植物外植体消毒过程的模块化处理

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植物外植体消毒过程的模块化处理

作者：刘开伟

来源：《硅谷》2013年第16期

摘 要 将植物组织培养过程中的外植体消毒这一过程分为浸泡、擦拭、冲洗及初步消毒等9个模块，不同的模块组合与重复实验证明该方法可操作性强，比常规消毒方法效果显著。 关键词 外置体；消毒；污染；模块

中图分类号：Q94 文献标识码：A 文章编号：1671-7597（2013）16-0142-02

在植物组织培养研究中，有效无菌外植体的获得是最为关键的一步，如果处理不当，会造成培养物的污染和褐化，导致整个试验的失败。而不同的外植体需要不同的处理手段、流程与时间，对于初学者来说并不太容易把握。该研究利用最为常见的试剂及器材，将外植体消毒的不同步骤模块化和标准化并对其效果进行了研究。 1 外植体消毒过程的模块与操作标准 1.1 外植体清洗 1.1.1 浸泡

根据洁净程度将材料浸泡于含有0.1%-1%餐洗净的纯净水中5 min-15 min。整个材料要完全处于洗涤剂溶液中，水温要比室温高5℃-10℃。 1.1.2 擦拭

而后用软毛刷或少量脱脂棉蘸取洗涤液轻轻擦拭材料表面。不可造成材料划伤或挤压。受伤的材料应弃去不用。 1.1.3 冲洗

擦拭好的材料置于流水中15 min-30 min，污染严重的材料可延长至1 h。水流不可过大过急，材料在容器中能够不停随水流翻转即可。内生菌严重的材料可冲洗12 h以上。 1.2 外植体消毒 1.2.1 初步消毒

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