实验生理论文 zhu

实 验 生 理 探 索 性 试 验

药学院2013级临床药学22班1组、10组

比较纳洛酮和拐枣葛花联用对醉酒小鼠的催醒

效果

摘要：目的比较纳洛酮和拐枣葛花联用对醉酒小鼠的催醒效果。方法小白鼠

30只 ,随机分成3组 ,每组10只。（1）模型对照组:每只小白鼠灌胃0. 15ml/10g生理盐水,30min后再灌胃0.15ml/10g56度二锅头酒。(2)纳洛酮组：腹腔注射0.15ml/10 g纳洛酮；30min后再灌胃0.15ml/10g56度二锅头酒。(3)葛花拐枣联用组: 每只小白鼠灌胃0.15ml/10g拐枣葛花混合解救药；30mi后,再灌胃0.15ml/10g56度二锅头酒。结果由实验结果可以得到拐枣葛花联用可明显延长醉酒潜伏期和减少醒酒所需的时间，本实验研究表明可以拐枣葛花联用可以用来醒酒，且对醉酒具有一定预防作用。

关键词：拐枣葛花联用；纳洛酮；催醒

饮酒是一种风俗,有着悠久的历史。随着人们生活水平的提高,饮酒的人数不断增多,因饮酒而导致乙醇中毒的人数也不断增多。乙醇中毒可引起多器官系统的功能损害,研究乙醇相关性疾病及乙醇中毒已成为重要的社会问题[1]。20世纪80年代以来,纳洛酮(naloxone,NAL)已成为治疗急性乙醇中毒的首选药物[2]。

葛花为豆科植物野葛 Pueraria lobata（Wild.）Ohwi、甘葛藤 P. thomsonii Benth.的花，其功效解酒醒脾，治伤酒发热烦渴、不思饮食、呕逆吐酸、吐血、肠风下血。始载葛花能解酒的古代本草文献为陶弘景所撰《名医别录》，自其提到葛花功效“主消酒”以来，历代本草方书多以此为解酒之专药而甚少用于其它疾病的治疗，为传统医学中最具代表性的解酒药物之一。[3]

拐枣, 也称枳棋、金钩子、鸡距子、金钩钩 ,鼠李科 (Rhamnaceae)、枳椇属, 学名 Hovenia acerbaLindl。拐枣含有黄酮类物质多糖类物质、 皂苷类物质、有机酸类物质、多种维生素和矿物质等活性物质 ,具有解酒毒、护肝、抗脂质过氧化等多方面功效。毒理学实验表明拐枣对人体无毒副作用,是一种纯天然绿色食品,具有巨大的开发前景。[4]

本实验旨在比较纳洛酮和葛花、拐枣联用对醉酒小鼠的催醒效果，为葛花、拐枣联用的进一步研究提供数据。

1材料

1.1器材: 鼠笼（4个），天平，注射器（1ml，2支），灌胃管（6支包括1ml注射器和灌胃管），小烧杯（100ml 5个），棉签2根，注射针头（2根），玻璃棒，玻璃漏斗，大烧杯，加热器，石棉网，滤纸。

1.2药品:生理盐水、成熟拐枣制成提取液、葛花饮料（组方: 葛花、葛根、酸枣仁等 ,含生药0. 958g /ml原液）、盐酸纳洛酮注射液 (0.4mg /1ml，生产公司、批号)、二锅头酒（56%，生产公司、批号），苦味酸试剂。

2 方法

2.1拐枣葛花提取液的制备:

2.1.1拐枣水提物制备:拐枣果实(85 ℃烘干，含水量 6.8%)→3倍重量蒸馏

水冷浸提12 h→过滤→1次提取滤液→滤渣用再蒸馏水 95 ℃热提取 1 h→过滤 →2次提取滤液→2次提取滤液合并→水浴浓缩成相当于含生药0.4 g/ml拐枣提取液。[4]

2.1.2葛花水提物制备: 中药洗净、晾干，80℃烘干2h→粉碎→称取粉末适

量置于烧杯中→加相当于中药量10－20倍的蒸馏水浸泡 2h→煮沸30min→过滤→1次提取滤液→药渣加5倍水→煮沸 20min→过滤→2次提取滤液合并→水浴浓缩成相当于含生药 0.1g/ml 的葛花水提液。[5]

2.1.3葛花、拐枣混合解酒药的制备：拐枣水提物与葛花水提物按体积比

1:1混合成混合解酒药作备用。

2.2动物分组及用药：取小白鼠30只 ,随机分成3组 ,每组10只。（1）模

型对照组:每只小白鼠灌胃0. 15ml/10g生理盐水,30min后再灌胃0.15ml/10g56度二锅头酒。(2)纳洛酮组：腹腔注射0.15ml/10 g纳洛酮；30min后再灌胃0.15ml/10g56度二锅头酒。(3)葛花拐枣联用组: 每只小白鼠灌胃0.15ml/10g拐枣葛花混合解救药；30mi后,再灌胃0.15ml/10g56度二锅头酒。[3]、[4]、[5]、[6]

2.3检测方法：

观察记录小白鼠醉酒潜伏期、醒酒时间。

小白鼠罐酒后,重复2次将其置于垂直于桌面的鼠笼网上，松手后，若小鼠能自行攀附于鼠笼网上，并保持30s不掉落则为不醉酒，反之则为醉酒。醉酒潜伏期为灌酒后出现出现醉酒现象的时间, 醒酒时间为出现醉酒现象后到恢复的时间。

3 结果

3.1对照组、纳洛酮组、以及葛花拐枣联用组由于资料（醉酒潜伏期）方差不齐

且不符合正态分布，用多样本秩和检验得P=0.00，在两两比较得P=0.00.所以数据具有统计学意义。

3.2拐枣和葛花联用组与纳洛酮组由于资料（醒酒时间），醒酒时间>60min,认定

为无效；醒酒时间<60min,则认定为有效。b+c<25,用配对设计四格表资料的确切概率法得P=0.041<0.05，所以数据具有统计学意义。

表1 模型对照组小鼠醉酒后催醒实验记录表

编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9

重量（g） 28.5 28.0 28.0 24.0 30.1 27.2 27.2 32.1 30.5

给药剂量（ml）

0.43 0.42 0.42 0.36 0.45 0.41 0.41 0.48 0.46

醉酒潜伏期（min）

3 3 4 4 3 3 3 4 4

醒酒时间（min）

>60 >60 >60 >60 >60 >60 >60 >60 >60

表2 纳洛酮组小鼠醉酒后催醒实验记录表

编号 1 2 3 4 6 7 8 9 10

重量（g） 29.8 26.2 23.8 29.6 28.7 27.1 27.2 26.5 32

给药剂量（ml）

0.45 0.39 0.36 0.44 0.43 0.41 0.41 0.40 0.48

醉酒潜伏期（min）

4 5 10 9 7 8 8 6 8

>60

>60 >60

醒酒时间（min）

>60 >60 14 19 >60 >60

表3 葛花拐枣联用组小鼠醉酒后催醒实验记录表

编号 2 3 4 5 7 8 9

重量（g） 30.0 28.0 30.0 28.5 30.0 24.5 27.0

给药剂量（ml）

0.45 0.42 0.45 0.43 0.45 0.37 0.41

醉酒潜伏期（min）

10 12 6 5 9 9 7

醒酒时间（min）

30 24 27 >60 32 31 40

4 讨论

体内的乙醇由乙醇脱氢酶-乙醇氧化体系以及肝微粒体－乙醇氧化体系氧化分解为二氧化碳和水。过量乙醇进入人体内时，机体不能及时分解乙醇，从而引起急性中毒。盐酸纳洛酮为特异性阿片受体拮抗剂，由于能有效拮抗内源性阿片肽，抑制β－内啡肽的合成和释放，从而减轻内源性阿片肽对中枢神经系统［６］及呼吸系统的抑制，具有强大的催醒作用［7 －8］。而葛花、葛根是自古以来公认的解酒

药材,葛花的醇提物能抑制乙醇诱导小鼠血糖的升高，三萜皂苷部位和异黄酮类能降低乙醇引起的尿氮浓度升高及肝功异常[3]。现代药理学已证实拐枣具有显著利尿作用，是一种解酒良药。由实验结果可以得到拐枣葛花联用可明显延长醉酒潜伏期和减少醒酒时间，本实验研究结果表明拐枣葛花联用可以用来醒酒，且对醉酒具有一定预防作用。由于个体差异的存在、小鼠代谢率差异较大以及实验条件的限制导致的实验数据较少，若需得到更准确的数据，建议增加实验小鼠数量 以及改变给药顺序（即先灌酒后腹腔注射）与先腹腔注射药物后灌酒做对比实验以减小个体差异的影响。

参考文献

[1]王亚南,刘儒林,程秀臻.酒精中毒大鼠动物模型的研究[J].中国康复理论与实践,2006,12(4):319-320.

[2]李雅君,陈秉良,张泰昌.纳洛酮治疗急性酒精中毒[J].中华内科杂志,1992,31(9):564.

[3]刘建书，蔺小平，朱笛霓.葛花饮料解酒作用的药效学实验[J].陕西中医，2007,28(10):1426-1428

[4] 邹礼根，柳爱春，刘超，赵芸.拐枣水提取液对小白鼠解酒的作用[J].浙江农业科学，2010,1（20）：109-110

[5]宫殿博,康新,杨亮.纳洛酮联合葛花水提物防治小鼠急性酒精中毒作用机理的实验研究[J].中国保健营养,2012,03.

[6]袁玲,孙林浩,张露露,刘烨,陈铁胜,陆悦,陆璇,武玉清.番茄红素和纳洛酮对急性酒精中毒小鼠的催醒和保护作用[J].徐州医学院学报,2015,35(2):72-74. [7]杨永明.纳洛酮、多沙普仑用于全身麻醉催醒及对血流动力学影响的比较［ Ｊ］ ． 吉林医学，２０１１，３２（３２） ：６８０４ － ６８０５． [8]王芷.还原型谷胱甘肽与纳洛酮对急性乙醇中毒小鼠的催醒作用［ Ｊ］ ． 徐州医学院学报，２０１３，３３（３） ：１４５ － １４７．

药材,葛花的醇提物能抑制乙醇诱导小鼠血糖的升高，三萜皂苷部位和异黄酮类能降低乙醇引起的尿氮浓度升高及肝功异常[3]。现代药理学已证实拐枣具有显著利尿作用，是一种解酒良药。由实验结果可以得到拐枣葛花联用可明显延长醉酒潜伏期和减少醒酒时间，本实验研究结果表明拐枣葛花联用可以用来醒酒，且对醉酒具有一定预防作用。由于个体差异的存在、小鼠代谢率差异较大以及实验条件的限制导致的实验数据较少，若需得到更准确的数据，建议增加实验小鼠数量 以及改变给药顺序（即先灌酒后腹腔注射）与先腹腔注射药物后灌酒做对比实验以减小个体差异的影响。

参考文献

[1]王亚南,刘儒林,程秀臻.酒精中毒大鼠动物模型的研究[J].中国康复理论与实践,2006,12(4):319-320.

[2]李雅君,陈秉良,张泰昌.纳洛酮治疗急性酒精中毒[J].中华内科杂志,1992,31(9):564.

[3]刘建书，蔺小平，朱笛霓.葛花饮料解酒作用的药效学实验[J].陕西中医，2007,28(10):1426-1428

[4] 邹礼根，柳爱春，刘超，赵芸.拐枣水提取液对小白鼠解酒的作用[J].浙江农业科学，2010,1（20）：109-110

[5]宫殿博,康新,杨亮.纳洛酮联合葛花水提物防治小鼠急性酒精中毒作用机理的实验研究[J].中国保健营养,2012,03.

[6]袁玲,孙林浩,张露露,刘烨,陈铁胜,陆悦,陆璇,武玉清.番茄红素和纳洛酮对急性酒精中毒小鼠的催醒和保护作用[J].徐州医学院学报,2015,35(2):72-74. [7]杨永明.纳洛酮、多沙普仑用于全身麻醉催醒及对血流动力学影响的比较［ Ｊ］ ． 吉林医学，２０１１，３２（３２） ：６８０４ － ６８０５． [8]王芷.还原型谷胱甘肽与纳洛酮对急性乙醇中毒小鼠的催醒作用［ Ｊ］ ． 徐州医学院学报，２０１３，３３（３） ：１４５ － １４７．

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