不同蒸制方法和时间对黄精中多糖含量的影响
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JournalofChineseMedicinalMaterials 第32卷第6期2009年6月 8
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加工炮制与养护
不同蒸制方法和时间对黄精中多糖含量的影响
贺海花,杨 云,王 爽,肖功胜
(河南中医学院药学院,河南郑州450008)
摘要 目的:研究不同蒸制方法及时间与黄精中多糖含量的关系。方法:采用紫外可见分光光度法,以葡萄糖为对照品,采用苯酚2浓硫酸显色,在波长490nm。结果:随着蒸制时间的延长,常压蒸制和高压蒸制酒黄精样品中多糖的含量降低。16132~
81160μg范围内有良好的线性关系(r=019998),精密度、稳定性。:3
其药理活性不相符,其药效物质基础有待于进一步研究。
关键词 黄精;多糖;蒸制
中图分类号:R283 A:2(20861202
kingianumm黄Polygonatumsibiri2cumRed1PolygonatumcyrtonemaHua的干燥根茎,其性平、味甘,入脾、肾、肺经,具有补肾益
〔1〕
精、滋阴润燥等功效。中医认为黄精对咽喉有一定的刺激作用,需炮制去除麻味后入药,同时认为蒸制能增强其补脾润肺益肾的作用,酒制能助其药势,使其滋而不腻。尽管对炮制前后黄精中成分的含量
〔2〕
变化有一些报道,但对不同工艺以及炮制时间对黄精中成分的影响缺乏系统的研究,炮制工艺也缺乏规范统一的技术参数。因此,本文研究了不同蒸制方法以及蒸制时间对黄精中多糖含量的影响,为阐明黄精炮制机理,确定最佳炮制工艺,进一步研究其药效物质基础提供参考依据。1 仪器与材料
LDZX240BI型立式自动电热压力蒸汽灭菌器(上海申安医疗器械厂),微型植物试样粉碎机(河北省黄骅市新兴电器厂),DHG29146A型电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司),UV22201型紫外可见分光光度计(日本岛津),MET2TLERAE240电子分析天平(瑞士)。
葡萄糖对照品(批号:071124,天津市科密欧化学试剂开发中心),黄酒(濮阳县清河头状元红酒厂,酒精度:13%V/V),试剂均为分析纯。
黄精药材采集于河南省洛阳市伏牛山区,由河南中医学院董诚明教授鉴定为百合科黄精属植物黄精PolygonatumsibiricumRed1的根茎。2 方法与结果
211 样品的炮制加工 将采挖的新鲜黄精除去芦
头、须根及泥沙,清蒸1h,干燥后加黄酒(每100g
加黄酒20g计),闷润至酒吸尽,分别常压和高压(0115MPa)蒸制不同时间,取出,放凉,切厚片,放入70℃烘箱内干燥,粉碎,过40目筛,备用。212 溶液的制备
21211 葡萄糖对照品溶液:精密称取干燥至恒重的葡萄糖对照品2014mg,置于500mL容量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。
21212 多糖样品溶液:精密称取样品粉末(常压012g,高压011g),置于250mL圆底烧瓶中,加80%乙醇150mL回流提取1h,趁热过滤,用热的80%乙醇洗涤烧瓶及残渣3次,每次10mL。然后将滤纸及残渣放回烧瓶中,加蒸馏水150mL回流提取1h,趁热过滤,热水洗涤烧瓶及残渣3次,每次10mL,合并滤液和洗涤液,放凉,转移至250mL容量瓶中,蒸馏水定容至刻度,摇匀,即得。213 方法学考察
21311 标准曲线的制备:精密吸取葡萄糖对照品溶液014、018、112、116、210mL置于具塞试管中,蒸馏水加至210mL,加入5%饱和苯酚溶液1mL、浓硫酸5mL,摇匀后,室温放置30min,以蒸馏水作空白对照,在波长490nm处测定光密度。以光密度为纵坐标,葡萄糖对照品溶液浓度(mg/L)为横坐标,绘制标准曲线,回归方程为:Y=010136X+010005(r=019998),表明葡萄糖含量在16132~81160μg范围内,呈良好的线性关系。
21312 精密度试验:精密吸取葡萄糖对照品溶液110mL,置于具塞试管中,其余操作同“21311”项,于490nm处测定光密度,连续测定5次,测定结果
收稿日期:2008212225
基金项目:河南省重大科技攻关项目(200422030700)
作者简介:贺海花(19832),女,硕士研究生,主要从事天然药物化学成分研究。3
通讯作者:杨云,Tel:0371265680605。
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RSD为1110%,表明仪器精密度良好。
21313 稳定性试验:取常压蒸制20h的酒黄精样
214 样品中多糖含量的测定 分别取常压和高压
品,按“21212”项下方法制备样品溶液,分别于10
min、30min、1h、115h、2h测定光密度,测定结果RSD为1153%,表明样品溶液在2h内基本稳定。21314 重现性试验:平行称取常压蒸制20h的酒
蒸制酒黄精样品,制备多糖溶液,按上述方法于490nm处测定光密度,结果见表2、表3。3 讨论
311 由常压蒸制酒黄精样品中多糖含量测定结果可以看出,随着蒸制时间的延长,多糖含量逐渐降低;高压蒸制酒黄精样品中多糖含量测定结果也进一步表明同一温度下,,多糖含、单糖,。,。因此,黄精蒸制,这与本实验结果是一致的。
312 2005年版中国药典将多糖含量作为黄精的质量控制指标,但上述实验结果表明黄精中多糖含量与蒸制时间成反比,即生黄精中多糖含量较高,随着炮制程度的加深,其含量呈减少的趋势,该变化趋势与多糖所显示的药效作用不相吻合,因此不能解释黄精经过加工炮制可以增强补益作用的传统中医药理论。同时,选用多糖作为黄精的质量控制指标也是不合适的,对高压蒸制酒黄精最佳工艺指标成分的选择,有待于进一步研究。
313 笔者曾对黄精中还原糖含量与饮片加工方法
〔4〕
和时间的相关性做了研究,结果显示还原糖含量随着蒸制时间的延长呈规律性变化,即酒炖样品中还原糖含量在25h时达到最大值,随后呈下降趋势。同时,对黄精中小分子糖的药理活性研究结果表明黄精中小分子糖具有促进小鼠非特异性免疫的作用,可增强小鼠体液免疫功能,推断黄精的补肾益精、滋阴润燥等药效物质基础可能为黄精中的低聚糖、单糖等小分子糖类,具体结论还有待于进一步的研究。
参
考
文
献
黄精样品5份,接“21212”项下方法制备样品溶液,
测定其光密度,RSD值为1134%,表明该方法重现性良好。
21315 加样回收率试验:取常压蒸制20h的酒黄精样品0115g,共6份,精密称定,精密加入葡萄糖对照品适量,按“21212”项下方法制备样品溶液,定其光密度,平均回收率为1,D2138%。结果见表1 表1
(n=6)
RSD
/%
取样量样品中回收率平均
含量回收率/g/mg/%/mg/mg/%
011513011509011514011517011507011511
1219412190
81538149
21137201952515128194
98187941799713395162
98104
1219412191121971219612188161791219216172
2138
2610210016929179100190
表2 常压蒸制酒黄精样品中多糖含量测定结果常压蒸制
时间/h
102030405055606570
样品重/g
012010012021012016012021012026012020012006012026012046
含水量/%
812781237175712761966194617371197179
光密度
014680143201428014230142301415014020137601363
多糖含量
/%
913181558144812981248111718971337107
表3 高压蒸制酒黄精样品中多糖含量测定结果不同高压蒸制工艺条件
105℃230min105℃260min105℃2120min110℃230min110℃260min110℃2120min120℃230min120℃260min120℃2120min
样品重
/g
011026011009011013011015011012011011011006011011011022
含水量/%
719481609173619271919153711071989112
光密度
013990135301264014090129301205014130129901209
多糖含量
/%
1515114106101611519111153812316124111808124
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1北
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