CIK细胞治疗晚期肝癌的临床观察

CIK细胞治疗晚期肝癌的临床观察

肿瘤基础与临床2009年12月第22卷第6期 505

CIK细胞治疗晚期肝癌的临床观察

张素青,施玲燕,刘继斌,张一心

(南通大学附属肿瘤医院生物治疗中心,江苏南通226361)

摘要:目的　观察CIK细胞治疗晚期肝癌的临床疗效。方法　体外培养CIK细胞,14d后分次回输给患者,观察患者治疗前后瘤体大小、肿瘤标志物、免疫指标、临床症状、生活质量、卡氏评分等的变化,并记录生存期。结果　晚期肝癌治疗前后肿瘤标志物

++CA199和AFP比较差异有统计学意义(P<0.05),CD4、CD19、CD3/CD16CD56比较差异均有统计学意义(P<0.05);治疗后患者

临床症状比治疗前有明显改善,差异有统计学意义(P<0.05);卡氏评分提高率为73.91%。结论　CIK细胞疗法为无手术放疗及化疗适应证的晚期肝癌患者提供了一种延长生存期,改善生活质量的新途径。关键词:晚期肝癌;CIK细胞;过继免疫疗法

中图分类号:R735.7;R730.54　　文献标识码:A　　文章编号:1673-5412(2009)06-0505-03

ClinicalStudyontheTreatmentofPatientsLIKCells

ZhangSuqing,ShiL(CenterofBiotherapy,theAffiliatedTumofNantong226361,China)

Abstract:Objective　Toestimatetheclinicalonlivercancerbycytokine2inducedkillercells(CIK).Meth2ods　CIKcellswereculturedint46patientswithadvancedlivercanceraftertwoweeks.Thechangesoftumorweight,imquality,andtheKarnofsky’sgradewereobserved,andthesurvivaltimewasrecorded.Results　TheAFPadvancedlivercanceraftertreatmentaresignificantlylowerthanthatbeforetreatment(P<0.05),theCD4,/CD16CD56

+

+

frompatientswithlivercanceraftertreatmentweresignificantlyhigherthanthatbeforetreat2

ment(P<0.05).Theclinicalsymptomsofpatientsaftertreatmenthaveasignificantimprovementascomparedwithbeforetreatment.Karnofsky’sgradeincreasedratewas73.91%.Conclusion　CIKcellstherapycanimprovesurvivalquantityandprolongsurvivalperiod,whichprobablyprovideanewstrategyforpatientswithadvancedlivercancer.Keywords:advancedlivercancer;CIKcells;adoptiveimmunotherapy

肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,由于病程发展快,患者就诊时大多已属中晚期。细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokineinducedkillers,CIK)疗法是继手术、放疗、化疗之后,一种新的治疗肿瘤的方法。与其他疗法相比,CIK细胞可以在不损伤机体免疫系统结构和功能的前提下,直接杀伤肿瘤细胞,并可调节和增强机体的免疫功能,因其特别适用于那些已无手术、放疗、化疗适应证的患者,而成为治疗肿瘤的重要辅助疗法。本文采用CIK细胞治疗46例晚期肝癌,现将结果报道如下。1　资料与方法

1.1　临床资料　2005年8月至2009年8月我院收治

1.2　CIK细胞制备及回输　异体外周血用Ficoll分

离并收集单个核细胞,用RPMI21640洗涤3次,将细胞按2×10mL悬浮于RPMI21640完全培养基中。参照美国斯坦福大学骨髓移植中心建立的CIK细胞培

γ500u/mL,置于37℃、养方法:第0天加入IFN25%CO2培养箱中培养24h,第1天加入IL22300u/mL,CD310μg/L,IL21100u/mL继续培养,每天观察细胞

6

-1

生长并根据情况进行扩增。以后每3d换液1次并调整细胞数为2×10L

9

-1

,在37℃、5%CO2培养箱中连

续培养10～12d后利用台盼蓝计数。CIK细胞培养14～28d后,取少量培养细胞做免疫组化检测,当CD3CD56细胞数≥50%,CD3CD8细胞≥30%,

+

+

+

+

且微生物学检查阴性时收集细胞。经生理盐水洗3次,加入含1%人血白蛋白的生理盐水中回输患者体内。每天回输1次,5d为1疗程

[1]

的46例晚期肝癌,其中男34例,女12例,年龄34～74

岁,平均年龄53岁;均经影像学、细胞学及病理学等检查确诊;根据国际抗癌联盟(UICC)分期标准进行临床分期,其中Ⅰ～Ⅱ期2例(4.3%),Ⅲ～Ⅳ期44例(95.7%)。

作者简介:张素青(1968-),男,副主任医师,主要从事肿瘤外科治疗与

研究。E2mail:suqing2zhang@

。

1.3　观测指标及疗效评估　观测指标包括瘤体变化、

肿瘤标志物、免疫指标、生存期、症状、生存质量及毒副

反应等。疗效评估参照WHO对实体瘤疗效判定标准:以患者治疗前及治疗后1个月CT及B超检查结果进行对照比较,分为完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、轻度缓解(MR)、稳定(SD)、进展(PD),缓解率

CIK细胞治疗晚期肝癌的临床观察

506 JOURNALOFBASICANDCLINICALONCOLOGYVol122No16Dec12009

[2]

=CR+PR+MR;临床症状评价根据其积分值,积分

值下降≥2/3为显著改善,积分下降1/3为部分改善,

[2]

积分下降<1/3为无改善;生存质量评价根据患者Karnofsky评分和体质量;毒副反应以患者主诉为依据。

1.4　统计学处理　采用SPSS10.0统计软件进行统

0.05),CA199比较差异有统计学意义(t=4.63,P<

0.05),见表1。

表1　CIK细胞治疗前后肿瘤标志物变化　(x ±s,μg/L)

时间例数治疗前46治疗后46

CA15311.57±7.6710.87±5.32

CA19954.86±22.5338.46±21.87

CA12518.78±11.2217.85±10.57

AFP108.86±11.6262.38±10.12

计分析,率的比较采用χ检验,检验水准α=0.05。2　结果

2.1　瘤体变化　46例中有2例出现明显的瘤体缩

2

2.3　CIK细胞治疗前后各免疫指标比较　CIK治疗

小,其余44例未见影像学改变。

2.2　CIK细胞治疗前后各肿瘤标志物比较　治疗前后,CA153比较差异无统计学意义(t=0.51,P>0.05),AFP比较差异有统计学意义(t=18.21,P<0.05),CA125比较差异无统计学意义(t=0.17,P>

前后CD3比较差异无统计学意义(t=0.48,P>0.05),CD4比较差异有统计学意义(t=3.57,P<0.05),CD8比较差异无统计学意义(t=0.59,P>0.05),CD19(t=14.11,P<

++

0.01);/CD16CD56异有统计学意义(t4.92,P<0.K(x ±s)

时间

治疗前治疗后

例数46

.4762.±55

.54±5.2539.86±6.27

CD822.14±8.5721.24±5.78

CD199.98±1.3514.45±1.58

CD3/CD1612.69±5.3919.83±8.22

+

+

2.5　CIK治疗前后症状变化　治疗前后疲乏无力比2

较差异有统计学意义(χ=69.69,P<0.01);食欲不

振比较差异有统计学意义(χ=33.62,P<0.01);盗

2

汗失眠比较差异统计学意义(χ=63.26,P<0.01);

2

懒言少语比较差异有统计学意义(χ=9.79,P<

2

0.01);气短怕动比较差异有统计学意义(χ=17.94,P<0.01),见表3。

表3　CIK细胞治疗后症状变化

症状疲乏无力食欲不振盗汗失眠懒言少语气短怕动

治疗前(n)治疗后(n)

422

42401829

15259

2

缓解率(%)

95.00

64.2895.0072.0068.90

程度高、生存期短等特点,发现时多属晚期,故临床治疗难度大,患者生活质量差,病死率高,严重危害着人类的生命和健康。

CIK细胞是患者外周血单个核细胞体外经多种细

++

胞因子共同诱导而获得的一群以CD3CD8CTL和

++[3]

CD3、CD56为主的异质细胞群,兼具有T淋巴细胞强大的抗肿瘤活性和NK细胞非MHC限制性杀瘤

[4-5]

活性,且体内外增殖能力强,一类杀瘤活性更强和杀瘤谱更广的新型抗肿瘤效应细胞。体内回输CIK细胞,可以在不损伤机体免疫系统结构和功能的前提下,直接杀伤肿瘤细胞并可调节和增强机体的免疫功能。特别适用于那些已无手术、放疗、化疗适应证的晚期肿瘤患者,因而已成为治疗肿瘤的重要辅助治疗方法。为预防肿瘤复发,改善晚期患者的生存质量提供

[6]

了新途径。一般在放疗、化疗后间隔2～4周,机体免疫力有所恢复时输入CIK细胞,可提高肿瘤患者的缓解率,并且在清除微小残留病灶方面也发挥着重要

[3]

作用。

本文结果显示,46例晚期肝癌经过我院综合治疗,结合常规CIK细胞治疗后,瘤体有不同程度的缩小;临床症状如疲乏无力、食欲不振、盗汗失眠、懒言少语等均有十分明显的改善;相关肿瘤标志物呈下降趋势,相关免疫活性细胞如T细胞、B细胞和NK细胞呈上升趋势。Karnofsky评分提高率为73.91%,体质量增加率为69.56%,这表明CIK细胞治疗晚期肝癌,能够明显提高患者生存质量,延长患者的生存期。

2.6　生存质量变化　46例用Karnofsky评分及体质

量的改变来评估生存质量的改善。治疗后Karnofsky评分平均提高10～20分,其中提高34例,稳定9例,下降3例,提高率为73.91%。治疗后患者平均体质量增加1～2kg,其中增加32例,稳定7例,减少1例,增加率为69.56%。2.7　毒副反应　46例经CIK过继免疫治疗后,仅有少数患者有一过性低热反应(温度≤38℃),24h内即降至正常。未见其它毒副反应。3　讨论

原发性肝癌具有起病隐匿、病程短、进展快、恶性

CIK细胞治疗晚期肝癌的临床观察

肿瘤基础与临床2009年12月第22卷第6期 507

CIK细胞对鼻咽癌细胞体外杀伤活性的研究

程伟民,方慧云,李晓玲,季明芳

(中山市肿瘤研究所,广东中山528403)

摘要:目的　以鼻咽癌细胞株CNE为靶细胞,探讨CIK细胞对鼻咽癌细胞的杀伤作用。方法　正常人外周血单个核细胞在体外经γCD3单抗、rhIFN2、rhIL21多种细胞因子诱导后所收获的CIK细胞作为效应细胞,以鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2为靶细胞。用

MTT法测定效应细胞对靶细胞的杀伤活性。结果　CIK细胞经体外诱导培养12d后,CD3细胞、CD8CD28细胞和CD3CD56

+

+

+

+

+

(38.01±细胞的阳性百分率分别为(92.69±5.69)%、14.63)%和(27.74±7.96)%。在效靶比为30%时,CNE1和CNE2的杀伤活

性分别为(67.90±8.19)%和(65.20±3.80)%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论　CIK后的补充治疗。该细胞对CNE1和CNE2两种不同分化程度的鼻咽癌细胞具有相似的杀伤活性,CIK细胞进行补充治疗,无须考虑细胞的分化程度。

关键词:细胞因子诱导的杀伤细胞;鼻咽癌;杀伤活性;体外

中图分类号:R739.63;R730.54　　文献标识码:A　　文章编号:--AStudyoftheIAgainstNasopharyngeal

CellsinVitro

in,FangHuiyun,LiXiaoling,JiMingfang

ResearchInstituteofZhongshanCity,Zhongshan528403,China)

Abstract:ObjectiTothekillingactivityofcytokineinducedkillercellsagainstnasopharyngealcarcinomacellsCNEasthetargetcells.Methods　PBMCswereisolatedfromhealthyhumanvenousblood,thenwereinducedtobeCIKcellsinvitroastheeffectcell

γandrhIbythepresenceofanti2CD3antibody,rhIFN2L21.WithCNE1cellsorCNE2cellsasthetargetcell.Thenthekillingactivityof

effectcellsagainsttargetcellswasmeasuredbyMTTmethod.Results　TheCIKcellswereanalyzedbyflowcytometryinvitroafter12days.ThepositivepercentageofCD3,CD8CD28,CD3CD56

+

+

+

+

+

cellwere(92.69±5.69)%,(38.01±14.63)%,(27.74±7.96)%re2

spectively.Attheeffecttargetratio30%,thekillingactivityofCIKcellsagainstCNE1cells(67.90±8.19)%wasnotsignificantlyhigherthanthatofCNE2cells(65.20±3.80)%(P>0.05).Conclusion　TheresearchhasprovidedthebasisfortheimmunotherapyofCIKcellsagainstnasopharyngealcarcinomaafterradiotherapy.ThekillingactivityofCIKcellsagainstCNE1cellsisthesameasthatofCNE2cells.So,weneednotconsiderthedifferentiationdegreeofcellswithCIKcellsinclinic.Keywords:cytokineinducedkillercell;nasopharyngealcarcinoma;killingactivity;invitro

细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokineinducedkil2lers,CIK)是新近发展起来的过继免疫细胞,由于它具有增殖速度快,抗肿瘤能力强,在细胞的数量上能满足临床的需要,因而具有较好的应用前景。本文以鼻咽癌细胞株CNE细胞为靶细胞,探讨CIK细胞对鼻咽癌

作者简介:程伟民(1959-),男,副主任检验师,主要从事鼻咽癌的相关

研究。E2mail:williamch_99@

细胞的杀伤作用,为鼻咽癌辅助治疗模式提供实验和

理论依据,现将研究结果报道如下。1　材料与方法

1.1　主要试剂　GT2T551无血清培养基购自TaKaRa

生物技术有限公司,CytoTox96非放射性细胞毒性分析试剂盒为Promega公司产品,培养用rhIL22、

γ均为R&D公司产品,流式CD3McAb、rhIL21、rhIFN2

疫治疗恶性肿瘤的临床观察[J].癌症,2002,21(7):797-801.

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(收稿日期:2009-10-20)

本文来源：https://www.bwwdw.com/article/j6qm.html