酶学分析方法及酶活性测定复习与练习
更新时间:2023-11-27 23:20:01 阅读量: 教育文库 文档下载
酶学分析方法及酶活性测定复习与练习 一、有关酶的基本理论知识
1、酶浓度与酶促反应速度的关系是?
2、底物浓度与酶促反应速度的定量关系式是? 3、影响酶促反应速度的因素主要有哪些?
4、Km及Vm代表的含义及它们在临床酶活性测定中应用及意义。 二、酶活性测定的基本知识
1、酶活性的概念及酶活性单位如何表示表示
2、目前酶活性单位有-------、----------、-------------三种表示方式。? 3、解释酶活性国际单位、催量(Katal)的概念,并比较两者的关系? 4、酶活性单位的计算:几类计算公式要求理解并熟练应用。 1)通用公式
2)惯用单位的计算公式(测定产物生成类的计算公式;测定底物消耗类的计算公式) 3)**连续监测法根据摩尔吸光系数进行酶活性浓度的计算;
**连续监测法因素F值(全自动化生化仪多用K表示)的计算和应用? 三、酶活性的测定方法
1、酶活性测定的基本原则是什么?
2、酶反应时间进程曲线有————、—————、————三个时期
酶活性测定是在————期测定,此时期反应速度不受------------的影响也称------期 3、根据反应时间,酶活性测定分为两类方法是---------和--------------两种
从概念、结果计算、优缺点叙述并比较两类方法 ?其中连续监测法
4、按检测对象的酶活性测定方法分为----------和------------法;其直接法的方法类型有哪些?
5、何谓酶偶联反应?写出酶偶联反应的基本模式?什么是待测酶、辅助酶、指示酶? 6、何谓工具酶?酶作为工具应用于临床生化检验可进行酶活性测定或进行代谢物浓度(底物)的测定时一般有哪两大指示系统?何谓-Trinder反应?Trinder反应的主要缺点或影响因素有哪些?
7、何谓同工酶?同工酶分析的常用原理有哪些?检测同工酶有何临床意义?并举例说明?
8、酶活性测定条件及影响因素有哪些?
9、从几个酶类测定(如AMY、ALT、LD、ALP|等)的实验操作中,讨论酶活性测定应注意的问题?
10、试述影响血清酶的生理变异有哪些?
11、酶活性测定,标本的采集、处理、贮存及样品试剂比有何要求? 四、体液酶测定:
1、常用于临床协助诊断的血浆酶有哪些?用于协助诊断心肌损伤、肝脏疾病、胰腺疾病、骨骼骨骼肌、前列腺疾病等的常用的血清酶有哪些?常用的临床诊断酶谱有哪些? 2、将各血清酶活性测定的方法学原理进行分析归纳,请总结出有哪几大反应基础。 3、书写出AMS、ALP两种(化学比色法、(连续监测法)方法及ALT、AST、GGT、LDH、CK酶测定(连续监测法)反应原理、主要试剂成分和作用?影响结果准确性因素有哪些?评价LD-L反应和
LD-P反应试剂盒的优缺点?
4、血清ALT、AST、ALP、GGT、AMS、CK、LD等酶测定的临床意义?
五、选择题:
A 1、K m是指反应速度为最大反应速度一半时的
A 底物浓度 B 酶浓度 C 激活剂浓度
D 温度 E 抑制剂浓度
D 2、根据1976年国际生化学会生化委员会规定,酶的一个国际单位是指
A 最适条件下,每小时催化生成1mmol/l产物的酶量 B 最适条件下,每分钟催化生成1mmol/l产物的酶量 C 最适条件下,每小时催化生成1umol/l产物的酶量
D 特定条件下,每分钟催化1umol底物产生变化所需的酶量
E 25℃及其它最适条件下,每分钟催化1umol底物产生变化所需的酶量 E 3、IFCC推荐法测定AST的辅助酶是
A G6PD B HK C POD D LDH E MDH
B 4、以NAD(P)或NAD(P)H为指示系统的酶活性测定主波长应设置为: A 293nm B 340nm C 405nm D 380nm E 500nm
D 5、以NAD还原为NADH反应为基础的生化分析,采用波长及吸光度变化为: A、340nm A下降 B、405nm A上升 C、500nm A下降 D、340nm A上升
E、405nm A下降
A 6、淀粉酶测定显著升高主要见于:
A、溃疡病穿孔 B、急性胰腺炎 C、甲亢 D、糖尿病 E、肾病综合症
C 7、正常成人血清LD同工酶电泳区带的结果应符合:
A LD1>LD2>LD3>LD4>LD5 B LD1
B 8、IFCC推荐法测定ALP选择用哪种缓冲液
A 乙二胺 B AMP C Tris D 甘氨酸 E 二乙醇胺 C 9、单底物酶促反应的最适底物浓度的确定原则:
A 1Km B 2Km C 10~20Km D 100Km E 越大越好 B 10、前列腺疾病最敏感的指标是:
A ALP B ACP D CHE D AMY E AST
C 11自动化生化分析仪测定酶活性常用计算K值的主要原因是
A 方便 B 准确 C 无标准品和校正品 D 酶校正品不准确
D 12、GPT测定时,底物液中的α酮戊二酸的量比丙氨酸的量小近百倍的原因是
A 防止酶促反应时,丙酮酸生成过量 B 保证酶有足够的底物
C 防止基质中PH小于7.4 D 减少α酮戊二酸与2.4二硝基苯肼的呈色反应 E α酮戊二酸过多可激活酶的活性
D 13、AST测定(速率法)的试剂中,不含有
A 天冬氨酸 B NADH C α-酮戊二酸 D 丙氨酸 E Tris缓冲液 C 14、酶联反应中最后一个外加酶称为:
A 偶联酶 B 辅酶 C 指示酶 D 工具酶 E 同工酶
D 15、ALP测定(King法)其底物是
A 铁氰化钾 B 酚 C 4-AAP D 磷酸苯二钠 E 丙氨酸
B 16、血清ALT测定中,标准曲线为抛物线的干扰物为 A 丙酮酸 B 2.4-二硝基苯肼 C 谷氨酸 D a-酮戊二酸 E 2.4-二硝基苯腙 B 17、ALT测定(R-F)终止酶促反应是用
A 0.4mol/LNaOH B 2.4二硝基苯肼 C a-酮戊二酸2.4二硝基苯腙 D 磷酸盐缓冲液 E 碳酸盐缓冲液
A 18、血清ALT测定(R-F法),下列哪些情况会导致结果偏低: A 制作标准曲线所用的丙酮酸钠变质
B 标本严重溶血 C 对照管混浊未被发现 D 水浴温度偏高 (升至50℃)
E 血清与基质混合匀后未及时放入37℃水浴保温 A 19、100n Kat单位酶量等于
A 6 IU D 278IU B 27.8IU E 1667IU C 166.7IU
E 20、根据米氏方程,不符合[S]与Km的关系的是
A 当[S]>>Km时,反应速度与底物浓度无关,成零级反应 B 当[S]<<Km时,反应速度与底物浓度成正比,成一级反应 C 当[S]=Km时,V=Vm/2 D 度量两者的单位是相同的
E 当[S]=Km/3时,V=67%Vm
A 丙氨酸+α酮戊二酸 → 丙氨酸+谷氨酸 B 天冬氨酸+α酮戊二酸 → 草酸乙酸+谷氨酸
C 肌酸+ATP → 磷酸肌酸 + ADP D 丙酮酸 +NADH → 乳酸 + NAD E 草酸乙酸 +NADH → 苹果酸 + NAD B 21、AST催化的反应 D 22、LDH催化的反应 C 23、CK催化的反应
A 磷酸苯二钠 B 铁氰化钾 C 4-AAP D 酚
E 碱性试剂
B 24、ALP(King)测定 氧化剂 C 25、 显色剂 D 26、 标准物 A 27\\ 底物
A ALT B ALP C GGT D AMS E CK-MB A 28、肝细胞急性损伤最好的指标
C 29、肝占位性病变 D 30、急性胰腺炎 E 40、心肌梗死 B 41、骨骼疾病
A NAD(P)H指示系统 B POD指示系统 C 两者均有 D 两者均无 C 42、葡萄糖测定 C 43、TG测定 B 44、胆固醇测定 B 45、尿酸测定 D 46、尿TP测定
(ALT AST 胆汁酸 胆红素、 肌酐等) A 平衡法 B 速率法 C 两者均有 D 两者均无 A 47、GOD-POD测葡萄糖 B 48、碱性苦味酸法测肌酐 C 49、GLDH测尿素
A 酶试剂法测定 B 离子选择电极法测定 C 两者均有 D 两者均无 C 50、血清钠、钾测定 C 51、血清氯、钙的测定 A 52、血清磷的测定
D 53、血清总蛋白、清蛋白测定 A 54、血清ALT、AST测定
ABCD 55、酶偶联方法测定酶活性的有:
A ALT B AST C CK D AMY E LDH ABCD 56、下列哪些因素影响酶活性的测定
A 缓冲液的种类和离子强度 B PH C 反应温度 D 激活剂浓度 E 比色皿光径 BC 57、酶促反应指示物的检测波长为405nm的有
A NADH B 4-硝基酚 C 5-氨基-2-硝基苯甲酸 D 磷钼酸 E ABCD 58、ALT测定时,UA-BA的意义有 A 消除2.4-二硝基苯肼溶液的A值
B 消除a-酮戊二酸-2.4-二硝基苯腙的A值 C 消除血清色素的干扰
D 消除血可能存在的酮酸的干扰 BC 59、属于Trinder反应的色原物是:
A H2O2 B 酚 C 4-AAP D POD E COD ACDE 60.以下说法正确的是
A.当[S]<<Km时,反应速度与底物浓度成正比,成一级反应
B.当[S]>>Km时,反应速度与酶浓度成正比,酶促反应呈一级反应 C.零级反应时V=Vman=K[E]
NADPH
D.一级反应是用工具酶测定各种代谢物浓度的方法学基础 E.零级反应是用于测定酶活性或浓度的方法学基础 ABCD 61.溶血时对测定结果有影响的血清酶是
A、CK B、LD C、ALT D、AST E、GGT ABE 62、ALP活性升高可见于
A、多发性骨肿瘤 B、骨折 C 贫血 D、甲低 E、阻塞性黄疸 AE 63、G6PD可用于测定
A、葡萄糖 B、淀粉酶 C、乳酸脱氢酶 D、碱性磷酸酶 E、肌酸激酶 ACDE 64、下列代谢物与其酶法测定所用试剂的组合,正确的是 A、尿酸—尿酸酶—过氧化氢酶
B、葡萄糖—葡萄糖氧化酶—葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 C、尿素-尿素酶-谷氨酸脱氢酶
D、三酰甘油—脂蛋白脂肪酶—甘油激酶 E、胆固醇—胆固醇氧化酶—过氧化物酶 ABDE 65、下列酶活性测定描述正确的是
A、可测定产物的生成量 B、可测定底物的消耗量 C、与底物浓度无关 D、需最适温度 E、需最适的酸碱度 补充选择题:
A 1当底物浓度大于Km时,此时的反应速度为
A.零级反应 B.一级反应 C.二级反应 D.混合级反应 E.无法确定反应级
D 2、为保证酶动力学分析,底物浓度最好是:
A.0.5Km B.2Km C.2~5Km D.10~20Km E.100Km 3、连续监测法测定ALT所用的底物通常是:对硝基苯酚磷酸钠 C 4、测定下列哪种血清酶有助于鉴别ALP的来源
A.ACP B.AMS C.GGT D.LD E.CK B 5、疾病时血清及尿液淀粉酶升高,应除外:
A.急性胰腺炎 B.肝炎 C.肠梗阻 D.急性腮腺炎 E.溃疡病穿孔
其它练习:
1、以NAD+还原为NADH反应为基础的生化分析,采用波长是___________nm, 吸光度变化为________________. 当测定时其S:R=1:20时(酶速率法) 结果计算是IU/L=△A/min×factor, factor为
_____________(附NADH在340nm毫克分子吸光系数为6.22) 2、SGPT测定中底物成分要求DL丙氨酸的浓度为200mmol/L a-酮戊二酸浓度为2mmol/L,现欲配制500ml底物,各应取 多少mg?
(DL丙氨酸MW=89, a-酮戊二酸MW=146)
3、CK测定实验原理中酶联的催化顺序_____ ______________。 4、SGPT测定(R-F)的底物是_____,______, 显色剂是______,酶作用时间_____分。
5、AST催化________+_______生成______, _______。在指示酶______的催化下,使_____ +______生成_______+________,在波长 ___nm下,连续监测吸光度_____变化,从而测定AST 的活力。
6、0.1ml血清,在37℃水浴中,使底物水解产生0.2mg酚,该标本的AKP活力是多少金氏单位?(列出计算式,算出结果) 。
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