发酵罐操作考核表

超净台操作 1穿实验服 2超净台物品 3紫外灭菌 4清洗双手 5关闭紫外，打开日光灯 6超净台玻璃门稍开 准备 7风速设置002 8将培养基、菌种、灭菌枪盒等放入（除去报纸） 不合格 合格 优秀 标准 穿戴实验服 无无关物品 20min以上 肥皂认真清洗 顺序正确 双手正好伸入 风速 是否除去报纸、放入的时间 9酒精棉球擦拭双手（手掌，手指间），镊子夹酒精棉球擦 洗操作台面至洁净（同方向） 10将培养基橡胶圈依次取下 11菌种开盖后绕火焰过一下 12左手轻微掀开瓶口，用枪将菌液快速打入 接种 13接种后的摇瓶标记接种日期、菌种名字 14过程中产生垃圾放在指定位置 15以上整个过程需要靠近酒精灯火焰完成，动作迅速 16将使用的菌种放回指定位置，垃圾进行清理，台面使用75%酒精擦拭 擦拭位置 是否取下 是否绕火焰 是否垂直加入 日期、菌种名字清晰 垃圾是否乱放 是否酒精灯下完成 是否恢复原状并用酒精擦拭 清场

5L发酵操作 步骤 指定动作 1 pH电极标定 准备 2 DO电极标定零点 3温度电极标定 4补料泵泵速的标定 5更换新的密封硅胶垫 6pH、DO电极装上罐盖 7取样口、进气口使用纱布包住并用止水夹夹住 灭菌 8排气口使用纱布包住 9补料瓶插针用纱布包住并用止水夹夹住 10发酵罐放入灭菌锅中按照规定灭菌 11灭菌结束后，尽快将罐放回原位 不合格 合格 优秀 标准 12连接空气过滤器，尽快通 入空气，调整空气流量2vvm 装罐 13连接好循环水管道，装入温度电极，设置好指定温度 14连接好pH、DO电极 15开启搅拌200rpm，等待发酵开始 16将温度设置到实验温度，转速设置指定转速 17将湿纱布盖于接种口附近的橡胶管上，点燃装有酒精棉的接种环，在火焰中迅速倒入准备好培养基，及时拧紧接种盖 接种 18将ph插针及微量元素在火焰保护下插入 19将pH设置到所需pH 20将种子在火焰保护下接入罐内 21待pH调整稳定后进行DO 100%标定 22 点击“发酵操作”界面按 钮，编辑好实验批号，点击“发酵”完成建档 23点击“发酵操作”下的“归档”按钮，完成归档后，“返回”点击“停罐”，完成拆罐前存档操作。 24关机、关闭循环水和压缩空气 25将补料瓶橡胶管用夹子夹紧，拔出针头。 26拆卸下pH电极、DO电极、 温度电极 27拧下发酵罐盖固定螺丝，处理发酵液 停罐 28将使用过的硅胶垫取出 29对搅拌及罐子进行清洗， 复位，罐内装入0.3%NaOH3L 30将pH电极清洗好擦干后，保存在KCl保护液中收于盒 内 31DO电极清洗后，盖上保护电极盖，收于盒子内 32将电源拔出，使用布覆盖罐体 33补料瓶、试剂瓶使用清水冲洗放回原处 34离心废液加入一定浓度的洁儿灭混匀倒入指定位置 菌体回收 35发酵液及时处理离心，离心后菌体注明发酵批次 36对实验垃圾进行清理，台面、地面使用75%酒精或洁儿灭擦拭 37检查使用过的试验台，注意水、电是否断开

清场

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