南农考研生化课题(2)

糖 类 代 谢

一、填空：

1. 麦芽糖水解产生的单糖是 ； 蔗糖水解产生的单糖是 。

2. 磷酸葡萄糖是某些代谢途径分支点上的重要化合物，它经 酶催化而

进入HMP途径，经 酶催化可进入EMP途径。

3. 糖酵解主要在细胞的 部位进行，该途径的关键酶有 、 和 ，其中最重要的调节酶是 ，该酶被高浓度的 和 所抑制。

4. 三羧酸循环在细胞的 部位进行，其关键酶有 、 和 。

5. 葡萄糖异生途径的关键酶有 、 、 和 。

6. 在真核生物中，1mol 3-磷酸甘油酸彻底氧化成CO2和H2O，净生成 molATP。

7. 在线粒体中，催化丙酮酸氧化脱羧形成乙酰CoA(或-酮戊二酸氧化脱氢形成琥珀酰CoA)的酶是 ，它需要五种辅因子(即辅酶和辅基)，它们是 、 、 、 和 ，需要的金属离子是 。 8. 在葡萄糖无氧酵解过程中， 酶需要耗用无机磷酸(Pi)。 9. 在原核细胞中，1分子葡萄糖通过EMP途径分解成丙酮酸，在无氧条件下可产生 分子ATP，在有氧条件下可产生 分子ATP；若在有氧条件下彻底氧化成CO2，可产生 分子ATP。

10. 在原核细胞中，下列物质被彻底氧化，各自可产生多少分子ATP? 丙酮酸： 、NADH： 、F-1,6-diP： 、PEP： 、DHAP： 。

11. 淀粉先磷酸解后再无氧酵解，淀粉的每个葡萄糖基可生成 个ATP。 12. HMP途径在细胞的 部位进行；

对于该途径的总结果，被氧化的物质是 ，被还原的物质是 ； 1mol的G-6-P通过此途径彻底氧化成CO2，产生 mol的NADPH；

该途径最重要的生物学意义是 。

13. 1分子乳酸经由丙酮酸羧化酶参与的途径转化为葡萄糖，需消耗 分子ATP。 14. 在真核生物内，1mol 6-磷酸葡萄糖彻底氧化为CO2和H2O，净生成 molATP。(按磷酸甘油穿梭计算ATP)

15. 磷酸蔗糖合(成)酶利用 作为葡萄糖的给体(供体)， 作为葡萄糖的受体，生成产物后经 酶水解而生成蔗糖。

16. 在真核生物中，丙酮酸氧化脱羧在细胞的 部位进行。

17. 一分子乙酰CoA经TCA循环彻底氧化为CO2和H2O，可生成 分子NADH、 分子FADH2和 分子由底物水平磷酸化生成的GTP。若上述所有的NADH、FADH2通过呼吸链进一步氧化，则一分子乙酰CoA共可产生 分子ATP。因此，乙酰CoA彻底氧化为CO2和H2O的P/O比值是 。

18. 1mol麦芽糖在植物细胞内彻底氧化为CO2和H2O，净生成 mol ATP。 19. 琥珀酸脱氢酶催化琥珀酸氧化成延胡索酸的磷氧比(P/O)是 。

20. 在下列三种反应体系中，1mol的柠檬酸氧化成苹果酸，分别可生成多少ATP： (1) 正常线粒体中： mol

(2) 线粒体中加有足量的丙二酸： mol (3) 线粒体中加有鱼藤酮： mol

二、选择题(注意：有些题不止一个正确答案)：

1. 下列哪种酶在糖酵解和糖异生中都起作用

(A)丙酮酸激酶 (B)3-磷酸甘油醛脱氢酶 (C)丙酮酸羧化酶 (D)己糖激酶 (E)果糖-1,6-二磷酸酯酶 (F)PEP羧激酶 (G)3-磷酸甘油酸激酶 (H)6-磷酸果糖激酶 (I)醛缩酶

2. 在三羧酸循环所生成的许多高能磷酸化合物中，有一个分子是在底物水平上合成的，它发生在下面哪一步中

(A)柠檬酸-酮戊二酸 (B)-酮戊二酸→琥珀酸 (C)琥珀酸→反丁烯二酸 (D)反丁烯二酸→苹果酸 (E)苹果酸→草酰乙酸

3. 下列什么酶不参与柠檬酸循环

(A)延胡索酸水合酶 (B)异柠檬酸脱氢酶 (C)琥珀酰-CoA合成酶 (D)丙酮酸脱氢酶 (E)顺乌头酸酶 (F)异柠檬酸裂解酶 (G)柠檬酸裂解酶 (H)柠檬酸合酶

4. 下列有关Krebs循环的叙述，哪些是正确的 (A)产生NADH和FADH2 (B)有GTP生成

(C)提供草酰乙酸的净合成 (D)在无氧条件下它不能运转 (E)把乙酰基氧化为CO2和H2O (F)不含有生成葡萄糖的中间体 (G)含有合成氨基酸的中间体

5. 下列什么酶催化三羧酸循环中的回补反应

(A)琥珀酸脱氢酶 (B)柠檬酸裂解酶 (C)柠檬酸合成酶 (D)丙酮酸脱氢酶 (E)丙酮酸羧化酶

6. 能控制柠檬酸循环速率的变构酶是

(A)丙酮酸脱氢酶 (B)顺乌头酸酶 (C)异柠檬酸脱氢酶 (D)苹果酸脱氢酶 (E)柠檬酸脱氢酶

7. 在反应 NDP-葡萄糖＋淀粉n → NDP＋淀粉n+1 中，NDP代表 (A)ADP (B)CDP (C)GDP (D)TDP (E)UDP 8. 在反应 NTP＋葡萄糖 → G-6-P＋NDP中，NTP代表 (A)ATP (B)CTP (C)GTP (D)TTP (E)UTP

9. 在反应 NTP＋OAA → NDP＋PEP＋ CO2中，NTP代表 (A)ATP (B)CTP (C)GTP (D)TTP (E)UTP

10. 在反应 F-6-P＋NDP-葡萄糖—→磷酸蔗糖＋NDP中，NDP代表 (A)ADP (B)CDP (C)GDP (D)TDP (E)UDP 11. 下列哪些是酮糖

(A)核糖 (B)核酮糖 (C)葡萄糖 (D)果糖 12. 下列哪些化合物含有糖基

(A)ATP (B) NAD＋ (C)RNA (D)乙酰CoA

13. 在磷酸己糖支路中，包含下列哪些酶 (A)反丁烯二酸水合酶 (B)-KGA脱氢酶 (C)己糖激酶 (D)葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 (E)转酮酶 14. 影响TCA循环活性的因素有

(A)OAA (B)NAD＋ (C)ADP/ATP (D)FMN

(E)FAD (F)NADP+ (G)CoA

15. 在柠檬酸循环中，由-KGA脱氢酶所催化的反应需要

(A)NAD＋ (B)NADP＋ (C)CoA (D)ATP (E)叶酸 (F)FAD 16. 磷酸果糖激酶的抑制剂有

(A)柠檬酸 (B)cAMP (C)ATP (D)NH4＋ (E)NADH 17. 下列关于多糖的叙述，正确的有

(A)多糖是生物的主要能源 (B)以线状或支链状形式存在 (C)是细菌细胞壁的重要结构单元 (D)是信息分子 18. 需要3-磷酸甘油醛脱氢酶参与的途径有 (A)EMP途径 (B)TCA循环 (C)HMP途径 (D)糖异生作用 (E)乙醛酸循环 19. 下列的反应中：

G-6-P (A)─→ F-6-P (B)─→ F-1,6-diP (C)─→ 3-PGAld (D)─→ 1,3-DPG (E)─→ 3-PGA (F)─→ 2-PGA (G)─→ PEP (H)─→ 丙酮酸 (I)─→ 乳酸 (1)有ATP→ADP的步骤有 (2)有ADP→ATP的步骤有 (3)有NADH→NAD+的步骤有 (4)有NAD+→NADH的步骤有

20. 在真核细胞中，1mol葡萄糖在有氧条件下氧化净得的ATP数与它在无氧条件下净得的ATP数之比例最接近于

(A)2∶1 (B)3∶1 (C)9∶1 (D)18∶1

21. 下列化合物中，哪些不是丙酮酸脱氢酶复合体的辅因子(丙酮酸氧化成乙酰CoA的反应中，不需要的辅因子有)

(A)NAD＋ (B)NADP+ (C)FAD (D)TPP (E)CoA (F)四氢叶酸 (G)硫辛酸

22. 下列对-淀粉酶的叙述，不正确的是 (A)对热不稳定 (B)对酸不稳定

(C)能水解淀粉中的-1,4糖苷键 (D)能水解淀粉中的-1,6糖苷键 23. 延胡索酸酶具有下列专一性特征

(A) 几何异构专一性 (B) 旋光异构专一性 (C) 键专一性 (D) 基团专一性 24. 磷酸蔗糖合酶作用的一组底物是

(A) ADPG和G6P (B) ADPG和F6P (C) UDPG和F6P (D) UDPG和G6P

三、问答题：

1. 从乙酰CoA开始的TCA循环的全过程中，共有哪些酶参与? 该循环对生物有何意义? 该循环中有哪些酶催化脱氢反应?

2. EMP途径在细胞的什么部位进行? 它有何生物学意义? 为什么它在无氧及有氧条件下均能进行? 该途径最重要的调节酶是什么酶? 该酶受那些因素的影响? 3. 三羧酸循环为什么只能在有氧条件下进行? 该循环对生物有何意义? 4. HMP途径在细胞内什么部位进行? 有何生物学意义?

5. 糖酵解和三羧酸循环分别在细胞的哪些部位进行? 它们有何共同的生物学意义? 6. 油料种子成熟时以PPP为主，试简单解释其生化机理。

四、计算题：

1. 从丙酮酸合成一分子葡萄糖，假如其能量是由NADH与电子传递链偶联来提供，则合成一分子葡萄糖至少需要几分子的NADH? (不考虑穿梭作用)

2. 在植物细胞中，淀粉先发生磷酸解，而后无氧氧化成乳酸，则它的每个葡萄糖基可生成多少分子的ATP? 为什么? 若两分子的乳酸通过异生作用形成淀粉分子中的一个葡

萄糖基，需要消耗多少分子的ATP? 为什么? (7分)

五、用结构式写出下列酶所催化的化学反应：(辅酶和核苷酸用代号表示) 1. 苹果酸脱氢酶 2. PEP羧化酶 3. 3-磷酸甘油酸激酶 4. 转酮酶 5. 琥珀酸脱氢酶 6. 3-磷酸甘油醛脱氢酶

7. PEP羧激酶 8. 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶 9. 丙酮酸脱氢酶 10. 丙酮酸激酶 11. 6-磷酸葡萄糖脱氢酶 12. 苹果酸酶 13. 醛缩酶 14. 柠檬酸合成酶 15. RuBP羧化酶

六、名词解释

1. 糖苷；2. 极限糊精；3. 糖酵解；4. 巴斯德效应；5. 回补反应；6. 乙醛酸循环；7. TCA；8. EMP；9. HMP；10. 糖的异生作用

答 案

一、填空：

1） 葡萄糖；葡萄糖和果糖

2） 6-磷酸葡萄糖脱氢，6-磷酸葡萄糖异构

3） 胞浆，己糖激酶、磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶，磷酸果糖激酶，ATP，柠檬酸 4） 线粒体，柠檬酸合成酶、异柠檬酸脱氢酶、α-酮戊二酸脱氢酶

5） 丙酮酸羧化酶、PEP羧激酶、1,6-二磷酸果糖磷酸酯酶、6-磷酸葡萄糖磷酸酯酶

6） 16

7） 丙酮酸脱氢酶系(-酮戊二酸氧化脱氢酶系)，TPP、硫辛酸、CoA、FAD、NAD+，Mg2+

8） 3-磷酸甘油醛脱氢酶 9） 2，8，38

10） 15，3，40，16，20 11） 3

12） 细胞质；葡萄糖，NADP＋；12；为细胞的各种合成反应提供主要的还原力 13） 6

14） 37

15） UDPG，6-磷酸果糖，蔗糖磷酸酯酶 16） 线粒体 17） 3，1，1，12，3 18） 72 19） 2

20） 9；7；3

二、选择题：

1. BGI 2. B 3. DFG 4. ABDEG 5. E 6. C 7. A 8. A

9. C 10. E 11. BD 12. ABCD 13. DE 14. ABCG 15. ACF 16. AC

17. ABC 18. AD 19.(1)B (2)EH (3)I (4)D 20. D 21. BF

22. AD 23. A

24.C

三、问答题：

1.(1)共有八种酶 ?? (2)三点意义 ?? 2.- 6. 略

四、计算题： 1） 4 2） 3，7

五、用结构式写出酶所催化的化学反应： 略

生 物 氧 化 I 一、名词解释：

1. 呼吸链；2. 氧化磷酸化；3. 化学渗透学说；4. 能荷；5. 生物氧化；6. 底物水平磷酸化；7. 磷氧比；8. 呼吸链电子传递；9. 解偶联剂；10. 高能化合物

二、填空：

1. 目前，解释氧化磷酸化作用的机理有多种假说，其中得到较多人支持的是 假说，该假说认为 是形成ATP的动力。

2. 在线粒体中，NADH的P/O (磷氧比)为 ，FADH2的P/O为 。 真核生物细胞质中的NADH的P/O(磷氧比)为 ，这是因为它须经 穿梭作用转变为 ，才能进入呼吸链。若在细胞中加入2,4-二硝基苯酚，其P/O值变为 。

3. 在线粒体内，典型的呼吸链有两条，即 呼吸链和 呼吸链。 4. 下图所示的电子传递过程，在细胞内 部位进行。在图中的方框内填入所缺的组分以及典型抑制剂的名称(或符号)。

三、选择题(注意：有些题不止一个正确答案)：

1. 在下列氧化还原体系中，哪一种标准还原电位最高 (A)氧化型CoQ/还原型CoQ (B)Fe3＋Cyta/Fe2＋ (C)Fe3＋Cytb/Fe2＋ (D)NAD＋/NADH

2. 目前常用下列哪些假说来解释氧化磷酸化的作用 (A)构象偶联假说 (B)化学渗透学说 (C)瓦勃氏假说

(D)巴斯德效应 (E)化学偶联假说

3. 下列化合物中，不抑制FADH2呼吸链的是(不抑制线粒体内琥珀酸氧化的是) (A)氰化物 (B)抗霉素A (C)鱼藤酮 (D)一氧化碳 4. 下列化合物中，哪些不含高能磷酸键

(A)ADP (B)6-磷酸葡萄糖 (C)磷酸烯醇式丙酮酸

27. 在大肠杆菌中，核糖体利用氨基酸合成1mol的fMet-Ala-Glu-Leu，至少需消耗 mol ATP。(ATP→AMP计算为消耗2ATP；1分子GTP折算为1分子ATP)

在原核生物中，1分子,-烯丁酰CoA经由β-氧化途径彻底氧化成CO2和H2O，可生成 个高能磷酸键；假如以氨基酸为原料在核糖体上起始合成多肽链，这些能量最多可用来合成一条含 个氨基酸残基的肽链。(GTP折算成ATP)

28. 在大肠杆菌蛋白质合成过程中，肽链的延长需要 、 和 因子。

29. 大肠杆菌DNA上的某个编码区，以起始密码子 开始，以UAA结束，它在标准的B-型双螺旋结构状态时长度为6.1纳米，该区段被转录后，以氨基酸为原料在核糖体上被翻译，则能合成含 个氨基酸残基的多肽链，每翻译出一条多肽链至少需要消耗 分子的ATP。

30. 蛋白质磷酸化是一个可逆过程，蛋白质磷酸化时需要的酶为 ，而去磷酸化时需要的酶为 。

31. 一个典型的分泌蛋白质的信号肽N端1~3个________和C端一段______________组成

32. 在DNA的样品保存液中一般要加入1mM EDTA,作用为___________和___________

33. 某细胞亚器官的膜厚度为7.5nm,存在于该膜上的蛋白质的穿膜部分至少应该由_________个富疏水氨基酸构成.

34. 尿素是一种蛋白质变性剂,其主要作用是___________其作用机制为_________________

35. 简要写出一下人物在生物化学领域的贡献(6分): 1).Banting 2)Tiselius 3)E.Fisch 4)Calvin 5)Sutherland 6)Gilbert 36.

三、选择题(注意∶有些题不止一个正确答案)∶

16. 在肽链合成的延伸阶段，需要下列哪些物质

(A)肽基转移酶 (B)鸟苷三磷酸 (C)Tu、Ts和G因子 (D)mRNA (E)甲酰甲硫氨酰-tRNA 17. 下列关于密码子的叙述，正确的有 (A) 无义密码子只有三个

(B) 一条mRNA分子可能有多个AUG密码子，但起始密码子只有一个 (C) 对一个氨基酸密码子来说，其3′末端的核苷酸的专一性最差 (D) 密码无标点符号，但密码子之间可能会有非编码的核苷酸序列 (E) 密码无标点符号，因此可以从任意一点开始译读密码

18. 在大肠杆菌肽链合成的延伸阶段，核糖体移位需要下列哪一种蛋白因子参与 (A)IF3 (B)EF-G (C)EF-Tu (D)RF1

19. 在蛋白质生物合成的肽链延长阶段，核糖体沿mRNA模板移动的方向和肽链延长的方向分别是

(A) 3′→5′，N端→C端 (B) 3′→5′，C端→N端

(C) 5′→3′，N端→C端 (D) 5′→3′，C端→N端

20. 肽链在进入到内质网之前，先要合成一段信号肽，新生的信号肽要在下列哪一种物质的帮助下才能正确插入内质网膜中

(A) 信号肽 (B) 信号肽识别颗粒（SRP） (C) RNA (D) 疏水性蛋白质

6. 在蛋白质合成过程中氨基酸在掺入肽前必须活化，其活化部位是

(A) 内质网的核糖体 (B)高尔基体 (C) 细胞质溶胶 (D) 线粒体 7. 蛋白质的生物合成中肽链的延伸方向是

(A) 5’—3’ (B) 从C端到N端 (C) 从N端到C端 (D) 定点双向进行 8. 多核糖体中每一种核糖体是

(A) 由mRNA3 (B) 信号肽识别颗粒（SRP） (C) RNA (D) 疏水性蛋白质

9. 一个mRNA的部分顺序和密码如下：

140 141 142 143 144 145 146

??? CAG CUC UAA CGC UAG AAG AGC??..

如果以mRNA为母板，经翻译后生成的未加工的多肽链含有的氨基酸残基数为 (A) 140 (B) 141 (C) 142 (D) 143 10. 核糖体上A位点的作用是 (A) 接受新的氨酰rRNA到位

(B) 含肽基转移酶活性，催化肽链的形成 (C) 可水解肽酰-rRNA，释放多肽链

(D) 合成多肽的起始点

11. 参与蛋白质生物合成的物质有（ ）

A．信使核糖核酸 B．核蛋白体 C．转肽酶 D．连接酶 E．羧化酶 12. 仅有一个密码子的氨基酸是（ ） A．苏氨酸 B．蛋氨酸 C．脯氨酸 D．丝氨酸

13. 蛋白质生物合成中催化肽链延长的酶是（ ）

A．氨基酸－tRNA合成酶 B．羧基肽酶 C．转肽酶 D．转氨酶

四、问答题∶

9. 某蛋白质含有一段标准的-螺旋，该片段包含20个氨基酸，问该螺旋的长度为多少? 假如该蛋白质在原核生物的核糖体上以氨基酸为原料被合成，问其中的这一段-螺旋至少需要消耗多少高能磷酸键?

10. 按下表所列蛋白因子，写出它们参与的途径名称和具体功能。 因子符号 参与途径名称 具体功能 RF1 SSB σ因子 EF-G 因子

11. 简述蛋白质与核酸的关系。

12. 陈述多肽链和蛋白质在翻译后，要具有生物活性的构象需要进行哪些加工过程。 13. 参与蛋白质生物合成的主要组分及辅助因子有哪些？各有哪些作用？ 14. 遗传密码有哪些特点？如何证明是三联体密码? 15. 原核细胞核糖体的基本结构与功能有哪些?

16. 在翻译过程中哪些环节保证了所合成的多肽的正确无误？ 17. 真核细胞与原核细胞的翻译过程有哪些区别？ 18. 嘌呤霉素如何抑制蛋白质的合成？

19. 简述蛋白质纯化的常用方法及其基本原理，说明重要的注意事项及纯化后的评价标准。（10分）

三、简答题（本大题共6小题，每小题5分，共30分） 51．简述酶的竞争性抑制剂。

52．简述脂肪酸的β－氧化及生理意义。 53．何谓生物氧化？并述其生理意义。

54．何谓不对称转录及转录的模板链、编码链？

55．何谓酶的变构调节与化学修饰调节？两者有何相同之处？ 56．什么是代偿性和失代偿性的代谢性酸中毒？ 四、论述题（本大题共2小题，每小题10分，共20分） 57．试比较糖无氧酵解与有氧氧化的异同点。

58．试述血浆蛋白、血红蛋白的功能及体内血红素合成的调节。

答 案

二、填空∶

1. 甲酰甲硫氨酸，AUG，CAU 2. 64，1，61，3 3. Z－A

4. 4，39

5. 3′→5′，5′→3′；5′→3′，N端→C端 6. 甲酰甲硫氨酸；甲硫氨酸 7. 15。27，7 8. EF-Tu、EF-Ts、EF-G 9. AUG，5，19

10. 蛋白质激酶、蛋白磷酸酯酶

三、选择题∶

1. ABCD 2. ACD 3. B 4. C 5. B 7. C 8. B

9. C 10.D 11. 12. 13. 14. 16.

四、问答题∶

1.

因子符号 参与途径名称 具体功能

RF1 mRNA翻译 识别mRNA上的终止密码子

SSB DNA复制 与单链结合，防止再形成双链(稳定单链) 因子 DNA转录 识别DNA上转录的起始部位(启动子) EF-G mRNA翻译 肽链延伸时，协助核糖体移位 因子 DNA转录 协助RNA聚合酶终止转录

6. C 15.

代谢调节

一、名词解释∶

1. 关键酶(标兵酶)； 2. 操纵子； 3. 酶的反馈阻遏与反馈抑制；

4. 诱导作用； 5. 前馈激活； 6. 顺序反馈抑制； 7. 转录因子； 8. 结构基因； 9. 代谢调节 10.

二、填空∶

1. 在乳糖操纵子的调控中，由 基因编码的阻遏蛋白与DNA上的 部位结合，使结构基因不能转录。

2. 无活性的磷酸化酶b经共价修饰接上 基团，便转变为有活性的磷酸化酶a。

3. 乳糖操纵子的正控制需要cAMP。cAMP是由 (化合物)在 酶催

化下生成的。当cAMP与 蛋白结合形成的复合物与DNA上的 部位结合后，促进 酶也在该部位结合，引起结构基因的转录。

4. 在酶活性的调节中，有些反应序列的 可对该序列 的酶发生抑制作用，这种作用称为反馈抑制。

5. 正调控和负调控是基因表达的两种最基本的调节形式，其中原核细胞常用 调控，而真核细胞常用 调控模式。

6. β-半乳糖苷酶基因的表达受到 和 两种机制的调节。 7. 乳糖操纵了的天然诱导物是 ，实验室里常用 作为乳糖操纵子的安慰诱导物诱导β-半乳糖苷酶基因的表达。

8. 代谢途径的终产物浓度可以控制自身形成的速度，这种现象为 。 三、选择题(注意∶有些题不止一个正确答案)∶

1. 乳糖操纵子如下图。转录开始前，RNA聚合酶和σ因子首先与哪个字母所表示的位点结合

调节基因 启动子 操纵基因 Z Y A ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ A B C D E F

(A) A (B) B (C) C (D) D (E) E (F)F 2. 操纵基因具有的功能有

(A)σ因子的识别部位 (B)影响结构基因的表达 (C)直接编码决定AA顺序 (D)编码调节蛋白

3. 下列化合物中，哪些能结合到乳糖操纵子的启动子附近的DNA上，促进RNA聚合酶的转录

(A)诱导物 (B)cAMP-CAP (C)激活剂 (D)ATP 4. 由相应底物所促进的酶的合成过程称为

(A)激活 (B)去阻遏 (C)去抑制 (D)诱导 (E)活化

5. 右图是一条生物合成线路，当某种酶缺陷的微生物在含有X的培养基上生长时，发现它积累了大量的M和L，但没有Z，说明该微生物突变发生在 (A)酶A (B)酶B (C)酶C

(D)酶D (E)酶E

6. 在大肠杆菌中，嘧啶的反馈抑制作用控制下列什么酶的活性 (A)二氢乳清酸还原酶 (B)乳清酸焦磷酸化酶 (C)还原酶 (D)天冬氨酸转氨甲酰酶 (E)羟甲酰胞苷酸合成酶 7. 大肠杆菌乳糖操纵子的控制系统有 (A)可阻遏的负控制 (B)可诱导的负控制 (C)可阻遏的正控制 (D)可诱导的正控制

8. 阻遏蛋白通过与下列什么物质结合才阻止蛋白质的合成 (A)fMet-tRNA (B)核糖体 (C)RNA聚合酶 (D)mRNA的特殊区域 (E)DNA上的特殊区域 9. 基因剔除（knock out）的方法主要用证明 (A) 基因的调控 (B) 基因的结构

(C) 基因的表达 (D) RNA的特殊区域 (E) 基因的功能 10. 在转录时DNA分子上被RNA聚合酶特异性识别的作用顺式元件为 (A) 操纵子 (B)启动子 (C) 终止子 (D) 增强子 11．识别转录起点的蛋白因子为

(A) 核心酶 (B) σ因子 (C) ρ因子 (D) ω因子 12. 下列哪些不是操纵子的组成部分

(A) 启动了 (B) 操纵基因 (C) 阻遏物 (D) 结构基因 (E) 转录因子 13. 关于转录的叙述下列哪一项是正确的？

(A) mRNA翻译的模板，转录只是指合成mRNA的过程 (B) 转录需要RNA聚合酶，但这种RNA聚合酶对利福平不敏感 (C) 逆转录也需要RNA聚合酶

(D) DNA复制中合成RNA引物也一个转录过程

(E) 转录需要RNA聚合酶，是一种酶促的核苷酸聚合过程

14. 可被蛋白激酶磷酸化的氨基酸残基是（ ）

A．酪氨酸／甘氨酸 B．甘氨酸／苏氨酸 C．苏氨酸／丝氨酸 D．甘氨酸／丝氨酸 15. 别构调节时酶分子发生的改变是（ ）

A．一级结构 B．空间结构发 C. 辅酶的结合 D．与金属离子的结合

四 问答题

1. 简要说明代谢调节中酶活性调节。

2. 哪些化合物是联系糖、脂类、蛋白质和核酸代谢的重要中间代谢物? 为什么? 3. 简述酶活性调节的方式及其产生的效应。

4. 共价修饰与酶原激活导致的级联放大作用有何不同? 级联放大作用有何意义? 5. 以大肠杆菌乳糖操纵子为例，具体说明可诱导操纵子的作用机制。 6. 大肠杆菌色氨酸操纵子是如何调节有关酶类的合成的？

答 案

一、名词解释∶ 略

二、填空∶

1. 调节，操纵基因(操作子) 2. 磷酸

3. cAMP，腺苷酸换化酶。CAP，启动子，RNA聚合酶 4. 终产物，前头 5. 正、负

6. 正调控、负调控 7. 别乳糖、IPTG 8. 反馈

三、选择题∶

1. B 2. B 3. B 4. D 5. B 6. D 7. BD 8. E 9 E 10 B

11B 12CE 13E 14 15 16 17 18 19 20

实验和计算部分

一填空题：

1. 测定还原糖和总糖时，所用的材料是 。在碱性条件下，黄色的 试剂与 糖共热，生成棕红色的3-氨基-5硝基水杨酸，比色所用波长为为 nm。多糖必须经过

处理，才能用此法测定。

2. 浓盐法提取酵母中RNA，所用NaCl的浓度为 。在 条件，加热1小时，使RNA从细胞中释放出来，离心后取上清夜，将其pH调至 ，溶液中便有 现象出现。

3. RNA与浓盐酸和 试剂在沸水浴中加热，生成 色物质。

4． 测定蛋白质含量有 法，所用波长 nm，还有考马斯亮蓝G-250法，所用波长 nm。

5．在凝胶层析脱盐实验中，所用的葡聚糖凝胶的G值表示每克干胶溶胀时吸水量（毫升数）的

倍；蛋白质与盐的混合样品经凝胶柱层析，先被洗脱下来的是 ，可用 试剂鉴定；后被洗脱下来的是 , 可用 试剂鉴定。 6．在纸层析实验中，固定相是 ，流动相是 ，各种氨基酸经纸层析分离后可用 溶液显色定位。由于谷氨酸的 比丙氨酸大，所以谷氨酸的Rf值比丙氨酸的要 。

7．盘状聚丙烯酰胺凝胶不连续电泳过程中存在的三种物理效应是 ， 和 ，凝胶管的加样端应置于电场的 极，蛋白质向电极的

极移动。

8．维生素C又名 ，测定时所用材料为 。

9．在测得面粉中总糖的含量时，首先须将面粉进行 处理，然后再与DNS试剂反应， 产生 色的3-氨基-5-硝基水杨酸，进行比色测定。

10．在酵母RNA的提取实验中，我们采用 方法将RNA从细胞中释放出来，然后用 方法将RNA从盐溶液中析出。

11．在淀粉酶的活力测定中，我们用到了6N的NaOH溶液，它的作用是 。

12．下表的实验是用于研究 。反应后，三支试管蓝色由深到浅的顺序是 。 试剂

(管号) 淀粉酶0.5% NaCl

0.3% CuSO4

1% H2O 缓冲液pH6.8 淀粉酶液 I-KI

（1） 5mL 1mL 0 0 2mL 1mL 37℃

水浴

3分钟 1滴

（2） 5mL 0 1mL 0 2mL 1mL 1滴

（3） 5mL 0 0 1mL 2mL 1mL 1滴

13．在Sephadex G-25、G-75、G-100三种凝胶中，网眼最大的是 。在凝胶层

析脱盐的过程中，蛋白质和盐离子先洗脱下来的是 。洗脱下来的蛋白质可以用 或 来鉴定。

14．在用钼酸铵比色法测定维生素C含量时，用 试剂可防止金属

离子破坏维生素C。

15．在连续的聚丙烯酰胺凝胶电泳中，样品的分离主要依据 效应和 效应。已知两种球状蛋白A、B，其分子量A>B，若它们所受的电场力相同，则泳动速度较快的是 。

16．我们在测定面粉总糖含量时，是采用 比色法在540nm处测定棕红色溶液的吸光度，查对标准曲线并计算，以先求得面粉中 含量，从而推算出糖的含量。 17．应用721型分光光度计进行比色时，设一个“0”号管的意义

是 ， 。

18．由于DNA和RNA中不同的戊糖各自具备不同的颜色反应，常用 ，和 试剂定性鉴别DNA和RNA，前者生成蓝色物质，后者生成绿色物质。

19．根据蛋白质含量与蓝色的深浅在一定范围内成正比关系的原则，Folin-酚法测定蛋白质含量是在

nm波长处测定一组 值，在经作图，计算求得样品中蛋白质含量。 20．葡聚糖凝胶是常用的层析介质，调节葡聚糖和交联剂配比，可以获得网眼大小不同、

型号各异的凝胶。G值表示 。

21．淀粉酶能专一性地水解淀粉。影响唾液淀粉酶活性的因素很多，在我们的实验操作中， 是它的激活剂， 对唾液淀粉酶具抑制作用。 22．在离心机的操作过程中，样品倒入离心管一定要先连同离心套管一起进行 ，然后才能对角线放入离心机内，闭盖离心。

23. 用721型分光光度计测定吸光度时，首先要用空白对照液调节吸光度至 。当短时间不测定时，光路应处于 状态。

二. 问答与计算

1. 下表为某淀粉酶活力测定的步骤： 管号

步骤 1 2 3 4 5 6 7 8 淀粉酶 各0.5ml pH6.8缓冲液 各1ml

0.3%NaCl溶液 各1ml

水(ml) 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0 0

37℃预热6分钟

6N NaOH(ml) 0 0 0 0 0 0 1.0 0

1mg/ml的葡萄糖溶液(ml) 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 0 0

37℃预热的可溶性淀粉(ml) 0 0 0 0 0 0 1.0 1.0

37℃保温4分钟

6N NaOH(ml) 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 0 1.0

DNS试剂 各2ml

沸水浴5分钟，冷却，用水定容至25ml

吸光度A540nm 0 0.150 0.300 0.450 0.600 0.750 0.100 0.700

若规定一个淀粉酶活力单位为：在37℃、pH6.8的条件下，每分钟转化淀粉生成1mg还原糖所需的酶量。计算每毫升酶液的活力单位。 2. 由下表的实验，你可得出什么结论？ 试剂

管号 淀粉液 盐溶液A 盐溶液B 水 pH6.8缓冲液 淀粉酶液 碘液 颜色

1 各5ml 1ml 0 0 各2ml 各1ml 37℃水浴5分钟 各1滴 深蓝

2 0 1ml 0 无色

3 0 0 1ml

浅蓝

3. 若要了解植物提取液中过氧化物酶同工酶的情况，可采用什么方法对该同工酶进行分离和鉴定？简要说明分离、鉴定的实验方法及原理。

4. 简述一种测定植物组织中可溶性糖含量的方法及理论依据。

5. 若要将溶液中的蛋白质沉淀出来，你可采用何种实验？其原理是什么？纯化时，若想将小分子杂质与蛋白质分离，你有采用何种方法？分离原理又是什么？

6. 如果测定某一果汁中的Vc含量很高，必须降低Vc浓度再次测定， 试问：（1）用什么溶剂稀释果汁为好？理由是什么？ （2）用什么方法测定Vc含量？原理是什么？

7．简述：（1）从酵母中提取核酸粗制品的操作过程。

（2）鉴定RNA、DNA的方法及原理。

（3）将某种核酸混合液中的RNA与DNA分离的方法及原理。

8．（1）请以丙氨酸、谷氨酸、脯氨酸的混合样液为例说明，应用纸层析法分离鉴定氨基酸的方法和理论依据。

（2）作出纸层析结果示意图。

9．设计一个实验，分别测定生物材料中还原糖含量及总糖含量，写出主要操作步骤并说明测定原理。

10．某样品中含有4种蛋白质，其等电点和分子量如下：

样品中蛋白质组分 pI 分子量（KD） 蛋白质A 4.82 69 蛋白质B 5.06 200 蛋白质C 5.12 300 蛋白质D 5.12 90-150

如果用电泳技术分离这4种蛋白质，电泳缓冲液pH应在什么范围？点样处应靠近哪一极？为什么？画出预计的电泳图谱并简要说明其理由。

11．测定一酶液总蛋白含量为60%（W/V），取0.5 mL酶液在标准条件下测定，最初底物浓度为3mol/L，催化反应20分钟后，底物浓度为27mol/L，此时，酶促反应速度达最大速度的70%，已知反应体系的总体积为100ml，问：

（1） 可用何种方法测定酶液中蛋白含量？原理是什么？ （2） 1ml酶液中所含酶的活力单位（IU）是多少？ （3） 该酶的比活力是多少？ （4） 该酶的米氏常数是多少？

12．如何用实验证明DNA半保留复制机制？

13. 由W，X，Y和Z 4种蛋白组成的混合样品，经凝胶过滤层折后，得到的层折图如图1-1所示。根据图形判断哪个分子的相对分子质量最大？

14. 将A(200 000)，B(150 000)，C(75 000)，D(65 000)4种蛋白质的混合液进行凝胶过滤层折。图1-2中哪个图是真正的层折图，说明理由。凝胶的排阻相对分子质量界限是100 000

左右。

15. 某一已纯化的蛋白无SDS的凝胶电泳图如图1-3(a)所示，SDS-PAGE图如图(b)所示，两栖种情况下的电极缓冲液pH值都为8.2。从这两幅图给出的信息，有关该纯化蛋白的结构你能得出什么结论？该蛋白的pI是大于还是小于8.2。

16. 利用SDS-PAGE测定蛋白质亚基的相对分子质量。下面给出了作为标准的4种纯化蛋白质的亚基的相对分子量和相应的迁移率。求迁移率为蛋白质1和2的平均值的未知蛋白的相对分子质量。

蛋白质编号 相对分子质量 迁移率 1 15 000 5 cm

2 35 000 为1的39％ 3 25 000 为1的63％ 4 20 000 为1的81％

17．从肝细胞中提取的一种蛋白水解酶的粗提液300 mL含有150 mg蛋白质，总活力为360单位。经过一系列纯化步骤以后得到的4 mL酶制品含蛋白质0.08 mg，总活力为288单位。整个纯化过程的回收率是多少？纯化了多少倍？

18.由于对蛋白质样品组成不清楚，从以下的SDS-PAGE和阳离子交换层折图1-4分析样品组成。

19. 下表是一种酶的各个纯化步骤的总蛋白和总活性单位数。 纯化步骤 总蛋白/mg 总活性单位数 1. 粗提 20 000 4 000 000 2. 盐沉淀 5 000 3 000 000 3. pH沉淀 4 000 1 000 000 4. 离子交换层折 200 800 000 5. 亲和层折 50 750 000 6. 凝胶过滤层折 45 675 000

(a) 从表中给出的信息计算每一步纯化步骤得到的酶溶液的比活。 (b) 哪一纯化步骤最有效 （相对纯度增加最大）？

(c) 哪一纯化步骤效率最低？

(d) 按照表中的6个步骤纯化的酶是纯酶，表中结果是否有指示？有没有别的方法评价酶的纯度？

20. 试述用凝胶电泳鉴定过氧化物酶同工酶的原理和主要操作步骤？

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