高效液相色谱法测定不同产地天麻中天麻素含量

ｕｓＨＩｚＨＥＮＭＥＤＩｃＩＮＥＡＮＤＭＡＴＥＲＩＡＭＥＤＩｃＡＲＥｓＥＡＲｃＨ２００９ｖｏＬ．２０Ｎｏ．４时珍国医国药２００９年第２０卷第４期

＿．－｜Ｌ

Ｃｊ

同效液相色谱法测定不同产地天麻中天麻素含量

乔怀耀１，张兴国ｈ，郭健１，党连慧１，张大全２

（１．西南交通大学药学院，四川峨眉６１４２０２；

２．金口河森宝野生植物开发有限公司，四川金口河６１４７００）

摘要：目的检测不同产地天麻中的天麻素含量。方法参照《中国药典》ＨＰＬｃ法。结果四川省金口河地区所产鸟天麻中天麻素含量最高。结论金口河地区鸟天麻是优良的天麻栽培品种资源，尽快建立符合国家ＧＡＰ要求的天麻基地切实可行。

关键词：天麻；不同产地；天麻素；高效液相色谱；含量

中图分类号：Ｒ２８４．１文献标识码：Ｂ文章编号：１００８旬８０５（２００９）０４羽２ｌ旬１

天麻是兰科植物天麻白ｓｆｒｏｄ施ｅ砌ⅡＢ１．的块茎，具有平肝熄风止痉的功效，其中有效成分主要为天麻素’“，临床应用十分广泛，为我国传统名贵药材。早在两千多年前就被《神农本草经》列为上品。有关天麻道地产区的记载很多，如《名医别录》中记载：“赤箭生陈仓川谷、雍州、太山、少室诸地”；《药物出产辨》亦记载“四川、云南、陕西、汉中所产者佳”。现代研究认为天麻在我国的分布区包括云南、贵州、四川、重庆、湖北、山东、陕西、辽宁、吉林、黑龙江等省区‘２Ｊ。本专题采用高效液相色谱（ＨＰＬｃ）法测定了四川、云南、陕西、贵州等４个产地的８个样品中天麻素的含量。

ｌ仪器与材料

１．１仪器岛津Ｌｃ一２０ＡＴＨＰＬｃ仪；超纯水机（国产）等。１．２试剂乙腈（天津市科密欧化学试剂有限公司），甲醇（天津市科密欧化学试剂有限公司），均为光谱纯。

１．３样品

１．３．１对照品天麻素，购自中国药品生物制品检定所（批号：１１０８０７—２００２０５）。

１．３．２天麻样品采自不同产地的天麻样品按袁崇文口１方法进行处理，烘干。

２方法

２．１样品溶液的制备精密称取天麻样品粉末Ｏ．５０００ｇ，平行重复３次，加稀乙醇４０ｌＩｌｌ，称重，回流３ｈ后，称定重量，稀乙醇

补足。摇匀后过滤，滤液用０．４５斗ｍ微孔滤膜过滤即得样品溶液。

２．２对照品溶液的制备精密称取对照品Ｏ．００７Ｏｇ，加流动相溶解并定容至５０“，混匀即得。

２．３色谱条件色谱柱为ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＣ１８柱（２５０ｍｍ×４．６咖，５斗ｍ），柱温３０℃，流动相为乙腈：Ｏ．０５％磷酸溶液（３：９７），检测波长２２０砌，流速１．０ＩＩｌｌ?ｍｉｎ～。

２．４标准曲线制作吸取上述对照品溶液２，４，６，８，１０“ｌ，按上述色谱条件进样，以进样量为横坐标，天麻素峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，标准曲线方程为：ｙ＝１５２８８４ｘ＋ｌ５２９，Ｒ＝０．９９９９。２．５样品含量测定取待测样品，按上法制成待测样品，精密吸取样品溶液４一，测定天麻素峰面积，计算天麻素含量，计算结

收稿日期：２００８埘一０３；修订日期：２００８一ｌＯ旬３

基金项目：四川省乐山市科技局重点科技项目（Ｎｏ．０６ＳＺＤ０９６）

作者简介：乔怀耀（１９８２一），男（汉族），河南南阳人。现为西南交通大学药学院在读硕士研究生，学士学位，主要从事中药分析及指纹图谱研究工作．

‘通讯作者简介：张兴国（１９５８一），男（汉族），四川成都人，现任西南交通大学药学院副教授。学士学位，主要从事中药资源开发利用与ＧＡＰ研究工作．

果，取平均值。天麻素对照品及样品色谱图见图ｌ一２。

２．６稳定性实验精密吸取样品溶液４ｍ，每隔４ｈ进样１次，

进样６次，６次测得的峰面积的ＲＳＤ为０．３１％，表明样品在２４ｈ

内稳定。

２．７精密度实验精密吸取对照品溶液４一，连续进样６次，测得６次天麻素峰面积的脚为０．２５％，表明该实验方法精密度

良好。

２．８重现性实验按样品制作流程，取同一天麻样品，平行制作

５份样品，测得天麻素含量的粥Ｄ为１．０２％，重现性良好。

２．９加样回收率实验取已知含量的天麻样品适量，加入一定

量的对照品，按待测样品制作方法制作成待测样品，测定天麻素含量，结果平均回收率为９８．７０％（凡＝６），回收率较好。

“ｍｊｎ

图ｌ天麻素对照品ＨＰＬｃ圈

＾．１／＼

“ｍｉｎ

圈２天麻样品ＨＰＬＣ图

３结果

本专题按“２．５”样品测定方法测定了不同产地天麻中天麻素的含量。结果见表ｌ。

表ｌ不同产地天麻中天麻素的含量

产地品种天麻索（％）四川峨眉山栽培红杆０．６０四川泸定贡嘎山野生红杆Ｏ．６５

贵州遵义栽培红杆０．４４

西藏日喀则栽培红杆０．６８

云南昭通栽培红杆Ｏ．３６

陕西紫阳栽培红杆Ｏ．６７四川乐山金口河栽培红杆Ｏ．６０

婴纠丕出垒旦型越堑璺珏Ｑ：１２

ｎ＝３

４小结

经过对以上几个产地天麻的天麻素含量测定实验的结果显

?９２１?

时珍国医国药２００９年第２０卷第４期ｕｓＨＩｚＨＥＮＭＥＤｌｃＩＮＥＡＮＤＭＡＴＥＲＩＡＭＥＤＩｃＡＲＥｓＥＡＲｃＨ２００９ＶｏＬ．２０Ｎｏ．４

示．产于四川省乐山市金口河区的乌天麻天麻素含量最高，其中云南昭通所产天麻中天麻素含量不及四川峨眉山所产天麻，与文献报道一致Ｈｏ。虽然有报道野生天麻中的天麻素含量高于栽培天麻一Ｊ，但野生天麻远远不能满足天麻的市场需求，另外金口河地区所产乌天麻和红天麻中天麻素含量远高于或达到药典标准ｕＪ，陕西、四川等天麻的道地产区所产的天麻中天麻素的含量均超过《中国药典》标准。因此，在天麻传统产区之一的金口河地区建立符合国家ＧＡＰ要求的乌天麻培育基地来满足市场需求是完全可行的。参考文献：．

［１］国家药典委员会．中国药典［ｓ］．北京：化学工业出版社，２００５：３９．［２］徐锦堂．中国天麻栽培学［Ｍ］．北京：北京医科大学，中国协和医科大学联合出版社，１９９３：３２．

［３］袁崇文。刘智，袁玉清，等．中国天麻［Ｍ］．贵阳：贵州科技出版社。２００２：１１５．

［４］关萍，高玉琼，石建明，等．不同产地野生及栽培天麻中天麻素含量比较［Ｊ］．中国中药杂志，２００５，３０（１１）：１６９８．，

石仙桃叶化学成分研究

林丽聪１，张怡评２，吴春敏¨，王勇３

（１．福建省淡水水产研究所，福建福州３５０００ｌ；２．国家海洋局第三海洋研究所，福建厦门３６１００５；

３．福建省药品检验所，福建福州３５０００１）

摘要：目的研究兰科石仙桃属植物石仙桃叶的化学成分。方法应用色谱和光谱分析方法分离和鉴定化学成分。结果从石仙桃叶子醋酸乙酯部分分离到７个化合物，分别鉴定为：４一（４一羟基一苄基）苯酚①，原儿茶醛②，天麻苷元③，对羟基苯甲醛④，ｐ一胡萝卜苷⑤，ｃｙｃｌｏｐｈｏｌｉｄｏｎｅ⑥，ｃｙｃｌｏｐｈｏｌｉｄｏ∞ｌ⑦。结论化合物ｌ一４为首次从该属植物分离得到；化合物５为首次从该种植物中分离得到。

关键词：石仙桃；化学成分；兰科

中图分类号：Ｒ２８４．１文献标识码：Ａ文章编号：１００８旬８０５（２００９）０４明２２旬２

ＳｔｕｄｉｅｓｏｎｔｈｅＣｈｅｍｉｃａｌＣｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ

ｏｆ用ｌＤＺ洳细咖伽Ｐ咒豳Ｌｉｎｄｌ．

ｕＮＬｉ－ｃｏｎ９１，ｚＨＡＮＧＹｉ－ｐｉｎ９２，ｗｕｃｈｕｎ－ｍｉｎ¨，ｗＡＮＧＹｏｎ矿

（１．Ｆ够口，ｌ加疵姚旷Ａｑ础幻Ｐｒｏｄ删讥胁．Ｉｌ加疵ｒ，Ｆ砒ｏｕ３５０００ｌ，劬ｉＭ；２．死ｉ趔胁觑ｔｅ矿００眦，嘲即一ｐ砂矿跏把Ｄ唧，ｌ缸Ａｄｍｉ几括￡ｒ０砌ｎ，Ｘ谊础ｎ３６１００５，铂ｉＭ；３．凡尬ｎ加玩妣加Ｄｎ蟛ｃＤｍｒｏＺ，凡舶“３５０００ｌ，铂ｉ船）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：ｏｂｊ仪＝ｔｉｖｅＴｂｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔＩｌｅｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆ‰ｆ谢Ｄ抛ｃＩ｜ｌｉ聊ｍ厶Ｌｉｎｄｌ．Ｍｅ山饿ｋＴｈｅ

ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ

ｗｅ陀ｉ∞ｌａ－

ｔｅｄｂｙｒｅｐｅａｔｅｄｓｉｌｉｃａｇｅｌｃｈｍｍａｔｏｇ阻ｐｈｙ，曲ｄｗｅｒｅｅｌｕｃｉｄａｔｅｄｂｙｃｈｅｍｉｃａｌａｎｄｓｐｅｃｔｒａｌ锄ａｌｙｓｉｓ．Ｉ她Ｉｌｌｔｓｓｅｖｅｎｃｏｍｐｏｕｎｄｓｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｂｍｔ｝ｌｅｅｔ｝ｌｙｌａｃｅｔａｔｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅｌｅ“ｏｆＰ．ｃ＾ｉ聊ｍ蠡．锄ｄｉｄｅｎｔｍｅｄａｓ４，４’一Ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｄｉｐｈｅｎｙｌｍｅｔｈａｎｅ①，Ｐｒｏｔｏ．ｃ砒ｅｃｈｕｉｃａｌｄｅｈｙｄｅ②，ｐ—ｈｙｄｍｘｙｂｅｎｚｙｌａｌｃｏｈｏｌ③，ｐ—ｈｙｄｒｏｘｙｂｅｍａｌｄｅｈｙｄｅ④，Ｂ—ｄａｕｃｏｓｔｅｒｏｌ⑤，ｃｙｃｌ叩ｈｏｌｉｄｏｎｅ⑥锄ｄｃｙ－ｃｌｏｐｈｏｌｉｄｏｎｏｌ⑦．Ｃ叩ｄ吲∞Ｆｏｒｔｈｅｆｉｒｓｔｔｉｍｅ，ｃｏｍｐｏｕｎｄｓＩ—ＩＶｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｍｍ眦ｚ协纽卸ｄｃｏｍｐｏｕｎｄＶｗ船ｉｓｏｌａｔｅｄｆ而ｍＰ『ｌＤｆｉｄＤ纪砒ｉ聊琊括Ｌｊｎｄｌ．．

ＫｅｙｗＯｒｄｓ：Ｐ胁ｆ讹ｍ如ｉ耻瑙厶“ｎｄｌ．；Ｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔ８；Ｏｒｃｈｉｄａｃｅａｅ

石仙桃系兰科石仙桃属植物石仙桃‰ｚ矗细。如ｉ聊ｍ蠡Ｌｉｎｄｌ．的全草，俗称石上莲、石橄榄、石穿盘等，始载于《生草药性备要》。其性甘味凉，具有养阴、清热、利湿消瘀的功效，民间常用来治疗高血压病、头晕和各种原因引起的头痛…。本文报道从石仙桃叶子中分离鉴定了７个化合物，通过理化性质和波谱数据分析鉴定为：４一（４一羟基一苄基）苯酚①、原儿茶醛②、天麻苷元③、对羟基苯甲醛④、Ｂ一胡萝卜苷⑤、Ｃｙｃｌ叩ｈｏｌｉｄｏｎｅ⑥、ｃｙ．ｃｌ叩ｈｏｌｉｄｏｎｏｌ⑦。其中化合物ｌ～４为首次从该属植物中分离得到，化合物５为首次从该种植物中分离得到。

收稿日期：２００８旬３?１８；修订日期：２００８ＪＤ９．１６

基金项目：福建省科技攻关重点项目（Ｎｏ．２００４Ｙ３１）

作者简介：林丽聪（１９８２一），女（汉族），福建莆田人，现任福建省淡水水产研究所实习研究员，硕士学位，主要从事药物分析研究工作．

‘通讯作者简介：昊春敏（１９“．），女（汉族），福建福州人，现任国家海洋局第三海洋研究所主任药师，硕士研究生导师，硕士学位，主要从事中药活性成分及质量控制研究工作．

?９２２?ｌ仪器与材料

ＹＲＴ一熔点仪（天津大学精密仪器厂）、紫外分光光度计（ｎｅｎＩｌｏｅｖｏｌｕｔｉｏＩｌ３００）、红外光谱仪（１＇ｈｅｍｌｏＦＡＴ一３３０）、核磁共振光谱仪（ＢＲｕＫＥＲ０Ｒｘ一５００型超导核磁共振仪测定，ＴＭＳ为内标）、质谱仪（ＶＣＡｕｔｏｓｐｅｃ一３０００，ＥＩ源，７０ｅＶ）。柱层析硅胶（６０～８０目，１００一２００目）和薄层层析硅胶（ＧＦ２５４）均购白青岛海洋化工厂。实验药材于２００６旬８采白福建武平。经福建省药品检验所金鸣副主任药师鉴定为石仙桃‰ｆｉ如￡Ⅱ以ｉ聊瑚厶“ｎｄｌ．，

样品保存于福建省药品检验所标本室。

２方法与结果

２．１提取与分离新鲜石仙桃叶子１０ｋｇ，切碎，用８０％的乙醇浸渍提取３次，减压回收乙醇至无醇味，加适量水悬浮，依次用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取。醋酸乙酯萃取部分回收溶剂得浸膏１８９ｇ，经反复硅胶柱色谱，以石油醚一醋酸乙酯进行梯度洗脱，得到化合物Ｉ（８５ｍｇ），ＩＩ（１４０ｍｇ），ＩＩＩ（６２ｍｇ），ＶＩ（２０ｍｇ），Ｖ（２ｌＯｍｇ），ＶＩ（４０ｎｌｇ）和ＶＩＩ（１５ｍｇ）。

２．２结构鉴定

本文来源：https://www.bwwdw.com/article/iq4e.html