乌头汤治疗类风湿性关节炎的药效学及作用机理研究

广州中医药大学

硕士学位论文

乌头汤治疗类风湿性关节炎的药效学及作用机理研究

姓名：陈少珍

申请学位级别：硕士

专业：方剂学

指导教师：何国樑

20060501

中文摘要

类风湿性关节炎（ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄａｒｔｈｒｉｔｉｓ，ＲＡ）是一种慢性炎症性疾病，是以对称性多关节炎病变为主要临床表现的全身性自身免疫性疾病。其特点是关节滑膜的慢性炎症、软骨吸收、骨质破坏和骨质纤维化。类风湿性关节炎在各年龄中均可发病，成人中多发于中年女性。本病为慢性、进行性、侵袭性疾病，如不给予适当的治疗，病情会逐步发展加重，造成对骨关节的破坏，最后导致关节强直、畸形、功能丧失。同时心、肺、肾、动脉、神经及眼等脏器也可受累。

ＲＡ的发病机制虽不十分清楚，但近年来通过临床与实验研究，认为ＲＡ是一种自身免疫性疾病，因其能够解释许多临床现象和症状，且逐渐被基础研究所证实，目前免疫发病机制已被普遍接受。ＲＡ的发病机制主要由细胞免疫和体液免疫协同作用占主导地位，近年来研究表明细胞免疫作用似更突出，因为在滑膜浸润的炎症细胞中，Ｔ淋巴细胞比Ｂ淋巴细胞数量多，在炎症部位的关节液中可测到多种细胞因子，其中最突出的是白介素一１（ＩＬ一１）和肿瘤坏死因子一ａ（ＴＮＦ—ｎ）其作用可促使前列腺素代谢，引起炎症变化；促进胶原酶产生，造成关节破坏、骨和软骨吸收；使肝细胞合成急性期蛋白，导致发热；同进也促使分泌某些细胞因子如ＩＬ－＿６等，加重ＲＡ炎症和关节破坏。

乌头汤出自《金匮要略》，是张仲景创制的一首名方，也是治疗风寒湿痹的代表方。《金匮 中风历节病脉症并治第五》记载：“病历节不可屈伸疼痛，乌头汤主之。”乌头汤素以温经祛寒，除湿止痛之效著称，为“治寒湿历节之正治也”。原方由麻黄、芍药、黄芪、甘草、川乌组成，药味简单，君臣佐使关系明确。历代医家用乌头汤治疗痹证均取得显著疗效；现代Ｉｆ岛床研究报导，该方可用于类风湿性关节炎等疾病的治疗，均获得明显疗效。

为探讨乌头汤治疗类风湿性关节炎的药理、药效机制，本课题从乌头汤的镇痛抗炎实验及对佐剂性关节炎大鼠的原发性、继发性病变、血液流变学、免疫器官及Ｔ淋巴细胞亚群的变化进行了动物实验研究，并以西药甲氨喋呤（ＭＴｘ）作为对照，以弗氏完全佐剂造成佐剂性关节炎大鼠模型。

本课题的研究结果显示：

１、乌头汤的抗炎镇痛作用

乌头汤对二甲苯、蛋清所致急慢性炎症有明显抑制作用，能提高小鼠痛阂值，减少醋酸所致小鼠扭体次数，有明显的抗炎镇痛作用：对佐剂性关节炎大鼠的原发性、继发性关节炎的肿胀有显著的防治作用，其抗炎、镇痛、消肿作用可能是其治疗类风湿性关节炎的部分药理学基础。２、对佐剂性关节炎大鼠血液流变学的影响

本实验的血液流变学结果显示ＡＡ大鼠的血液流变学指标明显异常。表现为全血粘度、还原粘度、血浆粘度、压积、血沉方程Ｋ值都明显增高。经乌头汤治疗后全血粘度、还原粘度、血浆粘度、压积、血沉方程Ｋ值都有明显降低，而血浆粘度和血沉则无明显下降，说明乌头汤治疗ＲＡ主要是通过降低全血粘度、血浆粘度、压积等来改善血液流变性，从而达到活血化瘀的作用。

３、对免疫器官及Ｔ淋巴细胞亚群的影响

本实验观察到从大鼠存着明显的细胞免疫异常，主要为抑制性Ｔ细胞功能低下，辅助性Ｔ细胞功能相对亢进。从实验结果来看，ＡＡ大鼠的外周血Ｔ淋巴细胞亚群明显失调，表现为ＣＤ８细胞明显偏低，ＣＤ４细胞水平及ＣＤ４／ＣＤ８显著升高，经乌头汤治疗后，从大鼠ＣＤ８升高，ＣＤ４降低、及ｃＤ４／ｃＤ８的比值下降。因此，乌头汤对Ｔ淋巴细胞亚群的影响主要是通过调节辅助性Ｔ淋巴细胞（ＣＤ４）和抑制性Ｔ淋巴细胞（ＣＤ８）的功能来实现的。

本课题以乌头汤为处理因素，以ＡＡ大鼠为受试对象，通过镇痛抗炎实验、血液流变学、Ｔ淋巴细胞亚群等实验，从药理学及分子生物学的角度探讨了鸟头汤治疗ＲＡ的药效学及作用机理，实验结果初步提示其治疗ＲＡ的机理与其具有镇痛抗炎作用、改善血液流变及调节Ｔ淋巴细胞亚群有关。

关键词：乌头汤；类风湿性关节炎；佐剂性关节炎大鼠：药效学；作用机制

ＥｆｆｅｃｔｏｆＷｕＴｏｕＤｅｃｏｃｔｊｏｎ

ａｎｄｏｎｒｈｅｕｍａｔｏｉｄａｒｔｈｒｉｔｉｓｍｓｉｔｓｐｏｓｓｉｂＩｅｍｅｃｈａｎｉ

ＳｐｅｃｉａＩｉｔｙ：ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙｏｆ

Ａｕｔｈｏｒ：ＣｈｅｎＳｈａｏｚｈｅｎ

Ｔｕｔｏｒ：ＨｅＧｕｏｌｉａｎｇｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃａｌｆｏｒｍｕｌａｅ

Ａｂｓｔｒａｃｔ

Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ

ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄ

ｉｓｄｉｆｆｉｃｕｌｔａｓａｒｔｈｒｉｔｉｓ（ＲＡ）ｉｓｐｅｒｉｐｈｅ））））ｒａｌｃｒｕｅａｃｈｒｏｎｉｃａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙｄｉｓｅａｓｅｍａｉｎｌｙｉｔｓｙｍｍｅｔｒｉｃａｎｄｐｏｌｙａｒｔｉｃｕｌａｒｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅｄｉｓａｂｉｌｉｔｙａｎｄｔｏｔｏｔａｌｌｙ，ｈａｖｉｎｇ

ｃａｕｓｅｎｏｒｉｎｃｒｅａｓｅｄｍｏｒｔａｌｉｔｙ．Ｎｅｉｔｈｅｒｔｈｅ

ｈａｓｂｅｅｎｋｎｏｗｎｔｈａｔ

ｐａｒａｍｅｔｅｒｓｏｆｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＲＡｉｓｅｎｔｉｒｅｌｙｃｉｅａｒ．Ｉｔｔｈｅｄｉｓｅａｓｅ．ＳｏｍｅｏｆｉｍｍｕｎｅｓｙｓｔｅｍｈａｓｃｌｏｓｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｗｉｔｈｔｈｅｉｍｍｕｎｅｓｙｓｔｅｍｃａｎｓｕｇｇｅｓｔｔｈｅｃｈａｎｇｅｓａｎｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓＲＡ．

ＷｕＴｏｕＤｅｃｏｃｔｉｏｎｉｓａｃｌａｓｓｉｃａｌｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎｔｒｅａｔｉｎｇａｒｔｈｒａｌｇｉａｓｙｎｄｒｏｍｅｓｗｈｉｃｈｉｓｉｎｖｅｎｔｅｄｂｙｔｈｅｍｏｓｔｆａｍｏｕｓａｎｃｉｅｎｔｄｏｃｔｏｒｏｆＣｈｉｎａ—ＺｈａｎｇＺｈｏｎｇｊｉｎｇａｎｄｈａｓｈａｄｏｕｔｓｔａｎｄｉｎｇｅｆｆｅｃｔｓｆｏｒｍｏｒｅｔｈａｎｏｎｅｔｈｏｕｓａｎｄｙｅａｒｓ．Ｔｈｅｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎｈａｓｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆｃｌｅａｒｉｎｇｈｅａｔａｎｄｒｅｌｉｅｖｉｎｇｄａｍｐｎｅｓｓ

ｔｈａｔ：Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆ

１．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｔｈｉｓｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｉｎｄｉｃａｔｅｏｆａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，ａｎａｌｇｅｓｉａ，ｒｅｌｉｅｖｉｎｇｓｗｅｌｌｉｎｇ

ｃａｎＷｕＴｏｕＤｅｃｏｃｔｉｏｎ

ｅｇｇｒｅｓｔｒａｉｎａｃｕｔｅａｎｇｃｈｒｏｎｉｃｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎｒｅｓｕｌｔｅｄｆｒｏｍｏｕｔｓｔａｎｄｉｎｇａｎｔｉ—ｉｎｆｌａｍａｔｏｒｙａｎｄｄｉｍｅｔｈｙｌｂｅｎｚｅｎｅ（ＤＭＢ）ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ，ｈａｓ

ｃａｎａｎａｌｇｅｓｉｓａｃｔｉｏｎ．Ｉｔｄｅｆｅｎｄａｎｄｔｒｅａｔｔｈｅｐｒｉｍａｒｙａｎｄｓｅｃｏｎｄａｒｙａｒｔｈｒｉｔｉｓ

ａｒｅｏｆＡＡｒａｔｓ．Ａｌｌｏｆｔｈｅｓｅ

ｂａｓｉｓｐｏｓｓｉｂｌｙｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄｔｏｔｈｅｐａｒｔｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｏｆｔｒｅａｔｉｎｇＲＡ．

ｅｆｆｅｃｔｏｆｈｅｍｏｒｒｈｅｌｇｙ

ｓｈｏｗｔｈａｔｉｎｔｈｅｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ２．ＴｈｅＴｈｅｒｅｓｕｌｔｏｆ从ｒａｔｓ’ｈｅｍｏｒｒｈｅｏｌｇｙｔｈｅ

ｎｕｍｅｒｉｃａｌｖａｌｕｅｉｓｍｕｃｈｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｎｏｒｍａｌｇｒｏｕｐ．ＴｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｄａｔａｉｎｄｉｃａｔｅｔｈａｔＷｕＴｏｕＤｅｃｏｃｔｉｏｎ

ｖｉｓｃｏｓｉｔｙｏｆＡＡ

ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ

３．ＴｈｅｃａｎｒｅｄｕｃｅｒａｐｉｄｌｙｔｈｅＷｈｏｌｅｂｌｏｏｄｖｉｓｃｏｓｉｔｙ，ｒｅｄｕｅｔｉｏｎｔｈｉｓｒａｔｓ．ｉｍｐｒｏｖｅｂｌｏｏｄｓｔａｓｉｓ．Ｔｈｅａｂｏｖｅｄａｔａｓｈｏｗｔｈａｔｏｆａｃｔｉｖａｔｉｎｇｏｎｈａｓｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎｂｌｏｏｄｆｌｏｗ．ｒｏｕｔｉｎｅｃｕｒａｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔａｄｊｕｖａｎｔ从ｒａｔｓ

ｏｎＴｈｅｓｕｂｊｅｃｔｍａｉｎｌｙｄｏｅｓｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｎｔｈｅｕｍｍｕｎｅｃｅｌｌｓ—Ｔ

ｃｅｌｉｓ（ＣＤ４ａｎｄＣＤＳ）．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄＷｕＴｏｕＤｅｃｏｃｔｉｏｎｈａｓｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎｔｏＩＩＩ

ｒｅｇｕｌａｔｅｔｈｅｉｍｍｕｎｅｓｙｓｔｅｍ．ＷｕＴｏｕＤｅｃｏｃｔｉｏｎｃａｒｌｉｎｃｒｅｓｅｔｈｅａｍｏｕｎｔｏｆＣＤ８（Ｔｓ

ＡＡｃｅｌｌ）．Ａ１１

ｒａｔｓ，ｓｏｔｈｅｓｅｆｕｎｃｔｉｏｎｓｗｉｌｌｄｅｐｒｅｓｓｔｈｅｈｙｐｅｒａｃｔｉｖｅｉｍｍｕｎｅｓｙｓｔｅｍｏｆｔｈｅｓｙｍｐｔｏｍｓｃａｎｂｅｒｅｌｉｅｖｅｄａｎｄｔｈｅｄｉｓｅａｓｅｃａｎｂｅｔｒｅａｔｅｄ．

ＴｈｉｓｓｕｂｊｅｃｔｔａｋｅｓｔｈｅＷｕＴｏｕＤｅｃｏｃｔｉｏｎ

ｔｈｅＡＡｒａｔｓｔｏｔｏｂｅｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｆａｃｔｏｒａｎｄｔａｋｅｓｂｅｔｈｅｔｅｓｔｅｄａｎｉｍａｌｗｈｉｃｈｉｓｆｏｒｍｅｄｂｙｉｎｊｉｅｔｉｎｇＦｒｅｕｎｄｓａｄｊｕｖａｎｔ．Ｔｈｅｓｔｕｄｙｏｆｔｈｅｓｕｂｊｅｃｔｅｘｐｌａｉｎｓｔｈｅａｃｔｉｏｎｍｅｃｈａｎｉｓｍｆｒｏｍｔｈｅｉｍｍｕｎｅｐｏｉｎｔ．

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＷｕＴｏｕＤｅｃｏｃｔｉｏｎ：ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄａｒｔｈｒｉｔｉｓ：ａｄｆｕｖａｎｔａｒｔｈｒｉｔｉｓ（ＡＡ）ＩＶ

广州中医药大学学位论文原创性声明

本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下．独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经特别加咀注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。

鬻器捌簿日期：口‘年多百≥ｌ占

关于学位论文使用授权的声明

本人完全了解广州中医药大学有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权广州中医药大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。

（保密论文在解密后应遵守此规定）…～麟…师签缈Ｅｌ期：“年岁，Ｅｌ；ＩＥｌ

乌头汤治疗类风湿性关节是的药效学及作用机理研究

引言

类风湿关节炎（ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄａｒｔｈｒｉｔｉｓ，ＲＡ）是一种以关节滑膜慢性炎症性病变为主要表现的难治性自身免疫性疾病，其患病率居自身免疫性结缔组织病首位。该病各年龄段均可发生，女性发病率高于男性２～３倍，且发病高峰期在４０～６０岁。本病是以对称性关节肿痛、晨僵、变形、功能受限为特征的慢性全身性病证，致畸、致残率高。由于ＲＡ的发病原因和病理机制还不十分清楚，目前尚无世界公认的根本治疗药物。众多药物如非甾体类药物消炎痛、布洛芬等只能消炎止痛、缓解症状，不能缓解病情；而慢作用药、免疫抑制剂如甲氨喋呤等虽能部分缓解病情，但长期应用副作用大，对患者的健康有伤害。

近年来，随着科学技术的发展，对ＲＡ认识的提高、研究的深入，特别是受人类回归自然、崇尚天然的感召，中医学对ＲＡ的治疗在前贤辨证论治的基础上，结合现代科学研究成果，逐渐形成了新的治疗方法，近年来已引起了国际风湿病学界的普遍关注，也受到患者的欢迎。

乌头汤出自《金匮要略》，是张仲景创制的一首名方，也是治疗风寒湿痹的代表方。《金匮 中风历节病脉症并治第五》记载：“病历节不可屈伸疼痛，乌头汤主之。”乌头汤素以温经祛寒，除湿止痛之效著称，为“治寒湿历节之正治也”。原方由“麻黄、芍药、黄芪、甘草（炙）各三两，川乌五枚”组成。方中君药乌头重在温经祛湿，散寒止痛。我们以久煎破坏其毒性强烈的乌头碱成分，却保持其优良的祛寒止痛之力，故选用制川乌。臣药麻黄长于辛温宣散，与乌头相伍，可通经络、利关节，祛风散寒除湿：佐以黄芪益气补中，与散寒除湿药相合，对气虚而寒湿留伏日久者，有扶正祛邪，益气蠲痹之功；白芍敛阴、柔肝、养筋，与甘草合用有缓急止痛之效，以利关节筋骨之屈伸。

历代医家用乌头汤治疗痹证均取得显著疗效；现代临床研究报导，该方可用于类风湿性关节炎等疾病的治疗，均获得明显疗效；现代药理研究也证明方中五昧药物都具有不同程度的抗炎镇痛作用。且该方药物组成只有五味，相对简单，君臣佐使关系明确，配伍精当。本课题从实验研究角度观察乌头汤对佐剂性关节炎大鼠的治疗作用，探讨乌头汤治疗ＲＡ的作用机理，为ｌ临床应用提供实验依据。

乌头汤治疗类风湿性关节炎的药效学及作用机理研究

第一章文献研究

第一节现代医学对类风湿性关节炎的认识

类风湿性关节炎（简称“类风关”或ＲＡ），是一种以关节和关节周围组织的非感染性炎症为主要病变的一种慢性自身免疫性疾病，其关节症状特点为关节腔滑膜发生炎症、渗液、细胞增殖、血管翳（肉芽肿）形成，软骨及骨组织破坏，最后关节强直，关节功能丧失。据统计ＲＡ在国外患病率平均１％左右，国内无精确统计，据１９８４年东北、北京及汕头等地调查，其发病率在０．２４％～０．５％左右，似较国外为低０１。ＲＡ以青壮年较多，好发年龄在２０～４５岁。ＲＡ的发病率和致残率较高，不但严重影响患者的生活质量，使患者丧失劳动能力，也加重了国家的医疗负担。

１．发病原因

对ＲＡ病因学的研究已深入到免疫病理、分子生物学水平，但对其发病原因至今尚未完全明确。一般来说，ＲＡ的发病与病原微生物（细菌、病毒、支原体及衣原体）感染及其抗原密切相关，但迄今尚未明确地从病人血与滑膜液中找到活的病原微生物，多数学者认为病原微生物在ＲＡ发病中起始动作用“１。此外，大多数学者认为ＲＡ与自身免疫因素、遗传因素、以及其他一些因素如寒冷、潮湿、外伤、营养不良、精神刺激有关。目前许多研究已显示，ＲＡ为多种因素诱发自身免疫反应而致病０３。２．发病机制

ＲＡ的发病机制虽不十分清楚，但近年来通过临床与实验研究，对ＲＡ发生机理，特别是在免疫学、遗传学方面研究逐步深入，已达到细胞、亚细胞和分子水平，认为ＲＡ是一种自身免疫性疾病，因其能够解释许多临床现象和症状，且逐渐被基础研究所证实，目前免疫发病机制已被普遍接受。其发病过程为：在免疫反应的初发阶段，机体在某一未知抗原（如细菌、病毒、支原体及衣原体等病原微生物）以及环境因素（潮湿、寒冷、创伤等）作用下，Ｔ淋巴细胞功能失调，浆细胞产生特殊的抗体！ｇａ，这种ＩｇＧ发生变性从而获得抗原性，然后刺激机体产生ＩｇＭ、ＩｇＧ抗体，即类风湿因子（ＲＦ）。ＲＦ又与关节滑液中自身变性的ＩｇＧ结合，形成抗原抗体复合物，沉积在滑膜和滑液中，从而激活补体系统，释放趋化因子等，使大量的中性粒细胞、巨噬细胞进入关节滑膜和滑液中进行活跃的吞噬。中性粒细胞吞噬了与补体相结合的免疫复合物后，便形成了类风湿细胞。后者在吞噬过程中释放了高浓度的溶体酶，导致关节软骨破坏；在免疫反应的延继，关节内免疫反应炎症渗出物的炎细胞不仅破坏关节组织，而且尚可与关节组织发生活跃的细胞相互作用。它们可生成大量的刺激因子，作用于滑膜细胞，有人认为甚至包括软骨细胞和骨细胞，使之活化生成并释放大量的胶原酶等蛋白水解酶及炎性介质前列腺素，这些物质的释放不仅加重了关节局部炎症，使软骨破坏和骨侵蚀，引起关节畸形，造成了关节组织不可逆的破坏。ＲＡ的发病机制主要由细胞免疫和体液免疫协同作用占主导地位，近年来研究表明

广州中医药大学２００６届硕士学位论文

细胞免疫作用似更突出，因为在滑膜浸润的炎症细胞中，Ｔ淋巴细胞比Ｂ淋巴细胞数量多，在炎症部位的关节液中可测到多种细胞因子，其中最突出的是白介素一１（ＩＬ一１）和肿瘤坏死因子一ａ（ＴＮＦ—ａ）其作用可促使前列腺素代谢，引起炎症变化；促进胶原酶产生，造成关节破坏、骨和软骨吸收：使肝细胞合成急性期蛋白，导致发热：同时也促使分泌某些细胞因子如ＩＬ一６等，加重ＲＡ炎症和关节破坏。总之，ＲＡ的可能发病机理可以概括为：具有某种遗传背景的人受某种或多种致病生物因子刺激，在外界寒冷等诱因的作用下侵入人体，从而引起滑膜、软骨以致骨的损伤和变质，而变质的自身组织进而引起全身广泛的自身免疫反应。

３．病理改变训

（１）关节的基本病理改变：ＲＡ的关节基本病理改变是滑膜炎。早期滑膜充血水肿，有中性粒细胞浸润，稍后则淋巴细胞、巨噬细胞、单核细胞、浆细胞及树突样细胞浸润，关节腔大量渗液，使关节明显肿大。以后滑膜增生，肉芽组织形成。由于伴有不同程度的血管炎，滑膜高度增生变厚形成肉芽血管翳。血管翳向关节腔内的软骨面生长，发生粘连。血管翳有免疫球蛋白及多种细胞浸润，因而释放许多炎性介质、多种酶及细胞因子，刺激破坏软骨，对关节软骨、骨、韧带、关节囊和基质的胶原基本质产生侵蚀作用。另外，由于软骨受血管翳包裹不能正常与滑液接触，影响其营养代谢，最终使软骨、骨遭到破坏，终至关节面融合，发生纤维化，关节错位、畸形、强直。

（２）系统病理改变：ＲＡ的关节外病理改变主要为血管炎和血管周围炎的结果。血管炎可广泛存在，受累的多为小动脉。在受压或易磨擦部位的皮下或骨膜上，形成所谓类风湿结节。类风湿结节实际上是血管炎基础上发生的一团坏死组织，内含纤维素和免疫复合物，周围为栅状排列的组织细胞，外围为单核细胞和肉芽组织。这种类风湿结节也可见于心包、心肌和心内膜和肝内等，引起相应症状。

４．治疗方法

由于本病病因仍未得以揭示，这就使得以病因治疗为主要原则的西医在ＲＡ治疗上举步维艰。当今国内外治疗药物和方法种类繁多，但仍停留于对炎症及后遗症的治疗，尚无一种能真正控制疾病的药物。

西医治疗ＲＡ的主要目的是：①缓解疼痛；②减轻炎症：③减少不必要的副作用；④阻止不可逆的骨改变，尽可能保护关节、肌肉的功能；⑤尽可能改善患者的生活质量。其中控制病情，阻止不可逆的骨改变是治疗的关键。１。

４．１一般治疗：急性期必须卧床休息，症状基本控制后，应尽早进行主动的和／或被动的功能锻炼，尽可能地保存关节的功能，加强肌肉的力量。饮食中应注意摄入足够量的蛋白质及维生索”’。

４．２药物治疗：，

（１）非甾体类抗炎药（ＮＳＡＩＤｓ）：为治疗本病首选药物，又称为一线药物，为非特异性的对症治疗。主要是通过抑制前列腺素解除急性期疼痛和炎症。小剂量只有止

乌头汤治疗类风湿性关节炎的药效学及作用机理研究

痛作用，大剂量则有抗炎作用。这类药物包括水杨酸类、吲哚类、丙酸类、苯乙酸类及噻嗪类。但是这些消炎镇痛药长期使用会引起胃肠道不良反应，而且并不能改变疾病进程或关节破坏，因此不能作为ＲＡ治疗的单一药物。

（２）二线类药物（ＤＭＡＲＤｓ）：又称改变病情的抗风湿药，能改善病情并延缓骨关节破坏。包括抗疟药（如氯喹、羟氯喹）、金制剂、青霉胺、柳氮磺胺毗啶、雷公藤及免疫抑制剂（如甲氨喋呤、环磷酰胺、硫唑嘌呤、环孢素Ａ）等。适用于经过一线药物治疗，而且不能控制病情者。

甲氨喋呤（ＭＴｘ）具有免疫抑制与抗炎症的作用，国外近年来应用较环磷酰胺广泛，认为见效较快（４～６周），副作用并不比环磷酰胺高，而远期无致癌作用。主张小剂量静脉滴注，但口服片剂方便、安全，每周服１次，剂量由７．５～ｌＯｍｇ为宜。副作用有恶心、呕吐、口腔溃疡、腹泻、白细胞减少、药物性间质性肺炎、肝脏纤维化等。肝、肾损害者及孕妇不宜应用。

（３）三线药——肾上腺皮质激素：此类药物可通过对不同环节的影响，干扰炎症反应和免疫作用，对缓解关节肿痛、控制炎症作用迅速，但效果不持久，不能根治ＲＡ，也不能抑制病变的发展。一旦减量或停药，短期内即可复发。长期应用还可出现严重的副作用以及对此类药物的依赖性，并可加重ＲＡ患者的骨质疏松，增加机会性感染和无菌性骨坏死的可能。

（４）生物物剂与免疫疗法：目前已上市或正在研究的生物制剂主要有四大类，即①针对炎细胞趋化过程的生物制剂；②针对Ｔ细胞功能的生物制剂；③针对细胞因子的生物制剂；④针对滑膜细胞增生的生物制剂。总的说来生物制剂具有药理作用环节选择性高、毒副作用较小的优点，但在治疗ＲＡ过程中也存在一定的问题，如异蛋白反应，对其疗效评价较困难，尤其部分药物近期疗效报告不一，远期疗效不详，且生物制剂作用复杂，部分药物有可能产生不良生物反应等“１。

４．３其他治疗：骨髓移植、血液净化、外科手术等。

由于西药在ＲＡ的治疗方面存在副作用较大、副作用发生率较高的缺陷，因此广大的药物工作者把研究的目光投向中医药，研制副作用少而有效的抗ＲＡ中药制剂具有广阔的前景。

第二节祖国医学对ＲＡ的认识

祖国医学并无类风湿性关节炎这一病名，但根据类风湿性关节炎的临床表现，可将其归属痹证范畴，相当于“历节”、“鹤膝风”、“顽痹”、“骨痹”等病。如《济生方》：“白虎历节……其病昼轻夜重，病痛彻骨，痛如虎啮，故名白虎也。”《金匮要略 中风历节篇》云：“诸肢节疼痛，身体旭赢，脚肿如脱。”《证治准绳》：“两手十指，一指痛了一指痛，痛后又肿，骨头里头痛，膝痛，左膝痛了右膝痛，发时多则五日，少则三日，昼轻夜重，痛时发热……”《内经》有“伤于寒湿，病在骨，骨重不可举，

广州中医药大学２００６届硕士学位论文

骨髓酸痛，寒气在，名日骨痹”等等，这些描述都与类风湿性关节炎的临床症状非常相似。

八十年代以来，中医中药以其疗效稳定、无毒副作用等优点，越来越引起学者的重视。本文拟从以下几个方面对近年来中医中药治疗ＲＡ的研究动态进行综述。１．病因病机

《素问 痹证》开篇即言“痹之安生？岐伯对日：风寒湿三气杂至，合而为痹”，又言：“不与风寒流湿气和，故不为痹。”历代一些医家多将此视为痹证的总病机。但ＲＡ的病情顽固、迁延难愈、疼痛遍历周身多个关节，又有别于一般的痹证，是痹证中的特殊类型，“三气”说尚不能完全解释ＲＡ的病因病机。

本病病位主要在骨、关节、筋脉、肌肉。肝主筋，肾主骨，筋骨既赖肝肾精血津液的充养，又赖于肝肾阳气的温煦。因此，本病外因是感受风寒湿热之邪、居处潮湿、冒雨涉水、气候骤变、冷热交错等等原因，以致邪侵入体，注于经络，留于关节，痹阻气血而发病；内因禀赋素亏，荣血虚耗，气血不足，肝肾亏损，或病后、产后机体防御能力低下，再若劳后汗出当风，或汗后冷水淋浴等，外邪乘虚而入，痹阻脉络，流注关节，病久邪留伤正，致肝、脾、肾三脏受损，使脏腑气血阴阳随之而亏，出现气血不足、肝肾亏虚之候，并可因之造成气血津液运行无力而成瘀阻或痰凝。痰瘀互结而使关节肿大、强直、变形。

ＲＡ的病因病机可以概括为素体本虚，气血不足，肝肾亏损，风寒湿邪痹阻脉络流注关节，致痰凝血瘀，痰瘀互结，痹阻经络，深入骨节脚。

２．辨证论治

辨证论治是祖国医学的精髓。因人因时因地制宜，反映了中医治病的灵活性。郭凤莲。１根据ＲＡ的症状、体征与实验室检查，将其分为急性活动期、恢复期、缓解期三期。急性活动期又分为风湿热型、风寒湿型；风湿热型用苍术、黄柏、惹苡仁、木瓜、防风、忍冬藤、虎杖、威灵仙；风寒湿型以桂枝附予汤加减，药用桂枝、附子、白术、防风、羌活、川芎、乌梢蛇。恢复期分为瘀热伤阴型、寒湿伤阳型；瘀热伤阴型药用生地、熟地、白芍、山茱萸、知母、黄柏、鸡血藤、地龙、秦艽；寒流湿伤阳型药用制附子、杜仲、桂枝、黄芪、当归、续断、淫羊藿、桑寄生、防己、苍术等。缓解期分为缓解阳虚型和肝肾阴虚型；缓解阳虚型药用党参、茯苓、白术、薏苡仁、山药、附子、山茱萸、杜仲、桑寄生、木瓜等；肝肾阴虚型药用生地、山茱萸、山药、牡丹皮、白芍、知母、枸杞子、地骨皮、酸枣仁、忍冬藤等。钟力０１分二型论治：风寒湿痹型用类风湿１号方治疗，方由制川乌、制草乌、桂枝、麻黄、细辛、黄芪、防己、当归尾、红花、蜈蚣、雷公藤组成；风湿热痹型用类风湿２号方治疗，方由青蒿、地骨皮、桑枝、土茯苓、防己、防风、黄柏、钩藤、地龙、牡丹皮、生地、黄芪、羚羊角、雷公藤组成。商宪敏等”１提出ＲＡ常见证治有六型：风寒湿痹型，治宜祛风散寒、除湿通络，方用麻黄附子细辛汤合桂枝汤加减；风湿热痹型，治宜清热祛风、利湿通

乌头汤治疗类风湿性关节炎的药效学及作用机理研究

络，方用白虎汤合宣痹汤加减；寒热错杂型，治宜祛寒清热、散风除湿、通经活络，方用桂枝芍药知母汤加减；痰瘀凝滞型，治宜活血祛瘀、化痰通络，方用身痛逐瘀汤合二陈汤加减：肝肾亏损型，治宜补益肝肾、强壮筋骨，佐以祛风散寒、除湿通络，方用右归丸合独活寄生汤加减；脾肾两虚型，治宜补脾益肾、强身壮骨，佐以散风化湿、温经通络，方用十全大补汤合薏苡仁汤加减。肖甫缓”１将临床ＲＡ病例分为阳证、阴证两大类，阳证以木防己汤、阴证以阳和汤为基础方，随证加减化裁。

辨证施治是中医论治体系的精髓与核心，它能使我们针对疾病的不同类型、不同阶段而予以不同的治疗，从而提高临床疗效。它的优点是针对性强，灵活性大。但对于ＲＡ这种需要长期服药的疾病来说，则又显得费时费力。

３．经验方与专方治疗

专方的选用一般多根据ＲＡ的病因病机，采用经方化裁，或根据临床经验自拟方剂组方。如我校伤寒教研室以桂枝芍药知母汤加减制成“通痹灵”系列中成药，治疗ＲＡ，取得较好的疗效。赵建平０１用风湿宁胶囊（含延胡索、血竭、羌活、独活等）治疗ＲＡ１２０例，２个月为一疗程，结果临床治愈１０例，显效５３例，有效４６例，无效１１例，总有效率为９０．８％。庞学丰“”等用热痹康胶囊（含Ｎ）ｌｌ乌、秦艽、桂枝、威灵仙等）治疗湿热型ＲＡ８６例，４周为一疗程，结果１１５床治愈９例，显效４０例，有效３０例，无效７例，总有效率为９１．９％。范成明“”运用蝎轴散（主要药物有蜈蚣、全蝎、羊踯躅的果实六轴子等）治疗ＲＡ８６例，先连服１周，停５天，再服１周，以后每月服药ｌ周，维持卜５年，结果显效３３例，有效４２例，无效５例，总有效率为９４．２％，治疗效果优于西药对照组。

临床医生亦根据自己多年治疗ＲＡ的临床经验仓，Ｊｌｔｌ０了一些行之有效的经验方。如新独活寄生汤“２１（由黄芪、当归、青风藤等组成）、海蛇风湿灵“”（由海蛇、土鳖虫、细辛等组成）、八花八藤汤ｏ”（由金银花、凌霄花、山茶花等组成）、补通消痹汤“”（由巴戟天、淫羊藿、鸡血藤等组成）临床都取得一定疗效。

运用某一专方或经验方治疗各种类型的ＲＡ，虽有时会有药不对症之虞，但我们认为，只要紧抓住ＲＡ的基本病机，兼顾其他致病因素，这样制定的方药的疗效是比较高的。而且，将某一专方或经验方制成丸、散剂，便于患者长期服用，具有验、便、廉的特点，有较大的临床实用性。

４．单味中药治疗

近年来，随着中药药理的研究，从中药中提取有效成分治疗ＲＡ是中药治疗ＲＡ的一条新途径，且愈来愈显示出其强大的生命力。中药一般以雷公藤、马钱子、川乌、草乌等为主，其疗效特别显著，但同时又存在不同程度的毒副作用，从而限制了该药的广泛应用。其中研究较多的是青风藤，研究表明该药的有效成分与临床广泛使用的治疗ＲＡ的西药及抗风湿中成药相比，具有如下优点：显效快、有效率高、不良反应低、用药范围广，可用于各期ＲＡ的治疗，且具有一定的病因治疗作用。此外，学者

广州中医药大学２００６届硕士学位论文

们还对青风藤进行联合复方、抗炎、镇痛和免疫抑制作用方面的研究，其结果表明该药无论单味使用，还是复方运用、联合用药，都显示出在治疗ＲＡ中的独特优势“…。５．其它疗法

中医药治疗ＲＡ除上述几种方法外，较为常用的还有中药外敷、膏贴、洗浴、熏蒸、穴位埋线、离子导入等。

第三节中药复方治疗ＲＡ的实验研究进展

随着现代科学技术与中医药的相互借鉴、融合，广大医务工作者将先进的实验模型及检测方法运用到动物实验研究中，以期阐明中药抗ＲＡ的药理、药效机制。兹从以下几个方面对中药治疗ＲＡ实验研究概述如下：

１．实验模型的选择

ＲＡ动物模型主要有蛋清性关节炎模型、甲醛性关节炎模型、佐剂性关节炎模型（多选用弗氏佐剂）、胶原诱导性关节炎模型（ＣＩＡ）等。

２．实验检测指标的选择

２．１对免疫调节作用的影响

近几年中医专方专药对ＲＡ免疫调节作用的研究突出，研究内容多涉及淋巴细胞、细胞因子等。淋巴细胞可分为Ｔ细胞、Ｂ细胞、ＮＫ细胞等。Ｔ细胞和Ｂ细胞还可进一步分为若干亚群，它们在功能和表面标志上各不相同。Ｔ细胞可分为四个主要的亚群：即杀伤性Ｔ细胞（ＣＴＬ或Ｔｃ）、抑制性Ｔ细胞（Ｔｓ）、迟发型超敏反应性Ｔ细胞（Ｔ。）、诱导一辅助性Ｔ细胞（Ｔｉ或ｎ）。其中，Ｔ。（ＣＤ４＋）Ｔ和Ｔｓ（ＣＤ８＋）细胞在免疫应答过程中起着十分重要的调节作用。临床上检测患者外周血中Ｔ细胞亚群或Ｔｈ／Ｔｓ比值，有助于了解机体的免疫状态和某些疾病的辅助诊断或发病机制。

卢建华等“”采用大鼠佐剂性关节炎（从）的病理模型来探讨五藤祛风合剂（由青风藤、雷公藤、忍冬藤、蕲蛇等组成）治疗ＲＡ的机理，结果表明其作用机理是抑制Ｔ淋巴细胞亚群Ｃ１）４细胞，提高Ｃ０８细胞的数量和功能，从而调节人体的细胞免疫，抑制Ｂ淋巴细胞产生自身抗体和Ｉｇ，逐步减轻免疫复合物在关节局部的沉积，控制滑膜炎。张育等“”探讨了乌芍制剂（由制川乌、白芍、干姜等组成）抗风湿的作用机制，结果显示乌芍制剂能明显抑制ＴＮＦ～ａ和ＩＬ—ｌＢ的分泌，作用持续至致炎后４周。肖力强“”观察到类风康（由桂枝、麻黄、防风等组成）能抑制佐剂性大鼠关节炎亢进的体液免疫，能增强ＣＩＡ大鼠迟发型免疫反应程度，从而提示其能增强大鼠的细胞免疫功能。

２．２对血液学、血液流变学的影响张立军等“”研究发现历节合剂（由黄芪、赤芍、生地、防风等组成）能使ＡＡ大鼠的全血黏度、高还原黏度（Ｅｂ）、低还原黏度（Ｅｉ）、刚性指数（Ｒｈ）、聚集指数（Ｌｂ）与模型组比较有明显下降，说明历节合剂能改善ＡＡ大鼠血液流变学的浓、黏、凝、

乌头汤治疗类风湿性关节炎的药效学及作用机理研究

聚状态。戴敏等。”通过实验观察到木瓜总皂苷能明显降低从大鼠异常升高的全血及血浆黏度、红细胞的聚集性和纤维蛋白原含量；且具有对抗ＡＡ大鼠凝血时间缩短的作用。

２．３抗炎镇痛作用的研究

现阶段对抗炎镇痛作用的研究，大多仍采用观察药物抑制化学药剂所致的模型动物足或耳肿胀、棉球、滤纸片肉芽肿和醋酸引起扭体反应的方法。

王伟等口２１研究发现当归拈痛汤（由羌活、防风、葛根等组成）高、中、低三个剂量都能减轻ＡＡ大鼠的炎症反应，抑制角叉菜胶引发的大鼠足肿胀，明显延长醋酸引起的小鼠扭体发生时间，减少扭体次数。高崇凯等。”观察发现白芍总苷（ＴＧＰ）粉针剂可明显抑制角叉菜胶引发的大鼠足肿胀和棉球肉芽肿，可显著抑制二甲苯所致辞的小鼠耳肿胀，减少醋酸引起的扭体次数，证明ＴＧＰ粉针剂具有较好的抗炎和镇痛作用。２．４病理学观察

通过在镜下观察药物对模型动物滑膜组织和关节软骨病变的影响，发现治疗ＲＡ的药物能保护滑膜细胞的结构，改善滑膜的炎症情况和减少软骨的破坏。

陈纪藩等。”。５１观察了通痹灵对ＣＩＡ大鼠滑膜组织病理改变和关节软骨病变的影响，发现通痹灵能明显抑制大鼠滑膜组织的炎性细胞浸润、纤维组织增生和巨噬样Ａ型细胞，证明了通痹灵能延缓和减少ＲＡ发病过程中的软骨破坏与炎症反应程度，对ＲＡ的滑膜炎症有较好的治疗作用。

第四节乌头汤概述

乌头汤是东汉时期著名医家张仲景创制的一首名方，《金匮要略 中风历节病》篇日：“病历节不可屈伸，疼痛，乌头汤主之。”原方由“麻黄、芍药、黄芪、甘草（炙）各三两，川乌五枚（口父咀，以蜜二升，煎取一升，即出乌头）”组成，是治疗风寒湿痹的代表方。且该方药物组成只有五味，相对简单，君臣佐使关系明确，配伍精当。１．历代关于乌头汤配伍规律的评述

仲景创制乌头汤两千余年，历代医家对乌头汤的组方配伍规律也颇多心得。清代尤怡在《金匮要略心典》提出：“此治寒湿历节之正法也。寒湿之邪，非麻黄、乌头不能去；而病在筋节，又非如皮毛之邪，可一汗而散者。故以黄芪之补、白芍之收、甘草之缓牵制二物，俾得深入而去留邪。如卫瑾监钟、邓入属，使其成功而及于乱，乃制方之要妙也。”《成方切用》云：“历节病即行痹之属也。乃湿从下受，挟风流注，故或足肿而必发热，且更不可屈伸而疼痛，故以甘芍和阴，麻黄、黄芪通肌肉之阳气，而借川乌之迅发，以行其痹着。”《退思集类方歌注》：“方中余四味用水煮，乌头用蜜煎，蜜煎则乌头之性出，而乌头之气不散，正取其气味俱全，而雄入之势更壮，非徒以蜜能解乌头之毒之谓也，故以乌头名方。细剖其义，芪、芍、甘草牵制麻黄之表散，白蜜牵制乌头以温经，无非欲使寒湿之邪，从关节徐徐而解耳。”

广州中医药大学２００６届硕士擘住论文

２．乌头汤各组成药物的研究文献

川乌头：味辛、苦，性热，大毒。具有祛风除湿，温经，散寒止痛之功效。《神农本草经》载其辛温有毒，列为下品；《本草纲目》也将其列为毒草类，并日：“乌附毒药，非危病不用。”其毒性虽大，经炮制或合理配伍后，毒性可减弱而发挥其疗效。《珍珠囊》谓其“去寒湿风痹、血痹”，《王氏究原方》云：“性轻疏、温脾去风”。

现代研究表明，其化学成分主要为乌头碱等生物碱。乌头碱具有抗炎、镇痛、免疫抑制等药理作用。张维敏等“捌观察了附子煎剂对巴豆油所致小鼠耳部炎症、甲醛所致大鼠脚跖肿胀有显著抑制作用，对切除双侧肾上腺的大鼠的足跖肿胀具有显著的抑制作用，提示附子的抗炎作用与肾上腺系统无明显关系。

双酯型二萜生物碱是川乌中的主要毒性成分，如乌头碱、中乌头碱、次乌头碱、杰斯乌头碱等，约０．４％～０．８％。单酯型二萜生物碱毒副作用较前者小。乌头碱人口服致死量约为２～５ｍｇ，小鼠皮下注射ＬＤ。为０．３２ｍｇ／ｋｇ。”。将川乌加工炮制或加水长时间煮沸的目的就是使双酯型生物碱的酯基水解生成毒性小得多的单酯型生物碱或醇胺。若发生川乌中毒，可见流涎、恶心、呕吐、腹泻、头晕、眼花、口舌及四肢及全身发麻、脉搏减少、呼吸困难、手足搐搦、神志不清、心律紊乱等症状，并因心脏毒性致死。

麻黄：味辛、微苦，性温。具有发汗解表，宣肺平喘。利水消肿的作用。《药性论》中记载麻黄“治身上毒风顽痹，皮肉不仁”，《珍珠囊》诉“泄卫中实，去营中寒，发太阳、少阴之汗”，《现代实用中药》称“对关节疼痛有效”。

现代研究表明，麻黄含有麻黄生物碱类、挥发油、黄酮类化合物等化学成分，具有解热、抗炎、抗病原微生物等药理作用。陈荣民等。１从麻黄提取物中分离出麻黄一９９０５能减轻二硝基氯苯所致的小鼠耳廓肿胀，使胸腺萎缩，调整二硝基氯苯所致的血液中ＣＤ４／ＣＤ８的失调，说明麻黄－９９０５对细胞免疫有抑制作用，其作用机理是一方面使胸腺萎缩，导致Ｔ淋巴细胞的形成减少，另一方面可能与调整辅助性Ｔ细胞和抑制Ｔ细胞的比例有关。

黄芪：昧甘，性温。具有益气升阳，固表止汗，利水消肿，托毒生肌的作用。黄芪能“温分肉，实腠理”、“益气”、“生血”、“补虚”，《日华子本草》记载“黄芪助气壮筋骨，长肉补血”。

黄芪主要含黄芪多糖、氨基酸、蛋白质等化学成分。黄芪多糖具有增强免疫功能的作用。其药理作用包括：①抗炎作用，黄芪皂苷甲给大鼠５０ｍｇ／Ｋｇ灌胃或５ｍｇ／静脉注射均能对抗组胺和５一ＨＴ引起的大鼠毛细血管通透性增加，２５～ｌＯＯｍｇ／Ｋｇ灌胃能显著对抗角叉菜胶引起的大鼠后跖肿胀；黄芪总黄酮能使从大鼠血清ＭＤＡ、ＩＬ－１和Ｎ０２量明显降低而发挥抗关节炎作用啪１。②能明显提高机体性免疫功能，黄芪水煎剂给小鼠口服，有增强网状内皮系统吞噬功能，对小鼠肺巨噬细胞的吞噬功能有增强作用。徐瑶等观察给烫伤大鼠注射液后能拮抗烫伤所抑制的大鼠腹腔Ｍ中吞噬活性、脾脏淋

鸟头汤治疗类风湿性关节炎的药效学及作用机理研究

巴细胞转化增殖、ＩＬ一２分泌、ＮＫ细胞活性、ＲＢＣ—Ｃ”Ｒ花环率，并且能拮抗烫伤所致腹腔Ｍ巾分泌ＴＮＫ—ａ，增加血清Ｉ卜６水平…。

白芍：味苦、酸，性微寒，具有养血和营，缓急止痛，敛肝平肝之功效。

白芍主含芍药苷、氧化芍药苷等有效成分。现代药理研究表明，白芍总甙（ＴＧＰ）具有抗炎、镇痛、抗应激、免疫调节和护肝作用，临床上用于ＲＡ的治疗，未见明显的不良反应。动物实验表明，白芍总苷对大鼠角叉菜性足肿胀及小鼠自身免疫性肝炎有明显的抑制作用，能够减轻从大鼠踝关节的纤维渗出、炎症细胞浸润及滑膜增生。“：白芍总苷对免疫细胞的增殖、免疫活性物质的产生具有低浓度促进和高浓度抑制的双向调节作用。…。白芍总苷可明显对抗Ｄ～半乳糖胺或四氯化碳所致小鼠肝损伤后血清谷丙转氨酶升高，血清白蛋白的下降及肝糖原含量降低，并能使形态学上的肝细胞变性和坏死得到明显的改善和恢复，从而发挥保肝护肝作用ｏ“。

甘草：味甘，性平。具有益气补中，缓急止痛，润肺止咳，泻火解毒，调和诸药的作用。《本经》记载甘草“主五脏六腑寒热邪气，坚筋骨，长肌肉、倍力，金疮肿，解毒”，《别录》云“通经脉，利血气，解百药毒”，《日华子本草》亦云“补五劳七伤，一切虚损……通九窍，利百脉，益精养气，壮筋骨，解冷热”。

甘草的主要有效成分是多种三萜化合物和多种黄酮类化合物，包括甘草甜素、甘草次酸、甘草多糖等，具有抗炎及抗变态反应作用、免疫调节作用、肾上腺皮质激素样等作用。甘草具有糖皮质激素样抗炎作用，抗炎的主要有效成分是甘草甜素和甘草次酸。对大鼠棉球性肉芽肿、甲醛性足肿胀、角叉菜胶性关节炎等有一定的抑制作用。甘草甜素是一种有效的生物应答修饰剂，其免疫调节作用可能是通过消除抑制性巨嗜细胞的活性，抑制磷酸酶Ａ２活性而抑制前列腺素２（ＰＧＥ２）的产生；促使ＩＬ一１产生从而增强淋巴细胞产生ＩＦＮ和Ｉ卜２；消除Ｔｓ细胞活性；与ＩＬ一２，ＩＦＮ协同ＮＫ细胞活性增强，因此使免疫细胞的生物学效应放大，从而调节抗体产生细胞活性“１。３．乌头汤的临床应用

现代医者多用乌头汤治疗风湿性疾病。夏善玲等“１用乌头汤加味治疗寒性关节痛３７９例，临床研究表明，本方对初病或慢性期急性发作之寒性关节痛效果较显著，尤其是未曾服用过西药激素类及其它止痛剂者效果更好，反之则效果不理想。如汤云龙等。”及勾廷祥等。７１以乌头汤为主治疗ＲＡ，总有效率均为１００％。徐俊啪’以乌头汤加味治疗风湿性多肌痛３８例，临床缓解２８例，显效５例，有效３例，总有效率９４．７４％。陈立富。１以乌头汤加制草乌、熟附子、当归、桂枝、木瓜、细辛、丝瓜络治疗腰椎间盘突出症１０５例，结果临床治愈８８例，占８３．８％，好转１５例，无效２例。王鹏…１以乌头汤加味治疗肩关节周围炎，效果良好。王道轩“”等以乌头汤加味治疗坐骨神经痛３８例，痊愈２９例，显效８例，无效１例。王永智等“２１用乌头汤加减治疗９２例脊柱过敏症，治愈４６例，好转４１例，无效３例，未发现有不良反应。乌头汤原方以内服为法，宋志刚””在乌头汤基础上，加上桂枝、细辛、红花、威

广州中医药大学２００６届硕士学位论文

灵仙等温阳活血、祛风湿的药物外敷治疗寒痹，使药力施于局部，而无损胃伤血之害，收到良好效果。

曹阳等“”采用中西医结合的方法，将乌头汤加味配合小剂量强的松治疗成人Ｓｔｉｌｌ病２１例，缓解１５例，有效４例，无效２例，总有效率为９０．４８％。

除用治风湿性疾病、肢体疼痛外，有的医生在辨证论治的基础上，用乌头汤治疗其他病证。如陈寿永“。用乌头汤治寒性喘咳、阳气虚弱、寒凝中焦之急性肠梗阻及寒邪客于胞宫、气滞血瘀之痛经，栾宏庆“”用治男子阳缩辨证属肾阳虚衰、下焦寒冷者，刘克龙ｍ１用治妇人子宫脱垂症属脾肾虚寒、中气下陷者。

４．乌头汤的实验研究

乌头汤的临床运用历代医家积累了丰富的经验，而有关乌头汤实验研究报导并不多见。毛理纳等“”观察了乌头汤对小鼠痛阈、扭体反应、耳部肿胀反应、大鼠足跖肿胀、大鼠棉球肉芽肿的影响，实验的研究结果表明：乌头汤可提高物理性或化学性刺激致痛的痛阈，即有一定的镇痛作用，亦有抗急、慢性炎症作用，其中对急性炎症的抗炎效果较好。另外，动物实验也表明乌头汤外用加温浸足疗效基本与内服乌头汤的疗效一致“…，而减少川乌对全身其他非治疗部位器官组织的毒性。该乌头汤由川乌、细辛、白芍、白芷等十几味中药组成，是在仲景乌头汤基础上进行加减制成的中药复方制剂。

乌麻颗粒是在乌头汤基础上加入鸡血藤等药物研制出来的中药制剂，夏建龙等脚１通过动物实验表明乌麻颗粒能够明显提高小鼠热板法痛闽，抑锘ｄ／Ｊ，鼠醋酸扭体反应率，提示乌麻颗粒具有较好的抗炎镇痛作用。

５．乌头汤中各药对的研究进展

药对是由临床常用的、相对固定的两味中药配伍形成的，是复方最小的组方单位，具有复方的基本主治功能，是复方的核心和经典复方疗效的体现。乌头汤药仅五味，就含有两组经典的药对，可见仲景方药组方非常之严谨，且药简效宏。

（１）川乌一白芍药对：

川乌与白芍这一寒热药性相反的配伍，是中医治疗风湿痹证的常用传统药对，最早见于仲景的乌头汤。有人对《中医方剂大辞典》进行统计，发现其中有２０８首川乌与白芍配伍的方剂，大多是用于风湿病关节疼痛、中风麻木疼痛、跌打损伤疼痛等证‘５“。

有关研究表明白芍和川乌配伍，两者均有明显的抗炎作用，并有选择性增效特点“”。对从大鼠继发性关节炎的疗效显著优于单昧药，表现出明显的配伍优势旧１。其配伍可使各单味药的镇痛作用明显增强，镇痛持续时间显著延长。增效的持续强度与配伍剂量、比例有关，剂量与作用有正相关效应嘲１。乌芍配伍能降低炎症过程中毛细血管通透性和炎症介质ＰＧＥ２的含量””，并且乌药配伍后，乌头碱含量明显降低，说明白芍能制约川乌的毒性“”。

鸟头汤治疗类风湿性关节炎的药效学及作用机理研究

（２）芍药——甘草药对

芍药、甘草是仲景方中著名对药方，即芍药甘草汤，由芍药和甘草各等份组成，在《伤寒论》中治筋脉失养的脚挛急，亦是后世医家用治诸痛症的常用药对。现代药理研究表明芍药和甘草配伍具有明显的解痉、镇痛、抗炎作用。芍甘配伍能明显减少醋酸所致的小鼠扭体次数，并能使二甲苯所致小鼠耳肿胀程度明显减轻”１。对横纹肌、平滑肌的挛急，不管是中枢性的或是末梢性的，均有解痉作用，对身体的挛急有效，对深在平滑肌的脏器，如胃、肠、气管、胆囊、输卵管、子宫、血管等，也能缓解其挛急，制止其疼痛”１，

第五节动物模型的选择

ＲＡ属于中医痹证范畴，目前中医治疗ＲＡ，临床上多在明确西医诊断的基础上进行辨证论治，即辨病与辨证相结合。但目前中医关于痹证的动物模型少，主要有两种，一种是在佐剂性关节炎基础上模拟风、寒、湿侵袭的气候条件，造成痹证模型，但气候条件对于痹证模型的意义目前尚存在争议；另一种则是切除卵巢配合胶原诱导性关节炎所致的与肾虚有关的痹证模型。这些病症结合模型尚处于摸索阶段，造模不易成功，也不易重复…。因此本研究直接选用目前应用最多、重复性好、制备方法简单的佐剂性关节炎大鼠模型。

佐剂性关节炎大鼠的关节病理学及血中变化与人ＲＡ相似，对从大鼠的的免疫变化进行研究表明，其存在着明显的细胞免疫异常，为一典型的免疫性炎症模型，适合于从免疫调节的角度研究防治ＲＡ的药物，是一种常用的模型。制作佐剂性关节炎（ＡＡ）模型最常用的弗氏按其制备方法，分为弗氏不完全佐剂（ＩＦＡ）弗氏完全佐剂（ＦＣＡ）。本实验采用ＦＣＡ致炎，使大鼠出现原发病变和继发病变。原发病变类似于一般炎性水肿，在致炎１２ｈ后于注射局部发生肿胀，１８ｈ达峰值，持续３日后，逐渐减轻。继发病变由迟发性超敏反应引起，于致炎１０天后出现对侧和前肢足爪肿胀，耳、尾部出现炎症性结节和红斑，并伴有体重明显下降，此过程持续数周。此种继发反应是由ＦＣＡ做为抗原，诱发机体产生自身免疫反应所致０１。

第六节流式细胞术（ＦＣＭ）概述

流式细胞术。”是一种自动分析细胞的高新技术，自１９６５年ＫａⅢｅｔｓｋｙ报道了一台简单的流式细胞计以来，这种新型的定量细胞分析仪器受到各国生物医学界的关注，并积极地投入研究。其原理是悬浮在液体中的分散细胞一个个地依次通过测量区，当每个细胞通过测量区时产生电信号，这些信号可以代表荧光、散射光、光吸收或细胞的光阻抗等。这些信号被测量、存贮、显示，于是细胞的一系列重要的物理特性和生化特性就被快速地、大量地测定。仪器还可以根据所规定的参量把指定的细胞亚群从

广州中医药大学２００６届硕士学位论文

整个群体中分选出来。

流式细胞术每秒可测１０００～１６０００个细胞，每个细胞只要有１００个荧分子（异硫氰酸荧光素）就可以检测出来，两个细胞间有２％的差别，ＦＣＭ就可以区别开来。在分析细胞时，比其他分析技术的变异系数（ＣＶ）更小，可达到１％以下，每个参数可达到２５６～４０９６通道辨力。流式细胞术分选纯度高（为９９％），分选收获率高（达９０％），并可对活细胞进行分选，且在一个细胞中又可同时测量ＤＮＡ、ＲＮＡ等多个参量。

乌头汤治疗粪风湿性关节炎的药效学及砟用机理研究

第二章乌头汤的实验研究

第一节乌头汤抗炎镇痛的实验研究

１．‘实验材料

１．１实验动物

昆明种小鼠，２—３月龄，体重１８—２２９；普通级ＳＤ大鼠，２—３月龄，体重１８０±２０９，由广州中医药大学实验动物中心提供。

１．２药物

１．２．１乌头汤：制川乌、黄芪、白芍、麻黄、炙甘草均购自广州中医药大学第一附属医院中药房，药材经本校标本中心老师鉴定。

甲氨喋呤（舯ｘ）购于广州中医药大学门诊部西药房（厂家：上海医药（集

团）有限公司信谊制药总厂，批号：０４０６０８）。

１．２．２中药药液的制备：将诸药洗净后，制川乌加水浸泡６０ｍｉｎ，先煎１ｈ左右，再加入其余各药同煎ｌｈ，过滤，药渣再加水适量煎煮４０ｍｉｎ，过滤，合并两次滤液，各组煎取液分别簧于６０摄氏度水浴中，浓缩，使每组药液中含同种药物的浓度相等，放４℃冰箱备用。

药物分组如下：

对照组：同等条件下喂养，每日灌服生理盐水一次，用量为０．１ｍｌ／１０９；

甲氨喋呤（ＭＴＸ）组：每周灌服ＭＴＸ一次，用量为０．０７６ｍｇ／１０９，简称ＭＴＸ组；乌头汤大剂量组：每日灌胃给药一次，用量为０．０７９／１０９，简称乌大组；

乌头汤中剂量组：每日灌胃给药一次，用量为Ｏ．０３５９／１０９，简称乌中组；

乌头汤ｄ，Ｎ量组：每日灌胃给药一次，用量为０．０１７５９／１０９，简称乌小组。

３．实验步骤

３．１抗炎实验

３．１．１对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响取昆明种小鼠６０只，体重１８—２２９，雌雄各半，随机分为５组，即对照组、ＭＴＸ组、乌头汤大剂量组、乌头汤中剂量组、乌头汤小剂量组，每组小鼠１２只，各组均按Ｍ／１０９齐Ⅱ量分别灌胃给药（对照组给予等容咱们的生理盐水），第天１次，连续给药３天。末次给药后０．５ｈ，将０．０２ｍｌ二甲苯均匀涂于每只小鼠右耳耳廓两面致炎，左耳不涂作为正常耳。１ｈ后脱颈处死各小鼠，用直径８ｍｍ打孔器在左耳及右耳同一部位打下圆耳片，用电子天平称重，以右耳重量减去左耳重量为肿胀度，计算耳肿胀度及肿胀抑制率。结果见表１

３．１．２乌头汤对蛋清致大鼠足肿胀的影响取体重１２０～１５０９的雄性大鼠５０只，随机分为５组，每组１０只。实验前在各鼠右后足踝关节处作标记，用足容积测定仪测定各鼠足容积两次，取平均值作为为正常足容积。连续给药３天，于末次给药后３０ｍｉｎ，在每只大鼠右后足跖部皮下注射１０％０．１ｍＬ的新鲜鸡蛋清溶液致炎，于注射

广州中医药大学２００６届硕士学位论文

蛋清后的０．５ｈ、ｌｈ、２ｈ、４ｈ、６ｈ测量大鼠致炎足容积，计算大鼠致炎前后右后足跖容咱们变化值，以足肿胀度和足肿抑制百分率表示药物的抗炎效应。结果见表２。３．２镇痛实验

３．２．１小鼠热板法实验取雌性小白鼠，将智能热板仪温度调至５５±０．５℃，预热１０分钟后，将雌性小鼠每次１只放在热板上，小鼠自放上至出现舐后腿、趾所需时间（ｓ）作为该鼠的痛阈值，将筛选合格（舔足时间小于５ｓ或者大于３０ｓ或者踊跃者弃之不用）的雌性小鼠６０只，随机分成５组，每组１２只，分组如下，每组给药前重复测定痛闽值，取两次痛阈平均值作为正常痛阈值。连续给药３ｄ，每天１次。第３天给药后在第０．５ｈ、ｌｈ、２ｈ、４ｈ、６ｈ测量小鼠的痛阈值，记录结果，计算各组痛阈提高百分率，结果见表３。

３．２．２醋酸扭体法实验取小鼠６０只，雌雄各半，随机分为５组，每组１２只，分组及给药方法同上，均于末次给药后３０ｍｉｎ，各小鼠腹腔注射０．８％的醋酸０．１ｍｌ／ｌＯｇ，观察记录１５ｍｉｎ内每只小鼠出现扭体反应（腹部收缩内凹，伸展后肢，臀部抬高，蠕行）的次数，计算镇痛百分率。结果见表４。

４．结果

表１乌头汤对＿－－Ｅｐ苯致小鼠耳肿胀的影响（ｚ±ｓ）

ＭＴＸ组１２１４．５１８．１’３．６４－１．１”５８．１

乌大组１２１５．５１９．６‘４．１±１．２＋５２．３

乌中组１２１５．２２０．４＋５．２±１．７’３９．５

乌小组１２１５．７２１．３’５．５±１．６．３４．９

注：与对照组比较＋Ｐ＜０．０５”Ｐ＜Ｏ．０１

表１结果显示，三个剂量的乌头汤和ＭＴＸ在给药后均能不同程度地抑制＝甲苯所致小鼠耳肿胀。

本文来源：https://www.bwwdw.com/article/ijnm.html