第十六课 维生素类药物分析(三)

第十章 维生素类药物的分析 (三)

第四节 维生素D的分析CH3 H H CH3 CH3 CH3 H CH3 CH2 HO H H

维生素D2(骨化醇、麦角骨化醇)

CH3

H H CH3

CH3 CH3

CH2 HO H

H

维生素D3(胆骨化醇)

一、结构与性质1. 溶解性 2. 不稳定性 脂溶性 含多个双健易被氧化，

对酸不稳定3. 旋光性 4. 显色反应 性状项下比旋度

5. 紫外吸收特征 性状项下吸收系数

二、鉴别试验(一)显色反应1. 与醋酐-浓硫酸反应 Ch.P(2005)

维生素D2

Ch.P(2005)

【鉴别】(1)取本品约0.5mg,加三 氯甲烷5ml溶解后，加醋酐0.3ml与硫

酸0.1ml,振摇，初显黄色，渐变红色，迅即变为紫色，最后成绿色。

维生素D3

Ch.P(2005)

【鉴别】(1)取本品约0.5mg,加三氯甲烷5ml溶解后，加醋酐0.3ml与硫酸

0.1ml振摇，初显黄色，渐变红色，迅即变为紫色、蓝绿色，最后变为绿色。

2. 与三氯化锑反应 BP

维生素D + 三氯化锑 →橙红色→粉红色 3. 其他显色反应

(二)IR

Ch.P(2005)

维生素D2

Ch.P(2005)

【鉴别】(2)本品的红外光吸收图 谱应与对照的图谱(光谱集452图)

一致。

(三)维生素D2、D3的区别反应

维生素D 与乙醇+硫酸反应维生素 D2显红色， max在570nm 维生素 D3显黄色， max在495nm

三、杂质检查 维生素D2中麦角甾醇的检查灵敏度法 维生素D2 Ch.P(2005) 取本品10mg,加90% 【检查】麦角甾醇

乙醇2ml溶解后，加洋地黄皂苷溶液(取

洋地黄皂苷20mg,加90%乙醇2ml,加热溶解制成)2ml,混合，放置18小时，

不得发生浑浊或沉淀。

四、含量测定HPLC 药典附录 维生素D测定法 共有三法

第一法

适用于无维生素A醇及其它正相色谱、内标法

杂质干扰时 1. 色谱条件 色谱柱

硅胶

流动相内 标

正己烷 –正戊醇(997:3)邻苯二甲酸二甲酯

2. 系统适应性试验维生素D3维生素D3 对照品光照△

前维生素D3

反式维生素D3速甾醇D3

目的 获得待测成分及各种干扰成分色谱峰，

检查分离度是否符合规定

3. 计算校正因子(对照品为维生素D3)

(1)维生素D校正因子(f1)

内标 进样 f1 对照

As / m s f1 Ar / mr

(2)前维生素D折算成维生素D的校正因子(f2)N 2,排空气、密塞 对照品 2, 6 二叔丁基对甲酚 通

冷至室温 进样

90 ℃、 1.5 h

内标物

As mr f1 ms Ar1 f2 Ar 2 ms

4. 计算含量

维生素D及前维生素D折算成维生素D的总量(mi)

mi ( f1 Ai1 f2 Ai 2 )ms / As单位 = 0.025 µg

第二法

适用于有维生素A醇及其它杂

质干扰时皂化提取 分离净化反相色谱系统

按第一法

第三法

适用于按第二

法处理后前维

生素D仍被干扰的样品 第二法净化后样品对照

维生素D

外标法计算维生素D含量

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