实验普鲁卡因LD50的测定

普鲁卡因中毒概述（普鲁卡因中毒是什么病？）：

普鲁卡因中毒是由于麻醉或静脉滴注用普鲁卡因过量所致。 普鲁卡因中毒症状体征（普鲁卡因中毒症状是什么？）：

体检注意意识、瞳孔、脉搏、呼吸、血压等变化，随时注意有无循环衰竭症状。 普鲁卡因中毒诊断检查（确诊普鲁卡因中毒需要做什么检查？）： 麻醉或静脉滴注用药过量史,结合临床表现。

普鲁卡因中毒治疗方案（普鲁卡因中毒如何治疗？）： 1.立即停止用药。

2.给予氧及5％二氧化碳混合吸入或人工呼吸。

3.氯化琥珀胆碱10～15mg缓慢静注，可控制抽搐。禁用中枢兴奋剂。

4.有严重惊厥者首先给氧人工呼吸纠正缺氧，同时选用硫喷妥钠0.5g加生理盐水25ml缓慢静注，亦可用地西泮(安定)10～20mg或阿米妥钠0.3～0.5g缓慢静注或肌注。 5.大量维生素C静滴，以加速其分解。

6.有正铁血红蛋白血症，可选用1％美蓝(亚甲蓝)25～50ml，以葡萄糖溶液稀释后缓慢静注。 7.普鲁卡因过敏性休克者：给氧，予肾上腺素或糖皮质激素。 普鲁卡因中毒预防及预后（如何预防普鲁卡因中毒？）： 使用普鲁卡因药物时注意其剂量。

普鲁卡因中毒注意事项（普鲁卡因中毒应该注意什么？）：

给予氯化琥珀控制抽搐，禁用中枢兴奋剂，在应用这些药物时，一定要仔细检查核对，以免引起意外事故。

1．发现中毒症状，立即停止给药。 2．给予含5%二氧化碳的氧气吸入，必要时予人工呼吸。给予大量维生素C，加速药物分解。 3．有正铁血红蛋白症，应给予亚甲蓝治疗。过敏休克者，给予吸氧，肾上腺素、肾上腺皮质激素治疗。

实验二 普鲁卡因的LD50测定

[实验目的] 通过实验，学习测定药物LD50的方法、步骤和计算方法，了解急性毒性试验的常规方法。

[实验材料] 小鼠、注射器、普鲁卡因溶液等。 [实验方法]

1、预试验 取小鼠8～10只，以2只为一组分成4～5组，选择组距较大的一系列剂量，分别按组腹腔注射普鲁卡因溶液，观察出现的症状并记录死亡数，找出引起0%死亡率和100％死亡率剂量的所在范围（至少应找出引起20%～80%死亡率）。（参考剂量：LD100为250mg/kg, LD 0为 164mg/kg）。

2、正式试验 在预初验所获得的0%和100%致死量的范围内，选用几个剂量（一般选4～5个剂量），每组10只小鼠，动物的体重和性别要均匀分配，完成动物分组和剂量计算后按腹腔注射给药。

3、LD50测定中应观察纪录的项目

⑴ 实验要素：实验题目，实验日期，药物的批号，动物品系，来源，性别，体重，给药方式及剂量、给药时间等。

⑵ 给药后各种反应：潜伏期，中毒现象，开始出现死亡的时间，末只死亡的时间，死前的现象，各组死亡的只数等。

⑶ 尸解及病理切片：对死亡的小鼠及时进行尸解，观察内脏的变化（心、肝、脾、肺、肾），记录病变情况。若肉眼可见变化时则需进行病理检查。观察结束时对全部存活动物称体重，尸解，同样观察内脏病变与中毒死亡鼠比较。当发现有病变时同样进行病理检查，以

比较中毒后病理变化及恢复情况。 [结果计算]

实验完毕后，清点各组死亡鼠数和算出死亡率（P），按改良寇氏法公式进行计算：

LD50= ㏒ -1[Xm –i (∑P – 0.5)]

其中：

Xm：最大剂量的对数值

i ：相邻两组剂量对数值之差

P：各组动物死亡率，用小数表示（如死亡率为80％应写成0.80） ∑P：各组动物死亡率之总和

[报告要点]

将实验资料填入下表，并按公式计算。

组别 动物数 剂量 对数剂量 动物死亡数 死亡率 LD50

（只） （g/kg） （X） （只） （%） 1 2 3 ……

[注意事项]

1、 正式试验选用的几个剂量应按等比级数增减。进行正式实验时最好从中剂量组开始，以便能从最初几组动物接受药物的反应来判断两端的剂量是否合适，否则随时调整。 从求得的LD 0及计算各剂量组的LD 100公比：

公比 r =

b —— 死亡率接近90% 或100% 的剂量 a —— 死亡率接近 5% 或 10% 的剂量 n —— 分组数

2、 供各组动物注射用的药液最好为按剂量比例稀释成的一系列浓度的溶液，使各组动物单位体重的给药ml 一致。 [讨论题]

什么叫LD50？测定LD50的意义和根据是什么？

测定LD50时为什么要记录各种中毒现象及时间过程，而不能只记录死亡只数？

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