肺损伤的实验研究．中华小儿外科杂志，2001，22(3)：177—179． [6] Nitta K，Kobay,~hi T．III aim lt of sttrfactant activity and ventilationby protein in lung edemafluid．RespirPhysiol，1994，95(1)：43—51． [7]丁延楷，唐亦奇．肺血管外肺水量的重量分析法及其应用．中国病理生理学杂志，1987，4：254-255．

二、实验设计方案（实验设计目标,拟解决的主要问题, 实验动物设计,实验专业

设计，实验统计设计,实验方法设计，可行性分析,预期结果，实验设计工作时间安排）。

（一）实验设计目标，拟解决的关键问题

设计目标：探讨外源性肺表面活性物质和内源性肺表面活性物质对实验性肺水肿治疗作用上所存在的区别，从而探讨外源性PS能否在肺水肿的防治中作为一种较为理想的内源性PS不足的替代药物。

拟解决的关键问题：实验模型的制备。对试验性肺水肿的模型进行分组与实验结果分析。

（二）实验设计 1、实验动物设计

我们选用家兔作为实验动物，有以下几点理由： 1）、家兔易得到，容易饲养，在科研工作中被广泛利用。 2）、家兔肺相对较大，易于得到样品，能在称重过程中减少实验误差。 2、实验专业设计

选用家兔作为实验动物，给予外源性肺表面活性物质和内源性肺表面活性物质，观察对实验性肺水肿治疗作用，观察兔子死亡时间（min），肺系数（g／kg），肺湿／干重比（g／g），血管外肺水（g）等实验指标。 3、实验统计设计

实验统计设计中应始终贯彻随机、对照、重复三大原则。

（1）随机：选正常成年健康重相近的家兔80只，将80只家兔按体重由小变大编号后，从随机数字表中查取随机数字，依次抄录于家兔编号下。具体方法：动物编号为1—80号，随机数字从11行第一个数字开始接着抄写80个，按照能被4除的规律：不余到A组，余1到B1组，余2到B2组，余3到B3组，每组20只。

（2）对照：本组实验做了空白对照和实验对照，在前面的专业设计里已经提及。 （3）重复：本实验采用的是每实验小组有20只家兔，具有一定的重复性。 （4）统计数据收集：本实验搜集计量资料，初步确定对各组实验数据的比较分为实验值和基础值比较。

表1 实验数据收集记录表 编号

肺系数（g／kg） A

B1 B2 B3

肺湿／干重比（g／

g） A

B1 B2 B3

血管外肺水（g） A

B1 B2 B3

兔子死亡时间（min） A

B1 B2 B3

组别 A （n＝20） B1（n＝20） B2（n＝20） B3（n＝20） 注：基础值比较 组别 A （n＝20） B1（n＝20） B2（n＝20） B3（n＝20） 表2 四组动物体重及模型形成时间比较（±s） 模型形成时间（min） 兔子死亡时间（min） 表3 四组动物肺组织含水量测定比较（±s） 肺系数（g／kg） 肺湿／干重比（g／g） 血管外肺水（g） 注：实验值比较 （5）统计数据分析 本实验采用计量资料来测定各种指标的数值，所有数据均采用平均数±标准差（±s）表示，四组间实验数据比较行完全随机单因素方差分析，组间两两比较行q检验，B1、B2、B3组模型形成时间行两样本比较t检验，均以0.05作为显著性检验水准。实验数据记录如表3。 四组间实验数据比较行完全随机单因素方差分析，如各组肺系数总体均值的比较，其方法如下： （1）建立检验假设 H0：?1=?2=?3（各组肺系数总体均值相等）。 H1：?1、?2、?3不等或不全相等，α＝0.05。 （2）计算统计量 利用统计学专业软件SPSS做One-way ANOVA 。 ( 3 ) 查F值表，确定P值，得出结论。 B1、B2、B3组模型形成时间行两样本比较t检验，如B1与B2组之间模型形成时间的比较，其方法如下： （1）建立检验假设 H0：?1=?2（两组肺模型形成时间总体均值相等）。

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