铁矾苏木精法

铁矾苏木精法

此种染色剂在细胞学及胚胎学制片上应用很广，是显示细胞一般结构及细胞分裂的优良染色剂。染色结果：此种染色剂最突出的优点是将细胞分裂时期的染色体染成蓝黑色，而且能够长久保持色泽（有些本世纪初用苏木精染色的植物制片，时过八十多年，至今仍是色泽如新）。同时细胞质则只染成浅灰色或近无色，因此可用番红或橘红G或其他染细胞质的染料衬染以后，表现细胞和组织的结构非常清晰。此剂通常应用0.5％苏木精水溶液。苏木精粉末在水中完全溶解约需一周左右。苏木精水溶液的染色效能在2-6周时达到最高峰，到了3-6个月以后，染液逐渐变坏，以至于无法使用。配置这种溶液，也可将苏木精溶解于纯酒精，作为10％的基液，经过一个月“成熟作用”以后就可以应用。基液可以长期储存。需用时，再稀释到0.5％（用5mL基液加入到95mL蒸馏水即可）。不过，现在国内进口分装苏木精，质量与纯度都比过去提高，一般溶解后数天即可应用，但是仍以配置1-2周后应用，易得较满意的效果。

染色步骤如下：

材料至蒸馏水→4％铁矾中媒染20-30分钟→流水洗5分钟→蒸馏水中更换数次→0.5苏木精中染色1-4小时→水中洗去多余的染料→2％铁矾或饱和苦味酸中分色→流水中洗30-60分钟→50％酒精→70％酒精→85％酒精→95％酒精→纯酒精→纯酒精II→二甲苯I→二甲苯II→封固。

注意：

①经媒染后，一定要在水中洗去多余的铁矾溶液，经蒸馏水洗后才移到苏木精染色液中，否则容易使苏木精染色液很快便坏。

②在铁矾或苦味酸溶液中分色时，需时多久，应该在显微镜下检查颜色后决定，一般分化至灰色为度。

③分色后，必须在流水（自来水或其它水）中洗干净（最少30分钟），才能脱水，如果铁矾不彻底洗净，以后制片的颜色会逐渐褪减。另外，流水一般偏碱性，可由增色作用，使苏木精染色液更加鲜艳。

④如果需要对染，可以在脱水至50％酒精时，用1％番红（在50％酒精）衬染2-24小时，到纯酒精II以后，再用丁香油-橘红G染分色1-5秒钟。

⑤累积染色方法和分化染色法结合应用。其关键步骤是：切片在蒸馏水中洗净后，不经过4％铁矾的媒染剂，即直接投入非常稀释的苏木精染液（方法：在染色缸中盛满蒸馏水，然后滴上0.5％苏木精液3-5滴）。将切片在此稀释染液中12～24小时。然后用蒸馏水洗，再很快地经过一次2％铁矾的分色。再用流水洗净或再按上述方法加衬染剂（番红或橘红G）。

本文来源：https://www.bwwdw.com/article/gfwp.html