红掌组织培养与快速繁殖
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红掌
红 掌 组 织 培 养 与 快 速 繁 殖
蔡维藩
广东 汕头 515041
红掌叶片在新代培养基上的分化能力与品种和叶片部位有关
佳诱导培养基为改良Nitsch (NH4NO3 200mg/L) + 6-BA 1.0mg/L + 2,4-D 0.1mg/L
生根培养基为Nitsch (NH4NO3 720mg/L)
红掌
中图分类号
快速繁殖
A 文章编号
最
Anthurium scherzerianumÔ-²úµØÖк£Ò»´ø
ºìÕÆ»¨Ö¦¶ÀÌØ»¨±£ÏÊÆÚ³¤ÊÇÒ»ÖÖºÜ
ÊÜ»¶Ó-µÄ¸ß¹ÛÉͼÛÖµµÄÖ²ÎïÊʺÏÎÒ¹úÄÏ·½µØÇøÔÔÅàÅ軨·Ç³£ÊʺÏÍ¥ÔºÌüÌü°±ö¹Ý¾ÆÂ¥ÊÒÄÚ°ÚÉè×Ô1996年起我们开始采用组织培养技术进行快速繁殖
1 材料与方法
1.1 试材
2月份从温室内盆栽红掌上取刚展开的新叶然后浸入70%酒精中消毒4再浸入5¼ÓÉÙÐíÍÂÎÂ-2015min
2
ÎÞ¾úÂËÖ½Îü¸Éºó14mm叶片置于愈伤组织诱导培养基上培养
根据不同培养要求调整NH4NO3浓度及加入不同
琼脂6.5g/L1.1kPa压力下杀菌20min
浓度配比的生长调节剂
收稿日期
蔡维藩(1969-)
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红掌
第3期 蔡维藩
愈伤组织诱导及扩大培养于
25
光源由冷质荧光灯提供
黑暗培养
在愈伤组织诱导产生小芽时
2 结果与讨论
2.1 外植体新代培养
在新代培养中培养的增殖中
在继代1个
而有些叶外植体
4个品种的叶片在诱导培养基上培养后
品种不能分化还有1个品种直接生成芽丛
每块叶外植体所产生的芽数差别较大
可产生43个芽点
这种差异主要是由叶片不同部位的分化能力不同引起将外植体分为近轴端结果发现平分化能力每外植体8.5个芽点平均芽数仅为2.3个
NH4NO3浓度对红掌不同品种的叶片分化能力有显著的影响
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2
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2,4-D及细胞分裂素6-BAºìÕÆ×î¼ÑÓÕµ¼ÅàÑø»ùÅ䷽Ϊ
NH4NO3
200
表2 不同生长素对叶诱导率的影响
生长素
IAA(0.5)NAA(0.5)2,4-D(0.1)
外植体数
333836
诱导率(%)
愈伤组织 小 芽
249597
217989
每个外植体平均芽数
1.0c4.1b8.6a
红掌
﹒68﹒
第31卷
表3 细胞分裂素对叶外植体诱导率的影响
细胞分裂素(mg/L)
6-BA 1.0KT 1.02-ip 1.0
外植体数
181718
诱导率(%)
愈伤组织 小 芽898371716139
每个外植体平均芽数
15.4a
11.5a2.6b
2.2 愈伤组织扩繁
为了快速增殖试材
在以后的试验中发现
应全部用于芽的诱导
零星
AS-1品种幼叶接种于诱导培养基上
第3个月进行第一次转瓶
因此
此外
而质地紧密的愈伤组织
发生芽的能力较强
虽然NH4NO3浓度对愈伤组织诱导有较大影响
2.3 芽丛增殖[2]
将愈伤组织转入芽分化培养基上
有时在小苗的叶腋
组织上以不定芽形式产生以6-BA 0.2
芽的发生成丛成簇
而有时则是在愈伤
从表4看出
ÔÚ15周内增殖30倍
AS-1品种
有时产生芽体形成小苗
光照下培养果
这样
在
如要获得快速生根的效
2周之内即可开始生根4周完全生根
此时可移栽下土3﹕
1»·¾³
×îÊÊζÈ25ÒÆÔÔÒ»¸öÔºóÍê³ÉÁ˹ý¶ÉÁ¶Ãç
3个月后上盆管理一般开花年龄在18È»ºóÿ40d
左右开出一支花5次花时
参考文献
红掌
红掌组织培养与快速繁殖
作者:作者单位:刊名:英文刊名:年,卷(期):被引用次数:
蔡维藩
汕头经济特区龙达建设总公司,广东,汕头,515041亚热带植物科学
SUBTROPICAL PLANT SCIENCE2002,31(3)10次
参考文献(2条)
1.曹孜义 实用植物组织培养技术教程 1996
2.李志芳 花烛的组织培养与快速繁殖[期刊论文]-植物生理学通讯 1997(03)
相似文献(10条)
1.期刊论文 仲磊.梁珍海.朱军 红掌袋式与瓶式组织培养生产性指标比较试验 -江苏林业科技2002,29(3)
利用袋式与瓶式组织培养2种方法生产红掌苗,经3个周期的数量统计结果表明,其生产性指标,培养苗的生长情况无显著影响;其他指标均有显著差异,以袋式组织培养方法比较优越.袋式比瓶式容器一次性投入可降低90.0%,培养基用量减少66.7%,培养架空间利用率提高51.1%,污染率降低57.0%.
2.期刊论文 刘玉冬.刘艳军.杨静慧 巨型红掌茎尖组织培养及快繁技术的研究 -安徽农业科学2009,37(12)
[目的] 建立巨型红掌组织快繁体系.[方法] 以巨型红掌基部侧芽为外植体,消毒后,接种到含有不同浓度激素的MS培养基上,培养60 d后,从中筛选出分化率最高的培养基;组培苗经过生根培养后,平均长有3~4条根时,移栽到不同的栽植基质上,从中筛选出移栽成活率最高的基质.[结果] 培养基配方为6-BA 3.0 mg/L+KT 0.3 mg/L +NAA 0.3 mg/L时,巨型红掌的分化率最高,光照强度和时间分别为2 000 lx和12 h/d时,巨型红掌的分化效果最好,每个侧芽分化芽数达4~5个.培养基配方为1/2 MS+IBA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L时,巨型红掌的生根率最高,达95.8%.草炭土 + 蛭石(1∶1)栽培基质中,巨型红掌组培苗生长良好,移栽成活率达87.0%.[结论] 研究建立的巨型红掌组织快繁体系可为红掌规模化生产种植提供技术支撑.
3.期刊论文 杜敬然.赵斌.李英丽.李荣华.方正.DU Jing-ran.ZHAO Bin.LI Ying-li.LI Rong-hua.FANG Zheng 红掌组织培养过程中外植体褐变的研究 -北方园艺2010(9)
在红掌组织培养过程中,外植体易发生褐变,严重阻碍了红掌组织培养的正常进行.现以红掌‘红粉佳人'(Anthurium andraeanum CV.Sonate)品种为试材,取健康植株幼嫩叶片为外植体,对其愈伤组织培养过程中褐变现象进行研究.研究不同抗氧化剂、吸附剂(柠檬酸、抗坏血酸VC、叶酸、聚乙烯吡咯烷酮PvP、活性碳AC)以及不同培养基硬度的防褐化效果.结果表明:使用硬度为5 g/L琼脂的MS培养基,并添加6-BA 1.0 mg/L+2,4 D 0.2 mg/L+聚乙烯吡咯烷酮(PVP)0.2%可有效控制褐变并获得较高的愈伤诱导率.
4.期刊论文 束晓春.彭峰.李乃伟.何树兰.夏冰 红掌组织培养研究 -江苏农业科学2009(2)
采用叶柄为外植体,对红掌盆栽品种Arizona组织培养的方法进行了研究,结果表明:(1)在春季和秋冬季分别进行初代培养时,诱导培养基中的激素水平不同,春季适宜的激素组合为6-BA 1.0~1.5 mg/L+2,4-D 0.15~0.2 mg/L,秋冬季适宜的激素处理为6-BA 1.0~1.5 mg/L+2,4-D 0.4~0.5 mg/L,秋冬季适宜的诱导培养基中2,4-D水平比春季的高.(2)愈伤诱导培养的最佳基本培养基和蔗糖浓度分别为1/2MS和30 g/L;光照是该品种红掌愈伤发生的必要条件.(3)外植体取材季节对红掌愈伤组织的分化增殖和试管苗的生根无明显的影响;适宜的愈伤分化和不定芽增殖配方为MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L,适宜的生根配方为MS+IBA 1.0 mg/L.
5.学位论文 陈尚万 红掌(Anthurium andraeanum Lind.)的组织培养及基因枪介导的遗传转化 2006
红掌花叶兼美,是一种有较大发展前景和名副其实的名优花卉。其常规繁殖为分株扦插,繁殖率极低,而播种繁殖,要经人工授粉才可以收获种子,耗费人力,使传统的遗传育种也受到极大的限制,而利用组织培养结合基因工程技术是一种具有前景的育种方法。目前已报道的红掌再生体系往往存在继代周期偏长、繁殖系数偏低等缺点。红掌的转基因工作在国际上已有报道,但转化频率低、筛选周期长。针对上述问题,本研究采用红掌品种“亚历桑那”为实验材料,进行再生体系和基因枪介导的遗传转化体系的建立和优化,获得了以下主要结果:
建立了红掌简单高效的离体再生系统。研究表明,附加0.5mgl-1TDZ的1/2MS培养基对红掌叶片、叶柄愈伤组织的诱导效果最好,愈伤诱导率为95%以上,愈伤直径40d即可达到4mm大小。诱芽诱根培养基则以MS附加0.1mgl-1IBA为宜,芽和根的再生可一步完成,每块愈伤2个月即可平均长芽20个,长根12.1条。
在红掌的继代培养过程中获得了胚性愈伤,建立了固体和液体培养增殖体系。固体培养基以MS+0.1mgl-1IBA+0.4mgl-1TDZ为佳。液体培养基以1/2MS+1.0mgl-1IBA+0.5mgl-1TDZ+3%山梨醇+3%蔗糖为最佳,能快速稳定地获得大量的胚性愈伤用于遗传转化。在建立高效再生体系的基础上,研究了基因枪介导的红掌转化过程中不同条件对GUS基因瞬时表达的影响,初步建立了基因枪介导的红掌遗传转化体系。结果表明,真空度为28英寸汞柱,可裂解膜压力为1100psi,金粉浓度为500μg/枪,DNA为2μg/枪,靶距为6cm,胚性愈伤作为外植体时GUS瞬时表达效果最好,每枪轰击可得到1000多个蓝点。基因枪轰击后的愈伤转到选择培养基上,经过一年的反复筛选继代可获得抗性无菌苗。4株抗性植株经PCR检测均为阳性。
6.期刊论文 陈海.黄小江.林思诚.梁云芳.蓝水平.Chen Hai.Huang Xiao-jiang.Lin Si-cheng.Liang http://www.77cn.com.cnn Shui-ping 红掌组织培养和快速繁殖技术 -广西热带农业2009(3)
就红掌的组培快繁技术进行了研究.结果表明:①红掌组织培养较适合的外植体是腋芽和嫩叶片;②适合愈伤组织诱导的培养基是MS+BA 1.0+2,4-D 0.1+NAA 0.1,有利于愈伤组织增殖及不定芽诱导的培养基是1/2MS+BA 0.5+CM 10%,诱导生根的适宜培养基是1/2MS+IBA2.0.
7.期刊论文 吴海红.印东生.赵兴华.闫立萍.WU Hai-hong.YIN Dong-sheng.ZHAO Xing-hua.YAN Li-ping 红掌盆栽品种组织培养及种苗快繁技术 -北方园艺2008(9)
对红掌(Authurium andraeanum)盆栽品种"北京成功"和"粉色的爱"的组织培养和快速繁殖进行了研究,采用叶片、叶柄、茎段作为外植体进行诱导,结果表明:叶片的诱导效果最好;BA与KT混合使用比单一使用效果好;基本培养基改良MS优于1/2 MS,1/2 MS优于MS.红掌愈伤组织诱导以改良MS+BA 1+KT 1+NAA 0.1+IBA 0.1培养基效果最好,试管苗在MS+BA 1+IAA0.05培养基上增殖倍数最高.
8.期刊论文 江如蓝.张施君.郑迎冬.杨承勇.周厚高 红掌的组织培养和快速繁殖 -仲恺农业技术学院学报2002,15(4)
对红掌(Anthurium anraeanum Lind.)的组织培养和快速繁殖技术进行了研究.采用叶片、叶柄和茎段作初代诱导,结果发现,茎段的诱导效果最好,葡萄糖作碳源的效果优于蔗糖,1/2MS作基本培养基优于MS.红掌试管苗在MS+BA 1.0 mg/L+KT 1.0 mg/L的培养基上生长增殖倍数最高.
9.期刊论文 张振霞.ZHANG Zhen-xia 红掌组织培养研究进展 -韩山师范学院学报2006,27(3)
红掌是珍贵的热带观赏植物,观赏价值很高,市场前景极大.文章介绍了在红掌的组培快繁方面的研究进展,对外植体的选择,不同基本培养基、激素、碳源对其增殖与分化的影响,以及生根壮苗的方法等进行了综述.同时还指出了红掌组培快繁的研究意义及种苗繁殖方面存在的问题.
10.学位论文 费昭雪 红掌组织培养快速繁殖技术的研究 2006
本研究以红掌(Anthuriumandraeanum)4个品种的3个不同部位为外植体,系统的研究了红掌离体培养中所涉及的各种影响因素,包括外植体种类的选择及消毒,愈伤组织的诱导、不定芽的诱导和生根,其中从基本培养基的选择、激素种类和配比等方面进行了研究。并探讨了光照条件、椰乳等因素在植株生长过程中的影响。同时建立了红掌组培快繁的育苗技术体系,为工厂化生产提供技术支撑。具体结果如下:
1.红掌外植体组织培养的最佳消毒方法是:流水冲洗30-60min后,用70%酒精浸泡30s,然后用0.1%HgCl2中浸泡叶片6min、叶柄和茎段各8min,无菌水冲洗4-5次。
2.外植体的选择上:不同的取材部位的愈伤组织诱导率各不相同,叶柄的诱导率最高,茎段的次之,而叶片的诱导率最低。在取材时间上,当红掌新抽出的叶片展叶两周时,叶片、叶柄对愈伤组织的诱导效果最好,诱导率最高,诱导所需时间最短。
3.适合红掌愈伤组织诱导的最佳基本培养基为MS培养基,适宜的激素组合及浓度配比为BA2.0mg/L+2,4-D0.2mg/L;当激素配比为BA2.0mg/L+NAA0.25mg/L时能很好的诱导不定芽的发生。
4.在进行红掌的愈伤组织诱导时,葡萄糖作为碳源的诱导效果明显优于蔗糖。
5.光培养不但对愈伤组织的诱导有利,而且对于不定芽的生长有明显的促进作用,以光照强度1000-15001x的自然散射光最好。而暗培养不利于红掌愈伤组织的发生并且不利于
红掌
不定芽的生长。
6.红掌的4个品种对愈伤组织的诱导率各不相同,其中以亚利桑娜的诱导率最高
7.在增殖培养时,选择丛芽(3-5个)带愈伤组织的自然切块接种方式,芽增殖效果明显优于单芽带愈伤组织的接种方式。
8.继代培养中,随继代次数的增多,芽增殖系数提高,当增殖继代5次时芽分化系数最高,五代以后分化系数增加不明显,丛芽生长状态变差。 9.在无激素的MS培养基中添加8ml/l椰乳,可以有效促进不定芽的伸长和加粗生长,使丛生芽得到复壮。
10.最佳的生根培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L,生根率可达100%,生根质量好。在珍珠岩∶水苔∶腐殖土(1∶2∶1)栽培基质中,红掌四个品种的组培苗均生长良好,移栽成活率达96%。
11.对于增殖培养得到的不定芽,经无激素培养基复壮培养后,再进行增殖培养,可以提高下个增殖周期中丛生芽分化数目和芽体质量的稳定性;复壮培养后再进行生根培养,可以显著提高生根率和苗木质量。
引证文献(7条)
1.段鹏慧.李兴泽.王云山 红掌愈伤组织分化培养相关影响因素的研究[期刊论文]-中国农学通报 2009(24)2.陈春满.郑健临.叶燕.蒋雄辉 物理条件对红掌组培苗生根和生长的影响[期刊论文]-热带作物学报 2008(4)
3.姜蕾.兰天维.黎扬辉.易懋升.梁彩红.张志胜 影响红掌愈伤组织诱导、增殖和芽分化的因素[期刊论文]-种子 2006(11)4.郭军战.费昭雪.成密红 红掌不同外植体愈伤组织诱导与不定芽分化的研究[期刊论文]-西北林学院学报 2006(3)5.张振霞 红掌组织培养研究进展[期刊论文]-韩山师范学院学报 2006(3)
6.夏慧敏.傅玉兰.杨海燕.徐莉莉 红掌组培快繁技术研究现状的综述[期刊论文]-安徽农业科学 2006(21)7.黄群声 TDZ和CPPU对红掌快速繁殖的影响[期刊论文]-亚热带植物科学 2004(3)
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