黄秋葵中总黄酮的含量测定

医药导报2004年9月第23卷第9期

［参考文献］

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675

［3］李子鸿，蒋春飞，刘东文，等.广东刘寄奴挥发油化学成分的GC-MS

分析［J］（8）：.中药材，2001，24575.

［4］国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草［M］.第10册.上

海：上海科学技术出版社，1999.566-1905.

黄秋葵中总黄酮的含量测定

方晴霞，金戈

（浙江省人民医院药剂科，杭州

［摘便可靠。

［关键词］黄秋葵；黄酮；紫外分光光度法［中图分类号］R282.71；R927.2

［文献标识码］A

［文章编号］1004-0781（2004）09-0675-02

用95%乙醇稀释至6mL，分别4.0，5.0，6.0mL于10mL量瓶中，加5%亚硝酸钠试液0.6mL，摇匀，静置6min；再加5%硝酸铝摇匀，静置6min；再加4%氢氧化钠3.0mL，用95%乙0.4mL，

醇稀释置刻度，摇匀，放置12min，以试剂作空白，在493nm处测定吸光度。以芦丁对照品溶液浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程Y=7.7048X+0.0573，r=见图1

。0.9995，

310014）

要］目的：测定黄秋葵中总黄酮的含量。方法：采用紫外分光光度法，测定波长493nm，测定黄秋葵中总黄酮

用紫外分光光法进行测定总黄酮的含量，方法简的含量。结果：黄秋葵中总黄酮的含量为2.8%，RSD=0.14%。结论：

黄秋葵（Okra）是锦葵科（Malvaceae）秋葵属（Abelmoschu咖啡黄葵（Abelmoschusesculentus）植物，原产于印度，其富Medic）

［1，2］含黄酮、多糖等成分。北美，日本等发达国家已将新鲜秋葵

作为运动员抗疲劳的首选蔬菜及老年人的保健蔬菜，其种子经过加工可作为咖啡替代物，具有较好的提神作用，而且不含咖

［2，3］啡因。黄酮类化合物与金属离子能形成稳定的呈色螯合

物；于493nm处有最大吸收，可用分光光度法进行测定准，为其进一步开发利用提供依据。1

仪器及试剂

［4］

。笔

者旨在讨论黄秋葵中总黄酮的含量测定方法，建立其质量标

（日本岛津）；芦丁对采用UV-2401PC紫外可见分光光度计

照品（中国药品生物制品检定所提供）；5%亚硝酸钠及5%硝酸铝试液（自制）；（自制）；其余实验所用试剂均4%氢氧化钠试液为分析纯。22.1

总黄酮的含量测定测定波长的选择

取样品液适量，在0.6mL亚硝酸钠存

2.4

图1

芦丁对照品标准曲线示意图

在的碱性条件下，经硝酸铝显色后，以试剂为空白参比，于

［5］

测定螯合物的吸收度；螯合物于493nm400～800nm内扫描，

样品总黄酮的含量测定精密吸取样品液4mL，置10mL

处有最大吸收，故测定时选用此波长。2.2

样品溶液的制备

取黄秋葵干果，去除籽，称重25.9g，加

入烧瓶中，加石油醚300mL，于68℃水浴下回流2.5h，过滤药渣挥干溶剂后，加95%乙醇300mL，在80℃回流1.5h，收集提取液，药渣中再加入95%乙醇300mL，继续回流1.5h，合并两次提取液，约550mL。提取液在50℃水浴下减压蒸发，浓缩至加入95%乙醇稀释至100mL即得。50mL，2.3

标准曲线的绘制

精密称取芦丁标准品0.1001g，置于

用95%乙醇溶解后，稀释至刻度，摇匀；精密100mL容量瓶中，

量取15mL置于50mL量瓶中，加95%乙醇稀释至刻度，摇匀，

［5］

即得。精密吸取0.3mg mL-1对照品溶液0.0，1.0，2.0，3.0，

量瓶中，余下按2.2项下操作，测定吸光度。测定6次，黄秋葵中总黄酮的含量按干果计为2.8%，RSD=0.14%。2.52.6

精密度试验

取样品液4mL6份，按2.2项下自“各加

为验证方法的可靠性，样品加入已知

起操作，测得吸光度，求得RSD=0.14%。5%亚硝酸钠溶液…”

样品加样回收试验

量芦丁对照品，在与上述测定方法相同条件下，进行测量，结果见表1。

表1

序号12345

样品加样回收试验结果

对照品加入量

19.6020.1020.2019.4219.80

测得量89.5089.8090.0389.9090.29

mgmL-1回收率/%98.4795.0296.19102.50102.90

样品含量70.2070.7070.6070.0069.90

［收稿日期］2003-05-21要从事药学咨询工作。

［修回日期］2003-07-09

［作者简介］方晴霞（1966-），女，浙江杭州人，主管药师，学士，主

注：平均回收率99.02%，RSD=0.04%。

676

3

讨论

以芦丁为对照品，用分光光度法测定总黄酮含量，方法简便可靠。样品提取时用石油醚是为了脱脂。样品浓缩后有沉淀析出，可通过95%乙醇稀释并用超声溶解等方法，如仍有醇不溶性杂质，可用微孔滤膜过滤。不加显色剂的样品溶液，在故采用加显色剂后在493nm处测493nm处无络合物的吸收峰，定总黄酮的含量。

［参考文献］

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HeraldofMedicineVol.23No.9September2004

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［5］吴琼诗.芨藜全草中总黄酮的含量测定［J］.广东药学院学报，

（4）：1998，14273-275.

复方仙灵脾注射液的质量标准研究*

胡润淮，万焱

（河南中医学院化学室，郑州

［摘

450008）

要］目的：研究复方仙灵脾注射液的质量标准。方法：用薄层层析法对其中的淫羊藿和黄芪等进行了定性鉴

别，用薄层扫描法对其中的淫羊藿苷进行了定量测定。结果：线性范围为1.15～5.75µ平均回收率为98.84%，g，RSD=该方法比较简单，灵敏度高，重现性好，可用于该制剂的质量控制。1.16%。结论：

［关键词］仙灵脾注射液，复方；淫羊藿；黄芪；淫羊藿苷；含量测定［中图分类号］R286；R927.2

［文献标识码］A

［文章编号］1004-0781（2004）09-0676-022.22.2.1

定性鉴别

淫羊藿的薄层色谱鉴别

淫羊藿苷对照品溶液的制备：

复方仙灵脾注射液是我院研制的一种中药制剂，由淫羊藿和黄芪等中药组成，具有益气生血，活血化瘀等功效，对治疗脑卒中后遗症有良好的疗效。为了控制该制剂的质量，笔者采用薄层层析法对其中的淫羊藿和黄芪等进行了定性鉴别，并采用薄层扫描法对其中的淫羊藿苷进行了含量测定。11.1

仪器与试剂仪器

（日本岛津）；微量分CS-9301型双波长薄层扫描仪

称取淫羊藿苷对照品1.02mg，加甲醇溶解并定容至1mL。供试品溶液的制备：吸取样品注射液3mL，加甲醇溶解并定容至1按处方（不含淫羊藿）同样品的制mL。阴性对照液溶液的制备：

备工艺及供试品溶液的制备方法制备供试品溶液。鉴别方

［1～4］

法：分别吸取上述溶液各4µ分别点于同一硅胶GF254L，

（3:1）薄层板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水（10:1-0.5%CMC-Na

析天平（METTLERAE240瑞士）；三用紫外线分析仪（江苏省江阴市申港电光仪器厂）；（上海超声波仪器CQ-500J型超声波仪厂）；定量毛细管（Drummond，。USA）1.2

试剂

硅胶GF254、硅胶G（青岛海洋化工厂）；样品：复方

仙灵脾注射液（河南中医学院第一附属医院制剂室）；淫羊藿和黄芪等中药购自河南中医学院第一附属医院药房，经河南中医学院中药鉴定教研室鉴定为正品，淫羊藿苷、氯原酸、黄芪甲苷对照品（中国药品生物制品鉴定所）；其他试剂均为分析纯。22.1

实验方法薄层板制备

分别取20g硅胶GF254和20g硅胶G置于研

为展开剂，展开，展距10cm，取出晾干后，在日光下观察，:1:1）

在供试品的色谱中，与淫羊藿苷对照品色谱的相应位置上，显相同的淡黄色斑点，在阴性对照液的相应位置上，无此暗斑，结果见图1。氯原酸对照品溶液的制备：称取氯原酸对照品1.02加甲醇溶解并定容至1mL。供试品溶液的制备：吸取样品3mg，

加甲醇溶解并定容至1mL。阴性对照液的制备：按处方（不mL，

含淫羊藿）同法制备。鉴别方法：分别吸取上述溶液各4µ分L，别点于同一硅胶G-0.5%CMC-Na（3:1）薄层板上，以醋酸丁酯-甲酸-水（7:3.5:3.0）上层液为展开剂，展开，展距10cm，取出晾干后，在紫外灯（365nm）下观察荧光，在供试品的色谱中，与氯原酸对照品色谱的相应位置上，显相同的淡黄色斑点，在阴性对照液的相应位置上，无此暗斑，结果见图2。2.2.2

黄芪的薄层色谱鉴别

黄芪甲苷对照品溶液的制备：称

取黄芪甲苷对照品1.98mg，加甲醇溶解并定容至2mL。供试品溶液的制备：用移液管吸取复方仙灵脾注射液5mL，置分液漏斗中，先用0.1mol L-1氢氧化钠饱和过的正丁醇萃取3次（10，，将萃取液用正丁醇饱和过的0.1mol 15，20mL）L-1氢氧化钠溶液洗涤3次（15，，弃去碱液，正丁醇部分置水浴20，20mL）

钵中，加入60mL0.5%羟甲基纤维素钠（CMC-Na）研匀，手动涂铺于10cm×20cm的玻璃板上，室温下晾干，置于干燥器中保存，使用前于105℃下加热35min。

［收稿日期］2003-05-15［基金项目］1999360013号）

［作者简介］胡润淮（1957-），男，河南偃师人，教授，学士，从事天然药物化学研究及新药开发。

*

［修回日期］2003-06-27

河南省教育厅科技攻关项目（基金编号：第

本文来源：https://www.bwwdw.com/article/l9tq.html