真菌显微形态观察和微生物菌落形态比较

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实验四、 实验四、真菌的显微形态观察及 微生物菌落形态观察

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一、实验目的 掌握真菌水浸片的制作 显微观察丝状真菌和酵母菌的形态 比较细菌、真菌和放线菌的菌落形态 比较细菌、

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二、实验材料和菌种1.器材： 1.器材 器材： 接种针、滴管、载玻片、盖玻片、酒精灯、 接种针、滴管、载玻片、盖玻片、酒精灯、显微镜 2.菌种： 2.菌种 菌种： 曲霉、根霉、犁头霉、青霉 曲霉、根霉、犁头霉、 酿酒酵母、红酵母 酿酒酵母、 大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌 大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、 放线菌 放线菌507(平板一套可打开用于显微观察，一套不用打开用于菌落形态 平板一套可打开用于显微观察， 观察) 观察)

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三、实验内容(一)丝状真菌及酵母显微形态观察1、实验目的要求 学习并掌握水浸片法制备标本片的方法 观察根霉、黑曲霉、 观察根霉、黑曲霉、犁头霉和青霉的菌丝形态 及特征 观察酵母菌的形态

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2、实验原理 真菌形态结构比细菌复杂。习惯上， 真菌形态结构比细菌复杂。习惯上， 真菌可分为酵母菌和霉菌。 真菌可分为酵母菌和霉菌。 霉菌由粗大、 霉菌由粗大、有隔或无隔分支状菌丝 构成，菌丝分为基内菌丝、气生菌丝。 构成，菌丝分为基内菌丝、气生菌丝。气 生菌丝特化结构上产生多种无性、 生菌丝特化结构上产生多种无性、有性孢 孢子着生部位、 子，孢子着生部位、排列方式以及孢子形 态可作为真菌鉴定的重要依据。 态可作为真菌鉴定的重要依据。

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根霉菌丝特化形成假根等特化菌丝

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孢囊孢子

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犁头霉(接合孢子)

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酵母菌是单细胞构造，个体形态多为卵圆形、圆柱 形，但有时某些酵母菌可形成假菌丝。酵母菌无性繁殖 以出芽方式生殖。

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3、实验材料 根霉(假根、孢子囊) 犁头霉(接合孢子) 黑曲霉(分生孢子头) 青霉(分生孢子) 酵母(试管悬液)

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4、操作步骤 (1)根霉、曲霉和犁头霉的水浸片观察 根霉、 在载玻片上滴加一滴蒸馏水，用接种针以无菌 在载玻片上滴加一滴蒸馏水， 操作方式挑取少许菌丝于蒸馏水中充分展开， 操作方式挑取少许菌丝于蒸馏水中充分展开，盖 上盖玻片(从一边向另一边覆盖， 上盖玻片(从一边向另一边覆盖，避免产生气 泡)。 镜检：用高倍镜(40× 观察细胞形态。 镜检：用高倍镜(40×)观察细胞形态。

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(2)青霉(切片法) 青霉(切片法) 在载玻片上滴加一滴水，用手术刀(盖玻片代替) 在载玻片上滴加一滴水，用手术刀(盖玻片代替) 首先在青霉菌落中心划一刀， 首先在青霉菌落中心划一刀，接着平行线方向

很薄 的位置再划一刀，用接种针挑取一小片菌苔( 的位置再划一刀，用接种针挑取一小片菌苔(包含 基内菌丝),以横截面的方式放置于水中， ),以横截面的方式放置于水中 基内菌丝),以横截面的方式放置于水中，盖上盖 玻片。 玻片。 用高倍镜观察培养基一边的菌丝结构及孢子形态。 用高倍镜观察培养基一边的菌丝结构及孢子形态。

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(3)酵母水浸片 酵母水浸片

用吸管吸取一滴酵母液(悬浮细胞),滴加在 用吸管吸取一滴酵母液(悬浮细胞),滴加在 ), 载玻片上，盖上盖玻片。 载玻片上，盖上盖玻片。 镜检：用高倍镜观察细胞形态。 镜检：用高倍镜观察细胞形态。

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5、实验结果 、 绘图表示丝状真菌、酵母菌的显微形态 标注其中的特征性结构

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(二)各类微生物菌落特征观察1、实验目的要求 观察细菌、放线菌、酵母菌、 观察细菌、放线菌、酵母菌、霉菌等微生物具 体菌种菌落的形态特征。 体菌种菌落的形态特征。 总结几类微生物菌落的一般特征并能识别。 总结几类微生物菌落的一般特征并能识别。

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2、实验原理 菌落：单个菌体在固体平面培养基上生长繁殖 菌落： 形成的肉眼可见的群体。 形成的肉眼可见的群体。 特征描述：形状、大小、颜色、边缘、隆起、 特征描述：形状、大小、颜色、边缘、隆起、 光泽、质地等。 光泽、质地等。

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细菌菌落特征： 细菌菌落特征：凝胶状、表面较光滑、湿润、与培养基结合 不紧密，易挑取，正反颜色一致。

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酵母菌菌落特征(与细菌相似) : 酵母菌菌落特征(与细菌相似)比细菌大而厚，不透明，表面光滑、湿润、 粘稠，易用针挑起。多呈乳白色。

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放线菌特征: 放线菌特征:致密、坚硬、多皱、不易用针挑起，不透 明。孢子成熟后，表面粉末 状，干燥(常有土腥味)。

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