实验室生物安全程序化文件及SOP

慈溪博视眼科医院检验科生物安全细则

（程序文件及SOP）

1.生物安全管理体系

1.1紧急事件电话和办公室联系方式 救护车/火警/警察

120/119/110

生物安全负责人：医院院长 生物安全办公室：检验科主任

实验室平面图、紧急出口、撤离路线：

1.2生物安全管理机构 生物安全负责人：医院院长

生物安全委员会委员：医院主管院长，主要管理部门和实验室负责人 实验室生物安全责任人：检验科主任

实验室生物安全管理员：各专业实验室或专业组负责人

生物安全办公室：设在检验科办公室内，主任：检验科主任 成员：各专业安全员 1.3职责

1.3.1生物安全负责人

医院法定代表人为生物安全负责人。生物安全负责人的主要职责是：

负责建立本单位生物安全管理体系，落实生物安全管理责任部门或责任人。 定期召开生物安全管理会议，对实验室生物安全相关的重大事项作出决定。 批准和发布实验室生物安全手册、生物危害评估等重要文件。

保持与生物安全办公室的联系。 1.3.2实验室生物安全责任人

各专业实验室主任为实验室生物安全责任人，其主要职责是： 全面负责本实验室生物安全工作。 决定并授权进入本实验室的工作人员。

监督有关法规和标准操作规程的执行，纠正违规行为并有权作出停止实验的决

定。

任命实验室生物安全管理员具体落实实验室生物安全管理工作。 负责制定和实施实验室应急处置预案。

负责实验室安全事故的现场处置和调查，并将调查结果以及处理意见向生物安

全办公室报告。

负责对涉及感染性物质的研究计划、方案以及操作程序等，实施前的生物安全

审查。

1.3.3实验室生物安全管理员

实验室生物安全管理员的主要职责是：

负责实验室生物安全保障以及技术规章方面的咨询工作。

就技术方法、程序和方案、生物因子、材料和设备进行定期的内部安全检查。 纠正违反生物安全操作规程的行为。

在出现潜在感染性物质溢出或其他事故时，协助事故调查。 检查和监督实验室废弃物的有效管理与安全处置。

检查和监督实验室各项消毒灭菌措施的落实情况。 2. 生物安全评估和管理

在建设实验室或开展实验活动之前，生物安全办公室应参照卫生部《名录》组织各相关方面的专家对拟操作的生物因子的危害程度、实验活动的危险性、气溶胶传播的可能性、预防治疗的获得性、防护屏障的安全性、应急预案的有效性等因素进行评估，确定相应的生物安全防护水平等级。

实验室生物危害评估结果应由中心的法定代表人签字认可，并归档保存。 生物安全负责人最终对实验室内的安全负责，其职责之一是指导现行工作以判断潜在的危害（生物安全评估），职责之二是实验开始前采用合适的安全程序（风险管理）。

特定的实验开始前需要预先进行登记和通过生物安全负责人的批准。 风险评估和风险管理的5个“P”是指： Pathogen 病原体 – 危险的生物因子

Procedures 规程 – 推荐的实验操作和安全的操作规范 Personnel 人员 – 相应的培训与技能

Protective equipment 防护设备– 防护衣和安全设备 Place 地点 – 实验室所在位置

实验室工作的每一方面都应考虑风险评估和风险管理的5个“P”。正确地指导和风险评估能帮助免受生物危害的暴露，以及最大程度减少实验室受到感染的可能性。 2.1 风险评估和风险管理表 （见下表）

表2.1风险评估和风险管理表

2.2 暴露途径

生物因子要导致疾病发生，首先必须有足够数量的因子进入或侵入人体，进入的途径有经口、呼吸道、黏膜及与动物的接触（叮、抓伤），当生物危害物进入人体，它产生疾病还需满足其它条件，它们必须在人体细胞、组织和/或器官内生长繁殖，克服人体的自然免疫机制和变异或适合人体的变化。

年龄、免疫状况、职业、物理或地理环境等因素会导致个体对疾病的不同易感性。 在涉及生物危害时，确定其最低感染量是很困难的。同一病原体相同剂量在一个人身上可能无症状，而在另一人身上可能导致严重的症状甚至致命。有些微生物只要一个进入到人体就足以侵入并促使疾病的发生，结核杆菌就是一个例子。暴露途径的更多信息见下图。

Mucous Membranes: Exposures to mucous membranes of the eyes, nose

the lab. Inhalation:

Breathing in respirable

needlestick, puncture with contaminated sharp object, animal scratch or bite, through wounds abrasions, or eczema.

2.2.1 实验室内传染因子的传播途径

在实验室内的任何时候始终执行以下工作制度： 不在实验室内吃、喝或吸烟 工作结束后或脱去手套后总是洗手

实验室内穿戴好个人防护设备，离开实验室前务必脱去个人防护设备 不用口吸、始终用手工吸液 使用锐器格外小心

用合适的设备抑制气溶胶的产生 对工作台面、溢出物和废弃物进行消毒

2.3 生物安全等级

国家和卫生部对微生物和生物医学实验室确立了从事生物危害工作对应的生物安全等级。提供了微生物操作、实验室设备和安全设施的结合使用，以及所选的感染因子与使用推荐的四种生物安全等级的实验室操作。

以下是1-4级生物安全所要求的实验室操作、防护设备、实验室设施和传染因子的概括。

2.3.1 所推荐的生物安全等级与相应感染因子

根据国家标准GB 19489-2004《实验室生物安全通用要求》编制

2.3.2生物安全评估

目前实验室内开展的病原体检测的范围为：

Hepatitis D virus Hepatitis E virus

丁型肝炎病毒 戊型肝炎病毒

卫星病毒 嵌杯病毒科

第三类 第三类

BSL-2 BSL-2

病原菌名称 序号 危害程度 学名Mycobacterium bovis Mycobacterium tuberculosis Vibrio cholerae Staphylococcus spp Streptococcus spp Enterococcus spp Micrococcus spp Moraxella spp Neisseria spp Corynebacterium spp Bacillus spp Listeria spp Erysipelothrix spp Rhodococcus equi Nocardia spp Eikenella corrodens Enterobacteriaceae Vibrio spp Aeromonas spp Plesiomonas spp Pseudomonas spp Acinetobacter spp Flavobacterium spp Haemophilus spp Pasteurella spp Gardnerella spp Legionella pneumophila

样本检测 所需生物 安全实验 室级别BSL-2 BSL-2 BSL-2 BSL-2 BSL-2 BSL-2 BSL-2 BSL-2 BSL-2 BSL-2 BSL-2 BSL-2 BSL-2 BSL-2 BSL-2 BSL-2 BSL-2 BSL-2 BSL-2 BSL-2 BSL-2 BSL-2 BSL-2 BSL-2 BSL-2 BSL-2 BSL-2

中文名牛型分枝杆菌 结核分枝杆菌 霍乱弧菌 葡萄球菌属 链球菌属 肠球菌属 微球菌属 莫拉菌属 奈瑟菌属 棒状杆菌属 芽胞杆菌属 李斯特菌属 丹毒丝菌属 马红球菌 诺卡菌属 啮蚀艾肯菌 肠杆菌科 弧菌属(除霍乱弧菌) 气单胞菌属 邻单胞菌属 假单胞菌属 不动杆菌属 黄杆菌属 嗜血菌属 巴斯德菌属 加德纳菌属 嗜肺军团菌

分类第二类 第二类 第二类 第三类 第三类 第三类 第三类 第三类 第三类 第三类 第三类 第三类 第三类 第三类 第三类 第三类 第三类 第三类 第三类 第三类 第三类 第三类 第三类 第三类 第三类 第三类 第三类

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. 23. 24. 25. 26. 27.

根据上述病原体检测的表格，本实验室仅仅允许在生物安全等级为1和2 的实验室里工作。

2.3.3生物安全检查

为确保实验室生物安全制度、措施落实到位，避免生物安全事故，特制订本制度。 1、主任每年至少组织一次生物安全全面检查，对关键控制点可根据风险评估报告适当增加

检查频率。检查内容包括：

a) 生物安全管理体系、实验室活动运行情况； b) 生物安全管理制度是否完善、是否落实； c) 实验室设施、设备和人员的状态；

d) 应急装备、消防装备、报警体系和撤离程序功能及状态是否正常； e) 危险物品如可燃易燃性、传染性、放射性以及有毒物质的防护、控制情况； f) 废物处理及处置情况；

g) 不符合规定的工作是否及时得到纠正；h)现有资源能否满足工作要求等。

2、科室负责人负责实验室生物安全的全面管理，检查、督促生物安全监督员工作，每季度进行科室生物安全工作检查，检查内容包括：

a)生物安全监督员工作记录；

b)菌（毒）株、样本的运输、保存、使用、销毁情况；

c)生物安全实验室的消毒和灭菌情况以及感染性废物的处理情况； d)生物安全设备的运行、维护情况； e)防护物资的储备情况等。

3、生物安全监督员负责实验室日常工作的生物安全监督、检查，内容包括： a)生物安全管理制度执行情况； b)个人防护要求执行情况；

c)实验室人员的生物安全操作是否规范等；

d)及时发现、纠正违规行为，避免生物安全事故发生。

4、对于检查中发现的问题及时纠正，必要时制定纠正措施或实施整改，并进行跟踪验证。

5、按照资料、档案管理制度保存所有检查记录，及时归档。 6、将自查发现的问题作为实验室生物安全培训计划解决。

7、为保证检查工作的质量，应依据事先制定的适用于不同工作领域的检查表实施检查。

8、当发现不符合规定的工作、发生事件或事故时，应立即查找原因并评估后果；必

要时，停止工作。

9、生物安全委员会应参与安全检查。

10、外部的评审活动不能代替实验室的自我安全检查。 3． 标志 3.1 墙面标志

3.1.1 实验室入口处的墙面上应有实验室名称。 3.2 门上标志

3.2.1 实验室入口处门上必须有生物危害警告标志。标志包括国际生物危害符号、生物危害等级（如BSL-1或2或3），有特殊要求的专用实验室应标明特殊进入等要求。

国际生物危害警告标志

3.2.2 BSL-2实验室入口处门上必须有人员出入限制标志和相关信息，如实验室责任人的姓名、联系电话等。 3.3 标贴和颜色

3.3.1 在实验室内，生物危害符号应贴在医用垃圾容器、冰箱、冷冻箱、培养皿和含BSL-2或BSL-3传染因子的离心机、污水池、超声腐蚀器及生物安全柜等上。

3.3.2 当设备用于处理人血液标本、其它潜在感染物质或感染因子时，生物危害符号应临时贴在相关的设备上。

3.3.3生物危害符号也应贴在其它用于储存、运送BSL-2或BSL-3传染因子、血液标本或“其它潜在感染物质”（注意：未怀疑包含传染因子或“其它潜在感染物质”的运送可以不贴生物危害符号，而贴诊断样品标志）的容器上。标贴应用带子、线、粘胶或其它方式尽可能贴近容器以防止松动或意外弄丢。

3.3.4生物危害警告标志底色应该是桔红色，字母和符号用对比明显的颜色。如果有下列情况，生物危害警告标志可以免贴： （1） 废弃物是放在黄色有的袋内；

（2） 在储存、转移、运送、处理过程中，单个盛血液或“其它潜在物质”的容器被放置在

贴有生物危害符号的第二个容器中。

（3） 当实验室门上贴有生物危害警告标志时，其室内的仪器等物品可免贴。 3.4 外送维修或处理的设备

3.4.1已污染或可能污染的设备外送维修或处理必须尽可能彻底消毒，在设备上贴上生物危害警示。

3.4.2 对一些不能进行彻底消毒的仪器设备，在外送之前，将这些仪器设备尽可能的消毒

（冲洗或擦干净外部），并贴上生物危害警示。

3.4.3 生物危害警示还必须注明哪些部分仍存在污染，生物危害符号贴在污染区域附近。

生物危害警示

本设备的外部和内部表面已消毒，已无任何生物危害。 本设备将作为（在□内打勾）

服务/维修 □ 重新安置 □ 报废 □ 消毒操作人员 所使用的消毒剂 消毒日期 设备放置地点 实验室联系电话 设备的以下区域 仍存在污染

4.生物安全要求和人员管理

以下的内容描述了实验人员的要求。每个专业科室负责人的职责是确保实验室能遵循规章制度。

4.1生物物质的使用登记

各专业科室实验室生物安全责任人要完成和递交“生物物质的使用登记表”。生物安全办公室必须保存有关人员使用生物物质的准确的信息（例如：微生物、细胞系、人源物质、动物和毒物），并要求各专业科室负责人每年递交准确信息，以及一年里有关生物物质的增加或删除、房间位置的增加或删除等变化。 4.1.1人类病毒

在开始研究人类致病因子前需要在生物安全办公室登记。生物安全办公室必须在实验开始前批准全部包括有传染性因子或潜在生物危害的生物物质导入动物。

实验人员必须在新的实验开始前接受生物安全培训。生物安全培训由生物安全办公室组织安排。生物安全负责人的职责是确保实验室全体人员得到适当操作和技术的培训。

生物安全负责人和/或实验室生物安全责任人在用风险组2（生物安全水平2）因子工作前必须到生物安全办公室登记。风险组2和较高致病因子名单见附录A。

生物安全办公室将定期监控设备和操作，同时回答任何关于安全的问题。 在下列情况发生之前必须联系生物安全办公室： 开始用新的可感染因子工作 改变现有工作的范围或位置

将可感染因子提供给科内外其他工作人员 在实验室安排非本实验室的工作人员工作

4.1.2人类血液、体液、组织和其他潜在有传染性的物质

血液耐受致病标准适用于“职业暴露”于人类血液或其他潜在有传染性物质下的工作人员。其他潜在有传染物质包括： 人类细胞或组织培养

来自于人类（活的或死的）任何不固定的组织或器官，除了完整无缺的皮肤。 人类体液，包括尿液、粪、唾液或眼泪等。 HIV－或HBV－包括培养液或其他溶液

血液，器官或其他来自于感染了HIV或HBV或其他血液耐受致病原的实验动物组织。

如果工作人员没有直接接触血液或其他潜在有传染物质，但使用那些用于处理或贮存

血液，其他潜在有传染物质或血液耐受致病原的仪器，那么此人也被认为是职业暴露。

员工暴露于由人类血液、组织和体液，可引起一个重要的健康风险，它们含有血液耐受致病原诸如：

人类免疫缺陷病毒（HIV）

乙型肝炎（HBV） 丁型肝炎（HDV） 丙型肝炎（HCV） 疟原虫

疏螺旋体菌 布氏杆菌 钩端螺旋体 弗朗西斯菌

虫媒病毒 减少螺菌 Creutzfeldt-Jakob virus Human T-lymphotropic Virus Type I I型人类T－淋巴促激素病毒

密螺旋体 4.2生物安全柜

空气清洁设备能确保科室员工的健康和安全，同时可保护实验和预防临床传染性物质释放到环境中。

生物安全柜的功效依赖于操作者的行为，如在设备中物品的定位和实验室人员的移动。 本中心的全部生物安全柜必须具有中心证明/服务合同以及至少每年鉴定。生物安全办公室联系确定需每年鉴定的日期。

当转让给新买主、报废、从中心搬走或从其他单位或制造商获得生物安全柜时，须预先通知生物安全办公室。如设备有服务或维修需要（例如，更换荧光灯、开关等）应联系

Streptobacillus

Hemorrhagic Fever viruses出血热病毒

巴贝西虫

科罗拉多壁虱热

moniliformis念珠链杆菌

生物安全办公室。在生物安全柜被重新贮存、维修（内部）或报废前，必须由有证的技师用甲醛等专业排污。

购买生物安全柜应与生物安全办公室协调。生物安全办公室评价全部生物安全柜的购买要求。科室不购买和使用超净工作台，因为超净工作台的空气吹向工作表面而进入操作者的面部和（皮肤）破损处。超净工作台不能提供保护人员或环境防止可传染性或潜在可传染性因子、过敏原、化学品或物质。 4.3人员管理

实验室应建立工作人员上岗考核制度，所有与实验活动相关的人员都应经过培训并取得上岗资质。

培训对象应包括实验室管理人员、实验室技术人员、样本运输人员、废弃物处置人员、仪器设备维修人员及保洁工等。实验室相关人员应每年接受生物安全培训。培训组织机构应采取有效方法对培训的效果进行评估。科室应建立人员培训档案。

人为的失误和不规范的操作会极大地影响所采取的安全措施对实验室人员的防护效果。因此，熟悉如何识别与控制实验室危害的有安全意识的工作人员，是预防实验室感染、差错和事故的关键。基于这一原因，不断地进行安全措施方面的在职培训是非常必要的。一个有效的安全规程首先始于实验室管理者，管理者应确保安全的实验室操作及程序融合到工作人员的基本培训中。安全措施方面的培训是新工作人员岗前培训的有机组成部分，应向工作人员介绍生物安全操作规范和实验室操作规程，包括安全手册或实验的操作手册。应采用诸如签名传阅的方法，来确保工作人员阅读并理解这些规程。专业科室主任在对属

下工作人员进行规范性实验室操作技术培训时起着关键作用，生物安全委员会可以帮助进行人员培训并研制教具和教案。 4.3.1培训规划

不断进行岗位安全教育对于维持实验室工作人员和后勤保障人员的安全意识是很重要的。下列各项是保证生物安全培训规划行之有效的必备要素：

4.3.1.1需求评估。这一过程包括确定相关的任务、重要性等级（以发生频率、危害程度以及复杂性来表示）以及完成这些任务的必要步骤等细节。

4.3.1.2确立培训目的。最令人满意的情况是，期望受培训者在进行培训之后，能在工作中加以应用。培训的目的是要了解开展实验的条件以及所需的熟练水平。

4.3.1.3规定培训的内容和方法。培训内容是受培训者为了实现实验操作目标所必须掌握的知识或技术。通常由那些对工作和相关要求最为了解的人员来确定生物安全培训规划的内容。其他的内容可能集中在练习如何解决工作中发生的问题，以及学习纠正人们在使用某一技术过程中所犯的错误。还不能确定某种教学方法（专题讲座、计算机辅助教学、交互式影像方式等）是否会比另一种更好，教学方法的好坏很大程度上取决于特定的培训需要、培训对象的构成等。

培训应该由取得当地实验室生物安全师资培训合格证的人员进行。

人员培训的内容：生物安全相关法律、法规、办法、标准、验室生物安全的基本知识、基本技能、生物安全管理制度、消防和应急处置预案、化学、生物危险和传染预防、应急救护等应急预案、紧急事件的上报和处置程序、生物安全风险评估、生物安全操作规范、仪

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