酶工程设备：第九章 层析设备和离子交换设备 (1)

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第九章 层析设备和离子交换设备

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一、层析法

1、定义 利用混合物中各种组分的物理化学性质 不同，分离、 不同，分离、分析多组分混合物的一种 方法。 方法。 固定相：固体或液体； 固定相：固体或液体； 流动相：气体或液体； 流动相：气体或液体； 当流动相流过固定相时，各组分以不同 当流动相流过固定相时， 的速度移动，而达到分离的目的。 的速度移动，而达到分离的目的。

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2、层析法分类 按两相的状态来分： 按两相的状态来分： 流动相

固定相

固体：气固色谱（GSC） 气体：气相色谱 液体：气液色谱（GLC） 固体：液固色谱（LSC） 液体：液相色谱 液体：液液色谱（LLC）

按固定相的使用形式分： 按固定相的使用形式分： 柱层析、纸层析、 柱层析、纸层析、薄层层析 按分离机制分： 按分离机制分： 吸附层析、分配层析、离子交换层析、凝胶过滤、 吸附层析、分配层析、离子交换层析、凝胶过滤、 其它层析（如亲和层析） 其它层析（如亲和层析）等

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二、柱层析分离基本原理

）、吸附柱层析 （一）、吸附柱层析 原理：利用固体吸附剂对混合试样各组分的吸 原理：利用固体吸附剂对混合试样各组分的吸 附力不同而使混合物中各组分分离 不同而使混合物中各组分分离。 附力不同而使混合物中各组分分离。 吸附力： 吸附力：离子引力 范德华力 H键 等 固定相：固体吸附剂 固定相： 常用：活性炭，氧化铝， 常用：活性炭，氧化铝，硅胶等 流动相：洗脱剂 流动相： 常用纯溶剂或混合溶剂（不含水， 常用纯溶剂或混合溶剂（不含水，且不与水 互溶） 互溶） 吸附力较强的组分，移动的距离小，后出柱； 吸附力较强的组分，移动的距离小，后出柱； 吸附力较弱的组分，移动的距离大，先出柱。 吸附力较弱的组分，移动的距离大，先出柱。

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（二）、分配柱层析 ）、分配柱层析 原理 分配层析是利用混合物中各组分在两种不 分配系数K 相混溶的溶剂间分配系数 的不同， 相混溶的溶剂间分配系数K的不同，使各组分 得以分离。 得以分离。

固定相中溶质的浓度C固 K= 流动相中该溶质的浓度C流

分配系数小的先出柱； 分配系数小的先出柱；分配系数大的后出柱 固定相：液体， 固定相：液体，常用水或水混合液体 支持剂：硅胶、硅藻土、纤维素等。 支持剂：硅胶、硅藻土、纤维素等。 流动相： 流动相：一般是有机溶剂

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（三）、离子交换柱层析 ）、离子交换柱层析

离子交换柱层析是以离子交换剂作为固定相，分 离子交换柱层析是以离子交换剂作为固定相， 离离子型化合物的方

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