专题2 课题1 微生物的实验室培养（第3课时）

专题2 微生物的培养与应用 课题1微生物的实验室培养（高二生物）

第3课时 纯化大肠杆菌（方法二）结果分析与评价

菌种的保藏 【学习目标】

1 学生预习教材P19内容，结合第2课时的学习，初步整理归纳出稀释涂布平板法的操作过程

2课堂上通过观看视频，教师提示，学生合作探究，学生能够准确理解并掌握 （1）“稀释涂布平板法”操作技术；

（2）“稀释涂布平板法”的操作注意事项以及原因 （3）菌种的保藏方法

3对本实验的结果进行科学的分析和评价 重点 稀释涂布平板法 实验结果的分析和评价 难点 稀释涂布平板法 【课前预习】

（二）稀释涂布平板法

阅读教材P19“稀释涂布平板法”的相关内容，整理归纳出稀释涂布平板法的操作过程

1稀释涂布平板法：将菌液先进行一系列的 ，然后将不同稀释度的菌液分别 到 培养基的表面，进行培养。如果稀释度足够高，则能在培养基表面形成 菌落。该方法分为两个环节： 和 2 系列稀释操作

认真阅读教材P19关于该操作的图，文字，解决下列问题： （1）该操作过程中涉及到了哪些无菌操作的措施？

（2）如果原始菌液的细菌密度是10个/Ml，请计算：理论上6支试管中的细

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菌密度分别是多少？

3 涂布平板操作

（1）涂布平板操作过程中使用的接种工具是什么？

（2）该操作过程中涉及到了哪些无菌操作的措施？

1以下操作用到接种环的是（ ）

A平板划线操作 B系列稀释操作 C涂布平板操作 D倒平板操作 2微生物的接种技术最常用的有（ ）

①平板划线法 ②稀释涂布平板法 ③斜面接种 ④穿刺接种 A ①②③ B ①② C ②③④ D ①②③④

3稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是（A操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释 B需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养基表面 C不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落 D操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理 4涂布平板操作需要用到（ ）

A接种环、滴管、酒精灯 B接种环、移液管、酒精灯 C涂布器、移液管、酒精灯 D涂布器、接种环、酒精灯

【课堂学习，合作探究】 （二）稀释涂布平板法

结合预习内容，观看视频，思考以下问题，整理好答案

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）【预习自测】 1系列稀释操作

向试管中注入菌液时，为什么要用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次？

2涂布平板操作

准确理解教材中的2个注意事项

3两种纯化细菌的方法的比较

项目 平板划线法 稀释涂布平板法 优点 可以观察 特征，对混合菌进行 可以计数，可以观察菌落特征 吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延 适用于 菌和 菌 缺点 计数 适用范围 适用于 菌 （三）微生物的培养

接种后的培养基和一个未接种的培养基放入37℃恒温箱内培养，观察记录结果. 思考？为什么放置一个未接种的培养基于37℃恒温箱内培养

三 结果分析与评价

1 如何判断大肠杆菌的分离纯化成功了？

2未接种的培养基表面如果有菌落生长，说明了什么？

3如果接种后的培养基上有不同形态的菌落，请分析原因

4培养12h和24h后的菌落大小，菌落分布位置一样吗？分析原因？ 四 菌种的保藏

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完成教材P20“课题延伸”的学习，填写下表 保藏方法 临时保藏法 甘油管保藏法 保藏对象 培养基 保藏条件 缺点 【巩固练习】

1分离纯化大肠杆菌最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。下列有关这两种方法的叙述错误的是 ( )。

A均将大肠杆菌接种在固体培养基的表面

B获得的每个菌落均是由一个细菌繁殖而来的子细胞群 C都应在火焰附近进行操作，以防止杂菌污染

D稀释分散菌种的原理不同，均能达到分离纯化大肠杆菌的目的 2下表是从土壤中分离纯化土壤细菌的培养基配方。请回答下面的问题。

试剂 用量 试剂 用量 牛肉膏/g 蛋白胨/g NaCl/g 5 10 5 琼脂/g 水/mL — 20 1 000 — (1)培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、碳源、________和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是________________。培养基配制完成以后，一般还要调节pH并对培养基进行________处理。

(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是______________和______________。 (3)假设培养结束后，发现培养基上菌落连成一片，可能的原因是什么？(列举两项)

_______________________________________________________________ ______________________________________________________________。

练习册P19例题4；P19 P19课时过关 能力提升4，8，9，12，13

专题2课题1第3课时 4

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