西南大学《分子生物学》参考资料

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西南大学 网络与继续教育学院

欢迎您! é?????é?? 同学 学号:W16207893313002

单项选择题

1、 下列哪一项引起DNA移码突变? 1. 2. 3. 4.

DNA链缺失一个核苷酸 DNA中的胞嘧啶转换为尿嘧啶 DNA中的腺嘌呤转换为鸟嘌呤 DNA中的鸟嘌呤颠换为胸腺嘧啶

2、 下列有关DNA复制的论述,哪一项是正确的? 1. 2. 3. 4. 3、

下列何者是DNA复制的底物? 1. 2. 3. 4.

dTTP dGDP ATP dUTP

随从链是连续合成的

新链合成的方向与复制叉前进方向相反者,称领头链 新链合成的方向与复制叉前进方向相同者,称领头链 领头链是不连续合成的

4、 在蛋白质的生物合成过程中,下列哪一步没有mRNA参与

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1. 2. 3. 4.

翻译的模板与核糖体结合 氨酰tRNA识别密码子 起始因子的释放 催化肽键的形成

5、 下列有关DNA聚合酶I的论述,哪一项是错误的? 1. 2. 3. 4.

没有5′-3′,外切酶活性 是复制酶,又是修复酶 有3′-5′外切酶活性 有5′一3′聚合活性

6、在原核生物复制子中以下哪种酶除去RNA引发体并加入脱氧核糖核苷酸?( ) 1. 2. 3. 4. 5.

F. DNA聚合酶III DNA聚合酶II DNA聚合酶I 外切核酸酶MFI DNA连接酶

7、 参与DAN复制的酶和蛋白质因子包括:⑴DNA聚合酶III;⑵解链蛋白和解旋蛋白;⑶DNA聚合酶I;⑷RNA聚合酶;⑸DNA连接酶。它按如下顺序工作: 1. 2. 3.

⑵、⑶、⑷、⑴、⑸ ⑷、⑵、⑴、⑸、⑶ ⑵、⑷、⑴、⑶、⑸

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4. 5.

⑷、⑶、⑴、⑵、⑸ ⑷、⑵、⑴、⑶、⑸

8、证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是:肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。这两个实验中主要的论点证据是( )。 1. 2. 3. 4. 5.

DNA是不能在生物体间转移的,因此它一定是一种非常保守的分子 生物体吸收的外源DNA(而并非蛋白质)改变了其遗传潜能 从被感染的生物体内重新分离得到DNA作为疾病的致病剂 真核心生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代 DNA突变导致毒性丧失

9、下列除哪个外都是原核细胞中蛋白质生物合成的必要步骤: 1. 2. 3. 4.

氨酰-tRNA与核糖体的70S亚基结合 氨酰-tRNA与核糖体的30S亚基结合

氨酰-tRNA合成酶催化氨基酸与核糖体结合 70S的核糖体分离形成30S和50S两个亚基

10、Shine-Dalgarno顺序(SD-顺序)是指:( )。 1. 2. 3. 4.

启动基因的顺序特征

在DNA分子的起始码上游8-13个核苷酸处的顺序 在mRNA分子的起始码上游8-13个核苷酸处的顺序 16srRNA3'端富含嘧啶的互补顺序

11、 细菌DNA复制过程中不需要: 1.

一小段RNA作引物

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2. 3. 4.

限制性内切酶的活性 脱氧三磷酸核苷酸 DNA片段作模板

12、DNA在10nm纤丝中压缩多少倍?( ) 1. 2. 3. 4.

40倍 10倍 6倍 240倍

13、 下列有关DNA聚合酶III的论述,哪一项是错误的? 1. 2. 3. 4.

有5′-3′聚合活性 有5′-3′,外切酶活性 有3′-5′外切酶活性 是复制酶

14、蛋白质生物合成的方向是( )。 1. 2. 3. 4.

从C→N端 定点双向进行 从N→C端 从N端、C端同时进行

15、 小白鼠的基因组比E.co1i的基因组长600多倍,但是复制所需要的时间仅长10倍因为:

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1. 小白鼠基因组含有多个复制起点,E.co1i的基因组只含有一个复制起点。

2. 3. 4.

染色质蛋白加速小白鼠DNA的复制。

小白鼠DNA聚合酶合成新链的速度比E.co1i DNA聚合酶快60倍。 在细胞中小白鼠基因组不全部复制。

16、 DNA半保留复制时,如果一个完全放射标记的双链DNA分子在不含放射物的溶液中复制两轮,共产生四个DNA分子,其放射性为: 1. 2. 3. 4.

半数分子的两条链有放射性 半数分子无放射性 所有分子有放射性

一个分子的两条链都有放射性

17、 下列叙述正确的是: 1. 2. 3. 4.

E. 氨酰-tRNA合成酶催化氨基酸与mRNA结合。 tRNA与氨基酸通过反密码子相互识别。

tRNA的作用是携带相应的氨基酸到核糖体上,参与蛋白质的合成 蛋白质的生物合成发生在线粒体内。

18、 下列与DNA解链无关的是: 1. 2. 3. 4.

单链DNA结合蛋白 拓扑异构酶 DNA Helicase DNA酶

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19、真核生物的延伸因子是( )。 1. 2. 3. 4.

EF—1 EF—Tu EF—G EF—2

20、 氨酰tRNA合成酶可以: 1. 2. 3. 4.

识别密码子 识别氨基酸 识别mRNA 识别反密码子

21、 在E.co1i细胞中DNA聚合酶I的作用主要是: 1. 2. 3. 4.

冈崎片段的连接 DNA合成的起始 切除RNA引物 DNA复制

22、从一个复制起点可分出几个复制叉?( ) 1. 2. 3. 4.

1 3 2

4个以上

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5. 4

23、 大肠杆菌DNA连接酶的催化活性是: 1. 以ATP作能源

2. 催化两条游离的单链DNA分子形成磷酸二酯链 3. 在双螺旋DNA一条链断开处形成磷酸二酯键 4.

以DNA作能源

24、 染色质非组蛋白的功能不包括 1. 复制 2. 结构

3. 核小体包装 4.

染色体分离

25、 当细胞丧失端粒酶活性后,不会出现以下哪种情形? 1. C. 分裂30-50次后,出现衰老迹象并死亡 2. 大量体细胞具有了无限分裂的能力 3. 随着细胞每次分裂,端粒逐渐缩短 4.

免疫系统逐步丧失某些防御机制

多项选择题

26、蛋白质生物合成过程中,下列哪些步骤需要消耗能量( 1.

氨基酸分子的活化形成

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2. 氨酰tRNA进入核糖体A位 3. 核糖体移位

4. 70S起始复合物的形成 5.

肽键

27、细胞器DNA能够编码下列哪几种基因产物? 1. 4.5SrRNA

2. tRNA

3. 小亚基rRNA

4. mRNA 5. 5SrRNA

6.

大亚基rRNA

28、下列哪些基因组特性随生物的复杂程度增加而上升?(1. 基因组大小 2. 单个基因的平均大小 3. 基因组中基因的密度 4.

基因数量

29、下列哪些因子是真核生物蛋白质合成的起始因子( 1. eIF4A 2. eIF2

3.

IF1

) )

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4. 5.

eIF4 IF2

30、下列关于DNA复制的说法正确的有: 1. 2. 3. 4.

涉及RNA引物的形成 需要DNA聚合酶 按全保留机制进行 需要DNA连接酶的作用

31、 下述特征是所有(原核生物、真核生物和病毒)复制起始位点都共有的是: 1. 2. 3. 4.

多聚体DNA结合蛋白专一性识别这些短的重复序列 起始位点旁侧序列是A-T丰富的,能使DNA螺旋解开 起始位点是形成稳定二级结构的回文序列

起始位点是包括多个短重复序列的独特DNA片段

32、滚环复制( ) 1. 2. 3. 4. 5.

产生的复制子总是双链环状拷贝

是噬菌体DNA在细菌中最通常的一种复制方式 是细胞DNA的主要复制方式

复制子中编码切口蛋白的基因的表达是自动调节的 可以使复制子大量扩增

33、蛋白质生物合成中的终止密码是( )。 1.

UAA

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2. 3. 4. 5.

UAU UAC UAG UGA

34、 对于一个特定的起点,引发体的组成包括( ) 1. 2. 3. 4.

在起始位点与DnaG引发酶相互作用的一个寡聚酶 一个防止DNA降解的单链结合蛋白 DnaB解旋酶、DnaG引发酶和DNA聚合酶Ⅲ DnaB解旋酶和附加的DnaC、DnaT、PriA等蛋白

35、DNA的变性( ) 1. 2. 3. 4. 5.

可以由低温产生 包括氢键的断裂 包括双螺旋的解链 是磷酸二酯键的断裂 是可逆的

36、DNA分子中的超螺旋( ) 1. 2.

是真核生物DNA有比分裂过程中固缩的原因

可在一个闭合的DNA分子中形成一个左手双螺旋。负超螺旋是DNA修饰的前提,为酶接触DNA提供了条件 3.

在线性和环状DNA中均有发生。缠绕数的增加可被碱基配对的改变和氢键的增加所抑制

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4. 仅发生于环状DNA中。如果双螺旋在围绕其自身的轴缠绕后(即增加缠绕数)才闭合,则双螺旋在扭转力的作用下,处于静止

5. 是双螺旋中一条链绕另一条链的旋转数和双螺旋轴的回转数的总和

37、蛋白质生物合成具有下列哪些特征( )。 1. 2. 3. 4. 5.

合成肽链由C端向N端不断延长 新生肽链需加工才能成为活性蛋白质

每延长一个氨基酸必须经过进位、转肽、移位、脱落 需要消耗能量

氨基酸必须活化落四个步骤

判断题

38、核糖体的活性中心“A”位和“P”位都主要在大亚基上。 1. 2.

A.√ B.×

39、密码子在mRNA上的阅读方向为5’→3’。 1. 2.

A.√ B.×

40、每种氨基酸只能有一种特定的tRNA与之对应。 1. 2.

A.√ B.×

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41、拓扑异构酶I之所以不需要ATP来断裂和重接DNA链,是因为磷酸二酯键的能量被暂储存在酶活性位点的磷酸酪氨酸连接处。 1. 2.

A.√ B.×

42、DNA的复制需要DNA聚合酶和RNA聚合酶。 1. 2.

A.√ B.×

43、只要子链和亲本链中的一条或两条被甲基化,大肠杆菌中的错配校正系统就可以把它们区别开来,但如果两条链都没有甲基化则不行。 1. 2.

A.√ B.×

44、在真核生物染色体DNA复制期间,会形成链状DNA。 1. 2.

A.√ B.×

45、在先导链上DNA沿5′→3′方向合成,在后随链上则沿3′→5′方向合成。 1. 2.

A.√ B.×

46、氨基酸活化时,在氨酰-tRNA合成酶的催化下,由ATP供能,消耗—个高能磷酸键。 1. 2.

A.√ B.×

47、构成密码子和反密码子的碱基都只是A、U、C、G。

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1. 2.

A.√ B.×

48、卫星DNA在强选择压力下存在。 1. 2.

A.√ B.×

主观题

49、 大肠杆菌某一多肽基因的编码链的序列是:

5′ACAATGTATGGTAGTTCATTATCCCGGGCGCAAATAACAAACCCGGGTTTC3′ (1)写出该基因的无意义链的序列以及它编码的mRNA的序列。 (2)预测它能编码多少个氨基酸。 (3)标出该基因上对紫外线高敏感位点。

参考答案:

答案:(1)某一基因的编码链的碱基序列与其编码的mRNA的序列是一致的,只不过是用U代替了T。因此该基因编码的mRNA的序列是: 5′ACAAUGUAUGGUAGUUCAUUAUCCCGGGCGCAAAUAACAAACCCGGGUUUC3′ 该基因的无意义链的序列编码链互补:

5′GAAACCCGGGTTTGTTATTTGCGCCCGGGATAATGAACTACCATACATTGT3′ (2)能编码9个氨基酸的多肽,因为该mRNA所含有的ORF序列为: AUGGUAGUUCAUUAUCCCGGGCGCAAAUAA (3)

5′ACAATGTATGGTAGTTCATTATCCCGGGCGCAAATAACAAACCCGGGTTTC3′

50、现分离了一DNA片段,可能含有编码多肽的基因的前几个密码子组成如下:

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5’---CGCAGGATCAGTCGATGTCCTGTG ---3’

3’---GCGTCCTAGTCAGCTACAGGACAC----5’

(1)哪一条链作为转录的模板链? (2)mRNA的顺序是什么? (3)此mRNA能形成二级结构吗?

(4)翻译从哪里开始?朝哪个方向进行?

(5)此DNA最可能是从原核细胞还是真核细胞中分离的?为什么? 参考答案: (1)由于这段DNA片段含有编码多肽的基因的起点,则ATG序列会存在于其中一条链上。从给出的DNA片段可以看出

5’---CGCAGGATCAGTCGATGTCCTGTG---3’ 链为编码链(有意义链),而3’---GCGTCCTAGTCAGCTACAGGACAC---5’链为模板链(无意义链)。 (2)mRNA的顺序为:5’---CGCAGGAUCAGUCGUCGAUGUCCUGUG ---3’

(3)mRNA能形成二级结构

(4)翻译从AUG起始密码子开始,按5’- 3’方向进行。

(5)此DNA样品可能是从原核细胞中分离得到的。因为在mRNA的起始密码子的上游有AGGA序列,是原核生物mRNA的SD序列的特征,能与16S rRNA互补配对。 51、

题目.docx

参考答案:

答案:1(5' m7G cap) + 100(exon 1)+ 50(exon 2)+ 25(exon 3)+ 200[poly

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(A)tail] = 376 碱基

52、尽管DNA聚合酶催化聚合反应既需要模板,又需要引物。但下面的单链DNA却可以直接作为DNA聚合酶Ⅰ的有效的底物。试解释其中的原因,并写出由DNA聚合酶Ⅰ催化而形成的终产物的结构。

3’--- OH-TGGCTCATAGCCGGAGCCCTAACCGTAGACCACGAATAGCATTAGGp ---5’

参考答案: 答案1.docx

答案.jpg

53、简述真核生物转录水平的调控机制?

参考答案: 答:真核生物在转录水平的调控主要是通过反式作用因子、顺式作用元件和RNA聚合酶的相互作用来完成的,主要是反式作用因子结合顺式作用元件后影响转录起始复合物的形成过程。A、转录起始复合物的形成:真核生物RNA聚合酶识别的是由通用转录因子与DNA形成的蛋白质-DNA复合物,只有当一个或多个转录因子结合到DNA上,形成有功能的启动子,才能被RNA聚合酶所识别并结合。转录起始复合物的形成过程为:TFⅡD结合TATA盒;RNA聚合酶识别并结合TFⅡD-DNA复合物形成一个闭合的复合物;其他转录因子与RNA聚合酶结合形成一个开放复合物。在这个过程中,反式作用因子的作用是:促进或抑制TFⅡD 与TATA盒结合;促进或抑制RNA聚合酶与TFⅡD-DNA复合物的结合;促进或抑制转录起始复合物的形成。B、反式作用因子:一般具有三个功能域(DNA识别结合域、转录活性域和结合其他蛋白结合域);能识别并结合上游调控区中的顺式作用元件;对基因的表达有正性或负性调控作用。

54、简述蛋白质生物合成过程。

参考答案:

蛋白质合成可分四个步骤,以大肠杆菌为例:(1)氨基酸的活化:游离的氨基

酸必须经过活化以获得能量才能参与蛋白质合成,由氨酰-tRNA合成酶催化,消耗1分子ATP,形成氨酰-tRNA。(2)肽链合成的起始:由起始因子参与,

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mRNA与30S小亚基、50S大亚基及起始甲酰甲硫氨酰-tRNA(fMet-tRNAt)形成70S起始复合物,整个过程需GTP水解提供能量。(3)肽链的延长:起始复合物形成后肽链即开始延长。首先氨酰-tRNA结合到核糖体的A位,然后,由肽酰转移酶催化与P位的起始氨基酸或肽酰基形成肽键,tRNAf或空载tRNA仍留在P位.最后核糖体沿mRNA5’→3’方向移动一个密码子距离,A位上的延长一个氨基酸单位的肽酰-tRNA转移到P位,全部过程需延伸因子EF-Tu、EF-Ts,能量由GTP提供。(4)肽链合成终止,当核糖体移至终止密码UAA、UAG或UGA时,终止因子RF1、RF-2识别终止密码,并使肽酰转移酶活性转为水解作用,将P位肽酰-tRNA水解,释放肽链,合成终止。 55、 基因与多肽链有什么关系?

参考答案:

多肽链是基因的编码产物,基因的碱基序列与蛋白质分子中氨基酸的序列之间 的对应关系是通过遗传密码实现的。 56、区别可诱导和可阻遏的基因调控。

参考答案:

答:在可诱导的系统中,操纵子只有在诱导物存在时才开放,没有诱导物时阻碍物结合在操纵子上阻止结构基因的转录。存在诱导物时,它与阻遏物结合,使之变构不再与操纵子结合,打开操纵子。酶的诱导是分解途径特有的,诱导物就是酶的底物或者底物的类似物。在可阻碍系统中操纵子被终产物所关闭。不存在终产物时,阻碍物不能结合到操纵子上,因此操纵子开放;存在终产物时,它结合到阻碍物上,改变后者的构象,使其能结合到操纵子上,关闭操纵 子。酶阻碍是合成代谢的特点。

57、简述分子生物学在医药工业中的应用。

参考答案:

1、DNA重组技术与新药研究;(1)重组微生物是生产有用小分子代谢产物的反应器;(2)研制亚单位和合成肽疫苗;(3)应用基因工程技术生产细胞因子、激素及血液因;(4)利用转基因动物或转基因植物生产药用蛋白;(5)开发第二代生物技术药品,如糖(糖肽+有机小分子化合物)、核酸(反义核

苷酸和肽核酸)和脂类(脂蛋白酶基因LPL基因)等药物。2、药物基因组学和药物蛋白质组学等生物技术手段已成为全新的现代药物研究的方法,对于发现新的药物治疗靶,鉴定先导化合物,论证它们的药理作用,研究它们的代谢规律及毒副作用的有效方法和提高药物发现和药物研究的速度和效率,指导临床研究和市场化策略等方面发挥重大的作用。

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58、

RNA的功能主要是参与蛋白质的生物合成,起着遗传信息由DNA到蛋白质的中间传递体核心功能,此外它的功能多样性还表现在哪些方面? 参考答案:

20世纪80年代对RNA的研究揭示了RNA功能的多样性,发现它不仅仅作为遗传信息由DNA到蛋白质的中间传递体的核心功能,还有以下5种功能:①控制蛋白质的生物合成;②作用于RNA转录后的加工与修饰;③参与基因表达的调

控;④具有生物催化剂的功能;⑤遗传信息的加工与进化。RNA所具有的诸多功能都与生物机体的生长发育密切相关,它的核心作用是基因表达的信息加工和调节。

59、衰减作用如何调控E.coli中色氨酸操纵子的表达?

参考答案:

答:衰减作用根据tRNATrp的数量去调节Trp操纵子的表达,而tRNATrp的数量又取决于细胞中Trp的水平.Trp操纵子mRNA前导序列很长,包括了编码一个长14个氨基酸的多肽所需的全部遗传信息(包括一个AUG起始密码和一个UGA终止密码)。这个多肽含有两个相邻的Trp残基,因此色氨酰-tRNA对前导肽的翻译是必不可少的。衰减作用发生的必要条件是:(1)翻译产生前导多肽;(2)转录和翻译的偶联。这样,当RNA聚合酶转录前导序列的同时核糖体就紧接着结合到新生的mRNA上翻译产生前导肽。mRNA的前导序列包括两对相似的反向重复序列(图A7.7中用1,2,3和4表示)。序列2与序列1和3部分互补,这样1+2或2+3或3+4或1+2和3+4都能通过碱基配对形成茎环结构。由序列3和4配对形成的茎环结构与Trp操纵子的终止子基本相同。和终止子一样,在其茎的3’一侧具有7个连续的U形成的尾巴。当形成这种衰减子结构 时,它就能像终止子一样使转录终止。注意到两个Trp密码位于序列1内,而且前导肽的终止密码在序列l和2之间。这样,如果色氨酸的量是充足的,那么,tRNATrp的含量也能够使前导肽的翻译进行到终止密码UGA。结合的核糖体覆盖了l和2两个区域,这样1和2、2和3两个序列就不能形成茎环结构,这就使3,4两个序列形成衰减子环并起到终止子的作用,导致RNA聚合酶分子脱离DNA模板。另一方面,如果色氨酸缺乏,那么存在的色氨酰-tRNA也很少,导致核糖体停止在两个Trp密码之前,这样核糖体仅盖住区域l,并在序列4被转录之前,序列2和序列3形成茎环结构。这个结构的形成阻止了序列3与序列4形成终止子结构。于是,出现通读,切操纵子的其他部分被继续转录。事实上,是mRNA上核糖体所在的位置决定mRNA的二级结构和衰减作用是否发生。

60、举例说明生物信息学的研究方法

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参考答案:

答:生物信息学是把基因组DNA序列信息分析作为源头,找到基因组序列中代表蛋白质和RNA基因的编码区;同时,阐明基因组中大量存在的非编码区的信息实质,破译隐藏在DNA序列中的遗传语言规律;在此基础上,归纳、整理与基因组遗传信息释放及其调控相关的转录谱和蛋白质谱的数据,从而认识代谢、发育、分化、进化的规律。

生物信息学还利用基因组中编码区的信息进行蛋白质空间结构的模拟和蛋白质功能的预测,并将此类信息与生物体和生命过程的生理生化信息相结合,阐明其分子机理,最终进行蛋白质、核酸的分子设计、药物设计和个体化的医疗保健设计。

首先,它需要一定的计算能力,包括相应的软、硬设备。要有各种数据库或者能与国际、国内的数据库系统进行有效的交流。要有发达、稳定的互联网络系统;同时,生物信息学需要强有力的创新算法和软件。没有算法创新,生物信息学就无法获得持续的发展。最后,它要与实验科学,特别是与自动化的大规模高通量的生物学研究方法与平台技术建立广泛、紧密的联系。这些技术,既是产生生物信息数据的主要方法,又是验证生物信息学研究结果的关键手段。

61、怎样证明DNA是遗传物质? 参考答案:

62、简述RNAi的原理和应用。

参考答案:

RNA干扰( RNA interference, RNAi)是指双链RNA诱导同源mRNA 降解导致基因表达抑制的现象,又称基因沉默,是一种转录后基因沉默(post-

transcriptional gene silencing, PTGS)现象,是生物体在进化过程中抵御病毒感染及防御重复序列和突变引起基因组不稳定的保护机制。

RNA干扰(RNA interference, RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链

RNA(double-stranded RNA,dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。 其机制分两步:

(1)长双链RNA被细胞源性的双链RNA特异的核酸酶切成21~23个碱基对的短双链RNA,称为小干扰性RNA(small interfering RNA)。2小干扰性RNA与细胞源性的某些酶和蛋白质形成复

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合体,称为RNA诱导的沉默复合体(RNA-induced silencing complex,RISC),该复合体可识别与小干扰性RNA有同源序列的mRNA,并在特异的位点将该mRNA切断。

它的应用:

1.RNAi在探索基因功能中的应用:由于RNAi技术可以利用siRNA或siRNA表达载体快速、经济、简便的以序列特异方式剔除目的基因表达,所以现在已经成为探索基因功能的重要研究手段。同时siRNA表达文库构建方法的建立,使得利用RNAi技术进行高通量筛选成为可能,对阐明信号转导通路、发现新的药物作用靶点有重要意义。

2.RNAi在基因治疗领域中的应用:RNAi作为一种高效的序列特异性基因剔除技术在传染性疾病和恶性肿瘤基因治疗领域发展极为迅速。在利用RNAi技术对HIV-1、乙型肝炎、丙型肝炎等进行基因治疗研究中发现,选择病毒基因组中与人类基因组无同源性的序列作为抑制序列可在抑制病毒复制的同时避免对正常组织的毒副作用。同时将抑制序列选择在特定的位点,可对部分有明确基因突变的恶性肿瘤细胞如含有BCL/ABL或AML1/MTG8融合基因的白血病细胞产生凋亡诱导作用。此外尚可通过使用肿瘤特异性启动子如hTERT启动子、survivin启动子或组织特异性启动子如酪氨酸酶启动子、骨钙素启动子引导针对某些癌基因或抗凋亡分子的siRNA或shRNA表达,从而达到特异性杀伤肿瘤细胞的目的。 63、

几种不同真核生物的RNA聚合酶分别转录哪些RNA? 参考答案:

真核生物RNA聚合酶Ⅰ转录45S rRNA前体,经转录后加工产生5.8S rRNA、18S rRNA和28S rRNA。RNA聚合酶Ⅱ转录所有mRNA前体和大多数的核内小RNA

(scRNA)。RNA聚合酶Ⅲ转录tRNA、5S rRNA、U6snRNA和不同的胞质小RNA(sc RNA)等小分子转录物。

64、研究DNA的一级结构有什么重要的生物学意义? 参考答案:

所谓DNA的一级结构就是指DNA分子中的核苷酸排列顺序。生物的遗传信息通过核苷酸不同的排列顺序储存在DNA分子中,DNA分子4种核苷酸千变万化

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的序列排列即反映了生物界物种的多样性。为了阐明生物的遗传信息,首先要测定生物基因组的序列。迄今已经测定基因组序列的生物数以百计。DNA分子的一级结构是DNA分子内碱基的排列顺序,DNA分子以密码子的方式蕴藏了所有生物的遗传信息,任何一段DNA序列都可以反映出它的高度个体性或种族特异性。

DNA一级结构决定了二级结构,折叠成空间结构。这些高级结构又决定和影响着一级结构的信息功能。研究DNA的一级结构对阐明遗传物质结构、功能以及它的表达、调控都是极其重要的。 65、

hnRNA转变成mRNA的加工过程包括哪几步? 参考答案:

hnRNA转变成mRNA的加工过程包括:①5`端形成特殊的帽子结构

(m7G5`ppp5`N1mpN2p-);②在链的3`端切断并加上多聚腺苷酸(polyA); ③通过剪接除去由内含子转录而来的序列;④链内部的核苷被甲基化。

66、PCR的基本原理?

参考答案:

答:PCR是在试管中进行的DNA复制反应,基本原理是依据细胞内DNA半保留复制的机理,以及体外DNA分子于不同温度下双链和单链可以互相转变的性质,人为地控制体外合成系统的温度,以促使双链DNA变成单链,单链DNA与人工合成的引物退火,然后耐热DNA聚合酶以dNTP为原料使引物沿着单链模板延伸为双链DNA。PCR全过程每一步的转换是通过温度的改变来控制的。需要重复进行DNA模板解链、引物与模板DNA结合、DNA聚合酶催化新生DNA的合成,即高温变性、低温退火、中温延伸3个步骤构成PCR反应的一个循环,此循环的反复进行,就可使目的DNA得以迅速扩增。DNA模板变性:模板双链DNA?单链DNA,94℃。退火:引物+单链DNA?杂交链,引物的Tm值。引物的延伸:温度 至70℃左右,TaqDNA聚合酶以4种dNTP为原料,以目的DNA为模板,催化以引物3’末端为起点的5’→3’DNA链延伸反应,形成新生DNA链。新合成的引物延伸链经过变性后又可作为下一轮循环反应的模板PCR,就是如此反复循环,使目的DNA得到高效快速扩增。

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67、大肠杆菌的终止子有哪两大类?请分别介绍一下它们的结构特点。 参考答案:

大肠杆菌的终止子可以分为不依赖于 p 因子和依赖于 p 因子两大类。不依赖于 p 因子的终止子结构特点:1,终止位点上游一般存在一个富含 GC 碱基的二重对称区,由这段 DNA 转录产生的 RNA 容易形成发卡式结构。2,在终止位 点前面有一端由 4—8 个 A 组成 的序列,所以转录产物的 3’端为 寡聚 U。依赖于 p 因子的终止子的结构特点: 1.转录的RNA也具有发夹结构,但发夹结构后无poly(U)。2.形成的发夹结构较疏松,茎环上不富含GC。3.终止需要ρ因子的参与。4.与不依赖于ρ因子的终止一样,终止信号存在于新生的RNA链上而非DNA链上过程。 68、

真核基因表达调控与原核生物相比有什么异同点? 参考答案:

真核基因表达调控的许多基本原理与原核生物基因(以下称原核基困)相同。主要表现在:①与原核基因的调控一样,真核基因表达调控也有转录水平调控和转录后的调控,并且也以转录水平调控为最重要;②在真核结构基因的上游和下游(甚至内部)也存在着许多特异的调控成分,并依靠特异蛋白因子与这些调控成分的结合与否调控基因的转录。

在真核基因表达调控中至少有4个带普遍性的与原核基因表达调控不同的方面,现归纳如下:①原核细胞的染色质是裸露的DNA,而真核细胞染色质则是由DNA与组蛋白紧密结合形成的核小体。在原核细胞中染色质结构对基因的表

达没有明显的调控作用,而在真核细胞中这种作用十分明显;②在原核基因转录的调控中,既有激活物参与的调控(阳性调控或正调控),也有阻遏物参与的调控(阴性调控或负调控),二者同等重要,而真核细胞中虽然也有正调控成分和负调控成分,但目前已知的主要是正调控,且一个真核基因通常都有多个调控序列,必须有多个激活物同时特异地结合上去才能调节基因的转录;③原核基因的转录和翻译通常是相互偶联的即在转录尚未完成之前翻译便已开始,而真核基因的转录与翻译在时空上是分开的,从而使真核基因的表达有多种调控机制,其中许多机制是原核细胞所没有的;④真核生物大都为多细胞生物,在个体发育过程中发生细胞分化后,不同细胞的功能不同,基因表达的情况也就不一样,某些基因仅特异地在某种细胞中表达,称为细胞特异性或组织特异性表达,因而具有调控这种特异性表达的机制。

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67、大肠杆菌的终止子有哪两大类?请分别介绍一下它们的结构特点。 参考答案:

大肠杆菌的终止子可以分为不依赖于 p 因子和依赖于 p 因子两大类。不依赖于 p 因子的终止子结构特点:1,终止位点上游一般存在一个富含 GC 碱基的二重对称区,由这段 DNA 转录产生的 RNA 容易形成发卡式结构。2,在终止位 点前面有一端由 4—8 个 A 组成 的序列,所以转录产物的 3’端为 寡聚 U。依赖于 p 因子的终止子的结构特点: 1.转录的RNA也具有发夹结构,但发夹结构后无poly(U)。2.形成的发夹结构较疏松,茎环上不富含GC。3.终止需要ρ因子的参与。4.与不依赖于ρ因子的终止一样,终止信号存在于新生的RNA链上而非DNA链上过程。 68、

真核基因表达调控与原核生物相比有什么异同点? 参考答案:

真核基因表达调控的许多基本原理与原核生物基因(以下称原核基困)相同。主要表现在:①与原核基因的调控一样,真核基因表达调控也有转录水平调控和转录后的调控,并且也以转录水平调控为最重要;②在真核结构基因的上游和下游(甚至内部)也存在着许多特异的调控成分,并依靠特异蛋白因子与这些调控成分的结合与否调控基因的转录。

在真核基因表达调控中至少有4个带普遍性的与原核基因表达调控不同的方面,现归纳如下:①原核细胞的染色质是裸露的DNA,而真核细胞染色质则是由DNA与组蛋白紧密结合形成的核小体。在原核细胞中染色质结构对基因的表

达没有明显的调控作用,而在真核细胞中这种作用十分明显;②在原核基因转录的调控中,既有激活物参与的调控(阳性调控或正调控),也有阻遏物参与的调控(阴性调控或负调控),二者同等重要,而真核细胞中虽然也有正调控成分和负调控成分,但目前已知的主要是正调控,且一个真核基因通常都有多个调控序列,必须有多个激活物同时特异地结合上去才能调节基因的转录;③原核基因的转录和翻译通常是相互偶联的即在转录尚未完成之前翻译便已开始,而真核基因的转录与翻译在时空上是分开的,从而使真核基因的表达有多种调控机制,其中许多机制是原核细胞所没有的;④真核生物大都为多细胞生物,在个体发育过程中发生细胞分化后,不同细胞的功能不同,基因表达的情况也就不一样,某些基因仅特异地在某种细胞中表达,称为细胞特异性或组织特异性表达,因而具有调控这种特异性表达的机制。

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