生化习题集
更新时间:2024-04-27 13:15:01 阅读量: 综合文库 文档下载
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第一章 蛋白质结构与功能
一、单选题
1. 维系蛋白质二级结构稳定的化学键是 A. 盐键 B. 二硫键 C. 肽键 D. 疏水键 E. 氢键
2.关于蛋白质二级结构错误的描述是 A. 蛋白质局部或某一段肽链有规则的重复构象 B. 二级结构仅指主链的空间构象
C. 多肽链主链构象由每个肽键的两个二面角所确定
D. 整条多肽链中全部氨基酸的位置 E. 无规卷曲也属二级结构范畴 3.蛋白质分子中的肽键
A. 是由一个氨基酸的 α-氨基和另一个氨基酸的 α-羧基形成的
B. 是由谷氨酸的 γ-羧基与另一个 α-氨基酸的氨基形成的
C. 是由赖氨酸的 ε-氨基与另一分子 α-氨基酸的羧基形成的
D. 氨基酸的各种氨基和各种羧基均可形成肽键 E. 以上都不是
4.以下有关肽键的叙述错误的是 A. 肽键属于一级结构 B. 肽键具有部分双键的性质
C. 肽键中 C-N 键所连的四个原子处于同一平面 D. 肽键中 C-N 键长度比 C-Cα 单键短 E. 肽键旋转而形成了 β-折叠 5.蛋白质多肽链具有的方向性是 A. 从 5′端到 3′端 B. 从 3′端到 5′端 C. 从 C 端到 N端 D. 从 N端到 C 端 E. 以上都不是
6.蛋白质分子中的 α-螺旋和 β-片层都属于 A. 一级结构 2 B. 二级结构 C. 三级结构 D. 四级结构 E. 结构域
7.在各种蛋白质中含量相近的元素是
A. 碳 B. 氢 C. 氧 D. 氮 E. 硫
8.完整蛋白质分子必须具有 A. α-螺旋 B. β-片层 C. 辅基 D. 四级结构 E. 三级结构
9. 蛋白质吸收紫外光能力的大小,主要取决于A. 含硫氨基酸的含量 B. 碱性氨基酸的含量 C. 酸性氨基酸的含量 D. 芳香族氨基酸的含量 E. 脂肪族氨基酸的含量 10. 蛋白质溶液的稳定因素是 A. 蛋白质溶液的粘度大
B. 蛋白质分子表面的疏水基团相互排斥 C. 蛋白质分子表面带有水化膜 D. 蛋白质分子中氨基酸的组成 E. 以上都不是
11. 维系蛋白质四级结构主要化学键是 A. 盐键 B. 二硫键 C. 疏水作用 D. 范德华力 E. 氢键
3 12. 维系蛋白质中 α-螺旋的化学键是 A. 盐键 B. 二硫键 C. 肽键 D. 疏水键 E. 氢键
13. 含有两个羧基的氨基酸是 A. 赖氨酸 B. 苏氨酸 C. 酪氨酸 D. 丝氨酸 E. 谷氨酸 二、多选题 1. 蛋白质变性 A. 由肽键断裂而引起
B. 都是不可逆的 C. 可使其生物活性丧失 D. 可增加其溶解度 2. 蛋白质一级结构 A. 是空间结构的基础 B. 指氨基酸序列 C. 并不包括二硫键 D. 与功能无关 3. 谷胱甘肽
A. 是体内的还原型物质 B. 含有两个特殊的肽键 C. 其功能基团是巯基 D. 为三肽 三、 名词解释 1. 肽键 2. 蛋白质变性 4 3. 蛋白质等电点 4. α-螺旋 5. β-片层 6. 蛋白质三级结构 四、 问答题
1.蛋白质的基本组成单位是什么?其结构特征如何?
2.蛋白质一级结构、空间构象与功能之间的关系?
链伸向螺旋外侧。每 3.6 个氨基酸残基螺旋上升一圈。α-螺旋的稳定依靠上下肽键之间所形成的氢键维系。
5. β-片层为蛋白质二级结构。β-片层中,多肽链充分伸展,各个肽单元以 Cα 为旋转点,依次折叠成锯齿状结构,氨基酸残基侧链交替地位于锯齿状结构的上下方。两条以上肽链或一条肽链内的若干肽段可平行排列,肽链的走向可相同,也可相反。氢键是维系稳定的重要因素。
6.蛋白质的三级结构是指整条肽链中全部氨基酸残基的相对空间排布,即整条肽 链所有原子在三维空间的排布位置。蛋白质三级结构的形成和稳定主要靠次级键,包括氢键、离子键、疏水作用、范德华力、二硫键。 四、问答题
1. 蛋白质的基本组成单位是氨基酸。组成蛋白质的氨基酸有20种,且均为L- α - 氨基酸 (除甘氨酸外)。即在 α-碳原子上有一个氨基、一个羧基、一个氢原子和一个侧链。每个氨基酸的侧链各不相同,因此表现不同性质的结构特征。 根据其侧链的结构和理化性质可分成四类:非极性疏水性氨基酸;极性中性氨基酸;酸性氨基酸;碱性氨基酸。 2.1. 蛋白质的功能是由其特定的构象所决定的,蛋白质的一级结构是空间构象的基础,而蛋白质的空间构象则是实现其生物学功能的基础。一级结构相似的多肽或蛋白质,其空间构象以及功能也相似。例如不同种属的胰岛素分子结构都是由 A 和 B 两条链组成,2 且二硫键的配对和空间构象也很相似,一级结构仅有个别氨基酸差异,因而它们都有降低血糖调节各种物质代谢的相同生理功能。某些情况下蛋白质分子中起关键作用的氨基酸残基缺失或被替代,可通过影响空间构象而影响其生理功能。例如正常人血红蛋白 β 亚基的第 6位氨基酸是谷氨酸,而镰刀形贫血患者的血红蛋白中,谷氨酸变异成了缬氨酸,即酸性氨基酸被中性氨基酸替代,即使这一个氨基酸的改变,将使血红蛋白聚集粘着,红细胞变成镰刀状且极易破碎、带氧功能降低、产生贫血。蛋白质的功能与特定的空间构象密切相关,蛋白质构象是其生物活性的基础。例如,肌红蛋白是一个只有三级结构的单链蛋白质,肌红蛋白的三级结构折叠方式使辅基血红素能与 O2 结合与解离,发挥储氧的功能。血红蛋白的主要功能是在循环中运送氧,这一功能依赖于 Hb 具有四级结构的空间构象。Hb 由四个亚基组成四级结构,
第一章 蛋白质结构与功能 参考答案
一、单选题
1.E 2.D 3.A 4.E 5.D 6.B 7.D 8.E 9.D 10.C 11.C 12.E 13.E 二、多选题 1.C 2.AB 3.ABCD 三、名词解释
1.一个氨基酸的氨基与另一个氨基酸的羧基脱去一分子的水,所形成的酰胺键称为肽键。
2.在某些理化因素的作用下,使蛋白质的空间构象破坏,进而改变蛋白质的理化性质和生物活性,称为蛋白质变性。
3.在某一 pH 值溶液中,蛋白质分子解离成正电荷和负电荷的趋势相等,其净电荷为零,此时溶液的 pH 值称为该蛋白质的等电点。
4.α-螺旋为蛋白质二级结构。在 α-螺旋中,多肽链主链围绕中心轴作有规律的螺旋式上升,螺旋的走向为顺时针方向,即所谓的右手螺旋。氨基酸侧
2
每个亚基可以结合一个血红素并携带一分子氧,共结合四分子氧。当 Hb 中第一个亚基与 O2 结合以后,可促进第二及第三个亚基与 O2 的结合。当前三个亚基与 O2 结合后,又可大大促进第四个亚基与 O2结合。
A.tRNA分子中含有稀有碱基 B.tRNA的二级结构有二氢尿嘧啶环 C.tRNA二级结构呈三叶草形
D.tRNA分子中在二级结构的基础上进一步盘曲为倒“L”形的三级结构
E.反密码环上有多聚腺苷酸结构 7.DNA变性是指()
A.DNA分子由超螺旋降解至双链双螺旋 B.分子中磷酸二酯键断裂 C.多核苷酸链解聚 D.DNA分子中碱基水解 E.互补碱基之间氢键断裂 8.DNA变性伴有的特点是() A.是循序渐进的过程 B.变性是不可逆的 C.溶液粘度减低 D.形成三股链螺旋
E.260nm波长处的光吸收增高 9.有关 DNA复性的正确说法是() A.37 。 C 为最适温度 B.4 。 C 为最适温度
C.热变性后迅速冷却可以加速复性 D.又叫退火
E.25 。 C 为最适温度
10.组成核小体的主要组份是() A.RNA和非组蛋白 B.RNA和组蛋白 C.DNA和非组蛋白 D.DNA和组蛋白 E.rRNA和组蛋白
11.参与 hnRNA剪辑与转运的小 RNA是() A.sn RNA B.snoRNA C.scRNA D.siRNA E.snmRNA
12.以下哪一点不能用来区别DNA和 RNA() A.碱基不同 B.戊糖不同 C.含磷量不同 D.功能不同
E.在细胞内分布部位不同 多选题
1.直接参与蛋白质生物合成的 RNA是()
第二章 核酸的结构与功能
一、选择题 单选题
1.核酸分子中储存、传递遗传信息的关键部分是() A.核苷 B.碱基序列 C.磷酸戊糖 D.磷酸二酯键 E.戊糖磷酸骨架
2.DNA与 RNA完全水解后,其产物的特点是() A.核糖不同,部分碱基不同 B.核糖不同,碱基相同 C.核糖相同,碱基不同 D.核糖相同,碱基部分相同
E.磷酸核糖不同,稀有碱基种类含量相同 3.核酸具有紫外吸收能力的原因是() A.嘌呤和嘧啶中有氮原子 B.嘌呤和嘧啶中有硫原子 C.嘌呤和嘧啶连接了磷酸基团 D.嘌呤和嘧啶环中有共轭双键 E.嘌呤和嘧啶连接核糖
4.有关 DNA双螺旋模型的叙述哪项不正确() A.有大沟和小沟
B.一条链是 5’-3’,另一条链是 3’-5’方向 C.双螺旋内侧碱基之间借氢键相连 D.每一个戊糖上有一个自由羟基 E.碱基对平面垂直于螺旋轴
5.有关 tRNA分子的正确解释是()
A.tRNA的功能主要在于结合蛋白质合成所需要的各种辅助因子
B.tRNA分子多数由 80 个左右的氨基酸组成 C.tRNA3'-末端有氨基酸臂
D.tRNA的 5'-末端有多聚腺苷酸结构
E.反密码环中的反密码子的作用是结合DNA中相互补的碱基
6.关于 tRNA的叙述哪一项是错误的()
3
A.rRNA B.hnRNA C.mRNA D.tRNA
2.真核生物中核糖体上 tRNA有() A.5 S B.18 S C.23 S D.28 S
3.有关核酸复性的正确叙述为() A.复性的最佳温度为 Tm- 25 。 C
B.不同的 DNA分子变性后,在合适温度下都可复性
C.热变性后相同的 DNA经缓慢冷却后可复性 D.DNA的复性过程也称作退火 4.有关 ATP 的正确叙述是() A.ATP 可以游离存在 B.ATP 含有 3 个磷酸酯键 C.ATP 含有 2 个高能磷酯键 D.是体内贮能的一种方式 二、名词解释 1. 增色效应 2. Tm 3. snmRNAs 4. 碱基配对 5. 核酸变性与复性 三、问答题
1. 比较DNA和 RNA在化学组成上的异同点。 2. DNA的二级结构及其特点。 3. RNA的主要类别与功能。
4. tRNA的一级结构和二级结构有何特点?这种结构特点与其功能 有什么关系?
链程度相关,这种关系称为增色效应。
2.Tm 熔点或熔解温度,是指 DNA分子达到 50%解链时的温度。
3.snmRNAs 除了主要三种 RNA 外,细胞的不同部位还存在着许多其他种类和功能的小分子 RNA,这些小 RNA 被通称为非 mRNA 小 RNA(small non-messenger RNA,snmRNAs)。
4.碱基配对 两条链的碱基之间可以氢键相结合,由于碱基结构的不同,其形成氢键的能力不同,因此产生了固有的配对方式,即 A-T配对,形成两个氢键;G-C 配对,形成三个氢键。RNA中则 A-U配对。这种配对关系也称为碱基互补。
5.核酸变性与复性 DNA变性是指在某些理化因素作用下,双螺旋DNA分子中互补碱基对之间的氢键断裂,双螺旋结构松散,变成单链的过程。伴有增色效应。变性 DNA 在适当的条件下,如温度再缓慢下降时,由于两条链有互补关系解开的两条链又可重新缔合而形成双螺旋的过程称复性,也被称为退火。 三、问答题
1. 比较DNA和 RNA在化学组成上的异同点。 组 成 成 分 核酸种类
碱 基 戊 糖 磷 酸 基本组成单位 DNA A、G C、T 脱氧核糖 Pi dNTP RNA A、G C、U 核 糖 Pi NTP 2. DNA的二级结构及其特点。 DNA分子的二级结构——双螺旋结构
DNA 是右手双螺旋结构,两条链呈反向平行走向;双链之间存在 A-T 和 C-G 配对规则;碱基平面间的疏水性堆积力和互补碱基间的氢键,是维系双螺旋结构稳定的主要因素。 3.RNA的主要类别与功能。
RNA 的功能是参与遗传信息的传递与表达,主要存在于细胞液。RNA 根据在蛋白质生物合成中的作用可分三类:信使 RNA(mRNA):以 DNA为模板合成后转位至胞质,在胞质中作为蛋白质合成的模板。转运 RNA(tRNA):在细胞蛋白质合成过程中,作为各种氨基酸的运载体并将其转呈给 mRNA。核蛋白体 RNA(rRNA)):rRNA与核蛋白体蛋白共同构成核蛋白体,核蛋白体是细胞合成蛋白质的场所。其他小 RNA(SnmRNA)在 hnRNA 和 rRNA 的转录后加工、转运以及基因表达过程
第二章 核酸的结构与功能 参考答案
一、选择题
单选题 1.B 2.A 3.D 4.D 5.C 6.E 7.E 8.E 9.D 10.D 11.A 12.C 多选题 1. A、 C、D 2. A、B、 D 3. A、 C、D 4. A、B、C、D、 二、名词解释
1. 增色效应 核酸变性时,由于原堆积于双螺旋内部的碱基暴露,对260nm紫外吸收增加,并与解
4
的调控等方面具有重要生理作用,并且具有时间、空间和组织特异性。目前已知的SnmRNA有:核内小RNA (snRNA)、核仁小RNA (snoRNA), 、胞质小RNA (scRNA)、催化性 RNA和小片段干扰 RNA(siRNA)等。
4.tRNA的一级结构和二级结构有何特点?这种结构特点与其功能有什么关系?
tRNA 的一级结构都由 70~90 个核苷酸构成,分子中富含稀有碱基。tRNA 的 5?-末端大多数为 pG,而 3?-末端都是 CCA,CCA-OH 是 tRNA 携带与转运的氨基酸结合部位。tRNA 二级结构为三叶草形,含 4 个局部互补配对的双链区,形成发夹结构或茎-环,左右两环根据其含有的稀有碱基,分别称为DHU环和 Tψ 环,位于下方的环称反密码环。反密码环中间的 3 个碱基称为反密码子,可与 mRNA上相应的三联体密码子碱基互补,使携带特异氨基酸的 tRNA,依据其特异的反密码子来识别结合 mRNA 上相应的密码子,引导氨基酸正确地定位在合成的肽链上。
E. 维生素
5. 溶菌酶活性中心的氨基酸残基是下列中的哪一个?
A.Trp62 B.Ser57 C. His24 D.Glu35 E.Asp101 6. 酶加速反应速度是通过 A. 提高反应活化能 B. 增加反应自由能的变化 C. 改变反应的平衡常数 D. 降低反应的活化能 E. 减少反应自由能的变化
7. 下列哪个参数是酶的特征性常数? A. Vmax B. 酶的浓度 C. 最适温度 D. 最适 pH E. Km
8. 某一符合米氏方程的酶,当[S]=2Km 时,其反应速度 Vmax 等于
A.1/2Vmax B.3/2Vmax C.2Vmax D.2/3Vmax E.Vmax
9. 米氏常数Km 是一个用来衡量: A. 酶被底物饱和程度的常数 B. 酶促反应速度大小的常数 C. 酶和底物亲和力大小的常数 D. 酶稳定性的常数 E. 酶变构效应的常数
10. 保持生物制品最适温度是: A. 37℃ B. 20℃ C. 0℃ D. 25℃ E. 4℃
11. 关于 pH 对酶活性的影响主要是由于 A.影响必需基团解离状态 B.影响底物的解离状态 C.破坏酶蛋白的一级结构 D.改变介质分子的解离状态 E.改变酶蛋白的空间构象 12. 可用于汞中毒解毒的物质是: A. 水 B. 糖 水 C. 鸡蛋清 D. 盐水 E. 果汁
第三章 酶
一、 单项选择题:(20 道) 1. 全酶是指:
A. 酶与抑制剂的复合物 B. 酶蛋白与辅助因子的复合物 C. 结构完整无缺的酶 D. 酶蛋白与变构剂的复合物 E. 酶蛋白与激活剂的复合物 2. 辅酶与辅基的主要区别是
A.蛋白结合的牢固程度不同 B. 分子大小不同 C. 催化能力不同 D. 化学本质不同 E. 辅助催化方式不同
3. NAD + 及 NADP + 中含有哪种维生素? A. 维生素 B1 B. 维生素 B2 C. 维生素 B6 D. 维生素 PP E. 生物素
4. 决定酶专一性的是: A. 辅基 B. 酶蛋白 C. 辅酶 D. 金属离子
5
B.2 倍多 C.3 倍多 D.4 倍多 E.5 倍多
47.在脑磷脂转化生成卵磷脂过程中,需要下列哪种氨基酸的参与? A.氮氨酸 B.鸟氨酸 C.精氨酸 D.谷氨酸 E.天冬氨酸
48.1 摩尔软脂酸在体内彻底氧化生成多少摩尔 ATP? A.129 B.96 C.239 D.86 E.176
49.在胆固醇逆向转运中起主要作用血浆脂蛋白是 A.IDL B.HDL C.LDL D.VLDL E.CM
50.空腹血脂通常指餐后多少小时的血浆脂质含量? A.6~8 小时 B.8~10 小时 C.10~12 小时 D.12~14 小时 E.16 小时以后
多项选择题:请从每题的备选答案中选择正确答案,错选或漏选均不得分。
1. 脂酸 β-氧化在细胞内进行的部位是 A. 细胞浆 B. 细胞核 C. 微粒体 D. 线粒体
2. 胆固醇在人体内可转化成 A.CO2 和 H2O B.胆汁酸 C.类固醇激素 D.性激素
3. 乙酰辅酶 A可用于下列哪些物质的合成
A.胆固醇 B.脂酸 C.丙酮酸 E.酮体
4. 细胞内游离胆固醇的作用有 A.抑制细胞本身胆固醇的合成 B.抑制细胞 LDL受体的合成 C.被细胞质膜摄取,构成膜的成分 E.激活 ACAT 5. 酮体包括 A.丙酮 B.丙酮酸 C.乙酰乙酸 D.β-羟丁酸 6. LDL受体
A.能识别含apo B100 的 LDL
B.全部血浆 LDL都是通过 LDL受体降解 C.能识别含apo E 的脂蛋白
D.广泛地分布于机体各种组织细胞膜 7. 脂蛋白的基本组成成份包括 A.内核疏水脂质 B.白蛋白 C.磷脂 D.载脂蛋白
8. 正常人 12小时空腹血浆胆固醇主要分布于 A.CM B.VLDL C.LDL D.HDL
9. HMGCoA是下列哪些代谢途径的中间产物 A.胆固醇的转化 B.胆固醇的生物合成 C.酮体的生成 D.酮体的利用
10.空腹血浆甘油三酯显著升高的可能原因有 A. HL缺乏 B. LPL缺乏 C. Apo CII缺乏 D. Apo B 缺乏
11. 下列脂肪分解代谢的中间产物中,可转变成葡A.萄糖有 B.乙酰乙酸 C.乙酰辅酶 A D.甘油
16
E.丙酮
12. 参与胆固醇逆向转运的有 A.HDL B.LCAT C.ACAT D.LPL
13. 可引起血浆酮体含量升高的因素有 A.长期饥饿 B.缺氧 C.糖尿病 D.高糖膳食
14. 能产生乙酰辅酶 A的物质有 A.胆固醇 B.脂酸 C.酮体 D.12 葡萄糖
15. 合成脑磷脂、卵磷脂的共同原料有 A.脂酸 B.甘油 C.胆碱 D.CTP 二、名词解释 必需脂酸 脂肪动员
激素敏感性脂肪酶 酮体 脂解激素 抗脂解激素 血脂
Apolipoprotein Lipoprotein LCAT ACAT
胆固醇逆向转运途径 LDL receptor HMG-CoA还原酶 Chylomicron VLDL 磷脂酶 A2 Lipoprotein lipase Pancreatic lipase ACP 问答题
1. 脂类消化吸收有何特点?
2. 试述甘油三酯在机体能量代谢中的作用和特点?
3. 试述人体胆固醇的来源与去路? 4. 酮体是如何产生和利用的?
5. 脂酸的 β-氧化与生物合成的主要区别是什么?
6. 试述 HMG-CoA在脂质代谢中的作用? 7. 试述乙酰辅酶 A在脂质代谢中的作用? 8. 试述脂肪酶在人体脂质代谢中的作用? 9. 什么是载脂蛋白,它们的主要作用是什么? 10. 试述脂蛋白受体在血浆脂蛋白代谢中的作用? 11. 什么是血浆脂蛋白,它们的来源及主要功能是什么?
12. 什么是 LDL受体,它在维持细胞游离胆固醇平衡中有什么作用?
13. 参与甘油磷脂降解的主要磷脂酶有哪些,它们的作用是什么?
14. 胆固醇逆向转运的基本过程及作用? 15. 磷脂的主要生理功能是什么?卵磷脂生物合成需要哪些原料?
第五章 脂类代谢 参考答案
一、选择题 (一)单项选择题
1.D 2.C 3.C 4.A 5.B 6.E 7.C 8.B 9.B 10.D 11.A 12.D 13.C 14E 15.B 16.B 17.C 18.D 19.C 20E 21.E 22.A 23.D 24.E 25.E 26.E 27.D 28.E 29.B 30.B 31.A 32.B 33.D 34.B 35.C 36.E 37.C 38.C 39.B 40.D 41.B 42.A 43.D 44.C 45.B 46.B 47.A 48.A 49.B 50D (二)多项选择题
1.AD 2.BCD 3.ABD 4.ABCD 5.ACD 6.ACD 7.ACD 8.CD 9.BC 10.BC
11.C 12.AB 13.AC 14.BCD 15.ABD 二、名词解释
1. 机体必需但自身又不能合成或合成量不足、必须靠食物提供的脂酸叫必需脂酸,人体必需脂酸是一些多不饱和脂酸,包括亚油酸、亚麻酸和花生四烯酸。
2. 储存在脂肪细胞中的脂肪在脂肪酶的作用下,逐步水解,释放出游离脂酸和甘油供其它组织细胞氧化利用的过程叫脂肪动员。
3. 激素敏感性脂肪酶即脂肪细胞中的甘油三酯脂肪酶,它对多种激素敏感,活性受多种激素的调节,
17
胰岛素能抑制其活性,胰高血糖素、肾上腺素等能增强其活性。是脂肪动员的关键酶。
4. 酮体是脂酸在肝脏经有限氧化分解后转化形成的中间产物,包括乙酰乙酸、β-羟基丁酸和丙酮。酮体经血液运输至肝外组织氧化利用,是肝脏向肝外输出能量的一种方式。
5. 能增高脂肪细胞甘油三酯脂肪酶活性,促进脂肪动员的激素叫脂解激素。如胰高血糖素、肾上腺素等。
6. 能抑制脂肪细胞甘油三酯脂肪酶活性,抑制脂肪动员的激素叫抗脂解激素。如胰岛素。 7. 血脂是血浆中脂类物质的总称,它包括甘油三酯、胆固醇、胆固醇酯、磷脂和游离脂酸等。临床上常用的血脂指标是甘油三酯和胆固醇,正常人空腹甘油三酯为10~150mg/dL(平均 100mg/dL),总胆固醇为 150~250mg/dL(平均 200mg/dL)。 8. 载脂蛋白,它是脂蛋白中的蛋白质部分,按发现的先后分为 A、B、C、E 等,在血浆 中起运载脂质的作用,还能识别脂蛋白受体、调节血浆脂蛋白代谢酶的活性。
9. 即脂蛋白,血浆脂蛋白是脂质与载脂蛋白结合形成的球形复合体,球体的表面为载脂蛋白、磷脂、胆固醇的亲水基团,这些化合物的疏水基团朝向球内,内核为甘油三酯、胆固醇酯等疏水脂质。血浆脂蛋白是血浆脂质的运输和代谢形式。
10. 卵磷脂胆固醇脂酰转移酶,催化 HDL 中卵磷脂 2 位上的脂肪酰基转移至游离胆固醇的 3 位上,使位于 HDL表面的胆固醇酯化后向 HDL内核转移,促成 HDL成熟及胆固醇2 逆向转运。 11. 脂酰辅酶 A胆固醇脂酰转移酶,分布于细胞内质网,能将脂酰辅酶 A上的脂酰基转移至游离胆固醇的 3 位上,使胆固醇酯化储存在胞液中。 12. 新生 HDL 从肝外组织细胞获取胆固醇并在血浆 LCAT 的作用下被酯化,逐步膨胀为单脂层球状的成熟HDL,经血液运输至肝脏,与肝细胞膜表面HDL受体结合,被肝细胞摄取降解,其中的胆固醇酯可被分解转化成胆汁酸排出体外,这种将肝外组织多余胆固醇运输至肝脏分解转化排出体外的过程就是胆固醇逆向转运途径。
13. LDL受体,广泛地分布于体内各组织细胞表面,能特异地识别和结合 LDL,主要生理功能是摄取降解 LDL并参与维持细胞内胆固醇平衡。 14. 在胆固醇生物合成过程中,催化 HMGCoA 还有成羟甲戊酸,是细胞胆固醇合成的关键酶。
15. 乳靡微粒,由小肠粘膜细胞合成经淋巴系统吸收入血,功能是运输外源性甘油三酯和胆固醇。 16. 极低密度脂蛋白,由肝细胞合成并分泌入血,功能是运输内源性甘油三酯和胆固醇。
17. 参与磷脂降解的一种磷脂酶,能水解甘油磷脂 2 位酯键,生成 1 分子游离脂酸和 1 分子溶血磷脂。
18. 脂蛋白脂肪酶,水解 CM 和 VLDL中的甘油三酯,释放出甘油和游离脂酸供组织细胞摄取利用。
19. 胰脂酶,由胰腺合成并分泌至小肠腔发挥作用,将甘油三酯水解成 2 分子游离脂酸和1 分子 2-脂酰甘油。
20. 脂酰载体蛋白,是脂酸生物合成过程中脂酰基的载体,脂酸生物合成的所有反应均在该载体上进行。 三、问答题
1. ①主要部位在小肠。②需胆汁酸盐的参与。③有两条吸收途径,中短链脂酸通过门静脉系统吸收,长链脂酸、胆固醇、磷脂等通过淋巴系统吸收。④甘油三酯在小肠粘膜细胞中需进行再合成。⑤需载脂蛋白参与。
2. 甘油三酯在机体能量代谢中的作用是氧化供能和储存能量,其特点是:①产能多。②储能所占体积小。③有专门储存场所。④常温下呈液态,有利于能量的储存和利于。
3. 人体胆固醇的来源有:①从食物中摄取。②机体细胞自身合成。去路有:①用于构成细胞膜。②在肝脏可转化成胆汁酸。③在性腺、肾上腺皮质可转化成性激素、肾上腺皮质激素。
④在皮肤可转化成维生素 D3。⑤还可酯化成胆固醇酯,储存在胞液中。
4. 酮体是脂酸在肝脏经有限氧化分解后转化形成的中间产物,包括乙酰乙酸、β-羟基丁酸和丙酮。肝细胞以β-氧化所产生的乙酰辅酶 A为原料,先将其缩合成羟甲戊二酸单酰 CoA3 (HMG-CoA),接着 HMG-CoA 被 HMG-CoA 裂解酶裂解产生乙酰乙酸。乙酰乙酸被还原产生β-羟丁酸,乙酰乙酸脱羧生成丙酮。HMG-CoA 合成酶是酮体生成的关键酶。肝脏没有利用酮体的酶类,酮体不能在肝内被氧化。酮体在肝内生成后,通过血液运往肝外组织,作为能源物质被氧化利用。丙酮量很少,又具有挥发性,主要通过肺呼出和肾排出。乙酰乙 酸和β-羟丁酸都先被转化成乙酰辅酶 A,最终通
18
过三羧酸循环彻底氧化。
5. 脂酸的β-氧化与生物合成的主要区别有:①进行的部位不同,脂酸β-氧化在线粒体内进行,脂酸的合成在胞液中进行。②主要中间代谢物不同,脂酸β-氧化的主要中间产物是乙酰 CoA,脂酸合成的主要中间产物是乙酰 CoA和丙二酸单酰 CoA。③脂肪酰基的运载体不同,脂酸β-氧化的脂肪酰基运载体是 CoA,脂酸合成的脂肪酰基运载体是 ACP。④参与的辅酶不同,参与脂酸β-氧化的辅酶是 FAD 和NAD + ,参与脂酸合成的辅酶是NAD + +H + 。⑤脂酸β-氧化不需要 HCO3 - ,而脂酸的合成需要 HCO3 - 。⑥ADP/ATP 比值不同,脂酸β-氧化在 ADP/ATP 比值增高时发生,而脂酸合成在 ADP/ATP 比值降低时进行。⑦柠檬酸发挥的作用不同,柠檬酸对脂酸β-氧化没有激活作用,但能激活脂酸的生物合成。 ⑧脂酰 CoA的作用不同,脂酰辅酶 A对脂酸β-氧化没有抑制作用,但能抑制脂酸的生物合成。⑨所处膳食状况不同,脂酸β-氧化通常是在禁食或饥饿时进行,而脂酸的生物合成通常是在高糖膳食状况下进行。
6. HMG-CoA 是由乙酰辅酶 A 缩合而成。在几乎所有的有核细胞质中,HMG-CoA 可被HMG-CoA还原酶还原成羟甲戊酸,再经过多步生物化学反应合成胆固醇。HMG-CoA还原酶是胆固醇合成的关键酶。在肝细胞中, HMG-CoA可被 HMG-CoA裂解酶裂解,生成酮体,通过血液运输到肝外组织利用。
7. 在机体脂质代谢中,乙酰辅酶 A 主要来自脂酸的β-氧化,也可来自甘油的氧化分解。在肝脏,乙酰辅酶 A 可被转化成酮体向肝外输送。在脂酸生物合成中,乙酰辅酶 A 是基本原料之一。乙酰辅酶 A也是细胞胆固醇合成的基本原料之一。 8. 人体主要的脂肪酶酶有 4 种。①胰脂酶,由胰腺合成并分泌至小肠,将甘油三酯水解成2 分子游离脂酸和 1分子 2-脂酰甘油, 主要在食物脂肪的消化中发挥作用。②脂蛋白脂肪酶,位于毛细血管内皮细胞表面,需 apo CII激活,水解 CM 和 VLDL中的甘油三酯,释放出甘油和游离脂酸供组织细胞摄取利用。③激素敏感性脂肪酶即脂肪细胞中的甘油三酯脂肪酶,它对多种激素敏感,活性受多种激素的调节,胰岛素能抑制其活性,胰高血糖素、肾上腺素等能增强其活性。是脂肪动员的关键酶。④肝脂酶,由肝实质细胞合成,转运至肝窦内
皮细胞表面发挥作用,能被肝素释放入血。HL能水解 IDL中甘油三酯和 HDL2 中的磷脂、甘油三酯,促进 LDL的形成和胆固醇逆向转运。 9. 是脂蛋白中的蛋白质部分,按发现的先后分为 A、B、C、E等。其主要作用有:①在血浆中起运载脂质的作用。②能识别脂蛋白受体,如 apo E 能识别 apo E 受体,apo B100 能识别 LDL受体,apo AI能识别 HDL受体。③调节血浆脂蛋白代谢酶的活性,如 apo CII能激活 LPL,apo AI能激活 LCAT,apo CIII能抑制 LPL。
10. 主要的脂蛋白受体有: apo E 受体、 LDL受体和 HDL受体。 Apo E 受体分布于肝细胞膜,能特异地识别和结合乳糜微粒残粒,参与外源性脂肪和胆固醇的代谢。LDL 受体广泛地分布于机体各组织细胞表面,能特异地识别和结合含 apo B100 和 apo E 的脂蛋白,参与内源性胆固醇、脂肪代谢和维持细胞胆固醇平衡。HDL 受体广泛地分布于全身各组织细胞膜,能特异地识别和结合HDL。在肝外组织,HDL与受体结合后,能获取细胞多余的胆固醇。在肝脏, HDL与受体结合后,肝细胞能将其中的胆固醇摄取并转化成胆汁酸排出体外。 HDL受体主要是参与胆固醇逆向转运。 11. 血浆脂蛋白是脂质与载脂蛋白结合形成的球形复合体,是血浆脂质的运输和代谢形式,主要包括 CM、VLDL、LDL和 HDL4 大类。CM 由小肠粘膜细胞合成,功能是运输外源性甘油三酯和胆固醇。 VLDL由肝细胞合成和分泌,功能是运输内源性甘油三酯和胆固醇。 LDL由 VLDL 在血浆中转化而来,功能是转运内源性胆固醇。HDL 主要由肝细胞合成和分泌,功能是逆向转运胆固醇。 12. LDL 受体是一种广泛地分布于体内各组织细胞表面、能特异地识别和结合 LDL 的特殊蛋白质。当与 LDL 结合后,以内吞的方式将其转移至胞液,与溶酶体融合。溶酶体中的胆固醇酯酶能将 LDL 中的胆固醇酯水解,生成的游离胆固醇能调节细胞胆固醇的代谢。①抑制内质网HMG-CoA还原酶活性,从而抑制细胞本身的胆固醇合成。②从转录水平抑制 LDL受体蛋白的合成,减少细胞对 LDL的进一步摄取。③激活内质网脂酰 CoA胆固醇脂酰转移酶(ACAT),使游离胆固醇转变成胆固醇酯储存在胞液中。可见,LDL 受体在维持细胞内胆固醇平衡中起着十分重要的作用。
13. 参与甘油磷脂降解的主要磷脂酶主要有:磷脂酶 A1、磷脂酶 A2、磷脂酶 B、磷脂酶 C和磷
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脂酶D。磷脂酶 A1 水解甘油磷脂 1位酯键,磷脂酶 A2 水解甘油磷脂 2 位酯键,磷脂酶B 水解溶血磷脂 1 位酯键,磷脂酶 C 水解甘油磷脂 3 位磷脂酯键,磷脂酶 D 水解磷酸与取代基酯键。 14. 胆固醇逆向转运是将肝外胆固醇运输至肝脏进行转化,胆固醇逆向转运的主要承担者是HDL。在肝外组织,HDL与受体结合后,能获取细胞多余的胆固醇。在肝脏,HDL与受体结合后,肝细胞能将其中的胆固醇摄取并转化成胆汁酸排出体外。这是机体排出多余胆固醇的唯一途径。
15. 磷脂的主要生理功能:①作为基本组成成份,构造各种细胞膜结构。②作为血浆脂蛋白的组成成份,稳定血浆脂蛋白的结构。③参与甘油三酯从消化道至血液的吸收过程。合成卵磷脂所需要的原料包括:甘油、脂酸、磷酸、胆碱、ATP、CTP 等。
Ⅲ
E. NAD + →复合体Ⅰ→复合体Ⅱ→CoQ→复合体Ⅲ
5.下列哪种物质不能通过线粒体内膜 A. α-酮戊二酸 B. 草酰乙酸 C. ATP D. CO2 E. 丙酮酸
6.细胞色素氧化酶指的是 A. CoQ 2 B. Cyt b C. Cyt c D. Cyt aa3 E. FMN
7.下列哪些物质浓度升高可抑制氧化磷酸化的过程 A. ATP B. ADP C. NADH D. 琥珀酸 E. 甲状腺素
8.氧化磷酸化在下述哪种细胞器中进行 A. 细胞质 B. 溶酶体 C. 细胞核 D. 高尔基体 E. 线粒体
9. NADH 氧化呼吸链的氧化磷酸化 P/O 比值大约是 A. 4 B. 3 C. 1 D. 2 E. 5
10. 琥珀酸氧化呼吸链的氧化磷酸化 P/O 比值大约是 A. 5 B. 4 C. 2 D. 1 E. 3 二、多选题
1. 生物氧化终产物有
第六章 生物氧化
一、单选题
1. 在呼吸链中,既可作为 NADH 脱氢酶的受氢体,又可作为琥珀酸脱氢酶的受氢体的是 A. FAD B. CoQ C. Cyt c D. Cyt b E. 铁硫蛋白
2.线粒体呼吸链不包括以下何种物质 A. FAD B. NAD + C. TPP D. CoQ E. FMN
3.以下化合物中不含高能磷酸键的是 A. 磷酸烯醇式丙酮酸 B. ATP C. ADP D. AMP
E. 1,3-二磷酸甘油酸
4.NADH 氧化呼吸链的排列顺序为 A. NAD + →复合体Ⅰ→CoQ→复合体Ⅲ B. NAD + →复合体Ⅱ→CoQ→复合体Ⅲ C. NAD + →复合体Ⅰ→CoQ→复合体Ⅱ→复合体Ⅲ
D. NAD + →复合体Ⅱ→复合体Ⅰ→CoQ→复合体
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A.嘌呤核苷酸的补救合成 B.嘌呤核苷酸的从头合成 C.嘧啶核苷酸的补救生成 D.胸腺嘧啶核苷酸的生成
5.6-巯基嘌呤核苷酸不抑制( )。 A.PRPP 酰胺转移酶 B.IMP→GMP C.嘌呤磷酸核糖转移酶 D.E.IMP→AMP 6.体内核苷酸具有哪些功能( )。 A.参与核酸合成 B.参与物质代谢调节 C.参与某些辅酶组成 D.参与供能 二、名词解释
1.从头合成 2.自毁容貌征 3.交叉调节 4.痛风症 三、问答题
1.试述核苷酸在体内的重要功用。
2.嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸合成的原料有何不同?
它们的合成过程各有什么特点? 3.嘌呤核苷酸补救合成有何重要意义? 4.试述核苷酸代谢的抗代谢物及其临床意义。
核苷酸和鸟嘌呤核苷酸的合成得以保持平衡。 4.痛风症 痛风症是以血中尿酸含量升高为主要特征的疾病,主要是由于嘌呤代谢异常,导致尿酸生成过多而引起。尿酸盐所形成的晶体可沉积在关节、软组织、软骨及肾脏等处,从而引起关节炎、尿路结石及肾脏疾病。 三、问答题
1.试述核苷酸在体内的重要功用。
核苷酸最主要的功能是作为体内合成DNA和 RNA的基本原料。此外,核苷酸在体内还具有多种重要的生物学功用:①作为体内能量的利用形式,如 ATP 是细胞的主要能量形式,GTP、CTP 和 UTP 等也都能提供能量;②构成辅酶和参与相关代谢,例如腺苷酸可作为多种辅酶(NAD + 、FAD、辅酶 A等)的组份,在体内参与各种生化代谢活动;③充当载体、活化中间代谢物,有些核苷酸可以作为多种活化中间代谢物的载体,如 UDP-葡萄糖是合成糖原、糖蛋白的活性原料,CDP-二酰基甘油是合成磷脂的活性原料等;④形成第二信使参与 生理调节,某些环磷酸核苷是重要的调节分子,如 cAMP 是多种细胞膜受体激素作用的第二信使,cGMP 也同样与代谢调节有关。
2.嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸合成的原料有何不同? 它们的合成过程各有什么特点?
2 嘌呤核苷酸的从头合成的原料分别是 5-磷酸核糖、谷氨酰胺、一碳单位、甘氨酸、CO2和天冬氨糖、天冬氨酸、谷氨酰胺和 C02。嘌呤核苷酸的从头合成,首先先合成 IMP,再以 IMP 作为共同前体,分别转变成 AMP和 GMP。嘧啶核苷酸从头合成与嘌呤核苷酸的合成途径不同的是,先合成嘧啶环后再与磷酸核糖相连而成的,并以 UMP 为嘧啶核苷酸合成的共同前体。
3.嘌呤核苷酸补救合成有何重要意义? 其重要意义不仅在于利用现成的嘌呤或嘌呤核苷,减少能量和一些氨基酸前体的消耗;更重要的是脑、骨髓等组织细胞由于缺乏从头合成嘌呤核苷酸的酶体系,只能进行嘌呤核苷酸的补救合成。若遗传性基因缺陷导致HGPRT严重不足或完全缺失,是一种 X 染色体连锁的隐性遗传病,称为 Lesch-Nyhan综合征或称自毁容貌征,患儿表现为智力减退、有自残行为,并伴有高尿酸血症等。由此可见,补救合成途径对这些组织细胞具有非常重要的意义。
第八章 核苷酸的代谢 参考答案
一、选择题 单选题
1、B 2、C 3、B 4、D 5、10、A 11、B 12、E 多选题
1、ABD 2、AB 3、ABC 4、BD 5、ABCD 6、ABCD 二、名词解释
1.从头合成 两类核苷酸合成的主要途径,即由简单化合物磷酸核糖氨基酸、一碳单位及 C02 等为原料,经过系列酶促反应,从而合成核苷酸的途径。 2.自毁容貌征 是一种 X染色体连锁的隐性遗传病,因遗传性基因缺陷导致 HGPRT 严重不足或完全缺失,称为 Lesch-Nyhan 综合征或称自毁容貌征,患儿表现为智力减退、有自残行为,并伴有高尿酸血症等。
3.交叉调节 IMP 转变成GMP 时需要 ATP,而 IMP 转变成 AMP 时也需要 GTP。因此,GTP 可以促进 AMP 的生成,ATP 也可以促进 GMP 的生成。这种调控方式称为交叉调节作用,使腺嘌呤
C 6、E 7、C 8、A 9、C 酸,而嘧啶核苷酸从头合成的原料分别是 5-磷酸核
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4.试述核苷酸代谢的抗代谢物及其临床意义。 在临床治疗肿瘤中,常依据酶竞争性抑制的作用原理,针对核苷酸代谢过程的不同环节,应用类似代谢物的药物(抗代谢物),阻断或干扰核苷酸及核酸的合成代谢,使癌变细胞中核酸和蛋白质的生物合成迅速地被抑制,从而控制肿瘤的发展。此类药物按化学结构被分为两大类,一类是嘌呤、嘧啶、核苷类似物通过转变为异常核苷酸干扰核苷酸的生物合成。另一类是谷氨酰胺、叶酸等的类似物,可直接阻断谷氨酰胺、一碳单位在核苷酸合成中的作用。
B.具有5′→3′ 核酸内切酶活性 C.以有缺口的DNA双链为模版 D.dUTP 是 它的一种作用物
E.是唯一参与大肠杆菌 DNA复制的聚合酶 6.在生物体内 DNA复制过程中,DNA连接酶的作用是:
A.使 DNA的两条单链连接在一起 B.使引物与DNA单链连接
C.使双链 DNA中的单链缺口进行连接 D.将 DNA的双螺旋解链 E.使两股DNA双螺旋连接在一起 7.需要以 RNA为引物的是:
第十章 DNA生物学合成
一、单选题
1.DNA生物合成的基本原料是: A.dADP, dGDP, dCDP, dTDP B.dATP, dGTP, dCTP, dTTP
C.dAMP, dGMP, dCMP, dTMP D.ADP, GDP, CDP, TDP E.ATP, GTP, CTP, TTP
2.关于 DNA的生物合成,错误的是: A.新链的合成方向是 3’→5’ B.模板的阅读方向是 3’→5’
C.可进行双向复制 D.新链的延伸方向与引物相同
E.新链延伸时以 3’-OH 与下一个脱氧核苷酸的 5’-Pi 共价连接
3.Messelson和 Stahl 利用氮同位素标记大肠杆菌DNA的实验证明了: A.DNA能被复制 B.DNA可转录为 mRNA C.DN A可表达为蛋白质 D.DN A能进行半保留复制 E.DNA能进行全保留复制
4. DNA复制时不需要下列哪一种酶: A.DNA指导的 DNA聚合酶 B.DNA指导的 RNA聚合酶 C.拓扑异构酶及解旋酶 D.连接酶
E.RNA指导的 DNA聚合酶
5.关于大肠杆菌 DNA聚合酶Ⅰ的叙述,正确的是:
A.具有 3′→5′ 核酸外切酶活性
A.DNA复制 B.转录 C.翻译 D.反转录 E.RNA复制
8.下列不符合真核DNA复制的是: A.冈崎片段较短 B.仅有一个复制起点 C.RNA引物较短 D.有多种 DNA聚合酶参与 E.连接相邻 DNA片段需 ATP 供能
9.DNA双螺旋的两链间碱基配对形成氢键,其配对关系是:
2 A.C=U G≡A B.G≡A C≡T C.U=T C≡G D.G=C T≡A E.T=A C≡G
10.DNA复制的形式,错误的是: A.双向复制 B.半保留复制 C.滚环复制 D.连续复制 E.真核生物 DNA的多点复制
11.DNA复制需要①DNA聚合酶、②引物酶、③DNA单链结合蛋白、④解螺旋酶、⑤拓扑异构酶 的共同作用,其作用的顺序应该是:
A.①→②→③→④→⑤ B.②→③→⑤→④→① C.⑤→④→③→②→① D.④→⑤→③→①→② E.④→③→①→⑤→②
12.关于复制的引发体,其组成不包括: A.DNA分子中的任一段序列 B.解螺旋酶 C.引物酶 D.被引物酶识别结合的DNA序列 E.Dna C
13.以序列 5’-TTGAACGTCAT-3’为模板合成得到的互补结构是:
A.5’-AACTTGCAGTA-3’ B.3’-TTGAACGTCAT-5’ C.5’-UUCTTGCUGTU-3’ D.3’-UUCTTGCUGTU-5’ E.5’-ATGACGTTCAA-3’
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14.关于大肠杆菌DNA pol Ⅲ,错误的是: A.是由多种亚基组成的不对称二聚体 B.需要 dNTP 为底物
C.催化 dN TP 连接到 DN A新链的 5’-OH末端
D.催化 dNTP 连接到引物链末端 E.在 DNA复制延伸过程中起主要作用 15.关于真核生物DNA聚合酶,错误的是 A.DN A pol α 具有引发酶的作用,参与复制的引发
B.DNA po1δ 是催化延伸的主要复制酶 C.DNA pol ε 催化线粒体 DNA的生成 D.PCNA参与 协同DNA po1δ 的催化作用 E.DNA pol β 主要参与修复过程 16.与逆转录酶无关的是: A.不能以 DNA单链为模板 B.水解杂化双链中的 RNA 3 C.以 dNTP 为作用底物 D.依赖于 RNA的聚合酶
E.是一种由 DNA与蛋白质组成的复合体 17.DNA的损伤不包括:
A.重排 B.颠换 C.插入一段DNA序列 D.超螺旋化 E.相邻碱基的聚合
18.滚环复制是环状DNA的复制方式,它主要存在于:
A.真核细胞的细胞核 B.原核生物细胞的质粒 C.真核细胞的胞液 D.真核细胞的线粒体 E.大肠杆菌的染色体
19.下列有关端粒的叙述错误的是: A.由特殊的短重复序列与蛋白质组成 B.只存在于染色体的一个末端 C.可维持染色体的稳定性 D.保证DNA复制后长度不会缩短
E.人染色体的端粒中有 TTAGGG 重复序列 20.紫外线(UV)辐射能使 DNA分子中相邻碱基聚合成二聚体,其中最易形成是: E.U-C 二、多选题
1.具有催化形成 3’, 5’磷酸二酯键作用的酶有: A.解旋酶 B.DNA聚合酶 C.引物酶 D.拓扑异构酶
2.延伸方向为 5’→3’的反应是: A.引物的合成 B.DNA新链的延伸
C.DNA聚合酶阅读模板 D.逆转录酶催化的聚合反应
3.修复 DNA损伤部位的机制包括: A.光修复 B.重组修复
C.碱基切除修复 D.核苷酸切除修复 4.由于基因突变造成的遗传病有: A. 高血压 B.蚕豆病
C.镰刀状红细胞贫血 D.糖尿病 三、名词解释 1.半保留复制 2.冈崎片段 3.端粒及端粒酶 4 4.逆转录 四、问答题
1.DNA复制有哪些重要特点?人们是如何证明DNA半保留复制方式的?
2.原核生物的 DNA聚合酶与真核生物的DNA聚合酶各有哪些种类及生物学特征?
3.原核生物DNA的复制体系有哪些成分?各有何作用?
第十章 DNA生物学合成 参考答案
一、单选题
1-B 2-A 3-D 4-E 5-A 6-C 7-A 8-B 9-E 10-D 11-C 12-A 13-E 14-C 15-C 16-E 17-D 18-B 19-B 20-C 二、多选题
1-B C D 2-A B D 3-A B C D 4-B C 三、名词解释
1.半保留复制---- DNA复制时,亲代DNA双螺旋解开成为两条单链各自作为模板,按照碱基配对规律合成一条与模板相互补的新链,形成两个子代 DNA分子。每一个子代DNA分子中都保留有一条来自亲代的链。这种复制方式称为半保留复制。 2.冈崎片段----DNA复制过程中,在随从链上不连3.端粒及端粒酶----由特殊 DNA即短的 GC 丰富区重复序列及蛋白质组成,覆盖在染色体两个末端的特殊结构称为端粒,对保护染色体及维持染色体线性长度有重要意义。端粒酶是由特殊 RNA及蛋白质组成的复合体,能以自身的 RNA为模板,催化端粒的延伸。
4.逆转录----指以 RNA为模板,按照碱基配对原
A.C-C B.C-T C.T-T D.T-U 续合成的片段, 称之为冈崎片段(Okazaki fragment)。
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则,在逆转录酶的作用下,催化合成DNA的过程。 四、问答题
1.DNA复制有哪些重要特点?人们是如何证明DNA半保留复制方式的?
DNA复制的特点:半保留复制,半不连续复制,双向复制,有复制起始点,需要引物如何证明:通过 N 15 同位素标记大肠杆菌所做的实验来证明 2.原核生物的 DNA聚合酶与真核生物的DNA聚合酶各有哪些种类及生物学特征?
原核生物DNA聚合酶:表 10-l E.coli 中三种 DNA聚合酶的比较DNA polⅠ DNA polⅡ DNA pol Ⅲ分子组成 单一多肽链 不清 10 种亚基的不对称二聚体 生物学活性
(1)5′→3′聚合活性 聚合活性低 有 聚合活性高
(2)3′→5′外切酶活性 有 有 有 (3)5′→3′外切酶活性 有 无 无 2 功能 ①校读作用 无其它酶时发挥 作用 ①主要的复制酶 ②修复填补 ②校读作用 真核生物DNA聚合酶 DNA 聚合酶种类 生物学功能
DNA 聚合酶 α 有引物酶活性,参与复制的引发过程
DNA 聚合酶 β 主要参与DNA的修复过程 DNA 聚合酶 γ 参与线粒体中 DNA的复制 DNA 聚合酶 δ 是最主要的复制酶,参与链的延伸
DNA 聚合酶 ε 参与修复过程
3.原核生物DNA的复制体系有哪些酶及蛋白质成分?各有何作用?
(1) DNA聚合酶,催化链的延伸,填补引物切除后的空缺
(2) 拓扑异构酶,松解并理顺超螺旋。 (3) 解螺旋酶,使 DNA双链解开
(4) DNA单链结合蛋白,结合 DNA单链,保护并维持单链状态
(4) 引物酶,催化引物的生成
(5) 连接酶,连接不连续合成的冈崎片段,使 DNA复制完整
一、选择题 [单项选择题]
1.有关 RNA聚合酶,不正确的叙述是 A. ζ 因子参与启动 B.全酶含有ζ 因子
C.核心酶有?ββ?三种亚基
D.全酶与核心酶的差别在于 β 亚基的存在 E.核心酶由?2ββ?四聚体组成 2.识别转录起始点的亚基是 A.? B.β C.? D.ζ E.β?
3.有关 hnRNA剪切不正确的是 A.切除内含子,连接外显子
B.外显子与并接体结合,形成套索 RNA C.剪接过程是二次转酯反应
D.内含子与并接体结合,形成套索 RNA E. 并接体结合内含子的边界序列 4.下述关于复制与转录不正确的叙述是 A.新生链的合成都以碱基配对的原则进行 B.新生链合成方向均为 5?至 3? C.聚合酶均催化磷酸二酯键的形成 D.均以DNA分子为模板 E.都需要 NTP 为原料
5.指导合成 RNA的那条 DNA链叫 A.模板链 B. Crick链 C.编码链 D.有意义链 E.以上都不对
6.真核生物催化 tRNA转录的酶是 A.DNA聚合酶 B.RNA聚合酶 I C.RNA聚合酶Ⅲ D.RNA聚合酶Ⅱ E.DNA聚合酶 I 7.内含子是指 A.不被转录的序列 B.被转录的非编码序列 C.被翻译的序列 D.编码序列 E.以上都不是
8.以下对 tRNA合成的描述不正确的是 A.tRNA3?末端需要加上 ACC-OH
第十一章 RNA的生物合成
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B.tRNA前体中有内含子
C.tRNA前体还需要进行化学修饰加工 D.RNA聚合酶Ⅲ催化 tRNA前体的生成 E.tRNA前体在酶的催化下切除 5?和 3?端处多余的核苷酸
9.核酶是在研究哪种 RNA的前体中发现的 A.tRNA前体 B.mRNA前体
C.snRNA D.hnRNA E.rRNA前体 10.有关 RNA合成的描述哪项是错误的 A.DNA存在时,RNA聚合酶才有活性 B.转录起始需要引物 C.RNA链合成方向 5?至 3? D.原料是 NTP
E.以 DNA双链中的一股链做模板 11.合成 RNA需要的原料是 E.NDP
12.对真核生物启动子描述错误的是 B.转录起始点上游有共同的序列5?CAAT C.5?端的 TATA序列又叫 PribnoW 盒 D. 5?端的 TATA序列又叫 TATA盒 E.5?的 TATA序列又叫 Hogness 盒 13.对鹅膏蕈碱最敏感的酶是
A.RNA聚合酶Ⅱ B.RNA聚合酶 I C. RNA聚合酶Ⅲ D.DNA聚合酶 I E.DNA聚合酶Ⅱ
14.原核生物 RNA聚合酶核心酶的组成是 A.ζ?ββ? B. ?ββ? C. ?ββ D.?2ββ?ζ E. ?2ββ?
15.真核生物成熟的 mRNA5?端具有 D.7mCpppNp E.以上都不是
16.DNA分子上某段碱基顺序为5'AGCATCTA,转录后的 mRNA相应的碱基顺序为
A.5?TCGTAGAT B.5?UCGUAGAU C.5?UAGAUGCU D.5?TAGATGCT E.以上都不是 [多项选择题]
17.参与转录的物质有
A.单链 DNA模板 B.DNA指导的 RNA聚合酶 C.NTP D.NMP E.DNA指导的DNA聚合酶 18.真核生物 mRNA前体的加工包括 A.5?端加帽结构 B.3?端加多聚 A尾
C.3?端加 CCA-OH D.去除内含子 E.连接外显子 19.核酶的特点是 A.有催化作用的蛋白质
B.有催化作用的 RNA C.底物是 RNA D.具有干扰(沉默 mRNA)作用 E.底物是 DNA 20.反式作用因子包括
A.模版 DNA序列 B.转录产物 RNA序列 C.能结合转录起始点上游 DNA序列调控转录的蛋白 D.能结合顺式作用元件的蛋白 E.转录因子 二、名词解释 1.不对称转录 2. 编码链 3.外显子 5. 转录启动子 6.核心酶 3 8.Hogness 盒 三、问答题
1.复制与转录过程的异同点。
2.简述原核生物 RNA聚合酶各亚基在转录中的作用。
3.试述非依赖 pho终止转录的方式。 4.简述真核生物 mRNA转录后加工修饰。
A.dNTP B.dNMP C.NMP D.NTP 4.RNA剪接
A.转录起始点上游有共同的序列 5?TATA 7.Rho因子
第十一章 RNA的生物合成 参考答案
一、选择题
1.D 2.D 3.B 4.E 5.A 6.C 7.B 8.A 9.E 17.ABC 18.ABDE 19.BC 20.CDE 二、名词解释
1.转录时只以 DNA双链中的一条链为模板进行转录,而另一条链不转录;转录模板并非都在同 一条 DNA链上,称为不对称转录。
2.转录时DNA双链中有一条链不作为模板,但该DNA链的碱基排列顺序与转录生成的 RNA链 相同,只是前者为 T后者为 U而已,故称该链为编码链。
3.外显子 在 DNA分子中既能被转录又能被翻译的核苷酸序列叫做外显子。
4.真核生物的新生无活性 RNA需经转录后的加工
A.7mApppNp B.7mGpppNp C.7mUpppNp 10.B 11.D 12.C 13.A 14.E 15.B 16.C
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修饰才具有活性,加工方式之一为切除内含子序列,连接外显子片段,这叫做 RNA剪接。 5.在转录起始点上游的特殊碱基序列,一般包括 RNA聚合酶的识别位点、结合位点和转录起始点。 6.原核细胞的 RNA聚合酶由 5 个亚基(??????)组成,其中 ?????是该酶的核心酶,催化 RNA链由 5?至 3?延伸合成。
7.原核生物转录终止因子,有 ATP 酶和解螺旋酶活性。依赖 Rho的转录终止需要 Rho因子参与。 8.真核生物转录起始上游多数有共同的 5?TATA序列,称 Hogness 盒。 三、问答题
1.复制与转录的相同点:以 DNA为模板;需依赖 DNA的聚合酶;酶促核苷酸聚合,核苷酸之间生成磷酸二酯键;从 5?至 3?方向延长;遵从碱基配对规律。不同点: 复制和转录的区别 复 制 转 录
模板 两股链均复制 模板链转录(不对称转录) 原料 dNTP NTP 酶 DNA聚合酶(DNA pol) RNA聚合酶(RNA pol) 产物 子代双链DNA(半保留复制) mRNA,tRNA,rRNA
配对 A-T, G-C A-U, T-A, G-C 产物后加工 不需要 加帽、尾,剪接,编辑等 2.原核生物 RNA聚合酶全酶由 ?2???? 四种亚基组成。各亚基的功能为:? 亚基的功能是决定哪些基因被转录,? 亚基的功能是催化转录全过程,??亚基的功能是结合DNA模板(开链),? 亚基的功能是辨认起始点。
3. 非依赖 Rho 的转录终止主要依赖于 RNA3?-端的茎环(发夹)结构及随后的一串寡聚 U。茎环结生成后仍处于 RNApol 覆盖下,因而导致 RNApol 变构而停止。polyU与模板 polyA序列是最不稳定的碱基配对结构,易于解离。当酶变构不再前移时,DNA双链复合,转录产物 RNA链脱落。 4.真核生物 mRNA的初级转录产物是 hnRNA,需进行:① 5?-端加帽 (帽子结构 Gppp m G—)和 3?-端加尾(poly A); ② 剪接(splicing) 去除初级转录产物上的内含子,把外显子连接为成熟的mRNA;③ mRNA编辑,如改变碱基(突变)、产生不同的翻译蛋白等。
一.选择题
1.氨基酰?tRNA合成酶具有高度特异性是由于其 A 能特异地识别特定氨基酸 B 能特异地识别tRNA C 能特异地被 ATP 活化 D A和 B EA、B 和 C 三者
2.在蛋白质的生物合成中识别不同氨基酸是依靠 A 氨基酰-tRNA合成酶 B tRNA C mRNA D rRNA E hnRNA
3.不参与蛋白质生物合成的核酸是 A mRNA B hnRNA C tRNA D rRNA E 以上都参加
4.肽链延长阶段每加一个氨基酸的正确反应过程是
A 进位→转肽→移位→脱落 B 进位→移位→脱落→转肽 C 脱落→进位→转肽→移位 D 转肽→进位→脱落→移位 E 以上都不正确
5.下列哪种反应在细胞核蛋白体内进行 A 蛋白质合成 B 糖酵解 C 酮体利用 D 脂肪酸氧化 E DNA合成
6.tRNA携带氨基酸的部位是 A 5'-末端 B 3'-末端 C 反密码环 D T-ψ 环 E DHU环
7.在氨基酸与 tRNA分子结合的过程中活化的是 A tRNA分子的 5'端 B 氨酰-tRNA合成酶 C tRNA的反密码 D 氨基酸的氨基 E 氨基酸的羧基
第十二章 蛋白质的生物合成
31
8.遗传密码的通用性是指 A细菌和动物的遗传密码基本相同 B 细菌、植物和动物的启始密码相同 C 细菌、植物和动物的遗传密码基本相同 D 细菌、植物和动物的终止密码相同 E 相同植物和动物的遗传密码基本相同 9.保证遗传信息准确地表达于蛋白质分子的因素是
A 逆转录酶 B 转肽酶 C RNA聚合酶 D 氨基酸-tRNA合成酶 E DNA聚合酶 ?
10.摆动配对的正确含义是 A 由链霉素诱发的一种错误配对 B 一种反密码可与几种密码配对 C 加热导致的DNA 双螺旋结构局部变性 D 指核糖体从 mRNA5'端向 3'端的移动 E 肽键在核糖体大亚基伸展的一种机制 11.下列关于遗传密码的描述哪一项是错误的 A一种氨基酸可有一组以上的密码 B 一组密码只代表一种氨基酸
C 遗传密码阅读有方向性, 5′端起始, 3′端终止 D 遗传密码有种属特异性, 所以不同生物合成不同的蛋白质
E 遗传密码第 3 位碱基在决定掺入氨基酸的特异性方面不重要
12.遗传密码的简并性指的是 A一些密码适用于一种以上的氨基酸 B大多数氨基酸有一组以上的密码
C 一些三联体密码可缺少一个嘌呤碱或嘧啶碱 D 密码中有许多稀有碱基 E 以上都不是
13.一个 tRNA的反密码为 5'IGC 3' ,它可识别的密码是 A GCA B CCG C CCG D ACG E UCG
14.下列叙述正确的是 A转录时需要 RNA引物 B转录时需要 DNA聚合酶
C DNA复制时需要 DNA聚合酶辨认起始点
D 翻译是指以 DNA为模板指导蛋白质合成的过程
E DNA复制出的子代DNA,一条链来自亲代DNA,一条链是新合成的
15.核蛋白体循环过程中需要碱基配对的步骤是 A 移位 B 转肽 C 进位
D 结合终止因子 E 释放肽链
16.有关遗传密码的正确描述是 A 遗传密码位于 mRNA分子上 B 遗传密码由 DNA排列顺序决定 C 有起始密码和终止密码
D 每种氨基酸至少有一个遗传密码 E 以上都正确
17.蛋白质生物合成过程中终止密码子为 A AUG B UAA C AGG D UUG E UGA
18.蛋白质生物合成的部位是 A 核小体 B 线粒体 C 核糖体 D 细胞核 E 细胞浆
19.蛋白质生物合成的方向是 A 从 C 端到 N端 B 从 N端到 C 端 C 定点双向进行 D 从 5′端到 3′端 E 从 3′端到5′端 20.原核生物起始 tRNA是 A 甲硫氨酰–tRNA B 缬氨酰–tRNA C 任何氨酰–tRNA
D 甲酰甲硫氨酰–tRNA E 起始甲硫氨酰–tRNA 二.多选题
1.遗传密码具有的特点是 A方向性 B 连续性
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C 简并性 D 可调节性 2.终止密码有 A UAA B UAG C AUG D UGA
3.氨基酰-tRNA合成酶 A具有高度专一性 B 属于多功能酶 C 能识别特异的氨基酸 D 能识别特定的 tRNA 4.原核生物核糖体的组成有 A 23S rRNA B 18S rRNA C 16S rRNA D 5.8S rRNA
5.属于肽链延长阶段的反应是 A 形成起始复合物 B 进位 C 成肽 D 转位
6.蛋白质合成后修饰加工方式有 A新生肽链的折叠 B 一级结构的修饰 C 高级结构修饰
D 蛋白质合成后靶向分拣 三.名词解释 1.translation 2. signal peptide
3.aminoacyl-tRNA synthetase 4. polyribosome) 5. genetic codon 6.摆动配对 7.翻译后修饰加工 8.转肽酶
9.蛋白质合成阻断剂 10.翻译起始复合物 11. S-D 序列 四.问答题
1.蛋白质生物合成体系由哪些物质组成?它们各起何作用?
2.何谓遗传密码?遗传密码有何特点? 3.试比较复制、转录和翻译的异同。
4.简述蛋白质合成过程中与保持遗传信息稳定有关的环节和方法。
5.简述蛋白质合成后一级结构修饰加工的常见方式。
第十二章 蛋白质的生物合成 参考答案
一、 选择题
1D 2A 3B 4A 5A 6B 7E 8C 9D 10B 11D 12B 13A 14D 15C 16E 17B 18C 19B 20D 二.多选题
1 ABC 2 ABD 3 ABCD 4 AC 5 BCD 6 ABCD 三.名词解释
1.translation 翻译,也叫蛋白质生物合成,是指以mRNA为直接模板合成蛋白质的过程。
2.signal peptide 信号肽,位于分泌性蛋白质 N 端约有 13-36 个以疏水氨基酸为主的保守序列,其作用是帮助分泌性蛋白质跨膜。
3.aminoacyl-tRNA synthetase 在蛋白质合成中氨基酰-tRNA合成酶催化每个氨基酸与特异的 tRNA结合,活化成氨基酰-tRNA,与氨基酸活化有关。氨基酰-tRNA合成酶具有高度专一性,属于多功能酶,它既能识别特异的氨基酸,又能识别相应的 tRNA,保证遗传信息的准确传递。
4. polyribosome 多核蛋白体循环,指在一条 mRNA链上同时结合着多个核蛋白体,翻译合成多条相同的多肽链的方式,其大大提高了翻译的效率。
5. genetic codon 遗传密码,mRNA 分子中四种核苷酸以 5 / →3 / 方向,从 AUG 开始每 3个核苷酸组成三联体,即一个遗传密码(密码子),代表一个氨基酸。遗传密码共有64 个,其中 AUG 是多肽链合成的起动信号,还兼做蛋氨酸的密码,UAA、UAG、UGA为终止密码,不代表任何氨基酸,只代表蛋白质合成的终止信号。
6.摆动配对 遗传密码子与反密码子配对时不遵守碱基配对规律的现象被称为遗传密码的摆动配对,或称不稳定配对,也叫摆动性。遗传密码的摆动性常发生在反密码子的第 1位碱基与密码子的第3 位碱基配对时。
7.翻译后修饰加工 将没有生物学活性的蛋白质前
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体转变成具有生理功能的蛋白质的过程称。蛋白质修饰加工方式包括新生肽链的折叠、一级结构的修饰、高级结构修饰和靶向分拣 4 个方面。 8.转肽酶 催化 P 位的氨基酰基与 A位的氨基酰基形成肽键的蛋白质,主要存在于核糖体大亚基,该酶促反应是蛋白质合成的主要反应。
9.蛋白质合成阻断剂 指能抑制蛋白质合成各个环节,使蛋白质合成受阻,合成数量减少的化合物。许多抗生素能直接抑制细菌蛋白质合成的各个环节,达到抗菌治疗的目的。
10.翻译起始复合物 在蛋白质合成开始阶段由核蛋白体大、小亚基,mRNA,起始氨基酰-tRNA和各种起始因子等共同形成的复合物。真核生物起始复合物是由40S小亚基和60S大亚基组成的 80S 核蛋白体,原核生物由 50S 的大亚基与 30S 的小亚基共同组成 70S 起始复合物。
11. S-D序列 位于mRNA分子起始密码AUG上游8-13个核苷酸处的与核蛋白体结合的4~9 个富含嘌呤碱基的核苷酸短片段,这段序列正好与核蛋白体 30S 小亚基中的16S rRNA3 / 端一段富含嘧啶核苷酸的序列互补,使 mRNA与小亚基实现结合,因此 S-D序列也被称为核蛋白体结合位点。 四.问答题
1. 蛋白质生物合成是一个复杂的过程,需要多种物质参加,其中包括原料 20 种氨基酸、三种 RNA、各种酶及其蛋白质因子、ATP、GTP 能源等。mRNA 含有 DNA 传递的遗传信息,是蛋白质生物合成的直接模板。在蛋白质合成中 tRNA是搬运氨基酸的工具,其反密码子可识别 mRNA的密码子。rRNA与多种蛋白质一起构成核糖体(也称核蛋白体),为蛋白质合成提供了场所。蛋白质生物合成还需要许多蛋白质因子参与,在蛋白质合成的起始阶段发挥作用的蛋白质因子称起始因子,延长因子是在肽链延长阶段发挥作用的蛋白质因子,参与蛋白质合成结束阶段的蛋白质分子叫释放因子。 2.mRNA分子从 5 / 端 AUG 开始每 3 个核苷酸组成一个遗传密码子,编码一种氨基酸,决定了蛋白质分子中氨基酸的排列顺序。遗传密码具有方向性、连续性、简并性、摆动性、通用性等特点。 3.从复制、转录和翻译的原料、模板、聚合酶、产物、碱基配对规律、合成方式等方面比较复制、转录和翻译的相同与不同点。
4.蛋白质合成过程中与保持遗传信息稳定有关的环节有:遗传密码决定氨基酸排列顺序;tRNA反
密码子识别 mRNA密码子;氨基酰-tRNA合成酶识别特异氨基酸和 tRNA等。方法是以上每个环节的具体配对关系。
5.蛋白质一级结构修饰加工常见的方式有:1. 氨基端和羧基端的加工,2. 部分氨基酸的共价修饰,包括磷酸化、糖基化、羟基化、形成二硫键。3.剪接加工,水解切除信号肽等。
第十三章 基因表达调控
一、选择题 单项选择题
1.就当前认识,基因表达调控最主要的环节是: ( ) A.DNA复制 B.RNA转录激活 C.RNA转录后加工 D.RNA转录后转运 E.翻译及翻译后加工
2.真核生物基因表达不需要: ( ) A.启动子 B.增强子 C.沉默子 D.衰减子 E.以上都不是
3.阻遏蛋白与操纵子中的哪一部位结合? ( ) A.内含子 B.外显子 C.启动序列 D.结构基因 E.操纵基因
4.E.coli 经紫外线照射引起DNA损伤时: ( ) A.DNA复制增强 B.DNA复制抑制 C.DNA修复酶基因表达 D.DNA修复酶基因被阻遏 E.以上都是
5.下述关于管家基因表达描述最确切的是: ( ) A.在生物个体的所有细胞中表达
B.在生物个体全生命过程中几乎所有细胞中持续表达
C.在生物个体生命的部分细胞中持续表达 D.在特定环境下的生物个体全生命过程的所有细胞中持续表达
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E.具有适应性表达方式的基因 6.反式作用因子是指: ( ) A.特异的 DNA序列 B.特异的 RNA序列 C. 是负性调控元件
D.作用于转录调控的蛋白因子 E.组蛋白与非组蛋白 7.转录因子是: ( ) A.调节转录起始速率的蛋白质 B.调节 DNA结合活性的效应物分子 C.调节转录延伸速率的蛋白质
D.保护 DNA使免受核酸内切酶作用的DNA结合蛋白质
E.向基因启动子发出信号的环境刺激
8.下述哪种条件对 lac 操纵子的诱导作用最强? ( )
A. 高葡萄糖,低乳糖 B. 高葡萄糖,高乳糖 C. 高乳糖,低葡萄糖 D. 低乳糖,低葡萄糖 E. 高 IPTG,高葡萄糖
9.真核生物经转录作用生成的 mRNA是: ( ) A. 内含子 B. 单顺反子 C. 多顺反子 D. 插入序列 E. 间隔区序列 多项选择题
1.基因转录起始调节的基本要素包括: ( ) A.特异 DNA序列 B.ρ 因子 C.RNA聚合酶 D.GTP 2.真核基因表达调控特点是: ( ) A.正性调节占主导 B.负性调节占主导 C.转录与翻译分隔进行 D.转录与翻译偶联进行 E.伴有染色体结构变化
3.下列哪些是转录因子的 DNA结合域: ( ) A 酸性激活域 B 锌指
C 碱性亮氨酸拉链 D 谷氨酰胺富含域 二、 解释名词: 1.基因 2.基因表达 3.管家基因
4.顺式作用元件 5.反式作用因子 二、问答题:
1.与原核生物相比,真核生物基因组有哪些特点? 2.试述乳糖操纵子的结构及其调控机制。 3.转录衰减的机制及其意义。
第十三章 基因表达调控 参考答案
一、选择题
1.B;2 D;3E;4 C;5B; 6.D; 7.A;8. C;9.B; 多项选择题
1.AC;2. A C E;3.BC 二、解释名词:
1.基因 从遗传学的角度讲,基因是遗传的基本单位或单元,含有编码一种 RNA或是编码一种 多肽的信息单位;从分子生物学角度看,基因是负责编码 RNA或一条多肽链的DNA片段,包括编码序列、编码序列外的侧翼序列及插入序列。 2.基因表达 指基因转录及翻译的过程。在一定调节机制控制下,大多数基因经历基因激活、转录及翻译等过程,产生具有特异生物学功能的蛋白质分子,赋予细胞或个体一定的功能或形态表型。但并非所有基因表达过程都产生蛋白质。rRNA、tRNA 编码基因转录产生 RNA的过程也属于基因表达。 3.管家基因 某些基因产物对生命全过程都是必需的或必不可少的。这类基因在一个生物个体的几乎所有细胞中持续表达,这些基因被称为管家基因。 4.顺式作用元件 大多数真核编码基因两侧的某些 DNA序列参与基因表达的调控,这些具有调节功能的DNA序列称为顺式作用元件。按功能特性分为启动子、增强子和沉默子。
5.反式作用因子 是一类能分别特异识别并结合于 DNA特定序列,激活或阻遏基因表达的蛋白质因子。通常把以反式作用影响转录的因子统称为转录因子,分为基本转录因子和特异转录因子。
第十四章 基因重组与分子生物学技
术
一、 单选题(25题)
1.下列描述最能确切表达质粒 DNA作为克隆载体特性的是( )
35
A.具有自我复制功能
B.在细胞分裂时恒定地传给子代细胞 C.携带有某些抗性基因 D.环状双链DNA分子 E.分子量小
2.关于限制性内切核酸酶的描述,下列错误的是( ) A.该酶辨认的位点一般为连续的四个或六个碱基 B.经此酶切割的 DNA有两种不同的切口:平端和粘端切口
C.根据该酶的组成、所需因子及裂解 DNA方式的不同,可分为三类
D.两段DNA只有经同一限制性内切核酸酶的水解产生的切口才能连接
3.重组 DNA技术中常用的限制性内切核酸酶为( ) A.Ⅰ类限制性内切核酸酶 B.Ⅱ类限制性内切核酸酶 C.Ⅲ类限制性内切核酸酶 D.Ⅳ类限制性内切核酸酶 E.Ⅴ类限制性内切核酸酶 4.cDNA文库包括该种生物的( ) A.所有基因 B.内含子和调控区 C.所有结构基因
D.某些蛋白质的结构基因 E.所有 mRNA
5.目前在基因工程中获得目的 DNA最常用的方法是( ) A.化学合成法 B.筛选基因组文库 C.筛选 cDNA文库 D.聚合酶链式反应 E.从基因组 DNA中分离
6.某限制性内切核酸酶按 GAC↓CGGTG 方式切割产生的末端突出部分含( )。 A.一个核苷酸 B.两个核苷酸 C.三个核苷酸 D.四个核苷酸 E.六个核苷酸
7.在核酸分子杂交实验中,核酸探针( ) A.是用来检测蛋白质序列的 B.只能用于检测 DNA C.只能用于检测 RNA D.是带有特殊标记的核酸片段
E.不具有特定的序列
8.关于 PCR 技术的描述,下列错误的是( ) A.以 DNA复制为基础而建立起来的技术 B.在数小时内能使目的基因扩增至百万倍以上 C.反应体系需要模板、一对引物、四种 dNTP、耐热 DNA聚合酶和缓冲溶液 D.以变性-退火-延伸为一个周期
E.利用 PCR 技术可完全无误地扩增基因 9.用于鉴定 RNA的技术是( ) A.Southern印迹分析 B.亲和层析 C.Northern印迹分析 D.Western印迹分析 E.免疫印迹技术
10.Southern印迹的 DNA探针可与下列哪种情况杂交?( )
A.可与任何含有互补序列的 DNA片段 B.可与任何含有相同序列的 DNA片段 C.只与完全相同的 DNA片段 D.只与完全相同的 RNA片段
E.可与任何 DNA序列或 RNA序列结合 11.克隆羊多莉的诞生主要采用了下列哪项技术?( ) A.转基因技术 B.核转移技术 C.基因剔除技术 D.核酸序列分析 E.基因沉默技术
12.Sanger 双脱氧终止法中双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)缺少的羟基是( ) A.1`位羟基和 2`位羟基 B.2`位羟基和3`位羟基 C.3`位羟基和 4`位羟基 D.3`位羟基和5`位羟基 E.3`位羟基
15.下列哪种方法不是基因诊断的常用技术方法?( ) A.核酸分子杂交 B.基因测序 C.细胞培养 D.PCR E.基因芯片技术
16.目前认为最为确切的基因诊断方法是( ) A.核酸分子杂交 B.基因测序 C.细胞培养 D.RFLP 分析 E.聚合酶链反应
36
17.下列哪种方法不是目前基因治疗所采用的方法?( ) A.基因调控 B.基因增补 C.基因置换 D.基因修复 E.基因重组
18.利用特定的反义核酸阻断变异基因异常表达的基因治疗方法是( )。 A.基因灭活 B.基因矫正 C.基因置换 D.基因增补
E.“自杀基因”的应用
19.通过目的基因的非定点整合,使其表达产物补偿缺陷基因的功能或加强原有功能的基因 治疗方法是( ) A.基因灭活 B.基因矫正 C.基因增补
D.“自杀基因”的应用 E.基因置换
20.PCR 技术不可用于( ) A.检测微量目的基因 B.某些遗传病的检测 C.基因的体外突变 D.蛋白质结构分析 E.获取目的基因
21.关于转基因技术的描述,错误的是( )。 A.将目的基因整合入受精卵 B.将目的基因整合入胚胎干细胞 C.接受了目的基因的动物能够遗传 D.转基因技术可用于建立动物模型 E.是动物整体克隆的核心技术
22.下列关于 RNAi 技术描述错误的是( ) A.能降解特定的 mRNA B.干扰因子前身为单链 RNA C.是一个依赖 ATP 的过程 D.对目的基因 DNA序列没有影响 E.只作用于外显子
23.下列不是结构基因组学研究内容的是( ) A.构建物理制图 B.构建遗传制图 C.基因组 DNA序列测定
D.探讨基因的表达模式 E.绘制转录图谱
24.下列用于蛋白质组学研究的主要技术有( ) A.双向电泳技术 B.蛋白质信息组学 C.蛋白质芯片技术 D.飞行质谱技术 E.以上都是
25.下列技术中,不属于基因沉默技术的是( )。 A.反义 RNA技术 B.核移植技术 C.三链技术 D.干扰 RNA技术 E.核酶技术 二、 多选题
1.可用作克隆载体的 DNA分子有:( ) A.质粒 DNA B.噬菌体 DNA C.细菌 DNA D.病毒 DNA
2.关于重组体的筛选,下列哪些方法属于直接选择法?( )
A.抗药性标志选择 B.标志补救 C.分子杂交法 D.免疫学方法
3.以核酸分子杂交为基础的基因诊断方法有( )。 A.限制性核酸内切酶酶谱分析法 B.DNA限制性片段长度多态性分析法 C.等位基因特异寡核苷酸探针杂交法(ASO) D.PCR/单链构象多态性分析(SSCP) 4.基因工程基本过程包括:( ) A.目的 DNA的获取 B.目的 DNA与载体的连接 C.将重组分子导入受体菌
D.重组DNA分子转化受体菌的筛选 5.参与聚合酶链反应体系组成的是:( ) A.DNA引物 B.DNA模版 C.RNA聚合酶 D.Taq DNA 聚合酶 三、 名词解释 1.基因重组
2.限制性核酸内切酶
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3.核酸分子杂交 4.基因载体 5.聚合酶链式反应 6.人类基因组计划 7.生物芯片技术 8.蛋白质组 9.RNA干扰 10. 基因诊断 四、 问答题
1.简述基因重组主要步骤? 2.阐述蓝-白斑筛选的基本原理?
3.在基因工程中获取目的基因的途径包括哪几个方面?
4.在基因重组过程中筛选阳性菌株的方法及其原理?
5.举例说明基因诊断的应用?
6.人类基因组计划:是在 1986 年由美国学者提出,其目的是测定总长度约 1.7 米,由近30 亿个核苷酸组成的人基因组DNA全序列,它的实施将会为认识疾病的分子机制以及诊断和治疗提供重要的依据。
7.生物芯片技术:是指将大量生物大分子比如核酸片段、多肽分子甚至组织切片、细胞等生物样品有序地固化于支持物的表面,然后与已标记的待测生物样品中靶分子杂交,通过特定的仪器对杂交信号的强度进行快速、并行、高效地检测分析,从而判断样品中靶分子的数量。
8.蛋白质组:是指一个细胞内的全套蛋白质,包含了某一环境条件、某一生命阶段、某一生理或病理状态下,生命体的细胞或组织所表达的蛋白质种类和水平。
9.RNA 干扰技术:是指在特定因子作用下,导入或细胞内生成的双链 RNA(dsRNA)降解生成约 22个核苷酸长度的 siRNA,后者能通过碱基互补配对原则和靶 mRNA结合,诱导靶 mRNA降解,从而导致特定基因沉默,干扰基因表达。 10. 基因诊断:是指利用分子生物学及分子遗传学的技术和原理,直接检测基因结构及其表达水平是否正常,从而对疾病做出诊断的方法。 四、 问答题
1.基因重组主要步骤包括:
1) 获得目的基因 目的基因指与重组 DNA 工作最终目的相关的基因,包括基因组DNA和逆转录合成的双链 cDNA两大类,常通过人工合成、基因组 DNA分离、cDNA文库筛选及聚合酶链反应等方法获取。
2) 在体外将目的基因与适宜的载体 DNA连接形成重组体,该重组体有自我复制的能力。 3) 通过转化或转染等方法将重组DNA引入宿主细胞。
4) 从中筛选出成功转化带有重组体的阳性细胞克隆。
5) 重组蛋白质在宿主细胞的表达(即目的基因的表达)。
2.蓝-白斑筛选的原理:由 M13噬菌体改造而来的 pUC 系列是常用的基因工程克隆载体,在其基因间隔区插人大肠杆菌一段调节基因和 lacZ(β-半乳糖苷酶)的 N端 146 个氨基酸残基编码基因,其编码产物为 β-半乳糖苷酶的 α 链,突变型 lac - 大肠杆菌可表达该酶的 ω 片段(酶的 C 端
第十四章 基因重组与分子生物学技
术 参考答案
一、 单选题
1.A;2.D;3.B ;4.C;5.D;6.B;7.D;8.E;9.C;10.A;11.B;12.B;
15.C;16.B;17.E;18.A;19.C;20.D;21.E;22.B;23.D;24.E;25.B 二、 多选题
1.ABD;2.ABC;3.ABC;4.ABCD;5.ABD 三、 名词解释
1.基因重组:是指基因在染色体分子内或分子间的重新排布。
2.限制性核酸内切酶: 可以识别 DNA的特异序列,并在识别位点或其周围切割双链DNA,被称为基因工程的手术刀,广泛使用。
3.核酸分子杂交:异源的DNA分子,或DNA与 RNA在复性过程中,由于单链分子之间存在着一定程度的碱基配对从而形成杂化双链,称为核酸分子杂交。
4.基因载体:能携带外源基因并具有自我复制及表达能力的 DNA 分子称基因载体,它能实现外源基因的无性繁殖或表达。
5.聚合酶链式反应:DNA的体外酶促扩增反应,是指在体外通过DNA聚合酶反应模拟体内 DNA复制来合成 DNA的过程,能快速特异地扩增所希望的目的基因或DNA片段。
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区)。当 pUC 系列作为载体转入宿主细胞 lac - 大肠杆菌时,β-半乳糖苷酶的 α、ω 两个片段能同时表达,形成完整且具有活性的 β-半乳糖苷酶,后者可使人工底物 X-gal 转变为蓝色;如果外源基因插入位点在pUC 载体的 lacZ α 片断的基因内,形成的重组子即使转入 lac - 大肠杆菌也不能形成完整的 β-半乳糖苷酶,表现为重组菌在 含 X-gal 的培养基上生长时成白色菌落。这一现象称α-互补,可用于重组体筛选,又称蓝、白斑实验。 3.基因工程中获取目的基因的途径包括: 1)化学合成法 已知某种基因的核苷酸序列,或根据某种基因产物的氨基酸序列推导出该多肽链编码的核苷酸序列,再利用 DNA 合成仪通过化学合成原理合成目的基因。
2)从基因组 DNA 分离 采用一定的方法,直接从基因组中获取基因。低等生物的基因组 DNA 比较简单,且有不少基因已知其准确定位,可从基因组中直接分离得到目的基因。对高等生物可先建立基因组 DNA 文库,再采用适当的筛选方法可从中 选筛出含有感兴趣基因的菌株,再进行扩增,将重组 DNA 分离、回收、以获得目的基因克隆。 3)从cDNA文库中筛选 用逆转录酶可合成与真核生物mRNA互补的DNA(即cDNA)(相当于只有编码序列的基因组 DNA),然后将得到的双链 cDNA 插入载体中并克隆化。这样得到的一套 DNA 片段的克隆称为 cDNA 文库。该文库包含细胞表达的 各种 mRNA信息。采用标记的目的基因探针,从 cDNA文库中就可直接筛选到连续编码的目的基因,可用于生产某些蛋白质。
4)采用聚合酶链反应扩增目的基因 如果知道待扩增目的基因片段两侧或附近的 DNA序列,据此合成互补引物,可进行目的基因扩增。可以直接从染色体DNA扩增,也可用 RNA为起始模板,称逆转录 PCR(RT-PCR)。应用 PCR 技术可把极微量 生物材料中的 DNA扩增至足够使用量,是目前最常用的目的基因获取方法。
4.基因重组过程中筛选阳性菌株的方法及其原理: (1)直接选择法(direct selection),其特点是直接测定基因或基因表型。
1) 抗药性标志选择 如果重组质粒携带有某种抗药性标志基因,只有含这种抗药性基因转化的细菌才能在含有该抗生素的培养板上生存并形成菌落,据此可筛选出转化菌。
2)标志补救 转化或转染的外源基因表达产物可弥
补基因缺陷性宿主菌的性状,可以利用营养突变菌株进行筛选,即标志补救。例如α-互补筛选。 3)分子杂交法 用与外源 DNA互补的同位素标记探针与重组子DNA进行杂交筛选。将待测核酸样品结合在硝酸纤维膜上,再与溶液中的标记探针杂交。含有目的基因的重组 DNA 与探针结合,而被同位素标记。利用这种方法可以直接选择并鉴定目的基因。
(2)免疫学方法筛选
利用特异抗体与目的基因的表达产物(作为抗原)之间相互作用进行筛选,而不是直接去鉴定靶基因。免疫学方法又可分为酶免疫检测分析、放射免疫方法等。免疫学方法特异性强、灵敏度高,尤其适宜于筛选无任何选择标志的基因。 5. 举例说明基因诊断的应用:
1)遗传病的产前诊断:采用 PCR 技术,胚胎组织、绒毛组织、羊水细胞都可以作为检查材料,可通过扩增致病基因诊断出有遗传病危险的胎儿,及早结束妊娠,杜绝患儿出生。镰形细胞贫血病、地中海贫血、抗凝血酶Ⅲ缺乏、甲型血友病、假肥大性肌营养不良、囊性纤维病等疾病都可按上述方法作产前诊断。
2)恶性肿瘤的基因诊断:包括癌基因、抑癌基因在内的多基因结构和表达的异常是肿瘤病变的主要因素之一。RFLP 技术、PCR-RFLP 技术和寡核苷酸杂交法等都可以用于肿瘤相关基因诊断。 3)病原体的基因诊断:这些病原体包括病毒、细菌、衣原体等。使用 PCR 技术直接检测这些病原体特异基因的存在,以诊断各种感染性疾病,具有方法简便、结果可靠、快速等优点。
4)基因诊断在判定个体对重大疾病易感性、器官移植组织配型及在免疫学和法医学等多个领域都有着广泛的应用。
第十五章 血液的生物化学
一、选择题
1、血液 NPN 中含量最多的是 A. 甘氨酸 B.色氨酸 C.尿素 D.肌酐 E.尿酸
2、下列哪项不是血浆成分?
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A.糖 B.血小板 C.酶 D.非蛋白氮 E.水
3、下列哪句话正确?
A、血浆蛋白在血液中大多带负电荷 B.血浆成分中,血浆蛋白含量最多 C.临床可随时采血做生化分析 D.尿素和尿酸都是核酸代谢的产物 E. 清蛋白是结合蛋白质
4、属于成熟红细胞具有的代谢途径有 A、氧化磷酸化
B、糖酵解 C、2,3-二磷酸甘油支路 D、磷酸戊糖通路
5. 红细胞中存在磷酸戊糖途径,其主要意义 A.提供能量 B.生成NADH c.生成核糖 D.生成 2,3—DPG
E.为 G-S-S-G 还原提供NADPH
6.在红细胞内能使高铁血红蛋白(MHb)还原的物质是 A. G-SH B.GPT C.GOT D、FAD E. G-S-S-G
7. 血浆蛋白中含量最多的是 A、?1 球蛋白 B、?2 球蛋白 C、?球蛋白 D、?球蛋白 E、清蛋白 8.下列关于红细胞的叙述正确的是 A、含有 DNA聚合酶 B、能进行氧化磷酸化
C、含有葡萄糖—6—磷酸脱氢酶 D、能进行三羧酸循环; E、含有丙酮酸脱氢酶复合体
9.下列哪些物质是血红素合成的基本原料 A、甘氨酸
B、琥珀酰 CoA C、铁离子 D、胆色素
10.下列哪种酶是血浆功能酶? A、 ALA合成酶
B、脂蛋白脂肪酶 C、淀粉
D、谷丙转氨酶酶 E、乳酸脱氢酶
11.2,3-二磷酸甘油支路主要功能是 A、用于葡萄糖的活化 B、维持红细胞膜内外离子平衡 C、用于 G-SH 的合成 D、用于NADPH 的合成 E、调节血红蛋白的运氧功能 12. 关了成熟红细胞的叙述正确的是
A、有线粒体 B、能合成核酸 C、能合成蛋白质 D、靠糖酵解供能 E、能合成血红素 二、名词解释 1.非蛋白氮 2.血浆功能酶 3.细胞酶 4.细胞酶 三、问答题
1.何谓 NPN?临床上测定NPN 有何意义 2.红细胞代谢的主要特点是什么
第十五章 血液的生物化学 参考答案
一、选择题:1C 2B 3A 4BCD 5E 6A 7E 8C 9ABC 10B 11E 12D 二、名词解释
1.血液中不包括蛋白质在内的含氮化合物中所含氮的总称为非蛋白氮(NPN)。它们是蛋白质和核酸等代谢的最终产物。
2.在血浆中发挥重要催化作用的酶,此类酶大部分来自肝。
3.由外分泌腺产生的酶称外分泌酶。它们可有少量进入血液,在血浆中这些酶极少发挥催化作用。 4.细胞海是指体内各种组织细胞内催化各有关代谢的酶,随着细胞的更新或破坏,经常有少量细胞内的酶进入血液。这类酶的活性升高,常反映有关脏器细胞的破坏或细胞膜通透性的改变。对血清中这些酶活性测定有助于对有关脏器病变的诊断,但此类酶在血浆中没有催化作用。 三、问答题
1.非蛋白氮(NPN)是指血液中除蛋白质外的含氮化合物中所含的氮。正常含量为14.3—25.omm01/L。主要包括尿素、尿酸、肌酸、肌酐、氨基酸、
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