猪繁殖与呼吸综合征病毒S-1株ORF5和ORF7基因的克隆及变异分析

PRRSVS-1株经Marc-145复苏后,通过RT-PCR扩增了ORF5和ORF7基因。利用酶切位点将2个基因分别连接到原核表达载体PET-32C中,筛选阳性克隆送测序,序列分析表明：PRRSVS-1株ORF5基因变异性较高,与VR-2332毒株和CH-1a毒株的同源性分别是：核苷酸同源性为91%和89%,氨基酸同源性是87%和85%ORF7基因相对保守,核苷酸的同源性分别是97%和94%,氨基酸的同源性分别是95%和93%。

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上海农业学报

2 0,4 2: 0 5 0 8 2 ( ) 4—4

Ac a Ag i u t r e S a g a t rc lu a h n h i

文章编号：0 03 2 (0 8 0 .00 1 0.9 4 2 0 ) 24 .6

猪繁殖与呼吸综合征病毒 S1株 OR 5和 OR 7基因的一 F F克隆及变异分析张春玲张婉华臧克伟王英蒋凤英邹勇，,,,,, 李春华何锡忠，(上海市农业科学院畜牧兽医研究所，海 2 10;东农业大学，安 2 1 1)’上 0 16山泰 708 )

摘要： RRS S1 P V -株经 Mac15复苏后， r 4通过 RT P R扩增了 ORF .C 5和 0RF 7基因。利用酶切位点将 2个基因分别连接到原核表达载体 P T 3 C中， E -2筛选阳性克隆送测序，序列分析表明： RR V .株 O 5基因 P S s1 RF变异性较高， VR-3 2毒株和 C 1毒株的同源性分别是：与 23 H.a核苷酸同源性为 9%和 8%, 1 9氨基酸同源性是 8%和 8%; 7基因相对保守， 7 5 ORF核苷酸的同源性分别是 9%和 9%, 7 4氨基酸的同源性分别是 9%和 9%。 5 3 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒； F基因； F OR 5 OR 7基因；变异分析中图分类号： 8 8S 5 S 2;8 5文献标识码： A

Cl n n a i to n l ss o he O RF5 a o e a d v r a i n a a y i f t nd ORF7 g n s o r i e e e f Po c n

Re r d c ie a d Re p r t r y d o r s ( p o u tv n s ia o y S n r me Viu PRRS V)S 1 sr i 一 t anZHA NG un-i g Ch ln,ZHAN G a hu,ZANG - i W n- a Ke we,W ANG ng Yi,

JA I N

G e g y n F n - i g,ZOU n ,LICh - u Yo g u h a,HE - h n Xiz o g

(Anma sa d ya d V trn r ee rhI si t, h n h i a e fAg iutr l c— i l Hub n r n eeia yR s c nt ue S a g a d myo rc lu a i a t Ac S e cs S a g

a 0 6 C ia C l g fV trn r dcn, h n o gAg iutr l nv ri ne, h n h i 1, hn; ol e eeia yMe iie S a d n rc l a ies y, 2 1 0 e o u U tTa a 7 0 8,Ch n in 2 1 1 ia)Ab ta t s r c:Af e h e i a fPRRS S 1 sr i y M a c 1 5 c l,t e ORF5 a d ORF e e f t rt e r v v l o V . t a n b r . e l h 4 s n 7 g n so PRRS S 1s r i r m p ii d b V . ta n we e a lfe v RT. CR n l n d d r c l n o t e p o a y tc e p e so e . P a d co e ie t i t h r k r o i x r s i n v c y t rp o ET- 2.Th e u n e a a y i h we h t t e v ra i t f ORF e e wa e a i e y h g n 3 e s q e c n l ss s o d t a h a i b l y o i 5 g n sr l t l i h a d vt omol gy b t en t e PRRSV . a R. 33 t a ns a t e he PRRS S. a he h o e we h S 1 nd V 2 2 s r i nd be we n t V 1 nd CH . 1 a

s r i s wa e p c i e y 9% a d 8% i u l o i e a d 8% a d 8% i m i o a i t a n s r s e tv l 1 n 9 n n c e td n 7 n 5 n a n c d.Th e ORF e e 7g n wa e a i e y c n e v tv。a d c m p r d wih t e VR. 3 2 a d Ch 1 t a n h o o o y wa e s r l tv l o s r a i e n o a e t h 2 3 n . s r i s t e h m l g sr . a

s e t ey 9% a d 9% i u lo ie a d 9% a d 9% i mi o a i p c i l 7 v n 4 n n ce td n 5 n 3 n a n cd.Ke r s y wo d:P r i e r p o u tv n e p r t r y d o e v r s o c n e r d c i e a d

r s i a o y s n r m iu;oRF e e 5 g n;oRF7 g n e e;Va i r-a i n an y i to al ss

猪繁殖与呼吸综合征 ( ocn e rd ciea drsi tr y do,RRS是由猪繁殖与呼吸综 P rierpo ut n epr oysn rmeP v a )合征病毒 ( ocn e rd ciea drsiaoysn rmevrs RRS引起的一种以母猪繁殖障碍和 P rierpo u t n eprtr y do i v uP V)各种年龄猪呼吸障碍为特征的高度接触性传染病。P RRS于 19年在荷兰首次被发现后，速在全球 V 91迅蔓延。19 9 8年我国分离到了 P RRS随后全国各地陆续报道了该病的发生。目前，RRS已经成为影响 V, P养猪业的重要疾病之一 L。 1

P RRS属动脉炎病毒科，因组为单股正链 RN大小约 1 b共 9个开放阅读框架 ( F)分别 V基 A, 5k, OR,编码 2个非结构蛋白和 7个结构蛋白[。GP 2] 5是由基因组 OR 5编码的含有 2 1氨基酸的主要糖蛋 F 0个收稿日期：0 7 0—1 2 0—1 0初稿；0 8 4—1改稿 2 0—0 4二基金项目：海市科委重点攻关计划 (5 9 9 )上 0 3 1 17资助 1

作者简介：张￣ '96 ), ( 7一，硕士研究生， 1女助理研究员，要研究方向为动物病毒分子生物学。 e: 2) 52;曰l x￣@s ae 主 Tl O1 05 Bn i i ( 6 8:. m .m o *通讯作者，T l(2 ) 2 0 5 8 Emalz uh n a o .o c e:0 1 6 2 5 2; - i o sc@yh o t m.a .

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