山东肥城曹庄矿医院卓越360SOP

SOP标准操作程序

ALT/GPT 丙氨酸氨基转移酶试剂盒

临床意义：

本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清中丙氨酸氨基转移酶的活力。

临床上，有许多疾病会导致血清中丙氨酸氨基转移酶活力增高。如肝胆类疾病：包括传染性肝炎、肝癌、肝硬变活动期、中毒性肝炎、脂肪肝、胆管炎；心血管疾病：包括心肌梗塞、心肌炎、脑出血等。一些药物和毒物也可以引起ALT活性升高：如氯丙嗪、异烟肼、奎宁、酒精、铅、汞、有机磷等。 因此，血清丙氨酸氨基转移酶活力的测定可用于这些致病的诊断和监测，特别是用于肝胆类疾病的诊断和肝功能检测

方法原理：

上海科华生物工程股份有限公司的丙氨酸氨基转移酶试剂盒以IFCC1（国际临床化学委员会）推荐法为基础设计，采用两步法测定：

丙氨酸氨基转移酶

L-丙氨酸 + α-酮戊二酸 -----------------------→ 丙酮酸 + L-谷氨酸

乳酸脱氢酶

丙酮酸 + β-NADH + H+ ---------------→L-乳酸 + H2O + NAD+

底物L-丙氨酸和α-酮戊二酸在丙氨酸氨基转移酶催化下,生成丙酮酸和L-谷氨酸.其中丙酮酸在乳酸脱氢酶的催化下,生成了L-乳酸,并同时引起了β-NADH的氧化,使波长340nm处的吸光度下降.

在一定底物浓度范围内,β-NADH的氧化所引起的340nm处吸光度的下降速率与血清中丙氨酸氨基转移酶活力成正比。

样本：

病人准备： 应空腹取血。

样本类型： 新鲜无溶血现象的血清或EDTA抗凝血浆。 最少样品量：0.2ml。

样本稳定性：血清中的ALT在2～8℃可稳定7天，不推荐使用冰冻保存的样本2。

仪器与试剂:

仪 器：卓越360生化分析仪

试 剂：上海科华生物工程股份有限公司的丙氨酸氨基转移酶试剂盒

试剂准备：丙氨酸氨基转移酶试剂盒为即开即用的液体双剂型，无需特殊准备。试验用试管

的直径在12～16mm。 试剂组份：

参见试剂盒内说明书。

1

注意事项：

1.此试剂为体外诊断用。

2.试剂有毒，不要入口，吞下有害，如误服（包括内部接触）应立即寻求医疗保护。避免试剂和眼睛，皮肤及粘膜接触，如不慎接触（外部接触）应用大量的水冲洗受损害的部位, 如仍有不适，应前往医院诊治。

3.试剂中含有叠氮钠，可与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物，如果排向下水道请用大量的水冲洗。 性能参数：

1.精密度（重复性）：

批内变异系数≤5%； 批间相对极差 ≤6%。 2.准确度：

相对偏差≤15％。

3.病人结果可报告范围（线性范围）：

0～1000U/L（37℃）。 4.分析特异性（抗干扰能力）：

本液体试剂以IFCC推荐法为基础设计，采用二步法，可防止胆红素的干扰。 5.稳定性：

试剂在2～8℃避光保存，有效期为1年；

试剂开启后在2～8℃避光保存，可稳定30天。 变质指示：

如试剂混浊，或以蒸馏水为空白，试剂工作液在340nm处吸光度小于1.0，请勿使用。

校准：

使用生理盐水(蒸馏水)和理论K因素进行校准，或者使用生理盐水(蒸馏水)和其它质量可靠的校准血清进行二点校准。

质控：

至少2个浓度水平的质控品。

操作程序：

卓越360开机 ①装载试剂 ②输入参数 ③实施校准 ④加载样本

和仪器有关的操作程序请参照卓越360用户手册。 计算：

无需手工计算，在37℃每个样本的结果自动以U/L打印。

报告结果:

2

参考范围：

血清和血浆：8～40U/L（37℃）。

参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。每个实验室应建立自己的参考值。 不正常结果的处理程序：

根据仪器参数的正常值会打印异常标志。 报告格式：

自动地打印37℃U/L的报告，如果以SI单位（uKat/L）报告结果，要乘以0.017。

操作过程注意事项：

操作过程的限制性：

丙氨酸氨基转移酶试剂盒的线性范围是0～1000U/L。样品浓度超过线性上限应稀释重做。如在卓越360中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。超范围的标本也可以用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数，卓越360可以应用自动重做功能自动重作超范围的标本。

参考文献：

1. Expert Panel on Enzyme . Scientific Committee.International Federation of Clinical Chemistry:IFCC Methods for alanine aminotransferase(stage 2,Draft 1979-11-19). Clin . Chem .Acta. 147F-172F(1980).

2. 叶应妩，王毓三；全国临床检验操作规程（第三版）

3. Young,D.S.,Effects of Drugs on Clincial Laboratory Tests,4th Edition,AACC Press,1995.

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AST/GOT 天门冬氨酸氨基转移酶（紫外-苹果酸脱氢酶法）试剂盒

临床意义：

本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清中天门冬氨酸氨基转移酶的活力。 天门冬氨酸氨基转移酶在心肌细胞内含量较多，当心肌梗塞时，血清中天门冬氨酸氨基转移酶活力增高，48小时内达到高峰。约在3-5天内恢复正常。各种肝病也可引起血清天门冬氨酸氨基转移酶升高，中毒性肝炎可更高。肌炎，胸膜炎，肾炎及肺炎等也可引起其轻度升高。

方法原理：

紫外—苹果酸脱氢酶法（UV-MDH）1~5

AST

L-天门冬氨酸 + α-酮戊二酸 ------→ 草酰乙酸 + L-谷氨酸

MDH

草酰乙酸 + NADH + H+ --------→ L-苹果酸 + NAD+ + α-酮戊二酸

底物L-天门冬氨酸与α-酮戊二酸在天门冬氨酸氨基转移酶（AST）作用下生成草酰乙酸，生成的草酰乙酸在苹果酸脱氢酶（MDH）作用下转化成L-苹果酸，同时伴随着NADH的氧化，引起在波长340 nm处吸光度下降，下降速率与血清中AST活力成正比。

样本：

样本类型： 新鲜无溶血现象的血清或EDTA抗凝血浆。 最少样品量：0.2ml。

样本稳定性：血清中的AST在2～8℃可稳定7天。

仪器与试剂:

仪 器：卓越360生化分析仪

试 剂：上海科华生物工程股份有限公司的天门冬氨酸氨基转移酶试剂盒

试剂准备：天门冬氨酸氨基转移酶试剂盒为即开即用的液体双剂型，无需特殊准备。试验用

试管的直径在12～16mm。 试剂组份：

参见试剂盒内说明书。 注意事项：

1.此试剂为体外诊断用。

2.试剂有毒，不要入口，吞下有害，如误服（包括内部接触）应立即寻求医疗保护。避免试

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剂和眼睛，皮肤及粘膜接触，如不慎接触（外部接触）应用大量的水冲洗受损害的部位。： 3.试剂中含有叠氮钠，可与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物，如果排向下水道请用大量的水冲洗。 性能参数：

1.精密度（重复性）：

批内变异系数 CV≤5%； 批间相对极差 ≤6%。 2.准确度：

相对偏差≤15％。

3.病人结果可报告范围（线性范围）：

0～1000U/L（37℃）。 4.分析特异性（抗干扰能力）：

本液体试剂按IFCC推荐法为基础设计，采用二步法，可防止胆红素的干扰，可防止胆红素的干扰。 5.稳定性：

试剂在2～8℃避光保存，有效期为1年；

试剂开启后在2～8℃避光保存，可稳定30天。 变质指示：

如试剂混浊，或以蒸馏水为空白，试剂工作液在340nm处吸光度小于1.0，请勿使用。

校准：

使用生理盐水(蒸馏水)和理论K因素进行校准，或者使用生理盐水(蒸馏水)和其它质量可靠的校准血清进行二点校准。

质控：

至少2个浓度水平的质控品。

操作程序：

卓越360开机 装载试剂 输入参数 实施校准 加载样本

和仪器有关的操作程序请参照卓越360用户手册。 计算：

无需手工计算，在37℃每个样本的结果自动以U/L打印。

报告结果:

参考范围：

血清和血浆：5～40U/L（37℃）；3～24U/L（30℃）；

参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应

5

建立自己的参考值。

不正常结果的处理程序：

根据仪器参数的正常值会打印异常标志。 报告格式：

自动地打印37℃U/L的报告，如果以SI单位（uKat/L）报告结果，要乘以0.017。

操作过程注意事项：

操作过程的限制性：

天门冬氨酸氨基转移酶试剂盒的线性范围是0～1000U/L。样品浓度超过线性上限应稀释重做。如在卓越360中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。超范围的标本也可以用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数，卓越360可以应用自动重做功能自动重作超范围的标本。

参考文献：

1.Bergmeyer，H，U.Methods of Enzymatic Analysis .Vol.1.101(1974).

2.IFCC Method for Aspartate aminotransferase.Clin.Chim.Acta.70：F-19(1976) 3.Revised IFCC Method for Aspartare aminotransferase.Clin.Chim.Acta.80: F-21(1997).

4.Provisional Recommendation(1974) on IFCC Methods for Measurement of Catalytic concentration of Enzymes.Clin.Chim.Acta.61:F-11(1975).

5.Approved recommendation (1978) on IFCC Methods for Measurement of Catalytic concentration of Enzymes.Clin.Chim.Acta.98:F-163(1979).

6.Young,D.S.,Effects of Drugs on Clincial Laboratory Tests,4th Edition,AACC Press,1995.

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碱性磷酸酶（ALP）

临床意义：

碱性磷酸酶试剂盒适用于定量测定人血清中碱性磷酸酶的活力。 血清碱性磷酸酶（ALP）（EC3.1.3.1）的测量用在由于成骨细胞活性增加而引起的骨病和肝胆疾病的诊断中。某些条件下，如何杰金病，充血性心力衰竭和溃疡性结肠炎会引起碱性磷酸酶中等水平的升高，它的非病理性升高可在妊娠末三个月观察到。

方法原理：

上海科华生物工程股份有限公司的碱性磷酸酶的测定采用AMP法。

在AMP的缓冲环境下，磷酸对硝基苯在碱性磷酸酶的作用下，可以水解成磷酸盐和对硝基苯酚。在一定底物浓度范围内,磷酸对硝基苯的水解产物对硝基苯酚会引起405nm处吸光度的上升，其上升速率与血清中碱性磷酸酶的活力成正比。

碱性磷酸酶

磷酸对硝基苯 + H2O -----------------------→磷酸盐 + 对硝基苯酚

标本：

病人准备：无特殊要求。

类型：标本最好是无溶血的血清或肝素化的血浆。血清应在收集后两小时内分离出来。避免使用含EDTA或草酸盐的血浆。

标本稳定性：血清中的ALP在15～25℃可稳定3天，如果分析延迟8小时以上，最好把血清冷冻。冷冻的血清在融解后会表现出血清值的显著降低。它的活性恢复到初始值的速率依赖于时间和温度。

仪器与材料:

仪器：卓越360生化分析仪

材料：上海科华生物工程股份有限公司的碱性磷酸酶试剂 试剂准备：上海科华生物工程股份有限公司的碱性磷酸酶试剂盒为即开即用的液体试剂，无需特殊准备。试验用试管的直径在12～16mm。

试剂组份：

参见试剂盒内说明书。

注意事项：1.此试剂为体外诊断用。

2.不要入口，吞下有害。

3.如试剂空白吸光度值大于0.6或变混浊，请勿使用。

4.试剂使用后，及时旋紧瓶盖以防空气中的CO2对试剂的影响。

性能参数：

1.试剂空白：在波长405nm处，试剂空白吸光度应≤0.70A(光径1.0cm)。 2.精密度：批内变异cv≤4%；批间相对极差≤6%。 3.准确度：相对偏差≤10%。

4.试剂空白吸光值变化：ΔA/5分钟≤0.010A。

5.线性范围：要求试剂盒在样本浓度0~700U/L范围内，整个反应仍呈线性，r2≥0.995。 6.最低检测限：最低检测浓度至少应达到2U/L。

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试剂的贮存：1.当保存于2～8℃，不开盖情况下至标签的失效期。 校准：

标准液的准备：这个实验不需要标准液。

质控：

在每一批标本中都应把至少2个浓度水平的质控品作为未知标本进行分析。 操作程序（逐步地）： 卓越360开机 装载试剂 输入参数 实施校准 加载样本

完整的实验参数与操作程序可以在卓越360用户手册中查到。

计算：

无需手工计算，在37℃每个标本的结果自动以U/L打印。

报告结果:

参考范围：

温度 女性 男性 30℃（U/L） 37-90 40-110 37℃（U/L） 42-128 53-140 每个实验室应建立自己的参考值。 不正常结果的处理程序：

根据仪器参数的正常值会打印异常标志。

报告格式：

自动地打印37℃U/L的报告。

操作过程注意事项：

操作过程的限制性：上海科华生物工程股份有限公司的碱性磷酸酶试剂盒的线性范围是0～700U/L。样品浓度超过线性上限应稀释重做。样品浓度超过线性上限应稀释重做。在卓越360中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。

参考文献：

1.Clin. Chem. 21, (1975)1988.

2.J. Clin. Chem. Biochem. 21, (1983)731.

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γ-谷氨酰转移酶（γ-GT）

临床意义：

γ-谷氨酰转移酶试剂盒适用于定量测定人血清γ-谷氨酰转移酶的活力。

方法原理：

上海科华生物工程股份有限公司的γ-谷氨酰转移酶试剂测定采用L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺法。

L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺和双苷肽在γ-谷氨酰转移酶催化作用下,生成γ-谷氨酰双苷肽和5-氨基-2-硝基苯甲酸盐，其中5-氨基-2-硝基苯甲酸盐的生成会引起405nm处吸光度的上升。 在一定底物浓度范围内, γ-谷氨酰转移酶的催化产物5-氨基-2-硝基苯甲酸盐会引起405nm处吸光度的上升,同时其上升速率与血清中γ-谷氨酰转移酶活力成正比。

γ-谷氨酰转移酶

L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺 + 双苷肽---------- - →γ-谷氨酰双苷肽 + 5-氨基-2-硝基苯甲酸盐

标本：

病人准备：无特殊要求。

类型：血清、EDTA血浆，避免溶血。

标本稳定性：标本在2-8℃保存γ-谷氨酰转移酶活力可稳定7天。

仪器与材料:

仪器：卓越360生化分析仪

材料：上海科华生物工程股份有限公司的γ-谷氨酰转移酶试剂盒

试剂准备：γ-谷氨酰转移酶试剂盒为即开即用的液体试剂，无需特殊准备。试验用试管的

直径在12～16mm。

试剂组份：

参见试剂盒内说明书。

注意事项： 1.此试剂为体外诊断用。

2.不要入口，吞下有害。

3.如试剂空白吸光度值大于0.7或试剂混浊，请勿使用。

性能参数：

1.试剂空白：在波长405nm处，试剂空白吸光度应≤0.80A(光径1.0cm)。 2.精密度：批内变异cv≤4%；批间相对极差≤6%。 3.准确度：相对偏差≤10%。

4.试剂空白吸光值变化：ΔA/5分钟≤0.010A。

5.线性范围：要求试剂盒在样本浓度0~450U/L范围内,整个反应仍呈线性,r2≥0.995。 6.最低检测限：最低检测浓度至少应达到2U/L。

试剂的贮存：

1.试剂在2-8避光保存，有效期1年。

变质指示：如试剂空白吸光度值大于0.7或试剂混浊，请勿使用。 校准：

标准液的准备：这个实验不需要标准液。

质控：

9

在每一批标本中都应把至少2个浓度水平的质控品作为未知标本进行分析。

操作程序（逐步地）： 卓越360开机 装载试剂 输入参数 实施校准 加载样本

和仪器有关的操作程序请参照卓越360用户手册。

计算：

无需手工计算，在37℃每个标本的结果自动以U/L打印。

报告结果: 参考范围： 温度 男性 女性 每个实验室应建立自己的参考值。

25℃ 6-28U/L 4-18U/L 30℃ 6-43U/L 7-28U/L 37℃ 8-58U/L 8-30U/L 不正常结果的处理程序：

根据仪器参数的正常值会打印异常标志。

报告格式：

自动地打印37℃U/L的报告。

操作过程注意事项：

操作过程的限制性：上海科华生物工程股份有限公司γ-谷氨酰转移酶试剂盒的线性范围是0～450U/L。样品浓度超过线性上限应稀释重做。在卓越360中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。

参考文献：

1.Persijin, J. P. & van der Slik, W. , Clin. Chim. Clin. 14?1976),421. 2.Bulletin SGKC , Suppl. Vol. 27/1(1986).

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SOP标准操作程序

乳酸脱氢酶（LDH）

临床意义：

乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒适用于在生化分析仪上定量测定人血清乳酸脱氢酶（LDH）的活力。

乳酸脱氢酶增高主要见于心机梗塞、肝炎、肺梗塞、某些恶性肿瘤、白血病等。某些肿瘤转移所致的胸腹水中的乳酸脱氢酶活力往往升高。目前，常用于心机梗塞、肝病和某些恶性肿瘤的辅助诊断。

方法原理：

上海科华生物工程股份有限公司生产的乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒采用乳酸法。

+

乳酸氧化成丙酮酸（L→P），辅酶Ⅰ（NAD）还原成还原辅酶Ⅰ（NADH）生成，其反应产生的NADH引起340nm处吸光度的上升，吸光度上升的速率与LDH的活力呈正比关系。

L-乳酸 + NAD 丙酮酸 + NADH + H

+

LDH+

标本：

病人准备：无特殊要求。 类型：血清或肝素血浆。

标本稳定性：血清中总LDH活力在室温保存可稳定7天。

仪器与材料:

仪器：卓越360生化分析仪

材料：上海科华生物工程股份有限公司生产的乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒

试剂准备：乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒为即开即用的液体试剂，无需特殊准备。试验用试管的直径在12～16mm。

试剂组份：

参见试剂盒内说明书。

注意： 1.此试剂为体外诊断用。

2.不要入口，吞下有害。

3.保护剂为叠氮钠，与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的叠氮钠，如果排向下水道请用大量的水冲洗。

性能参数：

1.试剂空白吸光度与变化值：

在试剂盒有效期内，光径1cm, 波长340nm处吸光度≤0.50A，吸光度变化值ΔA/5min≤0.010A。

2..精密度：批内变异CV≤5%；批间相对极差≤10%。

3.准确度：采用Roche 的c.a.f.s作为标本测定，实测值介于标示值的70~100%。 4.线性范围：要求试剂盒在样本浓度为0~1000U/L时，整个反应呈线性，r2≥0.99。

试剂的贮存：1. 当保存于2～8℃，不开盖情况下至标签的失效期。 校准：

标准液的准备：这个实验不需要标准液。

质控：

在每一批标本中都应把至少2个浓度水平的质控品作为未知标本进行分析。

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操作程序（逐步地）：

卓越360开机 装载试剂 输入参数 实施校准 加载样本

完整的实验参数与操作程序可以在卓越360用户手册中查到。

计算：

无需手工计算，在37℃每个标本的结果自动以U/L打印。

报告结果:

参考范围：

115-220U/L

每个实验室应建立自己的参考值。

不正常结果的处理程序：根据仪器参数的正常值会打印异常标志。 报告格式：

自动地打印37℃U/L。

操作过程注意事项：

操作过程的限制性：上海科华生物工程股份有限公司生产的乳酸脱氢酶试剂盒的线性范

围是0～1000U/L，样品浓度超过线性上限应稀释重做。在卓越360中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。

参考文献：

1.Wroblewski, F & Ledne, J.S.,Proc. Soc. Exp. Biol. Med.,96,210(1955). 2.Amador. E. Dorfman, L. E. and Acker,W. E.C.,Clin. Chem.,9,391(1963).

3.Henry,R. J.,Chiamori,N. Golub, O.J.and Berkman, S., Am. J. Clin. Path.,34,381(1963).

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SOP标准操作程序

肌酸激酶（CK）

临床意义：

肌酸激酶（CK）试剂盒（N-乙酰半胱氨酸法）试剂盒适用于在生化分析仪上定量测定人血清肌酸激酶（CK）的活力。

肌酸激酶（CK）主要存在于骨骼肌和心肌，脑组织中也有存在。各种类型进行性肌萎缩时，血清肌酸激酶（CK）活性均可升高。神经因素引起的肌萎缩如脊髓灰白质炎时活力正常，皮肌炎时肌酸激酶（CK）活性可有轻度或中度增高。急性心肌梗塞后2～4小时就开始增高，可高达正常上限的10～12倍。肌酸激酶（CK）对诊断心肌梗塞较AST、LDH的特异性高，但此酶增高持续时间短，2～4天就恢复正常。病毒性心肌炎时也明显升高，对诊断及预后有参考价值。肌酸激酶（CK）增高还见于脑血管意外、脑膜炎、甲状腺机能低下等患者。还有一些非疾病因素如剧烈运动、各种插管及手术、肌肉注射冬眠灵和抗生素也可能引起肌酸激酶（CK）活性增高。

方法原理：

上海科华生物工程股份有限公司生产的肌酸激酶（CK）试剂盒采用N-乙酰半胱氨酸法。 肌酸激酶（CK）催化磷酸肌酸与二磷酸腺苷（ADP）反应产生三磷酸腺苷（ATP）与肌酸；偶联己糖激酶（HK）及葡萄糖－6－磷酸脱氢酶（G6PD）的催化反应。HK催化葡萄糖与ATP反应，形成葡萄糖－6－磷酸（G6P），G6PD催化G6P氧化，形成6－磷酸葡萄糖内酯（6－PG）及还原型辅酶Ⅱ（NADPH）。NADPH形成的速率与血清中肌酸激酶（CK）的活性成正比。

磷酸肌酸+ ADP 葡萄糖 + ATP

ＣＫ，ｐＨ６．８

肌酸 + ATP 葡萄糖-6-磷酸 + ADP

Ｇ６Ｐ－ＤＨ

ＨＫ

葡萄糖-6-磷酸 + NADP+ + H2O 葡萄糖酸-6-磷酸+NADPH + H+

标本：

病人准备：无特殊要求。 类型：血清或肝素血浆。

标本稳定性：血清于2℃-8℃保存，一天内活力下降10%；于15℃-25℃保存，一小时活力下降10%。

仪器与材料:

仪器：卓越360生化分析仪

材料：上海科华生物工程股份有限公司生产的肌酸激酶（CK）试剂盒 试剂准备：葡萄糖试剂盒为即开即用的液体试剂，无需特殊准备。试验用试管的直径在12～16mm。

试剂组份：

参见试剂盒内说明书。

注意：1. 此试剂为体外诊断用。

2. 不要入口，吞下有害。

3. 保护剂为叠氮钠，与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的叠

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氮钠，如果排向下水道请用大量的水冲洗。

试剂准备：肌酸激酶试剂盒为即开即用的液体试剂，无需特殊准备。 性能参数：

1.试剂空白吸光度与变化值

在试剂盒有效期内，光径1cm, 波长340nm处吸光度≤0.50A，吸光度变化值ΔA/5min≤0.010A。

2..精密度：批内变异CV≤5%；批间相对极差≤10%。 3.准确度：相对偏差≤10%。

4.线性范围：要求试剂盒在样本浓度为0~2000U/L时，整个反应呈线性，r2≥0.99。

试剂的贮存：1.当保存于2～8℃，不开盖情况下至标签的失效期。 校准：

标准液的准备：这个实验不需要标准液。

质控：

在每一批标本中都应把至少2个浓度水平的质控品作为未知标本进行分析。

操作程序（逐步地）： 卓越360开机

装载试剂 输入参数 实施校准 加载样本

完整的实验参数与操作程序可以在卓越360用户手册中查到。

计算：

无需手工计算，在37℃每个标本的结果自动以U/L打印。

报告结果:

参考范围： 温度 男性 女性 30℃（U/L） 16-136 18-115 37℃（U/L） 26-196 25-173 每个实验室应建立自己的参考值。

不正常结果的处理程序：根据仪器参数的正常值会打印异常标志。 报告格式：

自动地打印37℃U/L。

操作过程注意事项：

操作过程的限制性：上海科华生物工程股份有限公司生产的肌酸激酶（CK）试剂盒的线

性范围是0～2000 U/L，样品浓度超过线性上限应稀释重做。在卓越360中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。

参考文献：

1.Horder. M. et. Al, Eur. Clin. Chem. Biochem. 29,435(1991). 2.Szasz G., Clin. Chem. 22,650(1976).

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SOP标准操作程序

肌酸激酶MB型同工酶（CK-MB）

临床意义：

肌酸激酶MB型同工酶（CK-MB）试剂盒（免疫抑制法）试剂盒适用于在生化分析仪上定量测定人血清肌酸激酶MB型同工酶（CK－MB）的活力。

肌酸激酶(CK)分子是由M和B两种亚单位组成的二聚体，在细胞质内共有三种同工酶：即CK-MM、CK-MB、CK-BB。CK-MB主要分布于心肌中, 急性心肌梗塞胸痛发作后，血清中的CK－MB上升，先于总活力升高，24小时达峰值，36小时内其波动曲线与总活力相平行，至48小时消失。血清中CK－MB升高是国内外公认诊断急性心肌梗死和确定有无心肌坏死的重要指标，特别是对于心电图无Q波的急性心肌梗死和再发性心肌梗死，血清中CK－MB升高具有决定诊断的作用。

方法原理：

上海科华生物工程股份有限公司生产的肌酸激酶MB型同工酶（CK-MB）试剂盒采用免疫抑制法。

应用抗CK-M抗体抑制CK-M，但不影响MB和BB中B单位活性，然后用CK试剂（NAC为激活剂）测试CK的活力，测得的CK活力乘以2即为CK-MB活力，即肌酸激酶（CK）催化磷酸肌酸与二磷酸腺苷（ADP）反应产生三磷酸腺苷（ATP）与肌酸；偶联己糖激酶（HK）及葡萄糖－6－磷酸脱氢酶（G6PD）的催化反应。HK催化葡萄糖与ATP反应，形成葡萄糖－6－磷酸（G6P），G6PD催化G6P氧化，形成6－磷酸葡萄糖内酯（6－PG）及还原型辅酶Ⅱ（NADPH）。NADPH形成的速率与血清中肌酸激酶（CK）的活性成正比。

磷酸肌酸+ ADP 葡萄糖 + ATP

ＣＫ，ｐＨ６．８

肌酸 + ATP 葡萄糖-6-磷酸 + ADP

Ｇ６Ｐ－ＤＨ

ＨＫ

葡萄糖-6-磷酸 + NADP+ + H2O 葡萄糖酸-6-磷酸+NADPH + H+

标本：

病人准备：无特殊要求。 类型：血清或肝素血浆。

标本稳定性：4℃25小时失活率<10%； 25℃一小时失活率<10%。

仪器与材料:

仪器：卓越360生化分析仪

材料：上海科华生物工程股份有限公司生产的肌酸激酶MB型同工酶（CK-MB）试剂盒（免疫抑制法）。

试剂准备：肌酸激酶MB型同工酶（CK-MB）试剂盒（免疫抑制法）为即开即用的液体试剂，无需特殊准备。试验用试管的直径在12～16mm。

试剂组份：

参见试剂盒内说明书。

注意：1. 此试剂为体外诊断用。

2. 不要入口，吞下有害。

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3. 保护剂为叠氮钠，与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的叠

氮钠，如果排向下水道请用大量的水冲洗。

4.不同批号试剂请勿混用。

5.在测定CK-MB前，应用CK试剂（NAC法）测定CK总活力，如果CK总活力超

过1000U/L，则样本应以生理盐水稀释后再测定。

性能参数：

1.试剂空白吸光度与变化值

在试剂盒有效期内，光径1cm, 波长340nm处吸光度≤0.50A，吸光度变化值ΔA/5min≤0.010A。

2..精密度：批内变异CV≤5%；批间相对极差≤10%。

3.准确度：采用Roche 的c.a.f.s作为标本测定，实测值介于标示值的70~100%。 4.线性范围：要求试剂盒在样本浓度为0~500U/L时，整个反应呈线性，r2≥0.99。

试剂的贮存：1.当保存于2～8℃，不开盖情况下至标签的失效期。 校准：

标准液的准备：这个实验不需要标准液。

质控：

在每一批标本中都应把至少2个浓度水平的质控品作为未知标本进行分析。

操作程序（逐步地）： 卓越360开机

装载试剂 输入参数 实施校准 加载样本

完整的实验参数与操作程序可以在卓越360用户手册中查到。

计算：

无需手工计算，在37℃每个标本的结果自动以U/L打印。

报告结果:

参考范围： 温度 CK-MB 30℃（U/L） <16 37℃（U/L） <25 每个实验室应建立自己的参考值。

不正常结果的处理程序：根据仪器参数的正常值会打印异常标志。 报告格式：

自动地打印37℃U/L。

操作过程注意事项： 操作过程的限制性：上海科华生物工程股份有限公司生产的肌酸激酶MB型同工酶（CK-MB）

试剂盒的线性范围是0～500U/L，样品浓度超过线性上限应稀释重做。在卓越360中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。

参考文献：

1.Wurburg,U. et. Al., Clin. Chem. 54,357(1976). 2.Szasz G. Gruber,W.,, Clin. Chem. 22,650(1976). 3.Stein W., Med. Welt.,36,572(1985).

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SOP标准操作程序

CHE 胆碱酯酶（丁酰硫代胆碱-铁氰化钾法）试剂盒

临床意义：

本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清中拟胆碱酯酶（CHE）的活力。

血清拟胆碱酯酶是在肝脏中生成然后分泌到血液中的酶，可将胆碱酯水解成胆碱和有机酸。当实质性肝损伤时胆碱酯酶活力降低。 其临床意义主要有：

（1）急慢性肝炎、肝硬化、肝功能不全时胆碱酯酶明显降低；慢性胆道疾患、肝癌合并肝硬化时胆碱酯酶降低。

（2）有机磷中毒、营养不良、肥胖则出现血清胆碱酯酶增高。 （3）脂肪肝，肾脏病变，肥胖则出现血清胆碱酯酶增高。

方法原理：

丁酰硫代胆碱-铁氰化钾法（DGKC1994new）1

胆碱酯酶

丁酰硫代胆碱 + H2O 丁酸 + 硫代胆碱

2硫代胆碱 + 2[Fe(CN)6]3- + 2OH- 二硫代（双）胆碱+ H2O + 2[Fe(CN)6]4-

底物碘化丁酰硫代在血清中拟胆碱酯酶的作用下水解为丁酸和硫代胆碱，然后试剂中的铁氰化钾被硫代胆碱还原为亚铁氰化钾，引起在波长405 nm处吸光度下降，下降速率与血清中CHE活力成正比。

样本：

样本类型： 新鲜无溶血现象的血清、肝素化血浆或柠檬酸抗凝血浆，血浆须离心去除血细

胞。

最少样品量：0.2ml。

样本稳定性：血清中的CHE在2～8℃可稳定14天。

仪器与试剂:

仪 器：卓越360生化分析仪

试 剂：上海科华生物工程股份有限公司的胆碱酯酶试剂盒

试剂准备：胆碱酯酶试剂盒为即开即用的液体双剂型，无需特殊准备。 试剂组份：

参见试剂盒内说明书。 注意事项：

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1.此试剂为体外诊断用。

2.试剂有毒，不要入口，吞下有害，如误服（包括内部接触）应立即寻求医疗保护。避免试剂和眼睛，皮肤及粘膜接触，如不慎接触（外部接触）应用大量的水冲洗受损害的部位。： 性能参数：

1.精密度（重复性）：

批内变异系数 CV≤6%； 批间相对极差 CV≤6%。 2.准确度：

相对偏差≤15％。

3.病人结果可报告范围（线性范围）：

0～25000U/L（37℃）。 4.分析特异性（抗干扰能力）：

以下浓度的干扰物质对测定结果的影响可忽略：抗坏血酸（40mg/dl），胆红素（40mg/dl），血红蛋白（500mg/dl），脂质（1.2g/dl），尿酸（50mg/dl），肌酐（50mg/dl），还原型谷胱甘肽（50mg/dl） 5.稳定性：

试剂在2～8℃避光保存，有效期为1年；

试剂开启后在2～8℃避光保存，可稳定42天。 变质指示：

如试剂混浊，或以蒸馏水为空白，试剂工作液在405nm处吸光度小于1.0，请勿使用。

校准：

使用生理盐水(蒸馏水)和理论K因素进行校准，或者使用生理盐水(蒸馏水)和其它质量可靠的校准血清进行二点校准。

质控：

至少2个浓度水平的质控品。

操作程序：

卓越360开机 装载试剂 输入参数 实施校准 加载样本

和仪器有关的操作程序请参照卓越360用户手册。 计算：

无需手工计算，在37℃每个样本的结果自动以U/L打印。

报告结果:

参考范围：

血清和血浆：男：5120～11550（U/L）女：4290～10520（U/L）

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参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。

不正常结果的处理程序：

根据仪器参数的正常值会打印异常标志。 报告格式：

自动地打印37℃U/L的报告，如果以SI单位（uKat/L）报告结果，要乘以0.017。

操作过程注意事项：

操作过程的限制性：

胆碱酯酶试剂盒的线性范围是0～25000U/L。样品浓度超过线性上限应稀释重做。如在卓越360中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。超范围的标本也可以用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数，卓越360可以应用自动重做功能自动重作超范围的标本。

参考文献：

1. Ellen Schmidt, W. Gerhardt, E.Henkel, R.Klauke, W.Liese, K.Lorentz, O.Sonntag, W.Stein, G.

Weidemann (1992). Proposal of standard methods for the determination of enzyme catalytic concentrations in serum and plasma at 37℃ ——II. Cholinesterase. Eur.J. Clin. Chem. Clin. Biochem. Vol.30, 163-170

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SOP标准操作程序

甘油三酯 (甘油磷酸氧化酶法)试剂盒

临床意义：

本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清中甘油三酯的含量。

甘油三酯（TG）是人血脂中的重要成分，其含量的高低有助于诊断高脂血症，肾病综合症，冠状动脉粥样硬化，甲状腺机能，糖尿病以及肝病等众多疾病。

正常人甘油三酯水平<2.3mmol/L(<200mg/dl),但高低易受生活条件影响，且其个体内差异及个体间差异均大于总胆固醇，还随年龄增加逐渐升高。当TG>4.5mmol/L(>400mg/dl)即可诊断为高甘油三酯血症。

临床上，TG升高可见于以下疾病：

（1）家庭性高TG血病，家庭性混合型高脂血症。

（2）继发性疾病常见于：糖尿病、糖原累积症、甲状腺功能不足、肾病综合征、妊娠等。 （3）急性胰岛炎高危状态时，TG>11.3mmol/L(>1000mg/dl)。高血压、脑血管病、冠心病、糖尿病、肥胖与高脂蛋白血症常有家庭性集聚现象。单纯的高TG血症不是冠心病的独立危险因子，只有伴以高TC、高LDL－C、低HDL－C时才有病理意义。

而TG减低见于以下疾病：甲状腺功能亢进，肾上腺皮质机能减退，肝功能严重低下。

方法原理：

上海科华生物工程股份有限公司的甘油三酯试剂盒采用的是甘油磷酸氧化酶法

脂蛋白脂肪酶

甘油三酯 + H2O ----------→ 甘油 + 脂肪酸

甘油激酶

甘油 + ATP ------------→L-α-磷酸甘油 + ADP

甘油磷酸氧化酶

L-α-磷酸甘油 + O2 ------------------→磷酸二羟丙酮 + H2O2

过氧化物酶

H2O2 + 4-氨基安替比林 + ESPAS---------------→醌亚胺 + H2O

ESPAS:N-乙基-N-(3-磺丙基)-间-茴香胺

血清中的甘油三酯在脂蛋白脂肪酶的作用下水解成甘油和脂肪酸,甘油在甘油激酶的催化下和ATP一起反应生成L-α-磷酸甘油和ADP,其中的产物L-α-磷酸甘油在甘油磷酸氧化酶的氧化下产生磷酸二羟丙酮和过氧化物,最后过氧化物在过氧化物酶的催化下与色原底物4-氨基安替比林和4-氯酚反应生成红色化合物醌亚胺.

由于醌亚胺在波长550nm处有最大吸收峰,所以在一定底物浓度范围内, 550nm处吸光度的变化值与样本中甘油三酯的含量成正比.

样本：

样本类型： 新鲜抽取的至少禁食12h以上的血清。 最少样品量：0.2ml。

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样本稳定性：抽血后2h内必须完成离心分离，如当天不能测定，可暂存4℃冰箱内，至少

可稳定4天，如需长期保存，最好－80℃冷冻。

仪器与试剂:

仪 器：卓越360生化分析仪

试 剂：上海科华生物工程股份有限公司的甘油三酯 (甘油磷酸氧化酶法)试剂盒

试剂准备：甘油三酯 (甘油磷酸氧化酶法)试剂盒为即开即用的液体试剂，无需特殊准备。

试验用试管的直径在12～16mm。 试剂组份：

参见试剂盒内说明书。 注意事项：

1. 此试剂为体外诊断用，不要吞服。

2. 试剂有毒，不要入口，吞下有害，如误服（包括内部接触）应立即寻求医疗保护。避免试剂和眼睛，皮肤及粘膜接触，如不慎导致试剂接触粘膜或皮肤，应立即用大量清水冲洗，如有不适，则应去医院诊治。

3. 试剂中含有叠氮钠，可与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物，如果排向下水道请用大量的水冲洗。 性能参数：

1.精密度（重复性）：

批内精密度： CV≤4% 批间相对极差：CV≤6％。 2.准确度：

相对偏差≤10%（病理值质控血清） 相对偏差≤15%（正常值质控血清） 3.病人结果可报告范围（线性范围）：

0~11.3mmol/l（0～1000mg/dl）。

4.分析灵敏度：

测定本试剂盒内所附标准液（2.26mmol/l）, 其吸光度应在0.25～0.35A之间 。 5.分析特异性（抗干扰能力）

抗坏血酸≤2g/L或胆红素≤684μmol/L或血红蛋白≤5g/L，对测定的干扰可忽略。 6.稳定性：

试剂在2～8℃避光保存，有效期为1年；

试剂开启后在2～8℃避光保存，可稳定30天。 变质指示：

如试剂混浊或以蒸馏水为空白，试剂在550nm波长吸光度值大于0.1时，请勿使用。

校准：

使用生理盐水（蒸馏水）和科华公司校准品（或其它质量可靠的校准血清）进行二点定标。

质控：

至少2个浓度水平的质控品。

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操作程序：

卓越360开机 装载试剂 输入参数 实施校准 加载样本

和仪器有关的操作程序请参照卓越360用户手册。 计算：

无需手工计算，在37℃每个样本的结果自动以mmol/L打印。

报告结果:

参考范围：

男：0.48～1.82mmol/L(43～161mg/dl)； 女：0.58～1.88mmol/L(51～167mg/dl)；

参考值因年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。

不正常结果的处理程序：

根据仪器参数的正常值会打印异常标志。 报告格式：

自动地打印37℃mmol/L的报告。

操作过程注意事项：

操作过程的限制性：

甘油三酯 (甘油磷酸氧化酶法)试剂盒的线性范围是0～11.3mmol/l（0～1000mg/dl）。样品浓度超过线性上限应稀释重做。如在卓越360中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。超范围的标本也可以用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数，卓越360可以应用自动重做功能自动重作超范围的标本。

参考文献：

1.N.J.Jacobs.,et al.Arch.Biochem.Biophys.88:250(1960). 2.L.K.Koditechek.,et al.J.Bacteriology.98:1063(1969). 3.R.W.Spayd.,et al.Clin.Chem.24:1343(1978). 4.影山，临床检查.246:718(1980).

22

SOP标准操作程序

总胆固醇 (氧化酶法)试剂盒

临床意义：

本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清中总胆固醇的含量。

临床上胆固醇浓度受年龄、饮食、遗传和工作状况影响。高TC血症是冠心病的主要危险因素之一。高TC有原发和继发两种，包括见于家族性高胆固醇血症、家族性ApoB缺陷症、多源性高TC、混合性高脂血症以及其它的如肾综合症，胆总管阻塞，黏液性水肿和糖尿病，肥大性骨关节炎，老年性白内障和牛皮癣等血清胆固醇也会增高。

在恶性贫血，溶血性贫血以及甲状腺机能亢进时，血清胆固醇降低，其他如感染和营养不良等情况下，胆固醇总量常见降低。

方法原理：

上海科华生物工程股份有限公司的总胆固醇试剂盒采用的是氧化酶法

胆固醇酯酶

总胆固醇 + H2O ------------→ 游离胆固醇 + 脂肪酸

胆固醇氧化酶

游离胆固醇 + O2 ---------------→H2O2 + Δ4-胆甾烯酮

过氧化物酶

H2O2 + 4-氨基安替比林 + ESPAS---------------→醌亚胺 + H2O

ESPAS:N-乙基-N-(3-磺丙基)-间-茴香胺

血清中的总胆固醇在胆固醇酯酶的作用下水解成游离胆固醇和脂肪酸,游离胆固醇在胆固醇氧化酶的催化下,氧化成Δ4-胆甾烯酮和双氧水,最后双氧水在过氧化物酶的催化下与色原底物4-氨基安替比林和ESPAS反应生成红色化合物醌亚胺.

由于醌亚胺在波长550nm处有吸收峰,所以在一定底物浓度范围内, 550nm处吸光度的变化值与样本中总胆固醇的含量成正比

样本：

样本类型： 新鲜抽取的至少禁食12h以上的血清。 最少样品量：0.2ml。

样本稳定性：抽血后2h内必须完成离心分离，如当天不能测定，可暂存4℃冰箱内，至少

可稳定4天，如需长期保存，最好－80℃冷冻。

仪器与试剂:

仪 器：卓越360生化分析仪

试 剂：上海科华生物工程股份有限公司的总胆固醇 (氧化酶法)试剂盒

试剂准备：总胆固醇 (氧化酶法)试剂盒为即开即用的液体试剂，无需特殊准备。试验用试

管的直径在12～16mm。

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试剂组份：

参见试剂盒内说明书。 注意事项：

1. 此试剂为体外诊断用，不要吞服。

2. 试剂有毒，不要入口，吞下有害，如误服（包括内部接触）应立即寻求医疗保护。避免试剂和眼睛，皮肤及粘膜接触，如不慎接触（外部接触）应用大量的水冲洗受损害的部位。如仍有不适则应前往医院诊治。

3. 试剂中含有叠氮钠，可与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物，如果排向下水道请用大量的水冲洗。 性能参数：

1.精密度（重复性）：

批内精密度： CV≤3% 批间相对极差：CV≤5％。 2.准确度：

相对偏差≤10%（病理值质控血清） 相对偏差≤15%（正常值质控血清）

3.病人结果可报告范围（线性范围）：

0～25.85mmol/l（0～1000mg/dl）。 4.分析灵敏度：

测定本试剂盒内所附标准液（5.17mmol/l）, 其吸光度应在0.4～0.5A之间 5.分析特异性（抗干扰能力）

抗坏血酸≤2g/L或胆红素≤684μmol/L或血红蛋白≤4g/L，对测定的干扰可忽略。 6.稳定性：

试剂在2～8℃避光保存，有效期为1年；

试剂开启后在2～8℃避光保存，可稳定30天。 变质指示：

如试剂混浊或以蒸馏水为空白，试剂在550nm波长吸光度值大于0.08时，请勿使用。

校准：

使用生理盐水（蒸馏水）和科华公司校准品（或其它质量可靠的校准血清）进行二点定标。

质控：

至少2个浓度水平的质控品。

操作程序：

卓越360开机 装载试剂 输入参数 实施校准 加载样本

和仪器有关的操作程序请参照卓越360用户手册。

24

计算：

无需手工计算，在37℃每个样本的结果自动以mmol/L打印。

报告结果:

参考范围：

血清：3.35～6.45mmol/L(130～250mg/dl)；

参考值因年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。

不正常结果的处理程序：

根据仪器参数的正常值会打印异常标志。 报告格式：

自动地打印37℃mmol/L的报告。

操作过程注意事项：

操作过程的限制性：

总胆固醇 (氧化酶法)试剂盒的线性范围是0～25.85mmol/l（0～1000mg/dl）。样品浓度超过线性上限应稀释重做。如在卓越360中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。超范围的标本也可以用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数，卓越360可以应用自动重做功能自动重作超范围的标本。

参考文献：

1.W.Richmond.Clin.Chem.19:1350(1973). 2.C.Allain.,et al.Clin.Chem.20:470(1974).

25

SOP标准操作程序

尿素氮 (紫外-谷氨酸脱氢酶法)试剂盒

临床意义：

本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清或尿液中尿素氮的含量。

血尿素氮（BUN）是人体蛋白质代谢的终末产物。肝脏是生成尿素的最主要器官。尿素主要经肾脏排出，小部分经皮肤由汗液排出，每24小时由肾排出尿素10～30克。血液中尿素全部从肾小球滤过，正常情况下约30%～40%被肾小管重吸收；肾小管也可排泌少量尿素，严重肾功能衰竭时排泌量增加。

血清尿素氮的正常值为2.9～7.5毫摩尔/升，但其水平受诸多因素影响，如疾病、感染、高热、脱水、消化道出血、进食高蛋白餐等因素的影响；而低蛋白饮食或长时间不能进食或多饮水大量排尿时，尿素氮水平降低。

临床上，测定血液或尿液中尿素的含量有助于以下疾病的诊断：

肾前性疾病：如由剧烈呕吐、幽门梗阻、肠梗阻和长期腹泻等引起的失水。

肾性疾病：如急性肾小球肾炎、肾病晚期、肾功能衰竭、慢性肾炎和中毒性肾炎等疾病。 肾后性疾病：如前列腺肿大、尿路结石、尿道狭窄、膀胱肿瘤等。

方法原理：

上海科华生物工程股份有限公司的尿素氮试剂盒采用的是紫外-谷氨酸脱氢酶法

脲酶

尿素 + H2O + 2H --------------→2NH4 + CO2

谷氨酸脱氢酶

NH4+α-酮戊二酸 +β-NADH--------------------→谷氨酸 + H2O + NAD

血清中的尿素在酸性条件下，在脲酶的催化下水解生成NH4+和CO2,其中的NH4+与α-酮戊二酸 和β-NADH在下谷氨酸脱氢酶的催化下生成了谷氨酸，并同时引起了β-NADH的氧化,使波长340nm处的吸光度产生下降.

在一定底物浓度范围内,β-NADH的氧化所引起的340nm处吸光度的下降速率与血清中尿素氮的含量成正比.

+

+

+

+

样本：

样本类型： 新鲜血清或24h尿液。

样本预处理：24h尿液样本应按1：10用生理盐水进行机外稀释；也可在仪器参数中选择尿

液样本参数，让仪器自动稀释 最少样品量：0.2ml。

样本稳定性：2小时内分离出血清，室温放置不超过8小时；4℃保存不超过48小时；长时间保存需在冰冻条件下，且只能冻融一次；尿液样本应在2小时内分析，且2～8℃放置。

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仪器与试剂:

仪 器：卓越360生化分析仪

试 剂：上海科华生物工程股份有限公司的尿素氮 (紫外-谷氨酸脱氢酶法)试剂盒

试剂准备：尿素氮 (紫外-谷氨酸脱氢酶法)试剂盒为即开即用的液体试剂，无需特殊准备。

试验用试管的直径在12～16mm。 试剂组份：

参见试剂盒内说明书。 注意事项：

1. 此试剂为体外诊断用，不要吞服。

2. 试剂有毒，不要入口，吞下有害，如误服（包括内部接触）应立即寻求医疗保护。避免试剂和眼睛，皮肤及粘膜接触，如不慎接触（外部接触）应用大量的水冲洗受损害的部位，如仍有不适应前往医院诊治。

3. 试剂中含有叠氮钠，可与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物，如果排向下水道请用大量的水冲洗。 性能参数：

1.精密度（重复性）：

批内精密度： CV≤4% 批间相对极差：≤5％。 2.准确度：

相对偏差≤10%（病理值质控血清） 相对偏差≤15%（正常值质控血清）

3.病人结果可报告范围（线性范围）：

0～35.7mmol/L（0～100mg/dl）。 4.分析灵敏度：

测定本试剂盒内所附标准液（7.14 mmol/l）, 其吸光度变化值应在0.04～0.055A之间 5.分析特异性（抗干扰能力）

血红蛋白≤3g/L或胆红素≤342mmol/L或脂质≤2000mg/L，对测定的干扰可忽略。 6.稳定性：

试剂在2～8℃避光保存，有效期为1年；

试剂开启后在2～8℃避光保存，可稳定30天。 变质指示：

如试剂混浊或以蒸馏水为空白，试剂在340nm处吸光度值小于1.0时，请勿使用。

校准：

使用生理盐水（蒸馏水）和科华公司校准品（或其它质量可靠的校准血清）进行二点定标。

质控：

至少2个浓度水平的质控品。

27

操作程序：

卓越360开机 装载试剂 输入参数 实施校准 加载样本

和仪器有关的操作程序请参照卓越360用户手册。 计算：

无需手工计算，在37℃每个样本的结果自动以mmol/L打印。

报告结果:

参考范围：

血清和血浆（尿素）：3.9～6.1mmol/L(10.9～17.1mg/dl)； 24小时尿液：200～600mmol/24h；

参考值因年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。

不正常结果的处理程序：

根据仪器参数的正常值会打印异常标志。 报告格式：

自动地打印37℃mmol/L的报告。

操作过程注意事项：

操作过程的限制性：

尿素氮 (紫外-谷氨酸脱氢酶法)试剂盒的线性范围是0～35.7mmol/L（100mg/dl）。样品浓度超过线性上限应稀释重做。如在卓越360中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。超范围的标本也可以用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数，卓越360可以应用自动重做功能自动重作超范围的标本。

参考文献：

1.C.J.Halletl.et al.Clin.Chim.Acta.35,33(1971).

2.H.Shimizu.et al.J.Ferment.Technol.57(5),428(1979).

28

SOP标准操作程序

肌酐 (肌氨酸氧化酶法)试剂盒

临床意义：

本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清或尿液中肌酐的含量。

人体中的肌酐经肾小球滤过后不被肾小管重吸收，通过肾小管排泄，在肾脏疾病初期，血清肌酐值通常不升高，直至肾脏实质性损害，血清肌酐值才增高。所以，血肌酐测定对诊断晚期肾脏病临床意义较大。

血清肌酐水平随人的年龄，体重和性别而变化。有时它在肌肉块少，恶病质的病人，截肢者和老年人中的水平较低。血清肌酐水平正常并不排除肾功能受损。

方法原理：

上海科华生物工程股份有限公司的肌酐 (肌氨酸氧化酶法)试剂盒的测定原理如下：

肌酐氨基水解酶

肌酐+H2O--------------→肌酸

肌酸脒基水解酶

肌酸+H2O---------------→肌氨酸+尿素

肌氨酸氧化酶

肌氨酸+H2O+O2------------→甘氨酸+HCHO+H2O2 过氧化物酶

2H2O2+4-氨基安替比林+ N-乙基-N-磺丙基-间甲苯胺----------→醌亚胺+4H2O 肌酐在肌酐氨基水解酶的作用下水解成肌酸，肌酸在肌酸脒基水解酶的作用下生成肌氨酸和尿素，其中产物肌氨酸在肌氨酸氧化酶的作用下生成甘氨酸、过氧化氢和甲醛。最后过氧化氢在过氧化物酶的催化下与色原底物4-氨基安替比林和N-乙基-N-磺丙基-间甲苯胺反应生成红色化合物醌亚胺.

由于醌亚胺在波长546nm处有最大吸收峰,所以在一定底物浓度范围内, 546nm处吸光度的变化值与样本中肌酐的含量成正比.

样本：

样本类型： 新鲜无溶血现象的血清或24h尿液。

样本预处理：24h尿液样本应按1：20用生理盐水进行机外稀释；也可在仪器参数中选择尿

液样本参数，让仪器自动稀释。 最少样品量：0.2ml。

样本稳定性：样本于4℃保存，可稳定7天。

仪器与试剂:

仪 器：卓越360生化分析仪

试 剂：上海科华生物工程股份有限公司的肌酐 (肌氨酸氧化酶法)试剂盒

29

试剂准备：肌酐 (肌氨酸氧化酶法)试剂盒为即开即用的液体试剂，无需特殊准备。试验用

试管的直径在12～16mm。 试剂组份：

参见试剂盒内说明书。 注意事项：

1. 此试剂为体外诊断用，不要吞服。

2. 试剂有毒，不要入口，吞下有害，如误服（包括内部接触）应立即寻求医疗保护。避免试剂和眼睛，皮肤及粘膜接触，如不慎导致试剂接触粘膜或皮肤，应立即用大量清水冲洗，如仍有不适，则应去医院诊治。

3. 试剂中含有叠氮钠，可与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物，如果排向下水道请用大量的水冲洗。 性能参数：

1.精密度（重复性）：

批内：CV≤6％。

批间相对极差：≤6％。 2.准确度：

相对偏差≤10%

3.病人结果可报告范围（线性范围）：

0~8840μmol/l。 4.分析灵敏度：

测定本试剂盒内所附标准液（265μmol/l）, 其吸光度应在0.095～0.125A之间 。 5.稳定性：

试剂在2～8℃避光保存，有效期为1年；

试剂开启后在2～8℃避光保存，可稳定30天。 变质指示：

如试剂混浊或有沉淀时，请勿使用。

校准：

使用生理盐水（蒸馏水）和科华公司校准品（或其它质量可靠的校准血清）进行二点定标。

质控：

至少2个浓度水平的质控品。

操作程序：

卓越360开机 装载试剂 输入参数 实施校准 加载样本

和仪器有关的操作程序请参照卓越360用户手册。 计算：

无需手工计算，在37℃每个样本的结果自动以μmol/L打印。

30

报告结果:

参考范围：

血清和血浆：男：70～115μmol/L (0.8～1.3mg/dl)；

女：44～80μmol/L（0.5～0.9mg/dl）；

24h尿液： 男：7000～18000μmol/24h； 女：5300～16000μmol/24h； 各实验室应建立自己的参考值范围。 不正常结果的处理程序：

根据仪器参数的正常值会打印异常标志。 报告格式：

自动地打印37℃μmol/L的报告。

操作过程注意事项：

操作过程的限制性：

肌酐 (肌氨酸氧化酶法)试剂盒的线性范围是0～8840μmol/L。样品浓度超过线性上限应稀释重做。如在卓越360中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。超范围的标本也可以用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数，卓越360可以应用自动重做功能自动重作超范围的标本。

参考文献：

1.斋藤正行等，临床化学分析Ⅱ（东京化学同人）53（1968）. 2.安原正善等，临床检验仪器试剂，8（5），1183（1985）. 3.小西八郎等，临床检验自动化学杂志.

31

SOP标准操作程序 尿酸 (氧化酶法)试剂盒

临床意义：

本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清或尿液中尿酸的含量。

尿酸（UA）是人体核苷酸谢的代谢产物。临床上尿酸测定对痛风诊断最有帮助，痛患者血清中尿酸常有增高。另外，在核酸代谢增加时，如白血病，多发性骨髓瘤，红细胞增多症等；以及在肾功能衰退、氯仿中毒，四氯化碳中毒及铅中毒，妊娠反应及食用富含核酸的食物等，均可引起血中尿酸含量增高。

方法原理：

上海科华生物工程股份有限公司的尿酸试剂盒采用的是氧化酶法

尿酸酶

尿酸 + H2O + O2--------------→尿囊素 + H2O2 + CO2

过氧化物酶

H2O2 + 4-氨基安替比林 + ESPAS---------------→醌亚胺 + 2 H2O

ESPAS:N-乙基-N-(3-磺丙基)-间-茴香胺

血清中的尿酸在尿酸酶的催化下和H2O与O2反应生成尿囊素, H2O2和CO2,其中的H2O2与4-氨基安替比林和ESPAS在过氧化物酶的催化下生成了红色化合物醌亚胺.

由于醌亚胺在波长550nm处有吸收峰,所以在一定底物浓度范围内, 550nm处吸光度的变化值与样本中尿酸的含量成正比.

样本：

样本类型： 新鲜血清或24h尿液。

样本预处理：24h尿液样本应按1：10用生理盐水进行机外稀释；也可在仪器参数中选择尿

液样本参数，让仪器自动稀释。 最少样品量：0.2ml。

样本稳定性：血清样本，于2～8℃保存，可稳定4天；

尿液样本应在2小时内分析，且冷藏放置。

仪器与试剂:

仪 器：卓越360生化分析仪

试 剂：上海科华生物工程股份有限公司的尿酸 (氧化酶法)试剂盒

试剂准备：尿酸 (氧化酶法)试剂盒为即开即用的液体试剂，无需特殊准备。试验用试管的

直径在12～16mm。 试剂组份：

参见试剂盒内说明书。 注意事项：

32

1. 此试剂为体外诊断用，不要吞服。

2. 试剂有毒，不要入口，吞下有害，如误服（包括内部接触）应立即寻求医疗保护。避免试剂和眼睛，皮肤及粘膜接触，如不慎接触（外部接触）应用大量的水冲洗受损害的部位，如仍有不适应前往医院诊治。

3. 试剂中含有叠氮钠，可与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物，如果排向下水道请用大量的水冲洗。 性能参数：

1.精密度（重复性）：

批内精密度：CV≤4% 批间相对极差：≤5％。 2.准确度：

相对偏差≤10%（病理值质控血清） 相对偏差≤15%（正常值质控血清）

3.病人结果可报告范围（线性范围）：

0～4.72mmol/l（0～80mg/dl）。 4.分析灵敏度：

测定本试剂盒内所附标准液（0.59 mmol/l）, 其吸光度应在0.15～0.21A之间。 5.分析特异性（抗干扰能力）

抗坏血酸≤2g/L或胆红素≤684μmol/L或血红蛋白≤5g/L，对测定的干扰可忽略。 6.稳定性：

试剂在2～8℃避光保存，有效期为1年；

试剂开启后在2～8℃避光保存，可稳定30天。 变质指示：

如试剂混浊或以蒸馏水为空白，或在550nm处吸光度值大于0.3A时，请勿使用。

校准：

使用生理盐水（蒸馏水）和科华公司校准品（或其它质量可靠的校准血清）进行二点定标。

质控：

至少2个浓度水平的质控品。

操作程序：

卓越360开机 装载试剂 输入参数 实施校准 加载样本

和仪器有关的操作程序请参照卓越360用户手册。 计算：

无需手工计算，在37℃每个样本的结果自动以μmol/L打印。

33

报告结果:

参考范围：

血清：男：180～440μmol/L(3.0～7.5mg/dl)； 女：150～350μmol/L(2.6～6.0mg/dl)； 24h尿液：2400～5900μmol/24h；

根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。 不正常结果的处理程序：

根据仪器参数的正常值会打印异常标志。 报告格式：

自动地打印37℃μmol/L的报告。

操作过程注意事项：

操作过程的限制性：

尿酸 (氧化酶法)试剂盒的线性范围是0～4.72mmol/l（0～80mg/dl）。样品浓度超过线性上限应稀释重做。如在卓越360中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。超范围的标本也可以用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数，卓越360可以应用自动重做功能自动重作超范围的标本。

参考文献：

1.N.Cochman.,et al.Clin.Chem.17(12):1154(1971). 2.P.Kabasikalian.,et al.Clin.Chem.19:522(1973). 3.R.C.Trivedi.,et al.Clin.Chem.24(11):1908(1978). 4.G.T.B.Sanders.,et al.Clin.Chem.Acta.101:299(1980). 5.P.Fossati.,et al.Clin.Chem.26:277(1980).

34

SOP标准操作程序

总蛋白 (双缩脲比色法)试剂盒

临床意义：

本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清中总蛋白的含量。

总蛋白系白蛋白及球蛋白之和，其临床意义决定于白、球蛋白的变化。增高可见于各种原因失水所致血液浓缩（如腹泻、呕吐、休克、高热），引起球蛋白单克隆或多克隆性增高的疾病（见球蛋白项）；降低见于各种原因引起的血清蛋白质丢失和摄入不足，以及蛋白质合成障碍（见白蛋白项）。临床上，总蛋白往往和白蛋白一起作为肝硬化的辅助诊断指标。

方法原理：

上海科华生物工程股份有限公司的总蛋白试剂盒采用的是双缩脲比色法。

碱性条件

蛋白质中的肽键 + Cu --------→ 紫红色络合物

蛋白质中的肽键在碱性条件下，与铜离子反应生成紫红色络合物，并且引起550nm处吸光度的上升。由于反应所产生的化合物在波长550nm处有吸收峰,所以在一定底物浓度范围内, 550nm处吸光度的变化值与样本中总蛋白的含量成正比.

2+

样本：

样本类型： 新鲜无溶血现象的血清或血浆。 最少样品量：0.2ml。

样本稳定性：新鲜血清于2～8℃避光保存，可稳定7天。

仪器与试剂:

仪 器：卓越360生化分析仪

试 剂：上海科华生物工程股份有限公司的总蛋白 (双缩脲比色法)试剂盒

试剂准备：总蛋白 (双缩脲比色法)试剂盒为即开即用的液体试剂，无需特殊准备。试验用

试管的直径在12～16mm。 试剂组份：

参见试剂盒内说明书。 注意事项：

1. 此试剂为体外诊断用，不要吞服。

2. 试剂有腐蚀性。不要入口。避免和眼睛，皮肤或衣服接触。如有接触，应立即用大量的水冲洗接触部位，若仍有不适应前往医院诊治。 性能参数：

1.精密度（重复性）：

批内精密度： CV≤4% 批间相对极差：≤5％。

35

2.准确度：

相对偏差≤10%（病理值质控血清） 相对偏差≤15%（正常值质控血清）

3.病人结果可报告范围（线性范围）：

0～100g/l。 4.分析灵敏度：

测定本试剂盒内所附标准液（50g/l）, 其吸光度应在0.30～0.50A之间。 5.分析特异性（抗干扰能力）

血红蛋白≤1g/L或脂质≤2000g/L，对测定的干扰可忽略。 6.稳定性：

试剂在2～8℃避光保存，有效期为1年；

试剂开启后在2～8℃避光保存，可稳定30天。 变质指示：

如试剂混浊或有沉淀，请勿使用。

校准：

使用生理盐水（蒸馏水）和科华公司校准品（或其它质量可靠的校准血清）进行二点定标。

质控：

至少2个浓度水平的质控品。

操作程序：

卓越360开机 装载试剂 输入参数 实施校准 加载样本

和仪器有关的操作程序请参照卓越360用户手册。 计算：

无需手工计算，在37℃每个样本的结果自动以g/L打印。

报告结果:

参考范围：

血清和血浆：60～80g/L；

建议每个实验室建立自己的参考值。 不正常结果的处理程序：

根据仪器参数的正常值会打印异常标志。 报告格式：

自动地打印37℃ g/L的报告。

36

操作过程注意事项：

操作过程的限制性：

总蛋白 (双缩脲比色法)试剂盒的线性范围是0～100g/L。样品浓度超过线性上限应稀释重做。如在卓越360中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。超范围的标本也可以用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数，卓越360可以应用自动重做功能自动重作超范围的标本。

参考文献：

1.Weichselbaum,P.E., Am.J.Clin.Path.16:40(1946). 2.Doumas.B.T.,Clin.Chem.27:1642(1981).

37

SOP标准操作程序

白蛋白 (溴甲酚绿法)试剂盒

临床意义：

本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清中白蛋白的含量。 血清白蛋白在肝脏中合成，其浓度的异常常见于以下症状：

增高：见于严重的腹泻、呕吐所造成的脱水及休克，以及由饮水量不足或广泛烧伤所引起的脱水、急性大出血和阿狄森氏病。 降低：见于蛋白质丢失过多，如肾病综合征、严重出血和大面积烧伤，以及胸、腹腔积液等。消耗性疾病，如恶性肿瘤、甲亢、各种慢性发热性消耗疾患。白蛋白合成减少，如慢性肝脏疾病，尤见于肝硬变、急性和亚急性重症肝炎病情恶化时。当TP＜50g/L，Alb＜30g/L，常出现腹水。蛋白质摄入不足，如长期饥饿或消化吸收功能不良的慢性胃肠道疾患，妊娠后期或哺乳期摄入量相对不足。

方法原理：

上海科华生物工程股份有限公司的白蛋白试剂盒采用的是溴甲酚绿法。

pH4.2

白蛋白+ 溴甲酚绿(BCG) ———→ 白蛋白溴甲酚绿复合物

Brij－35

在PH4.2环境中，在有非离子型表面活性剂Brij-35存在同时，血清中的白蛋白可以与溴甲酚绿形成蓝绿色复合物，并且引起630nm处吸光度的上升。

由于反应所产生的化合物在波长630nm处有吸收峰,所以在一定底物浓度范围内, 630nm处吸光度的变化值与样本中白蛋白的含量成正比.

样本：

样本类型： 新鲜的血清。 最少样品量：0.2ml。

样本稳定性：新鲜血清于2～8℃避光保存，可稳定7天。

仪器与试剂:

仪 器：卓越360生化分析仪

试 剂：上海科华生物工程股份有限公司的白蛋白 (溴甲酚绿法)试剂盒

试剂准备：白蛋白 (溴甲酚绿法)试剂盒为即开即用的液体试剂，无需特殊准备。试验用试

管的直径在12～16mm。 试剂组份：

参见试剂盒内说明书。 注意事项：

1. 此试剂为体外诊断用，不要吞服。

38

2. 试剂有毒，不要入口，吞下有害，如误服（包括内部接触）应立即寻求医疗保护。避免试剂和眼睛，皮肤及粘膜接触，如不慎导致试剂接触粘膜或皮肤，应立即用大量清水冲洗，如有不适，则应去医院诊治。

3. 试剂中含有叠氮钠，可与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物，如果排向下水道请用大量的水冲洗。 性能参数：

1.精密度（重复性）：

批内精密度： CV≤4% 批间相对极差：CV≤5％。 2.不准确度：

相对偏差≤10%（病理值质控血清） 相对偏差≤15%（正常值质控血清）

3.病人结果可报告范围（线性范围）：

0～60g/l。 4.分析灵敏度：

测定本试剂盒内所附标准液（40g/l）, 其吸光度应在0.54～0.82A之间。 5.分析特异性（抗干扰能力）

血红蛋白≤1g/L对测定的干扰可忽略。 6.稳定性：

试剂在2～8℃避光保存，有效期为1年；

试剂开启后在2～8℃避光保存，可稳定30天。 变质指示：

如试剂混浊或有沉淀，请勿使用。

校准：

使用生理盐水（蒸馏水）和科华公司校准品（或其它质量可靠的校准血清）进行二点定标。

质控：

至少2个浓度水平的质控品。

操作程序：

卓越360开机 装载试剂 输入参数 实施校准 加载样本

和仪器有关的操作程序请参照卓越360用户手册。 计算：

无需手工计算，在37℃每个样本的结果自动以g/L打印。

39

报告结果:

参考范围：

血清：35～55g/L；

建议每个实验室建立自己的参考值。 不正常结果的处理程序：

根据仪器参数的正常值会打印异常标志。 报告格式：

自动地打印37℃ g/L的报告。

操作过程注意事项：

操作过程的限制性：

白蛋白 (溴甲酚绿法)试剂盒的线性范围是0～60g/L。样品浓度超过线性上限应稀释重做。如在卓越360中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。超范围的标本也可以用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数，卓越360可以应用自动重做功能自动重作超范围的标本。

参考文献：

1.Doumas.B.T.et al.,Clin. Chim.Acta.31(1971)87～96.

40

SOP标准操作程序

总胆红素 (钒酸盐氧化法)试剂盒

临床意义：

本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清中总胆红素的含量。

有许多肝脏疾病都会导致血中胆红素的异常，如肝炎、肝前黄疸、肝黄疸、肝后梗阻性黄疸等都可能使血中胆红素浓度增高。因此，总胆红素测定是评价肝功能的主要指标之一。

方法原理：

上海科华生物工程股份有限公司的总胆红素试剂盒采用的是钒酸盐氧化法（VOX）

钒酸盐

胆红素----------→胆绿素

样品中胆红素在PH3.0附近，以及钒酸盐和表面活性剂作用下，可以被氧化成胆绿素。与此同时，胆红素特有的黄色也随之消失。测定胆红素氧化前后吸光度的差，可以计算出样品中胆红素的浓度。

样本：

样本类型： 新鲜无溶血现象的血清。 最少样品量：0.2ml。

样本稳定性：收集样本后尽快测定，注意避光，否则冷冻保存。

仪器与试剂:

仪 器：卓越360生化分析仪

试 剂：上海科华生物工程股份有限公司的总胆红素 (钒酸盐氧化法)试剂盒

试剂准备：总胆红素 (钒酸盐氧化法)试剂盒为即开即用的液体试剂，无需特殊准备。试验

用试管的直径在12～16mm。 试剂组份：

参见试剂盒内说明书。 注意事项：

1. 此试剂为体外诊断用，不要吞服。

2. 试剂含有适量的防腐成分，应避免试剂接触人体。如不慎导致试剂接触粘膜或皮肤，应立即用大量清水冲洗，如有不适，则应去医院诊治。 性能参数：

1.精密度（重复性）：

批内精密度： CV≤6% 批间相对极差：CV≤6％。 2.准确度：

41

相对偏差≤15%(胆红素浓度≥17.1μmol/L) 相对偏差≤20%(胆红素浓度≤17.1μmol/L) 3.病人结果可报告范围（线性范围）：

0~684μmol/l。 4.分析灵敏度：

171μmol/L 的胆红素在450nm处测定，吸光度范围为0.12A～0.45A。 5.分析特异性（抗干扰能力）

抗坏血酸≤0.5g/L或血红蛋白≤5g/L或浊度≤2.0％，对测定的干扰可忽略。 6.稳定性：

试剂于2～8℃避光保存，有效期为1年半。 试剂开启后在2～8℃避光保存，可稳定30天。 变质指示：

如试剂混浊或有沉淀时，请勿使用。

校准：

使用生理盐水（蒸馏水）和科华公司校准品（或其它质量可靠的校准血清）进行二点定标。

质控：

至少2个浓度水平的质控品。

操作程序：

卓越360开机 装载试剂 输入参数 实施校准 加载样本

和仪器有关的操作程序请参照卓越360用户手册。 计算：

无需手工计算，在37℃每个样本的结果自动以μmol/L打印。

报告结果:

参考范围：

血清：5.1～19μmol/L(0.3～1.1mg/dl)； 每个实验室应建立自己的参考值。 不正常结果的处理程序：

根据仪器参数的正常值会打印异常标志。 报告格式：

自动地打印37℃μmol/L的报告。

操作过程注意事项：

42

操作过程的限制性：

总胆红素 (钒酸盐氧化法)试剂盒的线性范围是0～684μmol/L。样品浓度超过线性上限应稀释重做。如在卓越360中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。超范围的标本也可以用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数，卓越360可以应用自动重做功能自动重作超范围的标本。

参考文献：

1.Tokuda,K.and Tanimoto,K.Jpn.J.Clin,Chem.,22(2),116～122(1993)(in Japanese). 2.Akiyama,K.and Makino,I.Rinshoi,19(suppl.)242～244(1993)(in Japanese).

43

SOP标准操作程序

直接胆红素 (钒酸盐氧化法)试剂盒

临床意义：

本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清中直接胆红素的含量。

有许多肝脏疾病都会导致血中胆红素的异常，如肝炎、肝前黄疸、肝黄疸、肝后梗阻性黄疸等都可能使血中胆红素浓度增高。因此，直接胆红素测定也是评价肝功能的主要指标之一。

方法原理：

上海科华生物工程股份有限公司的直接胆红素试剂盒采用的是钒酸盐氧化法（VOX）

钒酸盐

胆红素----------→胆绿素

样品中胆红素在PH3.0附近，以及钒酸盐和表面活性剂作用下，可以被氧化成胆绿素。与此同时，胆红素特有的黄色也随之消失。测定胆红素氧化前后吸光度的差，可以计算出样品中胆红素的浓度。

样本：

样本类型： 新鲜无溶血现象的血清。 最少样品量：0.2ml。

样本稳定性：收集样本后尽快测定，注意避光，否则冷冻保存。

仪器与试剂:

仪 器：卓越360生化分析仪

试 剂：上海科华生物工程股份有限公司的直接胆红素 (钒酸盐氧化法)试剂盒

试剂准备：直接胆红素 (钒酸盐氧化法)试剂盒为即开即用的液体试剂，无需特殊准备。试

验用试管的直径在12～16mm。 试剂组份：

参见试剂盒内说明书。 注意事项：

1. 此试剂为体外诊断用，不要吞服。

2. 试剂含有适量的防腐成分，应避免试剂接触人体。如不慎导致试剂接触粘膜或皮肤，应立即用大量清水冲洗，如有不适，则应去医院诊治。 性能参数：

1.精密度（重复性）：

批内精密度： CV≤6% 批间相对极差：CV≤6％。

44

2.准确度：

相对偏差≤20%(胆红素浓度≥17.1μmol/L) 相对偏差≤25%(胆红素浓度≤17.1μmol/L) 3.病人结果可报告范围（线性范围）：

0~342μmol/l。 4.分析灵敏度：

171μmol/L 的胆红素在450nm处测定，吸光度范围为0.12A～0.45A。

5. 最低检测限：

最低检测浓度可达2.9μmol/L。 6.分析特异性（抗干扰能力）

抗坏血酸≤0.5g/L或血红蛋白≤5g/L或浊度≤2.0％，对测定的干扰可忽略。 7.稳定性：

试剂于2～8℃避光保存，有效期为1年半。

试剂开启后在2～8℃避光保存，可稳定30天。 变质指示：

如试剂混浊或有沉淀时，请勿使用。

校准：

使用生理盐水（蒸馏水）和科华公司校准品（或其它质量可靠的校准血清）进行二点定标。

质控：

至少2个浓度水平的质控品。

操作程序：

卓越360开机 装载试剂 输入参数 实施校准 加载样本

和仪器有关的操作程序请参照卓越360用户手册。 计算：

无需手工计算，在37℃每个样本的结果自动以μmol/L打印。

报告结果:

参考范围：

血清：1.7～6.8μmol/L(0.1～0.4mg/dl)；

参考值因年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。

不正常结果的处理程序：

根据仪器参数的正常值会打印异常标志。

45

报告格式：

自动地打印37℃μmol/L的报告。

操作过程注意事项：

操作过程的限制性：

直接胆红素 (钒酸盐氧化法)试剂盒的线性范围是0～342μmol/L。样品浓度超过线性上限应稀释重做。如在卓越360中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。超范围的标本也可以用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数，卓越360可以应用自动重做功能自动重作超范围的标本。

参考文献：

1.Tokuda,K.and Tanimoto,K.Jpn.J.Clin,Chem.,22(2),116～122(1993)(in Japanese). 2.Akiyama,K.and Makino,I.Rinshoi,19(suppl.)242～244(1993)(in Japanese).

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SOP标准操作程序

高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）定量测定试剂盒

临床意义：

本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清或血浆中HDL-C的含量。

众多流行病学研究证实，血清中的高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平与冠心病的发生几率呈负相关，即HDL-C是冠心病的负危险因素。

方法原理：

上海科华生物工程股份有限公司生产的高密度脂蛋白胆固醇试剂盒（直接法）采用两步法测定：

1. 用胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧化氢酶去除低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL-C）。 具体反应如下：

胆固醇酯 胆固醇酯酶胆固醇+游离脂肪酸

→ 胆固醇 + O2 胆固醇氧化酶→胆甾烯酮 + H2O2 2H2O2过氧化氢酶2HO + O

2 →2

2．在溶液B中含有特殊的表面活性剂，释放HDL-C，然后测定，反应如下： 胆固醇酯 胆固醇酯酶胆固醇 + 游离脂肪酸 → 胆固醇 + O2 胆固醇氧化酶→胆甾烯酮 + H2O2

2H2O2 + 4-AA + HDAOS过氧化物酶→醌类化合物 + 4H2O

在600nm处，醌类化合物颜色强度的增加与HDL-C的含量成正比。

样本：

病人准备： 应空腹取血。

样本类型： 血清或肝素血浆皆可，EDTA血浆会引起结果偏低。 最少样品量：0.2ml。

样本稳定性：血清于2-8℃避光保存可稳定6天，请勿冰冻。如标本中有沉淀，请先离心。

仪器与试剂:

仪 器：卓越360生化分析仪

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试 剂：上海科华生物工程股份有限公司生产的高密度脂蛋白胆固醇试剂盒（直接法） 试剂准备：高密度脂蛋白胆固醇试剂盒（直接法）为即开即用的液体双剂型，无需特殊准备。

试验用试管的直径在12～16mm。 试剂组份：

参见试剂盒内说明书。 注意事项：

1.此试剂为体外诊断用。

2.试剂有毒，不要入口，吞下有害，如误服（包括内部接触）应立即寻求医疗保护。避免试剂和眼睛，皮肤及粘膜接触，如不慎接触（外部接触）应用大量的水冲洗受损害的部位, 如仍有不适，应前往医院诊治。

3.试剂中含有叠氮钠，可与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物，如果排向下水道请用大量的水冲洗。 性能参数：

1.精密度（重复性）：

批内变异系数≤2.5%； 批间相对极差 ≤5%。 2.准确度：

测定RANDOX公司的标准血清，相对偏差≤10%。 3.病人结果可报告范围（线性范围）：

2

HDL-C在0-3.90mmol/L（0—150 mg/dl）范围内，反应呈线性， r≥0.995。 4.反应速度：

平衡时间≤10分钟

5.分析特异性（抗干扰能力）：

样本胆红素含量≤30mg/dl，血红蛋白含量≤500mg/dl，甘油三酯含量≤1000mg/dl时对试剂的测定没有影响。 6.稳定性：

试剂在2～8℃避光保存，有效期为1年； 变质指示：

如试剂混浊，或颜色变红，请勿使用。

校准：

使用生理盐水(蒸馏水)和配套校准血清，或者其它质量可靠的校准血清进行二点校准。

质控：

至少2个浓度水平的RANDOX质控品。

操作程序：

卓越360开机 装载试剂 输入参数 实施校准 加载样本

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和仪器有关的操作程序请参照卓越360用户手册。 计算：

无需手工计算，每个样本的结果自动以mmol/L打印。

报告结果:

参考范围：

血清和血浆：男性：>0.90mmol/L(>35mg/dl)

女性：>1.15mmol/L(>45mg/dl)

参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。每个实验室应建立自己的参考值。 不正常结果的处理程序：

根据仪器参数的正常值会打印异常标志。 报告格式：

自动地打印mmol/L或mg/dl的报告。

操作过程注意事项：

操作过程的限制性：

本方法线性范围为： 0-3.90mmol/L。如果样品中HDL-C含量超出线性范围应稀释重做。如在卓越360中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。超范围的标本也可以用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数，卓越360可以应用自动重做功能自动重作超范围的标本。

参考文献：

1. National Cholesterol Education Program Recommendations for Measurement of

High-DensityLipoproteinCholesterol:ExecutiveSummary.ClinChem,41/10:1427-1433,1995

2. Izawa S.,Okada M.,Matsui H.,and Horita Y.J.Medicine and Pharmacautical

Sci.,1385-1388,37(1997)

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SOP标准操作程序

低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）定量测定试剂盒

临床意义：

本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清或血浆中LDL-C的含量。

临床发现动脉粥样硬化症患者，其血浆LDL颗粒胆固醇（LDL-C）升高，且与冠心病发病率呈正相关。

方法原理：

上海科华生物工程股份有限公司生产的低密度脂蛋白胆固醇试剂盒（直接法）采用两步法测定：

1.用胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧化氢酶去除高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL-C）。 具体反应如下：

胆固醇酯 胆固醇酯酶胆固醇 + 游离脂肪酸

→ 胆固醇 + O2 胆固醇氧化酶→胆甾烯酮 + H2O2 2H2O2过氧化氢酶2HO + O

2 →2

2.在溶液B中含有特殊的表面活性剂，释放LDL-C，然后测定，反应如下： 胆固醇酯 胆固醇酯酶胆固醇 + 游离脂肪酸 → 胆固醇 + O2 胆固醇氧化酶→胆甾烯酮 + H2O2

2H2O2 + 4-AA + HDAOS过氧化物酶→醌类化合物 + 4H2O2

在600nm处，醌类化合物颜色强度的增加与LDL-C的含量成正比。

样本：

病人准备： 应空腹取血。

样本类型： 血清或肝素化血浆皆可，EDTA血浆会引起结果偏低。 最少样品量：0.2ml。

样本稳定性：血清于2-8℃避光保存可稳定6天，请勿冰冻。如标本中有沉淀，请先离心。

仪器与试剂:

仪 器：卓越360生化分析仪

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