福建省泉州市安溪六中2014-2015学年高二下学期期中生物试卷

福建省泉州市安溪六中2014-2015学年高二下学期期中生物试卷

一、选择题：每题1.5分，共60分 1．（1.5分）如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是（）

A． ①②③④ B． ①②④③ D．①④③② 2．（1.5分）在已知某小片段基因碱基序列的情况下，获得该基因的最佳方法是（） A． 用mRNA为模板逆转录合成DNA B． 以4种脱氧核苷酸为原料人工合成 C． 将供体DNA片段转入受体细胞中，再进一步筛选 D． 由蛋白质的氨基酸序列推测mRNA 3．（1.5分）下列关于基因工程的叙述，错误的是（） A． 目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物 B． 限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶 C． 人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性 D． 载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达 4．（1.5分）已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如图中箭头所指，如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段．现在多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是（）

C． ①④②③

A． 3 B． 4 C． 9 D．12

5．（1.5分）下列关于基因工程的叙述中错误的是（） A． 基因工程的出现使人类有可能按照自己的意愿定向改造生物，培育新品种 B． 基因工程技术能冲破远缘杂交不亲和障碍，培育生物新物种 C． 基因工程的基本工具是：限制性核酸内切酶、DNA连接酶和基因的运载体 D． 基因工程的研究成果，目前大多需要通过微生物的旺盛代谢来实现产业化 6．（1.5分）基因工程技术也称为DNA重组技术，其实施必须具备的四个必要条件是（） A． 目的基因、限制性核酸内切酶、运载体、体细胞 B． 重组DNA、RNA聚合酶、内切酶、连接酶

C． 模板DNA、信使RNA、质粒、受体细胞 D． 工具酶、目的基因、运载体、受体细胞 7．（1.5分）在基因工程技术中，限制性核酸内切酶主要用于（） A． 目的基因的获取和导入 B． 目的基因的导入和检测 C． 目的基因的获取和重组DNA分子 D． 基因表达载体的构建和导入 8．（1.5分）在基因工程操作中，运载体的本质是双链DNA分子，下列功能不能由运载体完成的是（） A． 目的基因的转运 B． 目的基因的扩增 C． 目的基因的表达 D． 目的基因的定位 9．（1.5分）图为四种限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ和BglⅡ的识别序列．它们切割出来的DNA黏性末端可以互补配对的是（）

A． BamHⅠ和BglⅡ B． BamHⅠ和HindⅢ C． BamHⅠ和EcoRⅠ D．EcoRⅠ和HindⅢ 10．（1.5分）镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变．检测这种碱基序列改变必须使用的酶是 （） A． 解旋酶 B． DNA连接酶 C． 限制性内切酶 D．RNA聚合酶 11．（1.5分）限制性内切酶的作用实际上就是把DNA上某些化学键打断，一种能对GAATTC专一识别的限制酶，打断的化学键是（） A． G与A之间的键 B． G与C之间的键 C． A与T之间的键 D． 磷酸与脱氧核糖之间的键 12．（1.5分）1982年，世界上第一例体型比普通小鼠大1.8倍的“超级小鼠”培育成功．下列相关叙述不正确的是（） A． 该“超级小鼠”是采用显微注射技术获得成功的 B． 将目的基因导入动物细胞的方法中采用最多，也是最有效的方法是显微注射技术 C． 将目的基因导入小鼠细胞前要将含有该目的基因的运载体提纯 D． 培育该“超级小鼠”所用的受体细胞可以是小鼠的受精卵，也可以是小鼠的体细胞 13．（1.5分）下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述，错误的是（） A． 一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 B． 限制性核酸内切酶的活性受温度的影响 C． 限制性核酸内切酶能识别和切割RNA

D． 限制性核酸内切酶可从原核生物中提取 14．（1.5分）基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选．已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是一G↓GATCC﹣，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是﹣↓GATC﹣．根据图示判断下列操作正确的是（）

A． 目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割 B． 目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割 C． 质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割 D． 质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割 15．（1.5分）水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，这种蛋白质基因如在转基因技术中利用，所起的作用最可能是（） A． 促使目的基因成功导入宿主细胞中 B． 使目的基因的成功导入容易被检测出来 C． 使目的基因在宿主细胞中更容易复制 D． 使目的基因更容易成功表达 16．（1.5分）质粒是基因工程中最常用的运载体，它存在于许多细菌体内．质粒上有标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因（目的基因）是否转移成功．

外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况也不同，表是外源基因插入位置（插入点有a、b、c），请根据表中提供细菌的生长情况，推测①②③三种重组后细菌的外源基因插入点正确的一组是（） 细胞在含氨苄青霉素培养基上生长情况 细菌在含四环素培养基上的生长情况 ① 能生长 能生长 ② 能生长 不能生长 ③ 不能生长 能生长

A． ①是c，②是b，③是a B． ①是a和b，②是a，③是b C． ①是a和b，②是b，③是a D． ①是c，②是a，③是b 17．（1.5分）植物细胞工程常采用的技术手段有植物组织培养和植物体细胞杂交等．这些技术的理论基础是（）

A． 植物细胞能进行有丝分裂 B． 植物细胞的结构是完整的 C． 植物体的生命活动受激素调节 D． 植物细胞具有全能性 18．（1.5分）下列关于单克隆抗体的叙述，正确的是（） A． 培养杂交瘤细胞获得单克隆抗体的过程体现了动物细胞核的全能性 B． 将抗原注入小鼠体内，小鼠发生免疫反应产生的抗体也称为单克隆抗体 C． 用灭活的仙台病毒作诱导剂，得到两两融合的细胞均为杂交瘤细胞 D． 筛选获得所需的杂交瘤细胞后，可在体内或体外培养，进而获得单克隆抗体 19．（1.5分）在动物细胞培养中，所培养的动物细胞大都取自（） A． 中龄动物器官 B． 老龄动物器官 C． 幼龄动物器官 D．中龄动物组织 20．（1.5分）如用动物的细胞进行克隆实验应该选择的细胞核不能是（） A． 乳腺细胞的 B． 卵细胞的 C． 胃腺细胞的 D． 囊胚时期的胚胎细胞的 21．（1.5分）在动物细胞培养过程中，使用胰蛋白酶的目的是（） A． 使动物组织分散为单个细胞进行培养 B． 去掉细胞壁成为原生质体 C． 去掉细胞膜暴露出原生质体便于细胞融合 D． 促进蛋白质水解为多肽 22．（1.5分）用于核移植的供核细胞和受体细胞一般选用（） A． 受精卵和减数第二次分裂时期的卵母细胞 B． 传代10代以内的细胞和减数第一次分裂时期的卵母细胞 C． 传代10～50代以内的细胞和减数第二次分裂时期的卵母细胞 D． 传代10代以内的细胞和减数第二次分裂时期的卵母细胞 23．（1.5分）动物细胞融合技术最重要的用途是（） A． 克服远源杂交不亲和 B． 制备单克隆抗体 C． 培育新品种 D． 生产杂种细胞 24．（1.5分）植物体细胞杂交和动物细胞融合比较，正确的是（） A． 诱导融合的方法完全相同 B． 所用的技术手段基本相同 C． 所采用的原理完全相同 D． 都能形成杂种细胞 25．（1.5分）科学家用灭活的病毒把骨髓瘤细胞与效应B细胞融合，得到杂交瘤细胞，灭活病毒的作用是（） A． 病毒比较小，可钻入到细胞内 B． 灭活的病毒已完全死亡，死亡的病毒可以让细胞聚集 C． 灭活的病毒已失去感染活性，对各种动物细胞不造成破坏，但它所保留的融合活性，可使不同动物细胞进行融合

D． 灭活的病毒带有目的基因，通过融合可以让杂合细胞带有目的基因 26．（1.5分）用a表示骨髓细胞，b表示效应B细胞，则细胞融合过程中两次筛选的目的分别是（） A． a、aa、ab、bb、b→a、aa、ab→ab培养 B． a、aa、ab、bb、b→ab、bb、b→ab培养 C． a、aa、ab、bb、b→ab→产生特定抗体的ab培养 D． a、aa、ab、bb、b→aa→能无限增殖的aa培养 27．（1.5分）将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要的是（） A． 具有完整细胞核的细胞 B． 一定的营养物质和植物激素 C． 离体状态 D． 导入指定基因 28．（1.5分）在下列各种育种方式中，与组织培养技术无关的是（） A． 利用花药离体培养得到单倍体植株 B． 秋水仙素处理二倍体幼苗，获得四倍体植株 C． 培育人工种子 D． 通过体细胞杂交培养“番茄﹣马铃薯”杂种植株 29．（1.5分）下面为番茄植物组织培养过程的流程图解，以下相关叙述不正确的是（）

A． 脱分化发生在b步骤，形成愈伤组织，在此过程中植物激素发挥了重要作用 B． 再分化发生在d步骤，是愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程 C． 从叶组织块到种苗形成的过程说明番茄叶片细胞具有全能性 D． 经该过程产生的人工种子属于无性繁殖 30．（1.5分）人们利用植物的微型繁殖技术来进行工厂化生产，这是利用了该项技术的哪些特点（） A． 操作简单 B． 使优良性状组合在一起 C． 培育新的性状 D． 高效性和保持种苗的优良遗传特性 31．（1.5分）下面的简式表示植物组织培养的大致过程，据此判断不正确的是（） ①

②

③→④

A． 若①是来自不同植物体细胞融合的杂种细胞，则④可能出现不同植物的遗传特性 B． 若①是花粉，则④是单倍体植株，经染色体加倍后可得到稳定遗传的品种 C． 若①是人参细胞，对②进行扩大培养可提高细胞产物人参皂甙的产量 D． 若①是具有杂种优势的农作物细胞，则用③进行繁育会发生性状分离 32．（1.5分）下列哪一项不是精子、卵细胞发生的区别（）

A． 初级精母细胞、初级卵母细胞的形成时间 B． MⅠ和MⅡ的时间连续性 C． 成熟生殖细胞是否经过变形 D． 成熟生殖细胞中染色体的数量 33．（1.5分）下列有关胚胎工程叙述正确的是（） A． 培养胚胎干细胞过程中加入饲养层是为了促进细胞分化 B． 胚胎分割移植，实现同卵多胎的成功率较低 C． 目前，人体胚胎体外培养时，需配制一系列不同成分的营养液，用以培养不同发育时期的桑椹胚、囊胚以及原肠胚 D． 胚胎分割时可采用胰蛋白酶处理囊胚，将内细胞团细胞分散开来 34．（1.5分）下列哪些过程发生在受精过程中（） ①精子必须发生顶体反应，释放顶体酶

②顶体酶可使精子穿过放射冠、透明带、细胞膜 ③卵子恢复并很快完成了减数第一次分裂

④精子和卵子的细胞核分别形成雄原核和雌原核 ⑤透明带反应可以防止多精入卵的发生． A． ①②⑤ B． ①④⑤ C． ②③④ D．②④⑤ 35．（1.5分）下列细胞，哪一个代表已经完成受精的卵（）

A． B． C． D．

36．（1.5分）在试管牛的生产过程中，不是必需的操作是（） A． 核移植技术 B． 卵母细胞的采集和培养 C． 精子的采集和获能 D． 早期胚胎培养和胚胎移植 37．（1.5分）关于桑椹胚和囊胚的比较，以下说法不正确的是（） A． 桑椹胚的各细胞结构、功能基本相同 B． 囊胚期细胞出现了细胞分化，但遗传物质未发生改变 C． 囊胚期细胞分化是由遗传物质突变引起的 D． 囊胚期内细胞团和滋养层细胞差异不是复制水平上的差异，而是转录水平上的差异引起的 38．（1.5分）供、受体母牛选择好后，要用激素进行同期发情处理的原因是（） A． 防止受体牛不愿意接受胚胎 B． 只有受体与供体的生理状态相同，被移植的胚胎才能继续正常发育 C． 只要发情排卵后，各阶段时间内的变化，供、受体生理状态完全相同 D． 同期发情处理后，卵细胞和精子受精结合能力强 39．（1.5分）杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点，被称为“钻石级”肉用绵羊．科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如图所示，相关叙述正确的是（）

A． 为了获得更多的卵母细胞，需用雌激素对雌性杜泊羊进行处理 B． 从卵巢中采集的卵母细胞可直接与获能的精子进行体外受精 C． 为避免代孕绵羊对植入胚胎产生排斥反应，应注射免疫抑制剂 D． 为了进一步扩大繁殖规模，可通过胚胎分割技术获得同卵双胎 40．（1.5分）高等动物随着胚胎发育，仅有少数细胞依然具有分化成其他细胞类型和构建组织器官的能力，这类细胞称为干细胞，如造血干细胞．图中最能完整显示正常机体内干细胞基本特征的是（）

A． B．

C． D．

二、非选择题：共40分 41．（7分）如图为大肠杆菌及质粒载体的结构模式图，据图回答下列问题．

（1）a代表的物质和质粒的化学本质都是，二者还具有其他共同点，如（写出一至二条即可）． （2）若质粒DNA分子的切割末端为QUOTE，则与之连接的目的基因切割末端应为；可使用把质粒和目的基因连接在一起．

（3）氨苄青霉素抗性基因在质粒DNA上被称为，其作用是． （4）下列常在基因工程中用作载体的是

A．苏云金芽孢杆菌抗虫基因 B．土壤农杆菌中的RNA分子 C．大肠杆菌的质粒 D．动物细胞的染色体．

42．（4分）反转录病毒载体是一种表达型质粒，结构如图所示．图上的“反转录病毒序列”可以整合到动物细胞的染色体上，不断地表达其携带的目的基因．（E、F、H分别为限制酶E、F、H的酶切位点）． （1）反转录的原料是．

（2）在构建重组质粒时，目的基因应插入到该质粒的位置是，此过程需使用的酶是．为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加的培养基进行培养．获取大量重组质粒后，将其再转入到某种哺乳动物细胞中，可获得大量重组反转录病毒．

43．（4分）如图为培育转基因小鼠基本过程的示意图．请回答下列问题：

（1）如A为重组质粒溶液，将其导入原核期受精卵的方法是；如A为重组反转录病毒，还可采取方法．

（2）小鼠出生后从其尾巴中提取分子，通过的方法，可检测出携带目的基因的小鼠． 44．（6分）野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能使用．俄、德、芬兰专家共同做实验研究，用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强的杂交系马铃薯．据图分析回答问题．

（1）①过程植物细胞原生质体的分离需经过酶解，其中“酶解”所用的酶应该包括． （2）②过程需要用聚乙二醇（PEG），其目的是．

（3）请用文字和箭头表示出④⑤技术过程的实验流程．由此过程可以看出植物细胞有形成再生组织的可能性，这是的表现．

（4）一般在培养基上培养24﹣48小时后，大部分原生质体已再生出细胞壁．可以取样，通过实验来鉴别细胞壁是否已经再生．

（5）请说明运用此植物体细胞杂交法的最大的好处：．

45．（9分）如图为动物细胞培养过程示意图，请回答以下几个问题：

（1）容器A中的动物器官或组织首先要剪碎，然后用胰蛋白酶处理，其目的是．

（2）培养先在B瓶中进行．瓶中的培养基成分有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和等．细胞增殖产生的新细胞会表现出生长现象．当细胞分裂生长到时，就会停止分裂增殖，这种现象称为接触抑制，需用胰蛋白酶处理后分瓶继续培养，称为．有一类不正常的动物细胞，体外培养不受接触抑制机制的制约而表现为“疯长”，这类细胞最可能是． （4）细胞在C瓶中培养一段时间后，大部分细胞衰老死亡，但有极少数细胞存活并传代下去，能够无限传代的原因是．

（5）制备单克隆抗体时选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的原因是．单克隆抗体与普通血清抗体相比较，具有的特点．

46．（10分）如图为经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程，请回答下列问题：

（1）A细胞是，在进行体外受精前要对精子进行处理．

（2）进行胚胎分割时，应选择发育到时期的胚胎进行操作． （3）囊胚的表面是单层扁平的细胞，称，将来发育成；

（4）通过同一胚胎的分割移植培育出的小牛的性别（“相同”或“不相同”）． （5）通过体细胞克隆技术培育的小牛，其性别取决于． （6）在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意．

（7）受体母牛必须和供体牛属于．移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是．

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参考答案与试题解析

一、选择题：每题1.5分，共60分

1．（1.5分）如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是（）

A． ①②③④ B． ①②④③ D．①④③②

考点： 基因工程的原理及技术；DNA分子的复制． 分析： 分析图解：图①双链DNA分子中间出现了黏性末端，图②两个具有黏性末端的DNA片段连接成一个完整的DNA分子，图③中DNA分子的双链解开，图④是以解开的单链DNA作为模板形成子链的过程．

解答： 解：限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端，因此作用于①；DNA聚合酶用于DNA分子的复制，能在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来，因此作用于④；DNA连接酶能在具有相同碱基末端的两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，因此作用于②；解旋酶能够将DNA分子的双螺旋解开，故作用于③． 故选C．

点评： 本题通过作用效果图解考查了限制性内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶的作用，意在考查考生的识图能力、区分能力、识记并理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力． 2．（1.5分）在已知某小片段基因碱基序列的情况下，获得该基因的最佳方法是（） A． 用mRNA为模板逆转录合成DNA B． 以4种脱氧核苷酸为原料人工合成 C． 将供体DNA片段转入受体细胞中，再进一步筛选 D． 由蛋白质的氨基酸序列推测mRNA

考点： 基因工程的原理及技术．

分析： 基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定．其中第一步骤中获取目的基因的方法有：从基因文库中获取目的基因、利用PCR技术扩增目的基因、用化学方法直接人工合成．

解答： 解：获取目的基因的方法有：从基因文库中获取目的基因、利用PCR技术扩增目的基因、用化学方法直接人工合成．在目的基因的序列为未知的情况下，可以采用从基因文库中获取目的基因；在目的基因比较小，核苷酸序列已知的情况下常采用人工合成法．所以在已知某小片段基因碱基序列的情况下，获得该基因的最佳方法是以4种脱氧核苷酸为原料人工合成． 故选：B．

点评： 本题考查基因工程的原理及技术，要求考生识记基因工程的步骤，特别获取目的基因的方法，这首先要求考生掌握获取目的基因的几种方法，能根据不同的条件选择不同的方法；其次再结合题干要求选出正确的答案，属于考纲识记层次的考查． 3．（1.5分）下列关于基因工程的叙述，错误的是（） A． 目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物

C． ①④②③

B． 限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶 C． 人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性 D． 载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达

考点： 基因工程的原理及技术．

分析： 基因工程中目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物；常用的工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶；人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性，只有经过一定的物质激活以后，才有生物活性；载体上的抗性基因主要是有利于筛选含重 组DNA的细胞，不能促进目的基因的表达．

解答： 解：A、基因工程中受体细胞中常用植物受精卵或体细胞（经组织培养）、动物受精卵（一般不用体细胞）、微生物──大肠杆菌、酵母菌等，A正确；

B、常用的工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶；常用的工具是限制性核 酸内切酶、DNA连接酶、运载体，B正确； C、人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性，只有经过一定的物质激活以后，才有生物活性，C正确；

D、抗性基因是标记基因，是为了检测并筛选出载体有导入受体的细胞用的，它不会影响目的基因的表达． D错误． 故选：D．

点评： 本题主要考查了学生对基因工程的操作步骤的了解，这题内容较难． 4．（1.5分）已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如图中箭头所指，如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段．现在多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是（）

A． 3 B． 4 C． 9 D．12

考点： 基因工程的原理及技术．

分析： 考查了限制性内切酶切割DNA片段的有关知识． “分子手术刀”﹣﹣限制性核酸内切酶（限制酶） ①来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的． ②功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性．

③结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端．

这道题目可以转化为单纯的数字计算题．每个DNA分子上至少有1个酶位点被该酶切断，可以切得的种类有：a、b、c、d、ab、bc、cd、abc、bcd九种．

解答： 解：A、每个DNA分子上至少有1个酶位点被该酶切断，可以切得的种类有：a、b、c、d、ab、bc、cd、abc、bcd九种，不是3种，A错误；

B、每个DNA分子上至少有1个酶位点被该酶切断，可以切得的种类有：a、b、c、d、ab、bc、cd、abc、bcd九种，不是4种，B错误；

C、每个DNA分子上至少有1个酶位点被该酶切断，可以切得的种类有：a、b、c、d、ab、bc、cd、abc、bcd九种，C正确；

D、每个DNA分子上至少有1个酶位点被该酶切断，可以切得的种类有：a、b、c、d、ab、bc、cd、abc、bcd九种，不是12种，D错误． 故选：C．

点评： 主要考查学生对DNA重组技术的基本工具等考点的理解，要求学生能够识记和运用相关知识． 5．（1.5分）下列关于基因工程的叙述中错误的是（） A． 基因工程的出现使人类有可能按照自己的意愿定向改造生物，培育新品种 B． 基因工程技术能冲破远缘杂交不亲和障碍，培育生物新物种 C． 基因工程的基本工具是：限制性核酸内切酶、DNA连接酶和基因的运载体 D． 基因工程的研究成果，目前大多需要通过微生物的旺盛代谢来实现产业化

考点： 基因工程的原理及技术．

分析： 1、基因工程是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品．

2、基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体（常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒）．

解答： 解：A、基因工程能按照人们的意愿定向改造生物的性状，创造出更符合人们需要的新品种，A正确；

B、基因工程技术能冲破远缘杂交不亲和障碍，都是培育的生物还是原来的物种，只是出现了新的性状，B错误；

C、基因工程需要的三个基本工具是限制性核酸内切酶、DNA连接酶和基因的运载体，C正确；

D、基因工程的研究成果，目前大多需要通过发酵工程和酶工程来实现产业化，D正确． 故选：B．

点评： 本题考查基因工程和细胞工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、工具、操作过程、应用及意义；识记细胞工程的意义；识记基因工程、细胞工程、酶工程和发酵工程之间的关系，能运用所学的知识准确判断各选项． 6．（1.5分）基因工程技术也称为DNA重组技术，其实施必须具备的四个必要条件是（） A． 目的基因、限制性核酸内切酶、运载体、体细胞 B． 重组DNA、RNA聚合酶、内切酶、连接酶 C． 模板DNA、信使RNA、质粒、受体细胞 D． 工具酶、目的基因、运载体、受体细胞

考点： 基因工程的原理及技术．

分析： 基因工程需要的工具有：限制酶、DNA连接酶、运载体．基因工程的实质是将一种生物的基因转移到另一种生物的细胞中，因此需要目的基因和受体细胞．

解答： 解：A、目的基因、限制性核酸内切酶、运载体是基因工程必需具备的条件，但体细胞不一定是受体细胞，A错误；

B、重组DNA是由目的基因和质粒重组形成的，RNA聚合酶是转录需要的酶，细胞中具有该种酶，因此不是基因工程必需的条件，B错误；

C、mRNA是基因转录的产物，基因工程中不需要提供该物质，质粒是运载体中的一种，除了质粒还有动植物病毒和噬菌体衍生物，因此质粒不是基因工程中必须的，C错误；

D、限制酶和DNA连接酶属于工具酶，另外运载体、目的基因和受体细胞是基因工程中的必需具备的条件，D正确． 故选：D．

点评： 本题考查了基因工程的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解判断能力，属于简单题．考生要能够理解基因工程的过程和实质，识记基因工程的实施必须具备的条件． 7．（1.5分）在基因工程技术中，限制性核酸内切酶主要用于（） A． 目的基因的获取和导入 B． 目的基因的导入和检测 C． 目的基因的获取和重组DNA分子 D． 基因表达载体的构建和导入

考点： 基因工程的原理及技术．

分析： 限制性核酸内切酶（限制酶）主要来源是从原核生物中分离纯化出来的．能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性．经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端．

解答： 解：A、目的基因的获取需要限制酶，而导入需要载体，A错误； B、目的基因的导入和检测都不需要限制酶，B错误；

C、目的基因与运载体结合是基因表达载体构建过程，此时需要同一种限制酶切割目的基因和运载体，使它们露出相同的黏性末端或平末端，之后用DNA连接酶连接成基因表达载体（重组DNA分子），C正确；

D、基因表达载体的构建需要限制酶，而导入不需要，D错误． 故选：C．

点评： 限制性核酸内切酶（限制酶）主要来源是从原核生物中分离纯化出来的．能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性．经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端． 8．（1.5分）在基因工程操作中，运载体的本质是双链DNA分子，下列功能不能由运载体完成的是（） A． 目的基因的转运 B． 目的基因的扩增 C． 目的基因的表达 D． 目的基因的定位

考点： 基因工程的原理及技术． 分析： “分子运输车”﹣﹣载体：

（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存． ②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入． ③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择．

（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子．

（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒

解答： 解：A、载体是基因工程的运输车，可以将目的基因导入受体细胞，A正确； B、目的基因会随着运载体的复制而复制，B正确；

C、基因的表达机制表明，目的基因的表达与运载体无关，C错误；

D、目的基因是否导入可以通过运载体上的目的基因进行检测，D正确． 故选：C．

点评： 本题考查基因工程中运载体的相关知识，意在考查学生分析问题和解决问题的能力，属于基础题． 9．（1.5分）图为四种限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ和BglⅡ的识别序列．它们切割出来的DNA黏性末端可以互补配对的是（）

A． BamHⅠ和BglⅡ B． BamHⅠ和HindⅢ C． BamHⅠ和EcoRⅠ D．EcoRⅠ和HindⅢ

考点： 基因工程的原理及技术．

分析： 分析题图：根据图中限制酶的识别序列及切割位点可知，限制酶BamH I、EcoR I、

HindⅢ和BglⅡ切割形成的黏性末端依次是、、、．

解答： 解：A、BamHⅠ和BglⅡ切割形成的末端依次是﹣CTAG、﹣CTAG，可见两者互补配对，A正确；

B、BamHⅠ和HindⅢ切割形成的末端依次是﹣CTAG、﹣TCGA，可见两者不互补配对，B错误；

C、BamHⅠ和EcoRⅠ切割形成的末端依次是﹣CTAG、﹣TTAA，可见两者不互补配对，C错误；

D、EcoRⅠ和HindⅢ切割形成的末端依次是﹣TTAA、﹣TCGA，可见两者不互补配对，D错误．

故选：A．

点评： 本题考查基因工程的工具，要求考生识记限制酶的特点，能根据图中各限制酶的识别序列及切割位点，准确判断各组限制酶切割形成的黏性末端是否可以互补配对，属于考纲识记和理解层次的考查． 10．（1.5分）镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变．检测这种碱基序列改变必须使用的酶是 （） A． 解旋酶 B． DNA连接酶 C． 限制性内切酶 D．RNA聚合酶

考点： 基因工程的原理及技术．

分析： 首先这道题考点是选修本中的基因诊断，所谓的基因诊断就是用放射性同位素（如32P）、荧光分子等标记的DNA分子做探针，利用DNA分子杂交原理，鉴定被检测标本上的遗传信息，达到检测疾病的目的．而检测样本中是否存在与探针序列互补的同源核酸序列，常用以下方法：

（1）限制性内切酶分析法． 此方法是利用限制性内切酶和特异性DNA探针来检测是否存在基因变异．当待测DNA序列中发生突变时会导致某些限制性内切酶位点的改变，其特异的限制性酶切片段的状态在电泳迁移率上也会随之改变，借此可作出分析诊断．

（2）DNA限制性片断长度多态性分析． 在人类基因组中，平均约200对碱基可发生一对变异（称为中性突变），中性突变导致个体间核苷酸序列的差异，称为DNA多态性．不少DNA多态性发生在限制性内切酶识别位点上，酶解该DNA片段就会产生长度不同的片断，称为限制性片段长度多态性（RFLP）．RFLR按孟德尔方式遗传，在某一特定家族中，如果某一致病基因与特异的多态性片断紧密连锁，就可用这一多态性片段为一种“遗传标志”，来判断家庭成员或胎儿是否为致病基因的携带者．甲型血友病、囊性纤维病变和苯丙酮尿症等均可借助这一方法得到诊断．

（3）等位基因特异寡核苷酸探针杂交法．遗传疾病的遗传基础是基因序列中发生一种或多种突变．根据已知基因突变位点的核苷酸序列，人工合成两种寡核苷酸探针：一是相应于突变基因碱基序列的寡核苷酸；二是相应于正常基因碱基序的寡核苷酸，用它们分别与受检者DNA进行分子杂交．从而检测受检者基因是否发生突变，以及是否有新的突变类型． 根据题意，可用第一种或第二种方法，因此检测过程中必须用到限制性内切酶． 解答： 解：A、解旋酶是在DNA复制时要用的酶，A错误； B、DNA连接酶是用来连接目的基因与质粒的工具酶，B错误；

C、根据题意，可用第一种或第二种方法，因此检测过程中必须用到限制性内切酶，C正确； D、RNA聚合酶是转录过程用的酶，D错误． 故选：C．

点评： 本题主要考查学生对基因诊断与基因治疗等考点的理解． 11．（1.5分）限制性内切酶的作用实际上就是把DNA上某些化学键打断，一种能对GAATTC专一识别的限制酶，打断的化学键是（） A． G与A之间的键 B． G与C之间的键 C． A与T之间的键 D． 磷酸与脱氧核糖之间的键

考点： 基因工程的原理及技术．

分析： 限制酶主要从原核生物中分离纯化出来，它能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．

解答： 解：限制酶的作用部位是磷酸和脱氧核糖之间的磷酸二酯键，而一条链中相邻两个碱基之间的化学键为﹣脱氧核糖﹣磷酸﹣脱氧核糖﹣． 故选：D．

点评： 本题难度一般，要求学生识记基因工程的相关知识，考查学生对基因工程概念及操作过程的理解． 12．（1.5分）1982年，世界上第一例体型比普通小鼠大1.8倍的“超级小鼠”培育成功．下列相关叙述不正确的是（） A． 该“超级小鼠”是采用显微注射技术获得成功的 B． 将目的基因导入动物细胞的方法中采用最多，也是最有效的方法是显微注射技术

C． 将目的基因导入小鼠细胞前要将含有该目的基因的运载体提纯 D． 培育该“超级小鼠”所用的受体细胞可以是小鼠的受精卵，也可以是小鼠的体细胞

考点： 基因工程的原理及技术．

分析： 将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．

解答： 解：A、“超级小鼠”是通过转基因技术的获得成功的，其中目的基因导入受体细胞用的是显微注射法，A正确；

B、将目的基因导入动物细胞最有效的方法是用显微注射仪将目的基因注射到受精卵中，B正确；

C、将目的基因导入小鼠细胞前要将含有该目的基因的运载体提纯，以提高实验的成功率，C正确；

D、培育该“超级小鼠”所用的受体细胞是小鼠的受精卵，而体细胞一般不能表达全能型，不适合作受体细胞，D错误． 故选：D．

点评： 本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或的能力． 13．（1.5分）下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述，错误的是（） A． 一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 B． 限制性核酸内切酶的活性受温度的影响 C． 限制性核酸内切酶能识别和切割RNA D． 限制性核酸内切酶可从原核生物中提取

考点： 基因工程的原理及技术．

分析： DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体．其中限制酶主要从原核生物中分离纯化出来，能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种．

解答： 解：A、限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，因此一种限制酶只能识别特定的碱基序列和切割一定的位点，A正确；

B、酶活性通常受温度和PH值的影响，B正确；

C、限制性核酸内切酶指能识别和切割DNA，C错误；

D、限制性核酸内切酶主要从原核生物中分离纯化出来的，D正确． 故选：C．

点评： 本题比较简单，属于考纲中识记层次的要求，着重考查了限制酶的分布、特异性及作用特点等方面的知识，考生只要识记该方面的知识即可解题． 14．（1.5分）基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选．已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是一G↓GATCC﹣，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是﹣↓GATC

﹣．根据图示判断下列操作正确的是（）

A． 目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割 B． 目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割 C． 质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割 D． 质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

考点： 基因工程的原理及技术．

分析： 由于限制酶Ⅱ能识别限制酶Ⅰ的识别序列，限制酶Ⅰ不能识别限制酶Ⅱ的识别序列．要将目的基因从该DNA链中提取出来，需要在目的基因左右切开，所以要用限制酶Ⅱ；质粒不能用限制酶Ⅱ，如果用该酶的话，质粒就会有两个切口．

↓

解答： 解：限制酶I的识别序列和切点是﹣GGATCC﹣，限制酶II的识别序列和切点是﹣↓

GATC﹣，可知限制酶II能够识别和切割限制酶I切割后的黏性末端．据题图可知，目的基

↓

因两端分别是限制酶I的识别序列和切点是﹣GGATCC﹣和限制酶II的识别序列和切点是﹣↓

GATC﹣，只有用限制酶II才能将目的基因切割下来．质粒有GeneI和GeneⅡ表示两种标记基因，分别有限制酶II的识别序列和限制酶I的识别序列；如果用限制酶II切割，则GeneI 和GeneⅡ都被破坏，造成重组质粒无标记基因；用限制酶I切割，则破坏GeneⅡ，保留GeneI，其黏性末端和切割目的基因所在DNA的黏性末端相同，可以连接形成重组DNA． 故选：D．

点评： 本题考查基因工程限制酶相关知识，意在考查考生的识图和理解能力，解题的关键是理解基因表达载体构建的过程． 15．（1.5分）水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，这种蛋白质基因如在转基因技术中利用，所起的作用最可能是（） A． 促使目的基因成功导入宿主细胞中 B． 使目的基因的成功导入容易被检测出来 C． 使目的基因在宿主细胞中更容易复制 D． 使目的基因更容易成功表达

考点： 基因工程的原理及技术．

分析： 标记基因的作用是用于检测目的基因的导入，荧光蛋白也具有相应的作用，即标记基因和目的基因一起，如果细胞表达出荧光蛋白，则说明目的基因已经进入细胞． 解答： 解：A、促使目的基因导入宿主细胞中是运载体的功能，A错误； B、发光蛋白可以作为标记，检测目的基因是否导入受体细胞，B正确； C、促使目的基因在宿主细胞中复制是运载体的功能，C错误； D、发光蛋白不能促使目的基因的表达，D错误． 故选：B．

点评： 本题以发光蛋白为素材，考查基因工程的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能将标记基因与荧光蛋白进行类比，得出正确结论的能力． 16．（1.5分）质粒是基因工程中最常用的运载体，它存在于许多细菌体内．质粒上有标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因（目的基因）是否转移成功．

外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况也不同，表是外源基因插入位置（插入点有a、b、c），请根据表中提供细菌的生长情况，推测①②③三种重组后细菌的外源基因插入点正确的一组是（） 细胞在含氨苄青霉素培养基上生长情况 细菌在含四环素培养基上的生长情况 ① 能生长 能生长 ② 能生长 不能生长 ③ 不能生长 能生长

A． ①是c，②是b，③是a B． ①是a和b，②是a，③是b C． ①是a和b，②是b，③是a D． ①是c，②是a，③是b

考点： 基因工程的原理及技术．

分析： 由图可知，a是抗氨苄青霉素基因，如果外源基因插入到a中，此基因结构被破坏，细菌无抗氨苄青霉素能力．将细菌放入含有氨苄青霉素培养基上生长，则会死亡；相反，会存活．b是抗四环素基因，如果外源基因插入到b中，抗四环素基因结构被破坏，细菌无抗四环素能力．将细菌放入含有四环素培养基上生长，则会死亡；相反，会存活．

解答： 解：第①组中细胞能在含氨苄青霉素培养基上生长，说明抗氨苄青霉素基因没有被破坏；细菌能在含四环素培养基上的生长，说明抗四环素基因没有被破坏．说明了外源基因插入位置使c；

第②组中细胞能在含氨苄青霉素培养基上生长，说明抗氨苄青霉素基因没有被破坏；细菌不能在含四环素培养基上的生长，说明抗四环素基因被破坏．说明了外源基因插入位置是b； ③细胞不能在含氨苄青霉素培养基上生长，说明抗氨苄青霉素基因被破坏；细菌能在含四环素培养基上的生长，说明抗四环素基因没有被破坏．说明了外源基因插入位置是a． 故选：A．

点评： 本题考查了基因工程的相关内容，意在考查学生对标记基因的生理功能的理解，能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系． 17．（1.5分）植物细胞工程常采用的技术手段有植物组织培养和植物体细胞杂交等．这些技术的理论基础是（） A． 植物细胞能进行有丝分裂 B． 植物细胞的结构是完整的 C． 植物体的生命活动受激素调节

D． 植物细胞具有全能性

考点： 植物组织培养的概念及原理．

分析： 本题主要考查植物组织培养和植物体细胞杂交的知识．

1、植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体．植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性．

2、植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株．植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性．

解答： 解：植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性，植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，因此植物组织培养和植物体细胞杂交等技术的理论基础是植物细胞具有全能性，ABC错误，D正确． 故选：D．

点评： 本题主要考查学生对知识的理解和记忆能力．生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能，全能性的基础是每个体细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体的全部基因．植物体细胞杂交是首先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体；用物理法（离心、振动、电刺激）或者化学法（聚乙二醇）诱导细胞融合，获得融合的原生质体；原生质体再生出细胞壁，获得杂种细胞；杂种细胞经过脱分化和再分化获得杂种植株． 18．（1.5分）下列关于单克隆抗体的叙述，正确的是（） A． 培养杂交瘤细胞获得单克隆抗体的过程体现了动物细胞核的全能性 B． 将抗原注入小鼠体内，小鼠发生免疫反应产生的抗体也称为单克隆抗体 C． 用灭活的仙台病毒作诱导剂，得到两两融合的细胞均为杂交瘤细胞 D． 筛选获得所需的杂交瘤细胞后，可在体内或体外培养，进而获得单克隆抗体

考点： 单克隆抗体的制备过程．

分析： 1、单克隆抗体是指由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体．

2、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体． 3、单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高，并可能大量制备．

解答： 解：A、培养杂交瘤细胞获得单克隆抗体的过程体现了细胞膜的流动性，并没有长成新个体，也没用核移植，不能体现动物细胞核的全能性，A错误；

B、单克隆抗体是指由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体，抗原注入小鼠体内，小鼠发生免疫反应产生的抗体，可能不止一种抗体，化学性质不单一，B错误；

C、两两融合的细胞有AA型、BB型、AB型，C错误；

D、筛选获得所需的杂交瘤细胞后，可在体内或体外培养，进而获得单克隆抗体，D正确． 故选：D．

点评： 本题考查了制备单克隆抗体的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系；理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力．

19．（1.5分）在动物细胞培养中，所培养的动物细胞大都取自（） A． 中龄动物器官 B． 老龄动物器官 C． 幼龄动物器官 D．中龄动物组织

考点： 动物细胞与组织培养过程． 分析： 动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养．动物细胞培养利用细胞增殖的原理，胚胎或幼龄动物的器官、组织的细胞分裂增殖能力强． 解答： 解：幼龄动物的器官、组织或动物胚胎细胞的分裂能力旺盛，适宜进行动物细胞培养．

故选：C．

点评： 本题考查动物细胞培养的相关知识，考查学生对知识的理解和记忆能力．动物细胞培养技术的应用：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞． 20．（1.5分）如用动物的细胞进行克隆实验应该选择的细胞核不能是（） A． 乳腺细胞的 B． 卵细胞的 C． 胃腺细胞的 D． 囊胚时期的胚胎细胞的

考点： 动物细胞核移植技术．

分析： 动物核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物）．

解答： 解：1、乳腺细胞、胃腺细胞和囊胚时期的胚胎细胞都含有2个染色体组，经过核移植获得克隆动物．

2、卵细胞只含有1个染色体组，核移植后获得单倍体，对于绝大多数二倍体动物而言，单倍体不能存活． 故选：B．

点评： 本题考查核移植技术，意在考查学生分析问题和解决问题的能力，属于中档题． 21．（1.5分）在动物细胞培养过程中，使用胰蛋白酶的目的是（） A． 使动物组织分散为单个细胞进行培养 B． 去掉细胞壁成为原生质体 C． 去掉细胞膜暴露出原生质体便于细胞融合 D． 促进蛋白质水解为多肽

考点： 动物细胞与组织培养过程．

分析： 动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖．所以在动物细胞培养时，首先要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织，以分解组织细胞间的物质，使组织分散成单个细胞．

解答： 解：A、胰蛋白酶的作用是消化组织细胞间的物质，使组织分散成单个细胞，A正确； B、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性，应该使用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁，B错误；

C、植物细胞去掉细胞壁以后获得的是原生质体，动物细胞没有原生质体，C错误；

D、使用胰蛋白酶的目的是分解组织细胞间的物质，最终促进蛋白质水解为氨基酸，D错误．

故选：A．

点评： 本题考查动物细胞培养过程，特别是该过程中胰蛋白酶的作用，只要考生识记相关知识点即可正确作答，属于考纲识记层次的考查． 22．（1.5分）用于核移植的供核细胞和受体细胞一般选用（） A． 受精卵和减数第二次分裂时期的卵母细胞 B． 传代10代以内的细胞和减数第一次分裂时期的卵母细胞 C． 传代10～50代以内的细胞和减数第二次分裂时期的卵母细胞 D． 传代10代以内的细胞和减数第二次分裂时期的卵母细胞

考点： 动物细胞核移植技术．

分析： 动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物）．核移植时一般都选用传代10代以内的细胞，因为正常细胞在传代10代以内时能保持细胞正常的二倍体核型．

解答： 解：A、核移植的供体细胞是体细胞，A错误；

B、正常细胞在传代10代以内时能保持细胞正常的二倍体核型，适宜用于核移植的供体细胞，但是用于核移植的受体细胞是处于减数分裂第二次分裂中期的次级卵母细胞，B错误； C、细胞传至10﹣50代左右时，增殖会逐渐缓慢，甚至于完全停止，且此时部分的细胞核型可能会发生变化，所以不适宜用于核移植的供体细胞，C错误；

D、细胞在传代10代以内时能保持细胞正常的二倍体核型，适宜用于核移植的供体细胞，处于减数分裂第二次分裂中期的次级卵母细胞是核移植的受体细胞，D正确． 故选：D．

点评： 本题考查动物体细胞核移植、动物细胞培养等知识，要求考生识记动物体细胞核移植的概念，明确核移植时的供体细胞是体细胞，受体细胞是去核卵母细胞；识记动物细胞培养的过程，明确细胞在传代10代以内时能保持细胞正常的二倍体核型． 23．（1.5分）动物细胞融合技术最重要的用途是（） A． 克服远源杂交不亲和 B． 制备单克隆抗体 C． 培育新品种 D． 生产杂种细胞

考点： 细胞融合的概念及方法；单克隆抗体的制备过程． 分析： 动物细胞融合：

（1）动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程．融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞． （2）诱导动物细胞融合的方法有物理法（电激等）、化学法（聚乙二醇PEG）、生物法（灭活的病毒）等．

（3）动物细胞融合的意义：打破了生殖隔离，使远缘杂交成为可能；成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段． （4）最主要的用途：制备单克隆抗体．

解答： 解：A、动物细胞融合技术可以克服远缘杂交不亲和，但这不是该技术的用途，而是该技术的意义，A错误；

BCD、动物细胞融合技术最重要的用途是制备单克隆抗体，B正确，C错误，D错误． 故选：B．

点评： 本题考查动物细胞融合的相关知识，要求考生识记动物细胞融合技术的概念、方法、用途及意义，能根据题干要求作出准确的判断，属于考纲识记层次的考查． 24．（1.5分）植物体细胞杂交和动物细胞融合比较，正确的是（） A． 诱导融合的方法完全相同 B． 所用的技术手段基本相同 C． 所采用的原理完全相同 D． 都能形成杂种细胞

考点： 植物体细胞杂交的过程；细胞融合的概念及方法． 分析： 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较： 项目 原理 细胞融合方法 诱导手段 用途 植物体细胞杂交 细胞膜的流动性，细胞的全能性 去除细胞壁后诱导原生质体融合 离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导 克服远缘杂交不亲和，获得杂交植株 动物细胞融合 细胞膜的流动性 使细胞分散后，诱导细胞融合 离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导 制备单克隆抗体的技术之一

解答： 解：A、植物体细胞杂交诱导融合的方法有物理法和化学法，动物细胞融合的诱导方法有物理法、化学法和生物法，A错误；

B、所用的技术手不相同，植物体细胞杂交还需要采用植物组织培养技术，而动物细胞融合不需要，B错误；

C、所采用的原理不完全相同，植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性和细胞的全能性，而动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，C错误； D、两者都能形成杂种细胞，D正确． 故选：D．

点评： 本题考查植物体细胞杂交和动物细胞融合的相关知识，要求考生识记植物体细胞杂交和动物细胞融合的原理、诱导方法、技术手段及应用，能列表比较两者，并结合所学的知识准确判断各选项． 25．（1.5分）科学家用灭活的病毒把骨髓瘤细胞与效应B细胞融合，得到杂交瘤细胞，灭活病毒的作用是（） A． 病毒比较小，可钻入到细胞内 B． 灭活的病毒已完全死亡，死亡的病毒可以让细胞聚集 C． 灭活的病毒已失去感染活性，对各种动物细胞不造成破坏，但它所保留的融合活性，可使不同动物细胞进行融合 D． 灭活的病毒带有目的基因，通过融合可以让杂合细胞带有目的基因

考点： 单克隆抗体的制备过程．

分析： 诱导细胞融合的方法有：物理法、化学法、生物法．其中物理法包括离心、振动和电刺激，化学法中的诱导剂一般为聚乙二醇（PEG），生物法中一般用灭活的病毒．

解答： 解：灭活的病毒已失去感染活性，对各种动物细胞不造成破坏，但它所保留的融合活性，可使不同动物细胞进行融合，故在骨髓瘤细胞与效应B细胞融合过程中，灭活病毒起了诱导细胞融合的作用． 故选：C．

点评： 本题考查了动物细胞融合和植物原生质体融合的方法，意在考查考生的识记能力和区分能力，属于简单题． 26．（1.5分）用a表示骨髓细胞，b表示效应B细胞，则细胞融合过程中两次筛选的目的分别是（） A． a、aa、ab、bb、b→a、aa、ab→ab培养 B． a、aa、ab、bb、b→ab、bb、b→ab培养 C． a、aa、ab、bb、b→ab→产生特定抗体的ab培养 D． a、aa、ab、bb、b→aa→能无限增殖的aa培养

考点： 单克隆抗体的制备过程．

分析： 单克隆抗体制备的两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群．

解答： 解：动物细胞融合，形成杂种细胞，即aa、bb、ab；第一次筛选是选出杂交瘤细胞即ab，去除未融合的细胞和自身融合的细胞；第二次筛选是选出产生特异性抗体的ab细胞，再进行克隆化培养． 故选：C．

点评： 本题考查单克隆抗体制备过程中的两次筛选，意在考查学生的识记和理解能力，解题的关键是理解杂交瘤细胞来源于骨髓细胞和效应B细胞，特点是即能无限繁殖，又能产生特异性抗体． 27．（1.5分）将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要的是（） A． 具有完整细胞核的细胞 B． 一定的营养物质和植物激素 C． 离体状态 D． 导入指定基因

考点： 植物培养的条件及过程．

分析： 植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其表现全能性的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）．②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）．

解答： 解：A、植物组织培养的原理是细胞具有全能性，这就要求细胞具有完整的细胞核，A正确；

B、植物组织培养需要一定的营养物质和植物激素，其中植物激素可以诱导细胞分裂和分化，B正确；

C、植物组织、细胞或器官只有再离体的条件下才能表现出全能性，C正确；

D、导入指定基因是基因工程的操作步骤，不是植物组织培养所需的条件，D错误． 故选：D．

点评： 本题考查植物组织培养的相关知识，重点考查植物组织培养的条件，要求考生识记植物组织培养的原理和条件等知识，能对选项作出正确的判断，属于考纲识记层次的考查． 28．（1.5分）在下列各种育种方式中，与组织培养技术无关的是（） A． 利用花药离体培养得到单倍体植株 B． 秋水仙素处理二倍体幼苗，获得四倍体植株 C． 培育人工种子 D． 通过体细胞杂交培养“番茄﹣马铃薯”杂种植株

考点： 生物变异的应用；植物体细胞杂交的过程．

分析： 植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性，即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能．

植物组织培养的过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成 胚状体，进一步发育植株（新植体）．

植物组织培养技术具有广泛的应用：植物繁殖的新途径（快繁技术、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产．

解答： 解：A、花药离体培养得到单倍体植株，将花粉培养成完整植株属于植物组织培养，A错误；

B、用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗后，由植株正常生长、发育就可获得多倍体植株，不需要采用植物组织培养技术，B正确；

C、人工种子中的胚状体是经植物组织培养得到的，C错误；

D、“番茄一马铃薯”杂种植株的培养过程包括植物体细胞杂交和植物组织培养，而将杂种细胞形成杂种植株的过程属于植物组织培养，D错误． 故选：B．

点评： 本题考查植物组织培养的相关知识，重点考查植物组织培养技术的应用，要求考生识记相关知识点，能联系基因工程和育种的相关知识，对选项作出正确的判断，需要注意的是③，要求考生明确受体细胞是体细胞时，需要采用植物组织培养技术． 29．（1.5分）下面为番茄植物组织培养过程的流程图解，以下相关叙述不正确的是（）

A． 脱分化发生在b步骤，形成愈伤组织，在此过程中植物激素发挥了重要作用 B． 再分化发生在d步骤，是愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程 C． 从叶组织块到种苗形成的过程说明番茄叶片细胞具有全能性 D． 经该过程产生的人工种子属于无性繁殖

考点： 植物的组织培养．

分析： 1、从图中分析可知，b代表的是脱分化，c表示的为再分化，d表示的细胞的分裂和分化．在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，需要的条件：①消毒灭菌；②一定浓度的植物激素；③适宜的温度；④充足的养料．

2、影响植物组织培养的因素：①培养基配制；②外植体选取；③激素的运用；④消毒；⑤温度、pH、光照．

3、植物组织培养中植物激素使用：物组织培养中关键性激素是生长素和细胞分裂素；同时使用生长素和细胞分裂素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向；先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂也分化．

解答： 解：A、从图中分析可知，b代表的是脱分化，在此过程中发挥作用植物激素有生长素和细胞分裂素，A正确；

B、再分化发生在c步骤，是愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程，B错误； C、由体细胞形成完整的植株，体现了植物细胞的全能性，因为其具有本物种全部的遗传信息，C正确；

D、人工种子是通过组织培养制备的，通过人工种子种植后得到的后代植株属于属于无性生殖，D正确． 故选：B．

点评： 本题考查了学生的识图理解分析能力，难度适中，解题的关键是明确植物组织培养过程以及对植物组织培养过程相关知识． 30．（1.5分）人们利用植物的微型繁殖技术来进行工厂化生产，这是利用了该项技术的哪些特点（） A． 操作简单 B． 使优良性状组合在一起 C． 培育新的性状 D． 高效性和保持种苗的优良遗传特性

考点： 植物组织培养的概念及原理．

分析： 1、植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体．植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性． 2、植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产． 解答： 解：A、植物组织培养操作繁琐，A错误；

B、植物组织培养为无性繁殖，能保持亲本的优良遗传特性，但不能使优良性状组合在一起，B错误；

C、植物组织培养为无性繁殖，不能培育新的性状，C错误；

D、植物微型繁殖即植物组织培养，具有高效、快速及保持种苗的优良遗传特性的特点，D正确．

故选：D．

点评： 本题考查植物组织培养的相关知识，要求考生识记植物组织培养的原理、过程及条件，掌握植物组织培养技术的相关应用，能结合所学的知识准确判断各选项． 31．（1.5分）下面的简式表示植物组织培养的大致过程，据此判断不正确的是（）

①②③→④

A． 若①是来自不同植物体细胞融合的杂种细胞，则④可能出现不同植物的遗传特性 B． 若①是花粉，则④是单倍体植株，经染色体加倍后可得到稳定遗传的品种 C． 若①是人参细胞，对②进行扩大培养可提高细胞产物人参皂甙的产量 D． 若①是具有杂种优势的农作物细胞，则用③进行繁育会发生性状分离

考点： 植物培养的条件及过程．

分析： 分析题图：图示表示植物组织培养过程，其中①是外植体、②是脱分化形成的愈伤组织（高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织）、③是再分化形成的胚状体、④是新植体．

解答： 解：A、若①是来自不同植物体细胞融合的杂种细胞，则其含有两个亲本的遗传物质，所以④可能出现不同植物的遗传特性，故A正确；

B、若①是花粉，则④是花药离体培养形成的单倍体植株，其高度不育，但经染色体加倍后可得到稳定遗传的品种，故B正确；

C、若①是人参细胞，则将其脱分化形成②愈伤组织，再进行扩大培养可提高细胞产物人参皂甙的产量，故C正确；

D、只有杂合子才会发生性状分离，而具有杂种优势的农作物细胞也可能是纯合子，所以用③进行繁育不一定会发生性状分离，故D错误． 故选：D．

点评： 本题结合植物组织培养过程图，考查植物组织培养的相关知识及应用，意在考查考生的识图能力和识记能力；能理解所学知识要点的能力和能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论． 32．（1.5分）下列哪一项不是精子、卵细胞发生的区别（） A． 初级精母细胞、初级卵母细胞的形成时间 B． MⅠ和MⅡ的时间连续性 C． 成熟生殖细胞是否经过变形 D． 成熟生殖细胞中染色体的数量

考点： 精子和卵细胞形成过程的异同． 分析： 哺乳动物精子和卵子发生的不同点：

（1）精子的减数两次分裂是连续的，场所唯一（MⅠ和MⅡ的场所都是睾丸）；而卵子的两次分裂是不连续的，场所不唯一．（MⅠ场所在卵巢，MⅡ场所在输卵管中）

（2）精子和卵子发生的时间不同：精子的发生是从初情期一直到生殖机能衰退；多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前完成的；MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的，MⅡ是在受精过程中完成的；

（3）精子的形成过程需要变形；卵细胞的形成过程不需要变形．

解答： 解：A、初级精母细胞是雄性动物初情期开始后，才由精原细胞分裂形成的，而初级卵母细胞是在胎儿期性别分化后形成的，A错误；

B、精子的产生过程中，MⅠ和MⅡ是连续的，而卵细胞产生过程中，MⅠ和MⅡ是不连续的，B错误；

C、精子细胞形成后变形为蝌蚪状，卵细胞不需要变形，C错误；

D、成熟的精子和卵细胞经过减数分裂形成，都含有相当于亲本体细胞一半的染色体数目，D正确． 故选：D．

点评： 本题考查精子和卵细胞形成过程的异同，要求考生识记精子和卵子的发生，掌握两者的相同点和不同点，只要考生识记相关知识点即可正确答题，属于考纲识记层次的考查．对于此类试题，考生要学会在平时的学习过程中对相关知识点进行归纳和总结． 33．（1.5分）下列有关胚胎工程叙述正确的是（） A． 培养胚胎干细胞过程中加入饲养层是为了促进细胞分化 B． 胚胎分割移植，实现同卵多胎的成功率较低 C． 目前，人体胚胎体外培养时，需配制一系列不同成分的营养液，用以培养不同发育时期的桑椹胚、囊胚以及原肠胚 D． 胚胎分割时可采用胰蛋白酶处理囊胚，将内细胞团细胞分散开来

考点： 胚胎工程的概念及操作对象；胚胎分割移植．

分析： 1、胚胎移植的基本程序：①对供、受体的选择和处理；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存．对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段．④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查．

2、胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等，经移植获得同卵双胚或多胚的技术．胚胎分割的分数越多，操作的难度越大，移植的成功率也越低．

解答： 解：A、胚胎干细胞培养时，加饲养层细胞（输卵管上皮细胞）是为了提供更好的营养促进干细胞分裂，抑制细胞的分化，A错误；

B、到目前为止，最常见的是分割产生的同卵双胎，而同卵多胎成功的比例很小，B正确； C、进行胚胎体外培养时，需配制不同成分的营养液，其目的是促进细胞分化，以培养不同时期的胚胎，如桑椹胚、囊胚，而不是原肠胚，C错误；

D、胚胎分割时对于囊胚的内细胞团要用切割刀或切割针进行分割，不采用胰蛋白酶处理，防止损伤细胞，D错误． 故选：B．

点评： 本题考查胚胎工程的相关知识，要求考生识记体外受精的过程及应用；识记早期胚胎培养的过程及条件；识记胚胎移植的过程，能结合所学的知识准确判断各选项． 34．（1.5分）下列哪些过程发生在受精过程中（） ①精子必须发生顶体反应，释放顶体酶

②顶体酶可使精子穿过放射冠、透明带、细胞膜 ③卵子恢复并很快完成了减数第一次分裂

④精子和卵子的细胞核分别形成雄原核和雌原核 ⑤透明带反应可以防止多精入卵的发生． A． ①②⑤ B． ①④⑤ C． ②③④ D．②④⑤

考点： 动物胚胎发育的概念．

分析： 在受精过程中精子必须发生顶体反应，释放顶体酶，顶体酶可使精子穿过放射冠、透明带、卵细胞膜透明带反应和卵黄膜的封闭作用防止了多精入卵和多精受精的发生，受精标志是出现第二极体，受精完成的标志是雌雄原核配合．

解答： 解：①在受精过程中，精子与卵子相遇时，精子顶体释放顶体酶，故①正确； ②顶体酶能溶解卵丘细胞间的物质，形成精子穿越放射冠的通道，故②错误；

③在受精过程中，卵子已经完成了减Ⅰ分裂，且处于减Ⅱ分裂中期，只有完成受精作用后，才继续完成减Ⅱ分裂，故③错误；

④受精后精子和卵子核膜都破裂，之后形成雄原核、雌原核再融合在一起，即形成合子，故④正确；

⑤精子与透明带接触，随即产生阻止后来精子进入透明带的反应，当精子接触卵黄膜后，卵黄膜立即发生拒绝其他精子再进入卵内的生理反应，故⑤正确． 故选：B．

点评： 本题考查受精过程，属于对识记、理解层次的考查，属于中档题． 35．（1.5分）下列细胞，哪一个代表已经完成受精的卵（）

A． B． C． D．

考点： 动物胚胎发育的过程．

分析： 受精包括受精前的准备阶段和受精阶段：准备阶段1﹣精子获能，刚刚排出的精子，不能立即与卵子受精，必须在雌性动物生殖道发生相应的生理变化后，才能获得受精能力；准备阶段2﹣卵子的准备，动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到减数第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力．

卵细胞形成过程，其中减数第一次分裂是在雌性动物排卵前后完成的，场所在卵巢；减数第二次分裂是在受精过程中完成的，场所在输卵管中．

受精作用完成的标志：在卵黄膜和透明带之间的间隙可以观察到两个极体．

解答： 解：卵子的减数第二次分裂是在精子和卵子结合的过程中完成的，次级卵母细胞经分裂产生一个成熟的卵子和第二极体．当在卵黄膜和透明带的间隙可以观察到两个极体时，说明卵子已经完成了受精，这是判断卵子是否受精的重要标志． 故选：C．

点评： 本题考查卵细胞的形成过程和受精作用等相关知识，意在考查学生识记相关细节和解决问题的能力．考生在解题时，首先看受精卵中染色体数（应为2N），再看极体的数目和位置． 36．（1.5分）在试管牛的生产过程中，不是必需的操作是（） A． 核移植技术 B． 卵母细胞的采集和培养 C． 精子的采集和获能 D． 早期胚胎培养和胚胎移植

考点： 胚胎移植；动物细胞核移植技术． 分析： 试管动物和克隆动物的区别： 试管动物 克隆动物 生殖方式 有性生殖 无性生殖 技术手段 体外受精、胚胎移植 核移植技术、胚胎移植 遗传规律 遵循 不遵循

解答： 解：A、试管牛的生产过程采用的是体外受精技术，不需要采用核移植技术，A错误； B、试管牛的生产过程需采用体外受精技术，体外受精包括卵母细胞的采集和培养，B正确； C、试管牛的生产过程需采用体外受精技术，体外受精包括精子的采集和获能，C正确； D、试管牛的生产过程需采用体外受精技术、早期胚胎培养和胚胎移植技术，D正确． 故选：A．

点评： 本题考查试管婴儿技术，要求考生识记试管婴儿技术的概念及采用的技术手段，并能与克隆动物进行比较，再根据题干要求作出准确的判断，属于考纲识记和理解层次的考查． 37．（1.5分）关于桑椹胚和囊胚的比较，以下说法不正确的是（） A． 桑椹胚的各细胞结构、功能基本相同 B． 囊胚期细胞出现了细胞分化，但遗传物质未发生改变 C． 囊胚期细胞分化是由遗传物质突变引起的 D． 囊胚期内细胞团和滋养层细胞差异不是复制水平上的差异，而是转录水平上的差异引起的

考点： 动物胚胎发育的过程．

分析： 桑椹胚时期细胞还没有发生分化，所以该时期的各细胞结构功能基本相同；囊胚期细胞分化形成内细胞团和滋养层细胞，两种细胞的差异不是复制水平上的差异，而是转录水平上的差异引起；细胞分化的实质是基因的选择性表达的结果，而分化过程中遗传物质未发生改变．

解答： 解：A、桑椹胚时期细胞还没有发生分化，所以该时期的各细胞结构功能基本相同，A正确；

B、囊胚期细胞分化形成内细胞团和滋养层细胞，但遗传物质不发生改变，B正确； C、细胞分化的实质是基因的选择性表达，而分化过程中遗传物质未发生改变，C错误； D、细胞分化的实质是基因的选择性表达的结果，即转录水平上的调控，D正确． 故选：C．

点评： 本题考查细胞分化和胚胎发育的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解判断能力，试题难度一般． 38．（1.5分）供、受体母牛选择好后，要用激素进行同期发情处理的原因是（） A． 防止受体牛不愿意接受胚胎 B． 只有受体与供体的生理状态相同，被移植的胚胎才能继续正常发育 C． 只要发情排卵后，各阶段时间内的变化，供、受体生理状态完全相同 D． 同期发情处理后，卵细胞和精子受精结合能力强

考点： 胚胎移植．

分析： 胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术．供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境，所以要用激素进行同期发情处理，使受体与供体的生理状态相同，保证被移植的胚胎继续正常发育．

解答： 解：A、用激素进行同期发情处理的原因是为了使供受体的生理状态相同，A错误； B、只有供、受体的生理状态相同，被移植的胚胎才能继续正常发育，所以要用激素进行同期发情处理，B正确；

C、同期发情处理的根本目的是保证被移植的胚胎继续正常发育，C错误； D、同期发情不会使卵细胞和精子受精结合能力增强，D错误． 故选：B．

点评： 本题考查胚胎移植的概念和生理学基础，要求考生识记胚胎移植的概念，掌握胚胎移植的生理学基础，明确用激素进行同期发情处理的原因和目的，选项正确的选项，属于考纲识记和理解层次的考查． 39．（1.5分）杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点，被称为“钻石级”肉用绵羊．科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如图所示，相关叙述正确的是（）

A． 为了获得更多的卵母细胞，需用雌激素对雌性杜泊羊进行处理 B． 从卵巢中采集的卵母细胞可直接与获能的精子进行体外受精 C． 为避免代孕绵羊对植入胚胎产生排斥反应，应注射免疫抑制剂 D． 为了进一步扩大繁殖规模，可通过胚胎分割技术获得同卵双胎

考点： 真题集萃；胚胎移植；胚胎分割移植．

分析： 阅读题干可知本题涉及的知识点是胚胎工程，明确知识点，梳理相关知识，分析题图，根据选项描述结合基础知识做出判断．

解答： 解：A、超数排卵用促性腺激素而不是雌激素，故A选项错误；

B、根据采集部位而定，如果是从输卵管采集的卵细胞，已发育成熟，可直接与获能的精子在体外受精；如果是从卵巢是采集的卵细胞，未发育成熟，都要经过体外人工培养成熟后才能与获能的精子受精，故B选项错误；

C、受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，不需要注射免疫抑制剂，故C选项错误；

D、为了进一步扩大繁殖规模，可通过胚胎分割技术获得同卵双胎或多胎，故D选项正确． 故选：D．

点评： 本题考查胚胎工程的相关知识，意在考查学生的识图能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力． 40．（1.5分）高等动物随着胚胎发育，仅有少数细胞依然具有分化成其他细胞类型和构建组织器官的能力，这类细胞称为干细胞，如造血干细胞．图中最能完整显示正常机体内干细胞基本特征的是（）

A． B．

C． D．

考点： 胚胎干细胞的来源及分化．

分析： 机体在发展适应过程中，保留了一部分未分化的原始细胞．称之为干细胞．一旦需要，这些干细胞按照发育途径通过分裂而产生分化细胞，以保证局部组织损伤的修复． 解答： 解：干细胞是具有细胞周期的细胞，它能不断分裂产生子细胞．有的子细胞仍然具有细胞周期，有的子细胞不再分裂，将分化成具有特定功能的细胞．已分化的细胞一般不再继续进行分裂，细胞分化具有不可逆转的特性． 故选：D．

点评： 本题考查了细胞分化的相关知识，意在考查考生的图文转换的能力和理解能力，难度适中．

二、非选择题：共40分 41．（7分）如图为大肠杆菌及质粒载体的结构模式图，据图回答下列问题．

（1）a代表的物质和质粒的化学本质都是DNA，二者还具有其他共同点，如能够自我复制、具有遗传效应（写出一至二条即可）．

（2）若质粒DNA分子的切割末端为QUOTE，则与之连接的目的基因切割末端应为

；可使用DNA连接酶把质粒和目的基因连接在一起．

（3）氨苄青霉素抗性基因在质粒DNA上被称为标记基因，其作用是供重组DNA的鉴定和筛选．

（4）下列常在基因工程中用作载体的是C

A．苏云金芽孢杆菌抗虫基因 B．土壤农杆菌中的RNA分子 C．大肠杆菌的质粒 D．动物细胞的染色体．

考点： 基因工程的原理及技术．

分析： 分析题图：图中a是大肠杆菌的拟核中的DNA，质粒是拟核以外的小型环状DNA，质粒上有复制原点、目的基因的插入位点、还有标记基因（氨苄青霉素抗性基因）． 解答： 解：（1）a代表的物质是拟核中的DNA分子，质粒是细胞质中的DNA分子，二者都是环状DNA分子、能够自我复制、具有遗传效应、也都具有双螺旋结构等．

（2）根据碱基互补配对原则，目的基因的切割末端应为；目的基因与质粒需要

用到DNA连接酶．

（3）质粒上的氨苄青霉素抗性基因是标记基因，可以用作目的基因（或重组质粒）是否导入的鉴定和筛选．

（4）大肠杆菌的质粒上基因工程中常用的运载体． 故答案为：

（1）DNA 能够自我复制、具有遗传效应

（2）DNA连接酶

（3）标记基因供重组DNA的鉴定和筛选 （4）C

点评： 本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及基本操作步骤，能正确分析题图，对物质a和质粒进行比较，属于考纲识记层次的考查．

42．（4分）反转录病毒载体是一种表达型质粒，结构如图所示．图上的“反转录病毒序列”可以整合到动物细胞的染色体上，不断地表达其携带的目的基因．（E、F、H分别为限制酶E、F、H的酶切位点）．

（1）反转录的原料是（四种）脱氧核苷酸．

（2）在构建重组质粒时，目的基因应插入到该质粒的位置是F（或：反转录病毒序列），此过程需使用的酶是限制酶和DNA连接酶．为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加抗生素A的培养基进行培养．获取大量重组质粒后，将其再转入到某种哺乳动物细胞中，可获得大量重组反转录病毒．

考点： 基因工程的原理及技术．

分析： 据图分析，基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心，基因工程载体的条件是能在受体细胞中保存并大量复制、有一至多了限制性内切酶切点和有特殊的遗传标记基因，便于进行筛选．反转录酶序列中有限制酶F的切割位点，目的基因与运载体结合，在粘性末端碱基互补配对，需要DNA连接酶作用于磷酸二酯键，形成重组DNA分子；该质粒上有具有的遗传标记基因是抗生素A抗性基因，可以用加有抗生素A的选择培养基进行筛选． 解答： 解：（1）逆转录是以RNA为模板合成DNA的过程，所需要的模板为RNA，原料为四种脱氧核苷酸．

（2）基因工程需要工具酶是限制酶和DNA连接酶；用到的限制酶不能破坏标记基因（抗生素A抗性基因），且应该整合到“逆转录病毒序列”上；抗生素A抗性基因为标记基因，用来帮助筛选目的基因． 故答案为： （1）（四种）脱氧核苷酸

（2）F（或反转录病毒序列） 限制酶和DNA连接酶 抗生素A

点评： 本题考查RNA复制，逆转录需要的模板、原料，重组质粒时目的基因的插入位点的知识，意在考查学生识图能力、信息的提取与应用能力、通过比较与综合做出合理判断的能力等． 43．（4分）如图为培育转基因小鼠基本过程的示意图．请回答下列问题：

（1）如A为重组质粒溶液，将其导入原核期受精卵的方法是显微注射法；如A为重组反转录病毒，还可采取感染（侵染）方法．

（2）小鼠出生后从其尾巴中提取DNA分子，通过DNA分子杂交的方法，可检测出携带目的基因的小鼠．

考点： 基因工程的原理及技术．

分析： 图中A为含有目的基因的重组质粒，可以用显微注射法将重组质粒导入小鼠（动物）的受精卵，并用DNA分子杂交法检测目的基因． 解答： 解：（1）将目的基因导入动物细胞常用显微注射法，所以图中应该用显微注射技术将重组质粒溶液导人小鼠原核期的受精卵；如A为重组逆转录病毒，还可采取感染方法． （2）检测目的基因可以用DNA分子杂交法，小鼠出生后可从其尾巴提取DNA分子，通过DNA分子杂交方法，可检测出携带目的基因的小鼠． 故答案为：

（1）显微注射法 感染（侵染） （2）DNA DNA分子杂交

点评： 本题考查基因工程、DNA分子杂交技术的知识，意在考查学生识图能力、信息的提取与应用能力、通过比较与综合做出合理判断的能力等． 44．（6分）野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗寒能力，但块茎不能使用．俄、德、芬兰专家共同做实验研究，用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强的杂交系马铃薯．据图分析回答问题．

（1）①过程植物细胞原生质体的分离需经过酶解，其中“酶解”所用的酶应该包括纤维素酶和果胶酶．

（2）②过程需要用聚乙二醇（PEG），其目的是诱导原生质体融合． （3）请用文字和箭头表示出④⑤技术过程的实验流程融合细胞

愈伤组织

幼

苗．由此过程可以看出植物细胞有形成再生组织的可能性，这是植物细胞全能性的表现． （4）一般在培养基上培养24﹣48小时后，大部分原生质体已再生出细胞壁．可以取样，通过质壁分离实验来鉴别细胞壁是否已经再生．

（5）请说明运用此植物体细胞杂交法的最大的好处：克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍．

考点： 植物体细胞杂交的过程．

分析： 据图分析，①是去壁过程，最常用的方法是酶解法，即用纤维素酶和果胶酶处理去除细胞壁．②表示诱导原生质体融合的过程，诱导植物细胞融合的化学法一般是用聚乙二醇（PEG）为诱导剂，原因是细胞膜具有一定流动性．③表示再生细胞壁，标志着细胞融合成功，细胞壁的形成过程主要与细胞内的高尔基体有关．④和⑤分别表示植物组织培养过程中的脱分化和再分化过程． 解答： 解：（1）细胞壁由纤维素和果胶组成，可采用纤维素酶和果胶酶将其水解． （2）细胞融合时常用聚乙二醇作为诱导剂，诱导原生质体融合．

（3）由④→⑤是杂种细胞经过脱分化、再分化形成幼苗的过程，体现植物细胞具有全能性．

（4）一般在培养基上培养24～48h后，大部分原生质体已再形成细胞壁．此时取样，利用质量分数为25%的蔗糖溶液以及其他用具，通过质壁分离实验来鉴别细胞壁是否已经再生． （5）植物体细胞杂交的优点是：克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍，大大扩展了可用于杂交的亲本组合的范围． 故答案为：

（1）纤维素酶和果胶酶 （2）诱导原生质体融合 （3）融合细胞

愈伤组织

幼苗 植物细胞全能性

（4）质壁分离

（5）克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍

点评： 本题结合植物体细胞杂交过程图，考查植物体细胞杂交的相关知识，意在考查考生的识图能力和分析能力，要求学生熟记杂交流程图，难度一般． 45．（9分）如图为动物细胞培养过程示意图，请回答以下几个问题：

（1）容器A中的动物器官或组织首先要剪碎，然后用胰蛋白酶处理，其目的是使细胞分散成单个细胞，每个细胞可以与培养液充分接触．

（2）培养先在B瓶中进行．瓶中的培养基成分有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等．细胞增殖产生的新细胞会表现出贴壁生长现象．当细胞分裂生长到表面相互接触时，就会停止分裂增殖，这种现象称为接触抑制，需用胰蛋白酶处理后分瓶继续培养，称为传代培养．有一类不正常的动物细胞，体外培养不受接触抑制机制的制约而表现为“疯长”，这类细胞最可能是癌细胞． （4）细胞在C瓶中培养一段时间后，大部分细胞衰老死亡，但有极少数细胞存活并传代下去，能够无限传代的原因是细胞遗传物质发生改变，带有癌细胞特点，能无限增殖． （5）制备单克隆抗体时选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的原因是每种B淋巴细胞只能产生一种特异性抗体，骨髓瘤细胞能无限增殖．单克隆抗体与普通血清抗体相比较，具有特异性强、灵敏度高、可大量制备的特点．

考点： 动物细胞与组织培养过程；单克隆抗体的制备过程． 分析： 本题主要考查动物细胞培养的过程．

1、动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养．

2、细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁．细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制． 解答： 解：（1）容器A中放置的是动物器官或组织，需要用胰蛋白酶处理，使细胞分散成单个细胞，每个细胞可以与培养液充分接触．

（2）动物细胞培养的培养液成分有葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、维生素、动物血清等．在C瓶中培养时，悬浮液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为贴壁生长．细胞进行有丝分裂，数量不断增多，当贴壁细胞分裂生长到相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制．需要用胰蛋白酶处理，把C瓶中的细胞分装后后分瓶继续培养，为传代培养．若有一类不正常的动物细胞，体外培养不受接触抑制机制的制约而表现为“疯长”，这类细胞最可能是 癌细胞．

（3）细胞在C瓶中培养一段时间后，大部分细胞衰老死亡，但有极少数细胞的细胞遗传物质发生改变，带有癌细胞特点，能无限增殖，能够存活并传代下去．

（4）单克隆抗体是由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体，体外可以大量制备．细胞来源有B淋巴细胞：能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖，所以杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体． 故答案为：

（1）使细胞分散成单个细胞，每个细胞可以与培养液充分接触

（2）动物血清 贴壁 表面相互接触 传代培养 癌细胞 （3）细胞遗传物质发生改变，带有癌细胞特点，能无限增殖

（4）每种B淋巴细胞只能产生一种特异性抗体，骨髓瘤细胞能无限增殖 特异性强、灵敏度高、可大量制备

点评： 本题主要考查学生对知识的理解和分析能力．细胞株传至50代后，不能再传下去，但有部分存活的细胞一般能够传到40～50代，这种传代细胞叫做细胞株．细胞株细胞的遗传物质没有发生改变．当细胞株传至50代以后又会出现“危机”，不能再传下去．但是有部分细胞的遗传物质发生了改变，而且带有癌变的特点，有可能在培养条件下无限制地传代下去，这种传代细胞成为细胞系． 46．（10分）如图为经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程，请回答下列问题：

（1）A细胞是（次级）卵母细胞，在进行体外受精前要对精子进行获能处理． （2）进行胚胎分割时，应选择发育到桑椹胚或囊胚时期的胚胎进行操作．

（3）囊胚的表面是单层扁平的细胞，称滋养层细胞，将来发育成胎膜和胎盘； （4）通过同一胚胎的分割移植培育出的小牛的性别相同（“相同”或“不相同”）． （5）通过体细胞克隆技术培育的小牛，其性别取决于供核的亲本．

（6）在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意将内细胞团均等分割，以免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育．

（7）受体母牛必须和供体牛属于同一物种．移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是受体子宫对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应．

考点： 胚胎移植；胚胎分割移植．

分析： 分析题图：图示为经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程，其中A是卵母细胞，可与获能的精子受精形成受精卵；①是囊胚中的内细胞团；②是囊胚腔． 解答： 解：（1）由以上分析可知，A是卵母细胞；在体外受精前要对精子进行获能处理． （2）进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚进行操作． （3）囊胚表面的单层扁平细胞称为滋养层细胞，将来发育成胎膜和胎盘．

（4）来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，所以通过胚胎分割产生的两个或多个个体的性别相同．

（5）核移植产生的克隆动物的核移植物质都来自供核亲本，因此其性别决定于供核亲本． （6）在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意将内细胞团均等分割，以免影响胚胎的恢复和进一步发育．

（6）胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术．由此可见，受体母牛必须和供体牛属于同一物种．受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应，这是胚胎能在受体子宫中存活的生理基础． 故答案为： （1）（次级）卵母细胞 获能 （2）桑椹胚或囊胚

（3）滋养层细胞 胎膜和胎盘 （4）相同 （5）供核的亲本

（6）将内细胞团均等分割，以免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育 （7）同一物种 受体子宫对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应

点评： 本题结合采用体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程图，考查体外受精、胚胎移植、胚胎分割等知识，要求考生识记体外受精的过程，识记胚胎移植的概念，识记胚胎分割的特点及注意事项，能运用所学的知识准确答题，属于考纲识记层次的考查．

（7）受体母牛必须和供体牛属于同一物种．移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是受体子宫对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应．

考点： 胚胎移植；胚胎分割移植．

分析： 分析题图：图示为经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程，其中A是卵母细胞，可与获能的精子受精形成受精卵；①是囊胚中的内细胞团；②是囊胚腔． 解答： 解：（1）由以上分析可知，A是卵母细胞；在体外受精前要对精子进行获能处理． （2）进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚进行操作． （3）囊胚表面的单层扁平细胞称为滋养层细胞，将来发育成胎膜和胎盘．

（4）来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，所以通过胚胎分割产生的两个或多个个体的性别相同．

（5）核移植产生的克隆动物的核移植物质都来自供核亲本，因此其性别决定于供核亲本． （6）在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意将内细胞团均等分割，以免影响胚胎的恢复和进一步发育．

（6）胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术．由此可见，受体母牛必须和供体牛属于同一物种．受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应，这是胚胎能在受体子宫中存活的生理基础． 故答案为： （1）（次级）卵母细胞 获能 （2）桑椹胚或囊胚

（3）滋养层细胞 胎膜和胎盘 （4）相同 （5）供核的亲本

（6）将内细胞团均等分割，以免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育 （7）同一物种 受体子宫对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应

点评： 本题结合采用体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程图，考查体外受精、胚胎移植、胚胎分割等知识，要求考生识记体外受精的过程，识记胚胎移植的概念，识记胚胎分割的特点及注意事项，能运用所学的知识准确答题，属于考纲识记层次的考查．

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