HPV-DNA标本处理的标准操作程序1
更新时间:2024-02-27 16:15:01 阅读量: 综合文库 文档下载
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×××院 临床分子生物实验室质量手册 文件编号: 序号: 第 版 颁 布 日 期: 共 2 页 第 次修改 主题:HPV-DNA标本处理的标准操作程序 HPV-DNA标本处理的标准操作程序
一、目的:
规范临床分子生物实验室对临床标本的处理,提高检测结果的准确率。
二、适用范围:
人乳头状瘤病毒(HPV)基因微阵列分型检测试剂盒。
三、职责:
由临床分子生物实验室专业技术人员制定程序文件,实验室负责人审核,科室主任批准实施。
四、程序:
1、将样本及阴性对照品置室温解冻,按习惯将标本编号,按相应数量取出样本管,对应编号。 2、有效细胞的收集:
2.1 对于宫颈脱落细胞标本,先振荡混匀临床样本10秒,取800?l临床样本加入样本管, 14000rpm离心5分钟,去上清液(若收集到的有效细胞太少的话,可再次吸取取800?l临床样本加入样本管,14000rpm离心5分钟,去上清液);
2.2 对于男性标本(棉拭子),先加入1ml生理盐水,充分振荡洗脱细胞,倒出洗脱液,14000rpm离心5分钟,去上清液;
2.3 对于血液太多的临床标本,可将收集到的细胞用已灭菌的蒸馏水漂洗一次,再离心收集细胞。
3、加入400?l溶液Ⅰ(如果出现沉淀应在45 ℃水浴中预热),将收集到的细胞振荡混匀,在100 ℃煮沸15分钟。
4、从沸水中取出样本管,点动离心,开盖,加入400?l溶液Ⅱ,混匀后,室温下放置2分钟后,14000 rpm离心5分钟,将上清液倒入废液缸,14000rpm离心1分钟,用200μl移液器,轻轻将剩余的上清液吸尽,枪头切勿碰到离心沉淀方向的管壁,以免将DNA吸掉。 5、开盖静置至少2分钟,加入60?l溶液Ⅲ充分溶解,静置10分钟。14000rpm离心1分钟取1?l样品做PCR检测, 或者贮存-20℃冰箱中备用。
l u 0 8 . 1 液转入
HPV样本处理流程图
此标准操作变更程序:如果本操作程序使用者在实际工作中发现其存在问题,则应向科室负责人提出,科室负责人则召集所有与本程序有关的的人员讨论,以决定是否需要变更本程序。
振 荡 取 制 定 者 吸 审 核 者 批 准 者 年 月 日 年 月 日 年 月 日
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