多胺测定
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果 树 学 报 2008,25(2):151~156JournalofFruitScience 低温胁迫下 4种苹果砧木叶片多胺的变化
赵玲玲 ,宋来庆 ,刘 志 ,谢兴斌 ,翟 衡 ,郝玉金 1.2 测定方法
多胺含量测定采用 HPLC(高效液相色谱)法 。精胺(Spm)、亚精胺(Spd)、腐胺(Put)和苯甲酰氯均为 Sigma产品,甲醇为色谱纯,水为超纯水,其它试剂为国产分析纯;所用高效液相色谱仪为 WatersTM996photodiodeArrayDetector,采用 DiamondC18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)和 N2000色谱工作软件,流动相为甲醇∶水=70∶30;检测波长为 230nm,流速为 0.8mL/min。 每个实验重复 3~5次,每次测定 4~5个样品。数据采用 SPSS统计分析软件进行显著度分析,取 P<0.05为显著相关,各数据均用平均值±标准差表示。
植物生理科学
枇杷果实发育不同阶段内源多胺及激素含量的变化 蔡建秀 ,刘国强 ,陈 伟
1.3.1多胺含量的测定 多胺的测定参照Flores等 的方法提取多胺。含量测定采用高效液相色谱法[18](HPLC),参照 Redmond 的方法略加改进。供作标样的P(ut腐胺)、Sp(d亚精胺)、Sp(m 精胺)均为 Sigma产品。高效液相色谱仪为 Agilent型,紫外检测器为Agilent1100Series,波长为 254nm,色谱柱为 C18反相柱(ODS4.6×250mm),流动相为 V(甲醇):V(乙腈):V(水)=64:2.5:33.5,流速 0.5ml/min柱温 30℃,进样量为20μl,用外标法定量计算。每个样品重复3次。
作物学报
水稻籽粒多胺浓度与米质的关系
王志琴 张 耗 王学明 张自常 杨建昌
1.2.1 多胺的提取与测定 于抽穗期选择穗型大小基本一致的穗子 500~600 个 ,挂上纸牌 ,部分穗标记各颖花开花日期。自开花至花后39 d每隔 3d ,取各品种标记穗15 个(每小区5 个) ,摘下所用籽粒 ,剔除空粒后测定籽粒中的(游离)多胺浓度。参照 Flores 和 Galston 的方法 提取多胺。用 Waters2600 型(美国 Waters公司)高效液相色谱仪测定。色谱柱为 Zorbax ODS反相柱(4.6 mm×150 mm,粒度 5μm) ,流动相为甲醇∶乙腈∶水 = 64.0∶2.5∶33.5 ,流速0.6 mL min ,柱温25 ℃,进样的体积为20μL ,在260 nm处检测。多胺的浓度用 nmol g FW表示。 ,
园 艺 学 报
甜瓜不 同性别花蕾发育中激素和 多胺的变化 张建农 李计红
多胺含量测定
多胺的提取:取 1.0g 油桃果肉,加入 5ml 预冷的 5%HClO4溶液,冰浴匀浆后在冰浴中静置提取 60min,随后于 4℃下 15000×g 离心 30min,取上清液即为多胺待测液,如不能立刻测定,可置于-20℃下保存待用。
多胺的测定:参考 Chien[289]等的方法。取待测上清液 1ml,加入 2mol/L 的 NaOH溶液 2ml 和 15μl 苯甲酰氯,混匀 10s,室温下放置 20min。在混合液中加 2ml 饱和 NaOH和 2ml 乙醚混匀、萃取、离心(10000×g,5min)。之后
取 1ml 乙醚相,在超净台上将乙醚吹干,溶于 100μl 甲醇,用于多胺含量测定。液相色谱的流动相为 64%的色谱级甲醇。液相色谱的检测条件为:ODS-反相 C18柱,SPD-6AV 紫外检测,波长 254nm,柱温 25℃,流速 0~12min 为 0.5ml/min,12~20min 为 1ml/min,20~40min 为1.5ml/min。标样进样量 1μl,样品进样量 20μl。
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