细粒棘球绦虫cDNA克隆EgA31在大肠埃希氏菌M15中的表达及重组蛋白的纯化和复性

为了获得细粒棘球绦虫66ku抗原的重组蛋白和抗血清,用该抗原的cDNA克隆EgA31构建了pQE30-EgA31重组质粒,在大肠埃希氏菌M15中表达,经亲和层析获得纯度较高的EgA31重组蛋白;用经复性处理的重组蛋白免疫动物,获得EgA31重组蛋白抗血清。本文就重组蛋白的稳定性和复性处理中遇到的问题进行了讨论。

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第3 2卷

第 l期

20 0 2年

细粒棘球绦虫 e A克隆 E A 1在大肠埃希氏菌 M1 DN g3 5中的表达及重组蛋白的纯化和复性傅玉才，王进成，张壮志。,季( .汕头大学医学院，东汕头 1广

or sBo q e雄。 AF e Fr nc ie Pe a y wl— a o s t v,Ge ge s u t.

5 5 3;2新疆畜牧科学院兽医研究所 .疆乌鲁术齐 10 1 新

800￣ 30 06 57 ) 9 3 3

3 .新疆地方病防治研究所，新疆乌鲁术齐 8 0 0}4法国里昂第一大学，法国里昂 302

摘要：为了获得细粒棘球绦虫 6 u抗原的重蛆蛋白和抗血清 .该抗原的 e A克隆 E A 1构建了 p 3 6k月 DN g3 QE 0一 E A 1重组质粒，太肠埃希氏茵 M1 g3在 5中表达，经亲和层折获得纯度较高的 E A3重组蛋白；经复性处理的重组蛋白 g 1用免疲动物 .获得 E A3重组蛋白抗血清。奉正就重组蛋白的稳定性和在复性处理中遇到的问题进行了讨{ g l旨美键词：粒棘球绦虫；抗原；重组蛋白细 中国分类号：R 8 . 3 Q7 3 3 33; 5文献标识码：A 文章编号：1 0—6 1 ( 0 2 0一0 0—0 0 0 4 9 20 ) l 0 5 3

细粒棘球蚴病叉称囊性包虫病，危害严重的^兽共患病是之一 .我国主要分布在西部和北部省区n从 2在 J 0世纪 8 0年代开始 .国在细粒棘球蚴病主要流行区采取以对犬驱虫为我主的综合控制措施，得了一定的进展。但由于经济、文和自取^ 然条件等原因，些措施推广效果不够理想这。近年来的胡

西部和北部向东部和南部扩散的趋势=为彻底控制细粒棘球

坳病的流行，必要开展该病的免疫预防研究。为了获得细牡有棘球缘虫优势抗原，者用免疫学方法对一细粒棘球绦虫成虫作 c NA表达文厍进行筛选 .得 l D获 3株阳性克隆，中克隆其 E A 1免疫反应最强，而对该克隆在大肠埃希氏菌 M1 g3的进 5中的表达和重组蛋白的纯化及复性进行了探讨

查贤料显示 .和家畜

细粒棘球蚴病的感染率仍较高，呈现自人并

收}鬲日期：2 0一 8—0 C1。 6

1材料与方法I 1 Eg 1 e . A3 DNA克隆的表达

基金项目：寡自然科学基盘资勘瑚 Ir9 6 c. = 0 7 ) 13 1作者筒彳：傅玉才 (9 7一，, r 1 5 )男山东省县^,副教授， f博

E A3 g l DN阅读框包含 l 3碱基 .试验是将其 e A 0对 8本

t n o 8 mb il s b n t h o g h H C l t i f9 7 P f o i ra u u i t r u h t e O t r Y e s l￣

[] D a KI snP 7 e Grd FK. a e NuI d esqe c fh e e a e o d uneo e n e e t ge c d n t e 9 7 P f n o i g h 8 i r[ s b n o E c e i i mb i a u uk f sk rc a h

baeo shr haci l] atr 11 9,7 ( ) rh f cei i ol J.JB cei .9 5 17 1 E c o 33 704—37l 3

c i J .F MS Mi o il et18,2 5—28 o] E c bo L t 9 7 4 f 3 5 . f r , 2

De e to f 9 7 o ii e En e o o i e c Es h r c i o i b t c i n o 8 p p s tv t r t x g ni c e i h a c l y Po y e a e Ch i a to l m r s a n Re c i nH U A Ron— o .Z| ANG hu xi .HE ng wa g g h ng t S— a Ko— nN IY a— i: Y A N G on h o n xu . Z g a r z( . Veei ay Me wieC lee .b nigAg iut r (Unvri 1 trn r d n olg￣ jn rc lu a iest N nig 2 0 9,Ch“;2 Ke a ( An ma y, a jn 1 0 5 yL b i lD ie s sL 'gno t c. M i s r,of g i l r,J n￣ A a e y o, r ut r ( c m e .N ig 2 0 1, h n: sa e b a si nit 2 A r ut e i g u. d m f_4 i l a S i - c u a c 1 c u 4 e s a n 1 0 4 C ia.

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