组织切片制作步骤、

1.从组织中提取材料的方法是制作切片的重要步骤。根据教学，科研和外部检查的具体要求，从人体（手术标本，活检标本，尸检标本）或动物中提取，确定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖学，组织学和病理学的基本理论知识，还需要掌握实际的手术技术。每个组织器官都有一定的位置和方法，不能随意切割组织作为生产材料，否则就无法实现教学，科研和临床诊断。具体要求如下：

（1）材料的新鲜度：获得的组织越新鲜越好。通常将人体组织分离，并杀死动物组织后将其快速固定以确保原始的形态结构。

（2）纸巾块的大小：所取纸巾块的理想体积为50px×50px×7.5px，以使固定液能快速，均匀地渗透到组织中，但纸巾块的理想体积因不同的准备材料和目的。例如，在进行病理检查和科学研究切片时，可以将组织块变薄0.1?5px，这可以缩短固定脱水的时间和透明度。如果制作示教部分，则厚度为0。

（3）请勿挤压纸巾块：用于切割纸巾块的刀子和剪刀应锋利，并且在切割过程中切勿来回锉刀。请勿将组织夹得太紧，以免因挤压而使组织和细胞变形。

（4）标准化采样位置：准确地根据解剖位置，并根据不同的病理位置和性质标准化病理标本的采样。

（5）选择组织块的切片：根据各器官的组织结构，确定切片的方向。纵向或横向切割通常是显示组织形态结构的关键，例如，横向切割更适合长管状器官。

（6）保持材料清洁：如果组织块上有血液，污垢，粘液，食物，粪便等，可以用水冲洗，然后放入固定溶液中。

（7）保持组织的原始形状：固定好新鲜组织后，它会或多或少地收缩，有时甚至完全变形。为此，组织可以被弄平以尽可能地保持其原始形状。

2.固定

（1）小组织固定方法：这是最常用的方法。从人体或动物身上获取的小组织必须立即放入液体固定剂中进行固定。通常，标本与固定剂的比例为1：4?20，但组织块不应太大或太厚，否则固定剂不能快速渗透。因此，所取组织的大小通常为50px×50px×50px×7.5px

（2）注射和灌注固定方法：由于某些组织块太大或固定溶液很难渗透到内部，或者需要固定整个器官或动物体。应采用注射固定或灌注固定。将固定液注入血管，并通过血管分支到达整个组织和全身，从

而获得足够的固定。

（3）蒸汽固定法：对于较小和较厚的试样，可以采用acid酸或甲醛蒸汽固定法。对于血液涂片，应在干燥血液涂片之前使用酸或甲醛蒸气进行接触固定。

最常用的固定剂是10％甲醛固定剂和95％乙醇固定剂。

3.固定并清洗了脱水的透明标本后，薄页纸中含有更多的水，因此必须更换薄纸块中的水。此过程称为脱水。无论是用石蜡或火棉切片，都必须除去组织中的水分。因为含水的组织与诸如石蜡和棉胶之类的包埋材料不相容，所以常用的脱水剂是一系列浓度不同的乙醇。

脱水步骤为：80％，90％，95％，100％的各种浓度乙醇持续2小时，可通过自动控制脱水器完成。

丙酮也是一种脱水剂，具有很强的脱水能力，但由于其强大的脱水能力，对组织具有严重的收缩作用，因此在进行科学研究和教学切片时通常不使用丙酮。由于乙醇，丙酮等不溶于石蜡，因此它们必须经过溶剂替代过程才能溶解在石蜡中，这称为透明性。

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