研究生 本科生医学分子生物学复习题

第一章 (必修和选修) 分子生物学与医学

? 分子生物学是现代医学的基础。

? 各种疾病发生学的阐明有赖于分子机理的认识。 ? 分子生物学引起医学诊断学与治疗学的革命变化。

? 当今生命科学研究的热点：遗传学、神经科学、发育生物学和免疫学。 RNA加工

? RNA剪接（splicing）

外显子（exon）、内含子（intron）

GT-AG法则：内含子末端的二核苷酸高度保守，绝大多数内含子以GT开始（在内含子RNA上变

为GU），并以AG结束。

1.分支位点保守序列的不变A亲核攻击内含子5′端G核苷酸，形成套索（lariat）状结构。

2.在剪接供体位点切割外显子/内含子连接。

3.3 ′端外显子上游剪接受体位点的亲核攻击，引起内含子RNA以套索的形式切割并释放，并将两个外显子RNA片段连接起来。

4.主要（GU-AG）剪接体U1、U2、U4、U5和U6 snRNA。次要（AU-AC）剪接体

? 5 ′加帽（capping）：7-甲基鸟苷（m7G）

作用：保护转录物免受5 ′→ 3 ′核酸外切酶的攻击；

协助mRNA从核转运至细胞质； 协助RNA剪接；

转录过程中协助胞质核糖体40S亚基附着于mRNA

? 3 ′多腺苷酸化（polyadenylation）AAUAAA ~200 AMP（腺苷酸残基）→poly（A）尾 作用：帮助mRNA转运至细胞质；

稳定细胞质中的mRNA；

加强mRNA被核糖体机器识别

染色体异常

1染色体数目异常：（1）.多倍体（polyploidy）

三倍体→ 双精、二倍体配子 四倍体→ 核内有丝分裂 （2）.非整倍体（aneuploid）：三体、单体 （3）.混倍体（mixoploidy）：嵌合体、异源嵌合体

2染色体结构异常：缺失，倒位，重复，插入，相互易位，罗伯逊异位，环状染色体，标记染色体等。 第二章

1.RNA基因分类及各自功能

2.高度重复DNA类型及特点

第三章

一个基因编码多个蛋白的原因 1． 许多基因具有多个启动子 2． 转录物的选择性剪接

3． RNA编辑，在转录后改变mRNA的序列 第四章

DNA测序的方法：

? 双脱氧DNA测序

? ? ? ?

自动双脱氧DNA测序

焦磷酸测序（pyrosequencing） 大规模平行DNA测序 基于芯片的DNA捕获方法

第五章 现代分子生物学技术基础

1）细胞DNA克隆的主要步骤。

? 分离纯化目的基因 ? 构建重组DNA分子 ? 宿主细胞的转化

? 含重组体的宿主细胞的筛选、扩增 ? 分离重组DNA

2）载体的一般特性以及常用载体的种类和特点。 载体的一般特性:

? 分子量小，以容纳较大的外源DNA ；

? 有多种限制酶单一识别序列，有助于外源DNA片段插入； ? 载体DNA被切割并插入外源DNA后，不影响其复制能力 ? 有标记基因，有利于筛选重组体。

? 克隆载体上要有复制起点，表达载体上还要有启动子。 常用在的种类和特点：

(1) 克隆较小片段DNA的载体：质粒（plasmid）细菌中独立于染色体外的双链闭环DNA分子。大小约为数千碱基对。

? 天然质粒需经改造才能适用于DNA克隆

*插入多克隆位点：人工合成 30bp 左右的一段DNA序列，含有多种限制酶的单一切点 *插入抗生素抗性基因：如Ampr

*建立用于重组子筛选的选择系统，将多克隆位点置于可表达的标志基因中间。 ? 能够携载外源DNA分子＜ 10kb (2) 克隆中等大小片段DNA的载体： λ噬菌体（Lambda phage）：

? 高效感染细菌的病毒

? DNA分子为线性双链5′末端是12个核苷酸突出的粘性末端，又称cos序列。 粘粒载体

? 将质粒和λ噬菌体改建的载体，即cos序列插入一小plasmid 中所构成. ? 能够携带外源DNA分子约33-44kb。 （3） 克隆大片段DNA的载体： 噬菌体P1载体：

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