菌种的衰退、复壮和保藏
更新时间:2023-06-01 05:54:01 阅读量: 实用文档 文档下载
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第八节 菌种的衰退、复壮和保藏
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性状稳定的菌种是微生物学工作最重要的基本 要求,否则生产或科研都无法正常进行。
影响微生物菌种稳定性的因素:a)变异; b)污染;
c)死亡.
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一、菌种的衰退(degenration)1. 衰退的表现1)原有形态形状变得不典型; 2)生长速度变慢; 3)代谢产物生产能力下降; 4)致病菌对宿主侵袭力下降; 5)对外界不良环境的抵抗力下降。
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2. 衰退的原因1)根本原因在于基因自发突变; 2)传代次数的影响,使负突变株的比例逐渐占 了优势; 3)与培养条件有关。
衰退是发生在微生物细胞群体中的一 个由量变到质变的逐步演变的过程。
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二、衰退的防止与复壮(一)防止衰退的措施1. 减少传代次数; 2. 创造良好的培养条件;
p228
3. 利用不易衰退的细胞传代
4. 采用有效的菌种保藏方法;
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(二)菌种的复壮(rejuvenation)1. 从衰退的菌种群体中把少数个体再找出来,重新获得具有 原有典型性状的菌种(狭义复壮,消极措施)。 a)纯种分离;
b)通过寄主体进行复壮; 2. 有意识地利用微生物会发生自发突变的特性,在日常的菌种 维护工作中不断筛选“正变”个体(广义复壮,积极措施) 。
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纯种的分离方法平板划线分离法 平板涂布分离法 平板倾注分离法 用“分离小室”进行单细胞分离 显微操纵器进行单细胞分离 菌丝尖端切割法进行单细胞分离
菌落纯
细胞纯
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三、菌种保藏
基本要求:在一定时间内使菌种不死、不变、不乱培养基传代培养 生活态 寄主传代培养 冷冻液氮、低温冰箱 斜面、平板
基本方法:休眠态
干燥
沙土管、冷冻真空干燥
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1. 原理人为地创造有利于微生物长期休眠的条件,主要是 低温、干燥、缺氧。
2. 保藏方法7种常用方法 (p244表7-13) (1)斜面冰箱保藏法 (2)半固体冰箱保藏法 (3)石蜡油封藏法 (4)甘油悬液保藏法 (5)沙土管保藏法 (6)冷冻干燥保藏法 (7)液氮保藏法
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ATCC采用的菌种保藏法:( American Type Culture Collection ,美国典型菌种保藏中 心)
冷冻干燥保藏法 液氮保藏法 CCCCM采用的菌种保藏法:( China Committee for Culture Collections of Microorganism,中国微生物菌种保藏委员会)
斜面传代法 冷冻干燥保藏法 液氮保藏法
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由于微生物的多样性,不同的微生物往往对不同的保藏方法有不同的适应性,迄今为止尚没有一种
方法能被证明对所有的微生物均适宜。因此,在具体选择保藏方法时必须对被保藏菌株的特性、保藏
物的使用特点及现有条件等进行综合考虑。对于一些比较重要的微生物菌株,则要尽可能多的采用各
种不同的手段进行保藏,以免因某
种方法的失败而导致菌种的丧失。
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本章重点一、了解证明核酸是遗传变异物质基础的3个经典实验 比较:基因型与表型,变异与饰变 质粒的概念,特点及主要类型。
二、基因突变和诱变育种 1. 基因突变的类型 2. 基因突变的规律 3. 了解常用诱变剂及其诱变机制 4. 艾姆氏法检测致癌剂的理论依据、方法和优点
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5. 了解诱变育种的主要环节及常用的初筛方法; 掌握UV诱变育种的操作程序及注意事项。 6. 筛选营养缺陷型突变株的主要步骤和方法, 淘汰野生型的方法 7. 抗生素高产突变株及抗性突变株的筛选方法。8. 名词:
营养缺陷型,野生型,原养型,基本培养基, 完全培养基,补充培养基,点突变,转换, 颠换,移码突变,染色体畸变,光复活作用
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三、基因重组与杂交育种 1. 了解原核生物和真核微生物基因重组的方式。 名词概念: 转化,转染,转导,普遍转导,局限转导, 低频转导,高频转导,双重溶源菌,接合,性导, Hfr菌株, 溶源转变。 比较: 转化与转染,转导与性导,转导与溶源转变, 普遍转导与局限转导,LFT与HFT 有性生殖与准性生殖, 转化、转导、接合和原生质体融合
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2. E. coli F+、F-、Hfr和F’菌株的异同及相互间关系。 3. 原生质体融合的基本操作及优点。 4. 酿酒酵母有性杂交的育种程序。四、基因工程 名词,基本操作 五、菌种的衰退、复壮与保藏 1. 菌种衰退的表现、原因与防止措施。 2. 菌种保藏的原理与常用的保藏方法。ATCC 和 CCCCM采用的菌种保藏法。
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第九章 微生物的生态
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生态学:研究生物及其环境条件间相互作用规律的科学 。 根据生态学的研究对象和采用的研究方法不同, 生态学的 分类不同。
微生物生态学:在一定意义上也可以称为环境微生物学,是研究微生物 群体与其环境系统之间相互作用及其功能表达规律的科学 。
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微生物生态学研究的主要三个目的: ①阐明自然界中微生物的生物多样性和微生物群落中不 同群体之间相互作用的关系; ②测定自然界中微生物的活动并监测它们对生态系统的 影响; ③充分挖掘特殊生态环境中有益微生物,使其更好地为 人类服务。
微生物生态系统: 微生物与其周围的环境(包括动植物)组成的具有一定 结构和功能的开放系统。在自然界的任何生境中,微生物之 间、微生物与其它生物之间、微生物与环境之间彼此影响、 相互依存构成一个稳定的系统关系 。
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本章内容第一节 第二节 第三节 第四节 第五节 第六节 第七节 第八节 自然界中的微生物 微生物生态学的研究方法 微生物活性的测定方法 微生物在自然界物质循环中的作用 微生物之间的关系
微生物与环境治理 瘤胃微生物生态系统 产甲烷作用和互养共栖
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第一节
自然界中的微生物
一、 土壤中的微生物土壤是微生物生长繁殖的天然培养基 ,是人类最丰富的
“菌种资源库”。不同类型的土壤、同一类型土壤的不同深度或不同水平 位置,微生物种类和数量变化很大。
由于表土层土壤比较干燥,且接受大量紫外线照射,所 以微生物主要分布在营养条件良好、氧气含量比较丰富的浅 土层
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每克耕作层土壤含菌量十倍递减
细菌(~108)>放线菌(~107,孢子) >霉菌(~106,孢子) >酵母菌(~105) >藻类(~104)
>原生动物(~103)
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