药物分析总复习

绪论 内容和要求

一.基本内容

药物分析的性质和任务；国家药品标准与主要的外国药典；药品的质量管理规范；药物分析课程的学习要求。 二、基本要求

(1)了解药物分析的性质、任务、发展趋势以及在药学中的作用。 (2)了解药品质量管理规范。 (3)掌握药物分析课程的学习要求。

要点和难点

一、药物分析的任务

药物分析的任务是全面控制药品的质量。药物分析工作者应加强与药品研发单位、药品生产单位、药品经营单位以及临床用药单位的联系。 二、国家药品标准

《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)和药品质量标准均为国家标准。《中国药典》是国家监督管理药品质量的法定技术标准。药品质量标准是药品生产、经营、使用和行政、技术监督管理各部门共同遵循的法定技术依据。 目前我国已经出版了九版药典，最新版本是《中国药典》2010年版。 三、主要外国药典

美国药典(缩写USP)，英国药典(缩写BP)，日本药局方(缩写JP)，欧洲药点(缩写Ph．Eup)。 四、药品质量管理规范

GLP：药品非临床研究质量管理规范； GMP：药品生产质量管理规范； GSP：药品经营质量管理规范； GCP：药品临床试验质量管理规范。 五、药物分析课程的学习要求

(1)《中国药典》的基本组成与正确使用。

(2)药物的鉴别、检查和含量测定的基本规律与方法。

(3)从药物结构分析出发，运用化学、物理化学以及其他方法进行质量分析。

练习和自测

一.问答题

1．什么是药物分析?药物分析的任务是什么?

2．新中国成立以来，我国出版了几版药典?分别是什么版本? 二、填空题

1．药物分析是研究化学结构明确的__________或__________及其制剂的质量控制方法。

2.国家药品标准包括__________和__________。

3.目前公认的全面控制药品质量的法规有________、______、______、_________。

参考答案

一.问答题

1．答：药物分析是研究化学结构明确的合成药物或天然药物及其制剂的质量控制方法。药物分析的任务是全面控制药品的质量。药物分析工作者应加强与药品 生产单位、药品经营单位的紧密配合，也应重视临床用药，开展治疗药物监测。 2．答：新中国成立以来，我国出版了九版药典，分别是1953、1963、1977、1985、1990、1995、2000、2005和2010年版。 二.填空题

1．合成药物 天然药物 2．《中国药典》 药品质量标准 3．GLP GMP GSP GCP

第一章药典概况 内容和要求

一、基本内容

药品质量标准；

《中国药典》的内容(包括凡例、正文、附录和索引四部分)，《中国药典》2010年版的进展；

外国药典简介；

药品检验工作的机构和基本程序。 二、基本要求

(1)掌握《中国药典》的组成、内容及其应用。 (2)熟悉药品质量标准的内容。

(3)熟悉药品检验工作的机构和基本程序。 (4)了解几种主要的外国药典的组成及内容。

要点和难点

一、《中国药典》

《中国药典》包括一部、二部和三部：一部收载药材及饮片、植物油脂和提取物、成方制剂以及单味制剂；二部分为两部分，其中，第一部分收载化学药品、抗生素、生化药品和放射性药品，第二部分收载药用辅料；三部收载生物制品。 《中国药典》的内容分为凡例、正文、附录和索引四部分。

1.凡例：凡例是解释和正确使用《中国药典》进行质量检定的基本原则，并对与检定有关的共性问题加以规定。

(1)检验方法与限度。标准中规定的各种纯度和限度数值以及制剂的质(装)量差异，包括上限和下限两个数值本身及中间数值，均为有效数字。

原料药的含量(％)，除另有注明者外均按质量计。如规定上限为100％以上，指用本药典规定的分析方法测定时可能达到的数值，为药典规定的限度或允许偏差，并非真实含有量；如未规定上限，指不超过101.0％。

(2)取样精密度与准确度。试验中供试品与试药等“称重”或“量取”的量，以阿拉伯数字表示，精确度根据数值的有效数位来确定。 精密称定：称取质量应准确至所取质量的千分之一。

称定：称取质量应准确至所取质量的百分之一。

精密量取：量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精密度要求。

量取：用量筒或按照量取体积的有效数位选用量具。 “约”：所取量不得超过规定量的±10％。

2．正文：正文为所收载药品或制剂的质量标准，基本内容有：品名；结构式；分子式与相对分子质量；来源或化学名称；含量或效价规定；处方；制法；性状；鉴别；检查。

3．附录：附录包括制剂通则、通用检测方法和指导原则等。

4．索引：中文品名目次按中文笔画排列，书末有汉语拼音索引和英文索引。 二、主要外国药典 1．美国药典(USP)

美国药典包括凡例、正文和附录。美国药典正文药品名录分别按法定药名字母顺序排列。各药品条目大都列有药名、结构式、分子式、CA登记号、成分和含量说明、包装和贮藏规格、鉴定方法、干燥失重、炽灼残渣、检测方法等常规项目。正文之后还有对各种药品进行测试的方法和要求的通用章节，以及对各种药物的一般要求的通则。可根据书后所附的USP和NF的联合索引查阅本书。 2．日本药局方(JP)

日本药局方由凡例、正文、附录和索引等内容组成。一部为化学药品、抗生素、放射性药品及制剂，二部收载生药、生物制品、调剂用附加剂等。 索引：包括日本名、英文名和拉丁名索引三种。 质量标准的主要内容：鉴别、检查、含量测定。 三、药品检验工作

药品检验工作是药物分析的一项重要工作，其基本程序是取样，鉴别，检查，含量测定，写出检验报告。

(1)取样：应注意科学性、真实性和代表性。 (2)鉴别：判断药物及制剂的真伪。

(3)检查：纯度检查、有效性检查、安全性检查、均一性检查。 (4)含量测定：测定药物中主要有效成分的含量。

(5)检验报告的书写：必须有完整原始记录，实验数据必须真实，不得涂改。检验完毕后，应写出实验报告，并有明确结论。

精选例题

1．什么叫空白试验?什么叫标准品?对照品?

答:空白试验指不加供试品或以等量溶剂替代供试液的情况下，按同法测得的结果。标准品是指用于生物检定、抗生素或生化药品中含量测定或效价测定的标准物质，按效价单位计，以国际标准品进行标定。对照品是指用于检测时按干燥品计算后使用的标准品。 2．药品检验工作的程序有哪些?

答:药品检验工作一般程序为取样，鉴别，检查，含量测定，写出检验报告。 取样：需注意取样的科学性、真实性和代表性。 鉴别：判断药物及制剂的真伪。

检查：纯度检查、有效性检查、安全性检查、均一性检查。 含量测定：测定药物中主要有效成分的含量。

写检验报告：有完整的原始记录，实验数据必须真实。

练习和自测

一、填空题

1．《中国药典》的主要内容由_________、_________、_________和_________四部分组成。

2．“精密称定”指称取质量应准确至所取质量的_________；“称定”指称取质量应准确至所取质量的_________；取用量为“约”若干，指取用量不得超过规定量的_________。

3．原料药的含量未规定上限时，指不超过_________。 4．《中国药典》附录薄层色谱法中增加了_________。 5．国家级药品检验机构是_________。

6．概括起来，鉴别是用来判定药物的_________。

7．药品检验工作的一般程序是______、______、_______、________、______。 二、选择题

1．《中国药典》规定实验用水，除另有规定外，均指( )。

A．纯化水 B．蒸馏水 C.离子交换水 D．新沸并放冷至室温的水 E．自来水 2．《中国药典》凡例规定，室温是指( )。

A．10～30℃ B．20℃ C．25℃ D．20～25℃ 3．英国药典英文缩写符号是( )。

A．UP B．JP C．BP D．USP E．Ch.P 4．《中国药典》凡例规定，乙醇未指明浓度时均指( )。

A.75％的乙醇 B.无水乙醇 C.中性乙醇 D.95％的乙醇 E.50％的乙醇 5．《中国药典》主要内容包括( )。

A.正文、含量测定、索引 B.凡例、制剂、原料 C.凡例、正文、附录、索引 D.前言、正文、附录 E.鉴别、检查、含量测定

6．对《中国药典》中所用名词(例如试药、计量单位、溶解度、贮藏、温度等)作出解释的属药典( )内容。

A．附录 B．凡例 C．制剂通则 D．正文 E．一般试验

7．《中国药典》中所指的“精密称定”，指称取质量应准确至所取质量的( )。 A.百分之一 B.千分之一 C.万分之一 D.十万分之一 E.百万分之一 8．《中国药典》规定，称取“2.OO g”指( )。

A．称取质量可为1.5～2.5 g B．称取质量可为1.95～2.05 g C．称取质量可为1.995～2.005 g D．称取质量可为1.999 5～2.000 5 g E．称取质量可为1～3 g

9．《中国药典》规定取用量为“约”若干时，指取用量不得超过规定量的( )。 A．±0.1％ B．±1％ C．±5％ D．±10％ E．±2％ 10．原料药含量百分数如未规定上限，指不超过( )。

A．100.1％ B．101.0％ C．100.0％ D．100％ E．110.O％

参考答案

一、填空题

1．凡例 正文 附录 索引 2．千分之一 百分之一 ±10％ 3．101.0％ 4．系统适用性试验

5．中国生物药品检定所 6．真伪

7．取样 鉴别 检查 含量测定 写出检验报告 二、选择题

1．A 2．A 3．C 4．D 5．C 6．B 7．B 8．C 9．D 10．B

第二章药物的鉴别试验

内容和要求

一、基本内容

与药物鉴别有关的基本概念：药物的鉴别试验(一般鉴别试验和专属鉴别试验)；鉴别试验的方法(包括化学鉴别法、光谱鉴别法和色谱鉴别法)；鉴别试验的条件。 二、基本要求

(1)掌握化学鉴别、光谱鉴别和色谱鉴别的方法。 (2)熟悉一般鉴别试验和专属鉴别试验的内容。 (3)熟悉鉴别试验的条件。

要点和难点

一.鉴别试验的项目 (一)性状

1．外观 外观指药物的聚集状态、晶型、色泽以及臭味等性质。 维生素B1的描述：本品为白色结品或结品型粉末；有微弱的特臭，味苦；干燥品在空气中迅速吸收约4％的水分。

2．溶解度 溶解度在一定程度上反映了药品的纯度。

3．物理常数 物理常数是评价药物质量的重要指标之一，用于药品鉴别，反映其纯杂程度。物理常数主要包括熔点、比旋度和吸收系数。

(1)熔点：是指固体熔化成液体的温度，熔融同时分解的温度，自初熔至全熔的一段温度。

(2)比旋度：在一定波长与温度下，偏振光透过长1 dm且1 mL中含有旋光性物质1 g的溶液时测得的旋光度。它是反映手性药物特性及其纯度的主要指标。 (3)吸收系数：在给定的波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度、

1%单位液层厚度时的吸光度。《中国药典》收载的是百分吸收系数E1cm。

(二)一般鉴别试验

一般鉴别试验是依据某一类药物的化学结构或理化性质的特征，通过化学反应来鉴别药物的真伪。《中国药典》附录收载项目包括丙二酰脲类、托烷生物碱类、芳香第一胺类、有机氟化物类、无机金属盐类、有机酸盐、无机酸盐。

注意：该试验只能证实是某一类药物，而不能证实是哪一种药物；只适用于纯品，混合药物或有干扰时不适用。 (三)专属鉴别试验

专属鉴别试验是证实某一种药物的依据，它是根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性的不同，选用某些特有的灵敏定性反应来鉴别药物真伪。

如巴比妥类药物可利用取代基的不同来进行区分。 二.鉴别方法 (一)化学鉴别法

(1)呈色反应鉴别法，如酚羟基的三氯化铁呈色反应。

(2)沉淀生成反应鉴别法，如含氮杂环类药物与生物碱沉淀试剂的反应。 (3)荧光反应鉴别法，如维生素B1的硫色素反应。

(4)气体生成反应鉴别法，如含硫的药物经强酸处理，可得到硫化氢气体。 (二)光谱鉴别法

1.紫外光谱法 紫外光谱鉴别常用的方法有： (1)测定最大吸收波长，或同时测定最小吸收波长。 (2)规定一定浓度的供试液在最大吸收波长处的吸光度。 (3)规定吸收波长和吸收系数法。 (4)规定吸收波长和吸光度比值法。

(5)经化学处理后，测定其反应产物的吸收光谱特征。

2.红外光谱法 红外光谱法足一种专属性很强，可应用于固、液、气态样品鉴别的方法，主要用于组分单一、结构明确的原料药，特别适合于其他方法不易区分的同类药物，如磺胺类、甾体激素类、β-内酰胺类。《中国药典》和BP均采用标准图谱对照法，USP采用对照品法。

3.原子吸收法 利用原子蒸气可以吸收由该元素作为阴极的空心阴极灯发出的特征谱线的特性，根据供试液在特征谱线处的最大吸收值和特征谱线的强度减弱程度进行定性、定量分析。 (三)色谱鉴别法

利用不同物质在不同色谱条件下产生各自的特征色谱行为(比移值或保留时

间)进行的鉴别试验。采用与对照品在相同条件下进行色谱分离并比较，根据两者的保留行为和检测结果是否一致来验证药品的真伪。

精选例题

1．《中国药典》(2010年版)规定了薄层色谱法需做系统适用性试验，包括哪些内容?

答：包括对薄层斑点的检测灵敏度、比移值和分离效能进行考察。 2．一般鉴别试验和专属鉴别试验有何区别?

答：一般鉴别试验是以某些类别的药物的共同化学结构为依据，根据其相同的物理化学性质进行药物真伪的鉴别，以区别不同类别的药物。专属鉴别试验则是在一般鉴别试验的基础上，利用各种药物的化学结构差异来鉴别药物，以区别同类药物或具有相同化学结构部分各个药物单体，最终起到鉴别药物真伪作用。

练习和自测

一、问答题

1．药物鉴别的意义是什么?药品质量标准中常用的鉴别方法有哪些? 2．对化学鉴别试验的要求是什么?

3．紫外光谱法在药物的鉴别试验中有哪些应用?

4．采用红外光谱法鉴别药物时，固体试样的制备需注意什么问题? 5。比较紫外光谱法和红外光谱法鉴别药物的优缺点。 二、填空题

1．重氮化-偶合反应可用来鉴别_______类药物。 2．含有酚羟基的药物可采用_______方法来鉴别。

3．含碘的药物经直火加热可生成_______，含氮杂环类药物可以和_______生成沉淀。

4.铵盐加碱处理后，产生的气体可以使湿润的红色石蕊试纸变_______，硝酸亚汞试纸显_______色。

5．硫酸盐的鉴别试验，向供试液中滴加氯化钡试液生成_______。

6．水杨酸盐的鉴别，取供试液，加稀盐酸即析出_______，分离，沉淀在_______ 溶解。

7．用红外光谱法进行鉴别试验时，《中国药典》采用_______，USP采用_______。

8．影响鉴别反应的因素主要有_______，_______ ，_______ ，_______ ，_______ 。

9．核磁共振法通过测定供试品指定基团上的_______和_______进行药物的鉴别。 10．薄层色谱法中，比移值的最佳范围是_______。 三、选择题

1．鉴别试验鉴别的药物是( )。

A．结构不明确的药物 B．结构相似的药物

C．贮藏在有标签容器中的药物 D．未知药物 E．化学药物 2．下列不属于物理常数的是( )。

A．折光率 B．黏度 C．吸收系数 D．晶型 E．相对密度 3．钾盐焰色反应的颜色为( )。

A．紫色 B．蓝色 C．砖红色 D．黄色 E．棕色

4．有机氟化物的鉴别方法中，用茜素氟蓝显色，得到溶液的颜色是( )。 A．蓝色 B．紫色 C．褐色 D．蓝紫色 E．绿色

5．水杨酸盐和三氯化铁在弱酸性条件下发生反应，产物的颜色是( )。 A．蓝色 B．紫色 C．褐色 D．黄色 E．绿色 6．芳酸及其酯类、酰胺类可以采用的鉴别方法有( )。

A．茚三酮显色反应 B．三氯化铁显色反应 C．Vitali反应 D．重氮化-偶合反应 E．异羟肟酸铁法 7．红外光谱鉴别法中，待测物质的形态是( )。

A．固态 B．液态 C．气态 D．固、液、气态均可 E．稀溶液 8．《中国药典》规定紫外光谱法测定中，溶液的吸收度应控制在( )。 A．0.OO～2.00 B．O.3～1.O C．O.2～O.8 D．O.1～1.0 E．0.3～O.7 9．关于红外光谱法鉴别，下列错误的是( )。

A．专属性很强 B．能以液体的形式鉴别 C．不能以气体的形式鉴别 D．固体压片需抽真空 E．晶型对红外光谱有影响 10．关于质谱鉴别法，下列描述不正确的是( )。

A．被测离子按质荷比的大小分离 B．质谱是物质的固有特性之一 C．高分辨率质谱可以得到离子的精确质量数 D．不同物质的质谱图一定不同

E．质谱图可用来进行定性分析

参考答案

一.问答题

1．答：药物的鉴别试验可以用来证实贮藏在有标签容器中的药物是否为其表示的药物，可以判断药物的真伪。药物鉴别的方法有化学鉴别法、光谱鉴别法、x射线粉末衍射法、色谱鉴别法以及生物学法。

2．答：化学鉴别试验必须反应迅速，现象明显，不要求反应一定要进行完全。 3．答：①测定最大吸收波长，或同时测定最小吸收波长；②规定一定浓度的供试液在最大吸收波长处的吸光度；③规定吸收波长和吸收系数法；④规定吸收波长和吸光度比值法；⑤经化学处理后，测定其反应产物的吸收光谱特征。 4．答：①药品和溴化钾稀释剂及所用器皿均需干燥；②研磨均匀，且需在红外灯下操作；③压片时需抽真空。

5．答：紫外光谱法的优点：不要求是单一组分，有其他成分时也可进行鉴别试验；缺点：吸收光谱简单，曲线形状变化不大，专属性不强。红外光谱法的优点：专属性强，应用广泛，特别适合于用其他方法不易区分的同类药物；缺点：多组分或多晶现象不适用。 二、填空题 1．芳香第一胺 2．三氯化铁显色

3．紫色碘蒸气 生物碱沉淀 4．黑 5．白色沉淀

6．白色水杨酸 醋酸铵

7．标准图谱对照法 对照品法

8．溶液的浓度 溶液的温度 溶液的酸碱度 试验时间 干扰成分 9．化学位移 偶合常数 10．0.3～0.5 三、选择题

1．C 2．D 3．A 4．D 5．B 6．E 7．D 8．E 9．C 10．D

第三章药物的杂质检查

内容和要求

一、基本内容

与杂质检查有关的基本概念：杂质的来源、杂质的分类(包括一般杂质和特殊杂质)、杂质的限量检查；氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐等一般杂质的检查方法，以及干燥失重测定法和残留溶剂测定法等；特殊杂质的检查方法。 二、基本要求

(1)掌握杂质的概念、来源、分类与检查目的。 (2)掌握杂质的限量检查方法与计算。

(3)掌握一般杂质检查的原理与方法，以及注意事项。 (4)熟悉特殊杂质检查的原理与方法。

要点和难点

一、概述

(一)药物的纯度要求

药物的纯度通常是指药物中所含杂质的量，它是反映药物质量的一个重要指标。药物的纯度主要由药品质量标准检查项下的杂质检查控制，同时也可以通过药物的物理性状和含量来反映。如果药物中存在超过限量的杂质，其外观性状和物理常数也会发生变化。

注意：药物的纯度和化学试剂的纯度不同，药物中的杂质主要考虑人体用药安全有效，而化学试剂的纯度考虑的是杂质对试验的影响，不考虑对人体的生理作用。

(二)杂质的来源和种类 1．生成过程中引入的杂质

(1)原料不纯或未反应完全、反应的中间体及副产物。如双氯非那胺，可能因原料未反应完全而引入邻二氯苯杂质。

(2)药物在制成制剂的过程中也能产生新的杂质。如肾上腺素，在配制注射液时会生成肾上腺素磺酸杂质。

(3)在生产的过程中，所用试剂、溶剂及还原剂残留在药品中成为杂质。如地塞米松磷酸钠在生产过程中使用大量的甲醇和丙酮，残留在成品中即为杂质。

(4)异构体和多晶型对药物质量也会产生影响。 2．贮藏过程中引入的杂质

在温度、湿度、日光、空气等外界条件影响下或因微生物的作用，引起药物发生水解、氧化、分解、异构化、晶型转变、聚合、潮解和发霉等变化，这类情况主要考虑以下两种因素。

(1)氧化：当药物结构中含有酚羟基、醚、双键、巯基、亚硝基、醛基等基团时，比较容易氧化变质。例如，麻醉乙醚在光和氧的作用下会生成醛及一些过氧化物。

(2)水解：当药物结构中含有酯、酰胺、内酰胺、卤代烃、苷类等基团时，容易发生水解反应。例如，青霉素含有内酰胺环，容易水解失效，故制成粉针剂，现用现配。 3．杂质的种类

杂质按来源分为一般杂质和特殊杂质；按毒性分为毒性杂质和信号杂质；按理化性质分为有机杂质、无机杂质及残留溶剂。 (三)杂质的限量检查

杂质限量指药物中所含杂质的最大允许量，通常用百分之几或百万分之几(×10-6)来表示。

杂质限量控制方法＜对照法 限量检查法＜灵敏度法

1.对照法 取一定量被检杂质的标准溶液和一定量的供试品溶液，在相同条件下处理，比较反应结果。

该法需注意平行原则，即供试液及对照液在完全相同的条件下反应，如加入的试剂、反应的温度和放置的时间等均应相同。 注意：①单位一致；②稀释倍数；③表示方法(％)。

2．灵敏度法 在供试品溶液中加入一定量的试剂，在一定反应条件下不得有正反应出现。如纯化水中氯化物的检查是在50 mL水中加入硝酸与硝酸银试液，不得发生浑浊。

3．比较法 取一定量供试品依法检查，测定待检杂质的参数，与规定的限量相比，不得更大。

如维生素B2中感光黄素的检查，规定在440 nm波长处测定的吸光度不得超过O.016。

二、一般杂质的检查方法 (一)氯化物的检查 1．原理

利用氯化物在硝酸溶液中与硝酸银试液作用，生成氯化银的白色浑浊液，与一定量的标准氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银浑浊液比较，以判断供试品中氯化物是否超过限量。 2．条件

Cl一浓度范围：(0.05～O.08)mg／50 mL，即相当于标准氯化钠溶液5～8 mL；酸度：稀硝酸10 mL／50 mL； 3．干扰的排除

(1)供试品溶液浑浊：含硝酸的蒸馏水洗净滤纸中的氯化物后过滤，以消除浑浊对氯化物检查的干扰。

(2)供试品有色：如枸橼酸铁铵中氯化物的检查可采用内消色法，按《中国药典》附录规定的方法处理。 (二)硫酸盐检查法 1．原理

利用硫酸盐在盐酸中与氯化钡试液作用，生成硫酸钡的白色浑浊液，与一定量标准硫酸钾溶液在相同条件下生成的硫酸钡浑浊液比较，以判断供试品中硫酸盐是否超过限量。 2．条件

2? SO4一浓度范围：(0.1～O．5)mg／50 mL，即相当于标准硫酸钾溶液1～5 mL；

酸度：稀盐酸2 mL／50 mL。 3．干扰的排除

供试品有色：可采用内消色法，原理与枸橼酸铁铵中氯化物的检查相同。 (三)铁盐检查法 1．原理

Fe3+可以和SCN-发生配合反应，生成[Fe(SCN)n]3-n红色产物。

2．条件

Fe3+浓度范围：(0.01～0.05)mg／50 mL，即相当于标准铁溶液1～5 mL；酸度：稀盐酸4 mL／50 mL。 3．干扰的排除

(1)当有Fe2+存在时，加氧化剂过硫酸铵氧化Fe2+成Fe3+。

(2)当供试液管与对照液管色调不一致，或所呈硫氰酸铁的颜色较浅不便比较时，可分别移入分液漏斗中，加正丁醇或异戊醇提取，分别用提取液比色。 (四)重金属检查法

重金属是指在实验室条件下与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质，如银、铅、汞、铜、镉、锡、锑、铋等。由于药品在生产过程中遇到铅的机会比较多，铅在体内又易积蓄中毒，故检查时以铅作为代表。

《中国药典》重金属的检查法一共收载了四种方法：第一法，硫代乙酰胺法；第二法，炽灼后的硫代乙酰胺法；第三法，硫化钠法；第四法，微孔滤膜法。 1．第一法(硫代乙酰胺法) 该法适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物。 1)原理 2)条件

Pb2+浓度范围：(10～20)ug／27 mL，即相当于标准铅溶液1～2 mL；酸度：pH 3.0～3.5。 3)干扰的排除

(1)供试品有色：可采用外消色法消除干扰。

(2)供试品有微量Fe3+：在弱酸性溶液中会氧化硫化氢析出硫，产生浑浊，影响比色，可加维生素C或盐酸羟胺使Fe3+还原成Fe2+再检查。

2．第二法(炽灼后的硫代乙酰胺法) 该法适用于含芳环、杂环以及难溶于水、稀酸及乙醇的有机药物。

1)原理 供试品经500～600℃炽灼后的残渣处理后依第一法检查。 2)注意事项

(1)炽灼温度对重金属检查影响较大，温度越高，重金属损失越多。炽灼时应控制温度在500～600℃。

(2)含钠及氟的有机药物应用铂坩埚、石英坩埚或硬质玻璃蒸发皿(因其可腐

蚀瓷坩埚而带入大量重金属)。

3．第三法(硫化钠法) 该法适用于溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的药物，如磺胺类、巴比妥类药物等。

条件：(1)Na0H碱性环境下。 (2)显色剂：硫化钠。

4．第四法(微孔滤膜法) 该法适用于含2～5ug重金属杂质及有色供试液的检查。

依第一法检查，结果经微孔滤膜过滤后比较色斑。滤膜直径10 mm，孔径30um。 (五)砷盐检查法

《中国药典》采用古蔡法(Gutzeit)和二乙基二硫代氨基甲酸银法(Ag-DDC)检查药物中微量的砷盐。 1．古蔡法

1)原理 金属锌与酸作用生成的新生态氢与药物中微量砷盐反应，生成挥发性的砷化氢，遇溴化汞试纸产生黄色至棕色的砷斑，与一定量标准砷溶液生成的砷斑比较，颜色不得更深。 2)装置与试剂作用 (1)检砷装置。 (2)试剂的作用。 ①KI—SnCl2的作用：

a．还原As(Ⅴ)为AsH3，加快反应速率；

b．KI被氧化生成的I2又可被SnCl2还原为I-，I-与反应中生成的Zn2+能形成稳定的配位离子，有利于生成AsH3的反应不断进行；

c．锌粒与SnCl2作用，在其表面形成锌锡齐，起去极化作用；

d．可抑制微量锑的干扰，在试验条件下100ug锑存在也不致干扰测定。 ②醋酸铅棉花的作用：消除锌粒及供试品中少量硫化物的干扰。醋酸铅棉花用量约60mg，装管高度60～80 mm。 3)干扰的排除

(1)供试品为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐等，因在酸中生成的H2S或SO2会与HgBr2作用生成HgS或Hg，干扰砷斑检查。用硝酸氧化成硫酸盐可消除干扰。 (2)供试品为Fe3+能消耗KI、SnCl2，影响测定条件，可先加足量KI，将高铁

离子还原为亚铁离子后再检查。

(3)具环状结构的有机药物要先进行有机破坏再检查。

常用的有机破坏方法：碱破坏法，如石灰法、无水碳酸钠碱熔法；酸破坏法，如葡萄糖中砷盐的检查。

(4)本法适用于不含锑供试品。含锑药物因锑盐被还原为SbH3，与HgBr2试纸作用产生灰色锑斑，干扰砷斑的检查，故可改用白田道夫法。

白田道夫法原理：SnCl2在盐酸中将砷盐还原成棕褐色的胶态砷，与一定量标准砷溶液用同法处理后比较颜色。

2．Ag-DDC法(二乙基二硫代氨基甲酸银法)

1)原理 利用砷化氢与Ag-DDC吡啶溶液作用，使Ag-DDC中的银还原为红色胶态银。以Ag-DDC溶液为空白对照，于510 nm的波长处测定吸光度。供试液的吸光度不得大于标准砷溶液的吸光度。 2)试剂的作用 同古蔡法。 (六)溶液颜色检查法

溶液颜色检查法是控制药物中有色杂质的方法。《中国药典》(2010年版)收载了三种方法。

(1)标准比色液法：按一定比例配成黄绿、黄、橙黄、橙红和棕红五种不同色调的储备液。

(2)分光光度法：单一波长定量。

(3)色差计法：全波长范围定量。本法是通过色差计直接测定溶液的三刺激值，对其颜色进行定量表述和分析的方法。通过测定供试品与标准比色液或水之间的色差值来检查。 (七)易炭化物检查法

易炭化物检查法是检查药物中遇硫酸易炭化或易氧化而显色的微量有机杂质。这类杂质多数结构未知，常采用与标准比色液比色的方法进行检查。 (八)溶液澄清度检查法

澄清度是检查药品的浑浊程度，可以反映药物溶液中微量不溶性杂质的存在情况。用作注射剂的原料药一般应做此项检查。 (九)炽灼残渣检查法

炽灼残渣是指有机药物经炭化或挥发性无机药物加热分解后，高温炽灼所产生的非挥发性无机杂质的硫酸盐。

注意：含氟的药品对瓷坩埚有腐蚀，应采用铂坩埚；重金属(如铅)在高温下易挥发，炽灼温度应控制在500--600℃；第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续炽灼30 min后进行。 (十)干燥失重测定法

干燥失重测定法主要检查药物中的水分及其他挥发性的物质，常采用重量法进行检查，以百分率表示。常用的方法有以下四种。

1．常压恒温干燥法 该法适用于受热较稳定的药物，如卡巴胆碱、尼莫地平等药物。

2．减压干燥法 该法适用于熔点低或受热分解的供试品，压力应在2.67 kPa(20 mmHg)以下，温度为60℃。木糖醇的熔点较低，以五氧化二磷为干燥剂，减压干燥24 h。

3．干燥剂干燥法 该法适用于受热分解或易升华的供试品。常用的干燥剂有硅胶、硫酸和五氧化二磷。 4．热分析法(thermo analysis)

(1)热重分析法(thermo gravimetric analysis，TGA)是在程序控制温度下，测量物质的质量与温度关系的一种技术，研究物质在加热同时所发生的质量的变化。常用于药物稳定性的研究，以及贵重和易氧化药物的干燥失重测定，如长春碱。

(2)差示热分析(differential thermal analysis，DTA)是在程序控制温度下，测量被测物质和参比物之间的温差与温度关系的一种技术。参比物是一种惰性物质，在加热过程中不发生相变和化学变化，因此温差(△T)只与被测物质的变化有关。△T=0时，被测物未发生吸热或放热反应；△T<0时为吸热峰；△T >O时为放热峰。

(3)差示扫描量热法(differential scanning calorimetry，DSC)是在程序控制温度下，测量维持样品和参比物的温度相同，系统所需供给样品随温度变化的能量的一种技术。DSC与DTA的不同之处在于记录方式不同，DSC是记录系统供给的能量，包括吸热供给能嫩和放热减少供给的能量。在药物分析中DSC的应

用与DTA相同。DSC与TGA常联合使用。 (十一)有机溶剂残留量测定法

有机溶剂残留量测定法主要检查药物在生产过程中引入的有害有机溶剂(如苯、氯仿、二氯甲烷、吡啶、甲苯、环氧乙烷及二氧六环等)。主要采用气相色谱法进行检查。

常用的方法有两种：《中国药典》法；静态顶空进样法(适用于挥发性大的样品测定)。

《中国药典》气相色谱系统适用性试验的要求：

(1)填充柱理论塔板数大于1 000，毛细管色谱柱的理论塔板数大于5 000。 (2)分离度应大于1.5。

(3)内标法测定时，待测物峰面积的相对标准偏差(RSD)≤5％；外标法测定时，待测物峰面积的RSD≤10％。 三、特殊杂质的检查方法 (一)薄层色谱法(TLC)

(1)杂质对照法。用于已知杂质并能够得到杂质对照品的情况。

(2)供试品溶液自身稀释对照法。适用于杂质的结构不能确定或无杂质对照品的情况(仅限于二者的颜色相近或相同，且对显色剂的灵敏度相近或相同的情况)。

(3)杂质对照法与供试品溶液自身稀释对照法并用。当药物中存在多个杂质， 其中已知杂质有对照品时，采用杂质对照法检查；共存的未知杂质或没有对照品的杂质，可采用供试品溶液自身稀释对照法。

(4)对照药物法。当无合适的杂质对照品，或者供试品显示的杂质斑点颜色和主成分颜色有差异，难以判断限量，可用与供试品相同的药物作为对照。 (二)高效液相色谱法(HPLC)

(1)内标法加校正因子法。用于有杂质对照品时，能够测定杂质的校正因子和杂质的含量。

(2)外标法。用于有杂质对照品或杂质对照品易制备的情况。

(3)加校正因子的主成分自身对照法。用于有杂质对照品时杂质的含量测定。 (4)不加校正因子的主成分自身对照法。用于没有杂质对照品的情况。

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