总氮

紫外可见分光光度计波长准确度

波长重复性是指波长的实际测定值与理论值的差，是分光光度计的重要技术指标，特别是在对多台仪器的测试结果进行比较时波长显得格外重要，如果仪器的波长准确度不好，就无法进行比较或比较不出正确的结果。因为对同一物质，在不同波长测试时，由于不同波长时摩尔吸光系数不同，就会有不同的灵敏度，即使是同一样品，测试的数据也不会相同。目前国内很多厂家，都采用氧化钬玻璃或钬溶液对仪器的多个波长点（有：241nm、279.4nm、333.7nm、360.9nm、418.7nm、536.2）等十一个点进行检测。但是检测某台仪器的波长准确度是有很多种方法的，在此不作详细介绍。引起波长的不准确，主要有：仪器的本身变形，给光栅的传动结构带来了影响，从而影响波长的准确度；光栅传动结构的精度，这对波长准确度具有决定性的作用，国内目前多数采用丝杆、扇形齿轮以及电机直接带动等，这其中丝杆结构基本上能让波长准确度做到±0.5nm，电机直接带动结构一般能够做到±1.5nm，扇形齿轮结构一般能够做到±2nm，所以丝杆结构相对较好，目前也有很少一部分厂商采用扇形齿轮加丝杆来进行传动，当然这种结构的波长准确度会更高一些。当然也有一些其它因素能直接影响到仪器的波长准确度，例如长年不重新鉴定、电机用的不好等等都会影响到波长准确度。

记得去年为测总氮疯狂来坛子求助 呵呵 很多大人提供了宝贵经验 感谢

这半年测总氮感觉挺有收获 基本把问题弄清楚了 所以也来分享一下 1、过硫酸钾提纯

我觉得这个方法测总氮的主要问题就是过硫酸钾含氮 去年我测试的时候，吸光度甚至达到了4 -_-|| 现在想想真是太恐怖了

听说国外的过硫酸钾没问题 但是实在太贵，另外我也不是完全确定肯定是过硫酸钾的问题，所以我选择重结晶提纯过硫酸钾（英明阿~~呵呵 自美下）

提纯过程：在1升广口瓶加入约800mL水，50摄氏度水浴锅加热，然后逐渐加入过硫酸钾，直至不能溶解为止，这个过程挺漫长-_-|| 然后把完全溶解的饱和溶液放在室温中自然冷却（选用广口瓶有盖，重结晶过程避免引入其他污染），再放进四度冰箱重结晶，建议同时用另一个广口瓶冰一瓶去离子水，重结晶一夜后，倒掉上清液然后用冰好的去离子水清洗几遍，我觉得这样效果更好（重结晶的晶体会结成一块沉在瓶底，但其实结构很松散，用钢勺什么的弄两下就离散开了，然后再清洗）。我一般都重结晶两次。

洗净后倒掉上清液，然后放入50摄氏度烘箱烘干即可（用广口瓶烘干比较慢，可以转移到烧杯）。

上次结晶了约170克回收了约60克，还比较满意，比买国外的便宜多了！ 2、其他药品

去年有大人说氢氧化钠以及盐酸都有影响，但是我都是用的一般分析纯药品，没有造成特别大的影响，应该没问题。 3、消解过程

我选择消解温度为124摄氏度左右，有大人说要避免跟生物实验室公用灭菌锅，会混入污染，不过遗憾的是我们实验室就是生物实验室-_-|| 但是我这半年做的基本没啥问题，消解的时候比色管盖严，用布和绳子把盖子扎严实，基本问题不大。 4、测试

测试的时候要加入1ml 1:9盐酸，我觉得盐酸跟过硫酸钾的反应可能需要一段时间，所以我都是加入盐酸后过几个小时再测试，结果很稳定。 5、结果

现在测试的空白220与275相减后基本都在0.01-0.02（220在0.04 275在0.01左右），对于我的实验精度已经足够了，标准曲线r=0.9997，不算特别好，但是跟去年空白吸光度4相比，我已经非常非常满足了呵呵 6、其他

实验过程中加碱性过硫酸钾的时候一定要避免加在瓶口处，另外消解前混匀样品千万不要倒转比色管，否则消解后会导致比色管打不开，惨痛教训！建议使用50ml比色管，容易混匀！

另外，测试过程中发现比色管的质量影响实验结果！我在三年前买的比色管非常好用，但是不够，所以又买了一些新的，就发现新的测试数据偏大，而且没用几次，新比色管的盖子就出现了裂纹，有些在开盖子的时候直接就裂掉了，郁闷！唉，产品质量下降太多了！都是一个牌子的-_-||

所以，也顺便求助一下北京哪里的50ml比色管可用来总氮消解 呵呵

我以前都是把过硫酸钾和氢氧化钠放在一起溶解的，后来看到网上说要把过硫酸钾溶解后再溶解氢氧化钠，今天我照着做了一次，其他环节都照旧，结果测出来的空白值极高，不知道是哪出了问题。请教一下大家。

我三天前刚做过过硫酸钾的药品，0.09几空白是，今天回来测竟然要2。

做TN一个非常重要的因素是药品，过硫酸钾，如果没有用上海爱建的产品，多半无法做出可靠性数据，我曾经用过德国进口产品，都无济于事，后来换成爱建的很简单就出来数据了。

先溶解过硫酸钾，然后一点一点加入氢氧化钠，由于溶解度低，需要不少时间来溶解氢氧化钠，同时溶解过程放出大量的热，千万不要加热！最好还要将溶解大烧杯放在水中。同时不断搅拌！

过硫酸钾溶液对测定总氮的影响

王小丽

摘 要：通过对过硫酸钾的配制方法，加热时的水浴温度,反应介质条件及其纯度等因素对总氮测定结果影响的讨论，提出了过硫酸钾有效的配制方法及其纯度要求，以进一步提高总氮测定的准确度。

关键词：总氮；过硫酸钾；影响因素

碱性过硫酸钾-紫外分光光度法(GB11894-89)是测定水样中总氮含量的最常用方法。用此方法测定总氮时，消解只加一种氧化剂碱性过硫酸钾，而方法中并未具体描述氢氧化钠和过硫酸钾的配制的过程，因而对此操作过程对测定所带来的影响作一讨论。

1实验

1.1实验原理

水中的氨、铵盐和亚硝酸盐以及大部分的有机氮化合物在120-124℃的碱性介质中，用过硫酸钾作氧化剂，将这些物质氧化为硝酸盐。而后，紫外分光光度法分别于220nm与275nm处测定其吸光度，A=A220-2A275计算硝酸盐氮的吸光度值，从而计算总氮含量。其摩尔吸光系数为1.47×103L/(mol×cm)。

1.2 主要仪器

UV240紫外分光光度计；25m比色管。

1.3主要试剂

1.3.1 实验用水： 均为无氨水。

1.3.2 盐酸：（1＋9）的盐酸。

1.3.3 碱性过硫酸钾：称取40g过硫酸钾，15g氢氧化钠，溶于无氨水中，稀释至1000ml。溶液存放于聚乙烯瓶内。

1.3.4 硝酸盐标准溶液

硝酸盐标准溶液：国家环境保护局标准样品研究所购买，浓度500+ 1％mg/L。

硝酸盐标准使用液：将标准溶液用10ml移液管移入500ml容量瓶，用无氨水稀释至刻度线。此溶液浓度为10ug/ml。

1.4 实验步骤：按标准方法配制曲线。

2.实验结果与分析

2.1过硫酸钾的3种配制方法对测定结果的影响

a.分开称取过硫酸钾和氢氧化钠，两者分开配制，再混合定溶。60℃水浴加热。

b.先配制氢氧化钠溶液，待其温度降至室温后再加入过硫酸钾溶液。二者在加水时，应缓慢加水，同时搅拌。

c.分别称取过硫酸钾和氢氧化钠，直接混合，再加水定容。

分别用以上三种方法配制的碱性过硫酸钾做氧化剂测定标样1，标样2，标样3的总氮浓度。结果见表1。

表1 三种不同方法配制的过硫酸钾溶液比对结果（mg/L）

由表1看出，使用方法c所配置的碱性过硫酸钾碱，造成三个标样的测定结果均偏离标样所允许的浓度范围，而方法a,b两种配制方法均可取，没有太大差异。因而过硫酸钾配制过程相当重要，掌握不好，将会影响消解效果，对测定结果产生一定影响。应尽可能不使用直接混合的方法配制碱性过硫酸钾，这会造成过硫酸钾局部损失，氧化不完全，影响标样值偏低。

2.2碱性过硫酸钾水浴温度对测定结果的影响

将碱性过硫酸钾配制时水浴温度分别控制在20℃，40℃，60℃，80℃左右，对标样1，标样2，标样3进行测定，测定结果如表2。

表2 不同水浴温度配制的过硫酸钾溶液比对结果（mg/L）

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