上海生科院2011—2014实验生物学期中考试

2011年实验生物学期中考试 1. 胡苹

初步实验证明细胞在生长因子的作用下，可产生核蛋白X，核蛋白X可能影响基因A的表达。请设计实验证明核蛋白X是否直接与基因A的转录因子结合，并证明核蛋白X对基因A的影响，以及如何影响。

凝胶迁移或电泳迁移率实验， 2. 钟杨

请列举目前较为可靠的基因功能预测的方法，并分别说明其优势和局限性。

3. 陈荣

现在的电镜主要分为透射电镜和扫描电镜两大类。请分别说明这两类电镜的成像原理，举一例说明其在生物研究中的应用。透射电镜与光学显微镜光路设计相似，但前者的分辨率比后者高很多，请说明决定分辨率的因素是什么？电镜观察中有许多技术的应用，请说明负染技术和免疫电镜技术，并举一例其在生物学研究中的应用。

4. 费俭

请列举现在常用的三种模式生物，说明其在生命科学研究中的贡献及现在的主要应用。 大肠杆菌：全基因组测序，4.3M4400个基因，可用于研究人类感染性疾病和微生物学研究。 酵母：可孢子生殖，可二倍体或单倍体生殖。研究分子生物学、遗传学发育生物学，12M6000编码基因，16条染色体，31%基因与哺乳动物有较高同源性。

果蝇：研究遗传发育，3条常染色体1条性染色体，有众多的突变体。有复杂的行为能力。 斑马鱼：胚胎发育阶段全身 透明可明显观察到胚胎发育变化。发育生物学

2012年实验生物学期中考试 1. 张惠展

简述将基因A构建到载体B上面的方法。

2. 廖侃

现通过Co-IP实验得到蛋白A与蛋白B之间有相互作用，如何设计实验验证此相互作用不是非特异性相互作用。再以此相互作用为基础进行进一步实验使其成为一篇能发表的文章。 答：设置对照，PRA-PRB-ANTIB-SPA/PASION将抗B抗体换成其他抗体，看是否还有，将PRB去掉看是否还有，用酵母双杂交法，将表达蛋白A的基因与编码DNA结构域的基因串联，表达蛋白B的基因与编码转录激活结构域的基因串联，最后用LACZ进行蓝白斑筛选。 3. 仇子龙

题目过长，主要为选择载体构建基因A与shRNA重组载体转染神经元细胞，设计实验方案研究过表达与敲低基因A对神经元生长的影响。

设计shRNA,将shRNA连接到载体上，和连有GFP的载体共转染，通过物理（基因枪、显微注射、点穿孔）化学（LIPOSOME,CA2PO4）生物（病毒转染），等方式转入受体细胞。将被基因沉默的细胞进行RECUES,即使mRNA被沉默的基因发生同义突变。

4. 肖华胜

简述基因芯片的原理、制作方法以及在生命科学中的应用。 13年试题 周兆才，

请说一下稳定蛋白质结构的所有作用力，并列举4例用不同的解析蛋白质结构的技术应用的实例

共价键：二硫键，离子配位键，辅因子共价修饰，翻译后修饰 非共价键：氢键，范德华力，疏水作用力，静电。

钟杨，

假设获得了某深海鱼类的全基因组，用你所知道的生物信息学方法研究其可能的功能，并解释原因

刘子荣，

各种电镜样品的制备方法，各种电镜的应用龙，题目很长，基本就是流式细胞仪的相关知识\\ 2014年 1.费俭

雄原核显微注射法获得转基因小鼠往往很难成功，请分析其主要原因

插入基因的拷贝数的影响，一些是单拷贝插入位点一些是串联多拷贝位点。 插入基因对基因表达的影响，可能引起DENOVO甲基化，同源依赖性的基因沉默，使用大片段DNA如BAC，加入隔离子减少对基因表达的影响。 技术设备需求高，成本高投入大。 2.胡萍

已知某转录因子A在XXX的疾病中发挥着作用，并且，其可以对下游的基因产生影响（包括一个蛋白编码基因B和非编码RNA C），请设计实验证明A在XXX疾病中的作用，以及可能的作用机制，每步实验都要用对照实验，先简述思路，在叙述具体实验

A对基因B和RNAC的影响。

对照：证明患病时A在mRNA水平和蛋白质水平表达都升高，过表达A敲出A观察影响。

基因修饰（甲基化乙酰化磷酸化泛素化）染色体结构，SNP，转录因子，将编码转录因子的geneA构建成一个质粒，基因B构建成另一个质粒共转染细胞 看蛋白B的表达

利用凝胶电泳迁移率实验，放射性标记RNAC，将纯化的蛋白A和RNAC一同保温，在非变性的聚丙烯凝胶电泳中，结合的跑得慢。 3.肖华胜

简述基因芯片的原理、制作方法以及在生命科学以及医学中的应用。

4．李斌

简述单细胞测序的原理，概念，应用领域以及如何克服其瓶颈向前发展。

有起始密码子和终止密码子，起始密码子有两种，一种是甲硫氨酸（AUG），一种是缬氨酸（GUG），而终止密码子（有3个，分别是UAA、UAG、UGA）没有相应的转运核糖核酸（tRNA）存在，只供释放因子识别来实现翻译的终止。

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