试验药剂与器械

．1初筛培养基

矿物质溶液I(2．25％KH2P04)、8％Na2C03和2．5％半胱氨酸盐酸盐（100ml） 挥发性脂肪酸混合液：30mL蒸馏水、丁酸、异戊酸、戊酸和2-甲基丁酸各lmL、 10mol／L的NaOH、

维生素混合液(每升含)：硫胺素，20mg：泛酸钙，20mg：烟酸，20mg：核黄素，20mg； 吡哆醇，20mg：对氨基苯甲酸，lmg：生物素，0．5mg：维生素B12，0．2mg： 叶酸，O．125mg：四氢叶酸，O．125mg。．22u m滤膜。 基础培养液(每升含)：，Nacl，5.63g、（NH4）2SO4, 5.63g、MgCl2·6H20，0．53g：

CaCl2·2H20，0．41g、MnCl2·4H20，O．172g、FeS04·7H20，0．125g、ZnCl2，0．059g、COCl2·6H20，0．013g。 0．2％刃天青，lmL：蒸馏水，795mL、半胱氨酸盐酸盐，1．5g、羧甲基纤维素钠，10g、琼脂粉，15g。 矿物质溶液I、8％Na2C03、VFA混合液、维生素混合液、无细胞瘤胃液分别为0．4mL、0．4mL、0．3mL、0．1mL、0．1mL。

2富集和传代培养基(培养基B)

(每升含)：基础培养基(其中NaHC03，5．0g、蛋白胨，1．0g、酵母粉，1．0g)，500mL； 矿物质溶液A(其中每100ml含KH2P04，0．3g：（NH4）2SO4,0．3g、 NaCl，0．6g： CaCl2·2H20，0．04g：MgS04·7H20，0．058g)，165ml：

矿物质溶液B(每100mL含K2HP04·3H20 0．396g)，165mL：半胱胺酸盐酸盐，1．5g：O．1％刃天青，1．0mL；纤维二糖，10g 到25mL(或150mL)西林瓶中

3复筛培养基(培养基C)

矿物质溶液I(2．25％KH2P04)、8％Na2C03和2．5％半胱氨酸盐酸盐

挥发性脂肪酸混合液：30mL蒸馏水、丁酸、异戊酸、戊酸和2-甲基丁酸各lmL、 10mol／L的NaOH、100ml蒸馏水

维生素混合液(每升含)：硫胺素，20mg：泛酸钙，20mg：烟酸，20mg：核黄素，20mg； 吡哆醇，20mg：对氨基苯甲酸，lmg：生物素，0．5mg：维生素B12，0．2mg： 叶酸，O．125mg：四氢叶酸，O．125mg。．22u m滤膜。 基础培养液(每升含)：，Nacl，5.63g、（NH4）2SO4, 5.63、MgCl2·6H20，0．53g：

CaCl2·2H20，0．41g、MnCl2·4H20，O．172g、FeS04·7H20，0．125g、ZnCl2，0．059g、COCl2·6H20，0．013g。 0．2％刃天青，lmL：蒸馏水，795mL、半胱氨酸盐酸盐，1．5g、5片1cm×5cm大小的Whatman No．1滤纸 矿物质溶液I、8％Na2C03、VFA混合液、维生素混合液、无细胞瘤胃液分别为2．4mL、2．4mL、1．8mL、0．6mL、0．6mL。

3菌种初筛

lmL注射器、20mL西林瓶、 革兰染色： 1．结晶紫溶液

A液：结晶紫2g、95％乙醇20 mL

B液：草酸铵o．8g、蒸馏水80 mL。需在用前24H将A液、B液混合，过滤后装入试剂

瓶内备用。

2．碘液：碘1g、碘化钾2g、蒸馏水300 mL，即碘与碘化钾混合并研磨，加入几毫升水，使其逐渐溶解，然后研磨，继续加入少量蒸馏水至完全溶解，最后补足水量。也可用少量蒸馏水，先将碘化钾完全溶解，再加入碘片，待完全溶解后，加水至300 mL。 3。脱色液：95％乙醇。 4．复染液

A贮存液：沙黄2．5g、95％乙醇loo mL E．应用液：A液10mL、蒸馏水90 mI

初筛和复筛药品总量：

KH2P04，5.1g、Na2C03，16g、半胱氨酸盐酸盐9.5g、蒸馏水无限量、 丁酸2ml、异戊酸2ml、戊酸2ml、2-甲基丁酸2ml、10mol／L的NaOH、

硫胺素，40mg：泛酸钙，40mg：烟酸，40mg：核黄素，40mg；吡哆醇，40mg：对氨基苯甲酸，2mg：生物素，1mg：维生素B12，0.4mg：叶酸，0.25mg：四氢叶酸，0.25mg。．22u m滤膜。 Nacl，22.46g、（NH4）2SO4，11.86g、MgCl2·6H20，1.06g、CaCl2·2H20，0.9、MnCl2·4H20，0.344g、FeS04·7H20，0.45g、ZnCl2，0.118g、COCl2·6H20，0.026g。 0．2％刃天青，lmL：、羧甲基纤维素钠，10g、琼脂粉，42g。

NaHC03，10．0g蛋白胨，17．0g、酵母粉，2．0g、MgS04·7H20，0.116g、O．1％刃天青，2．5mL；纤维二糖，20g、K2HP04·3H20 0.792g

5片1cm×5cm大小的Whatman No．1滤纸、二氧化碳无限量

结晶紫2g、95％乙醇250ml、草酸铵o．8g、碘1g、碘化钾2g、沙黄2．5g、

酪素水解物，20g、巯基醋酸钠，2g；甲醛次硫酸钠，lg；琥珀酸钠，1％、NaN03，O．1％、 K2HP04，O．1％、KCI，0．02％、牛肉膏，3g：酵母粉，3g、乳糖，10g；蔗糖，10g：葡萄糖，lg；Na2S203，0．3g；酚红，0．074mL、肉汤琼脂斜面、3％～10％的H202、格里斯试剂、白色瓷盘

生理生化特征的鉴定药品

无氧生理盐水：500mL瓶装生理盐水、L-半胱氨酸盐酸盐0．75g

KH2P045.1g 烟酸，40mg MgCl2·6H20，1.06g Na2C03，半胱氨16g 酸盐酸盐9.5g 蒸馏水无限量 丁酸2ml 异戊酸2ml 戊酸2ml 2-甲基丁酸2ml 叶酸，0.25mg 0．2％刃天青，lmL O．1％刃天青，2．5mL 四氢叶酸，0.25mg 羧甲基纤维素钠，10g 10mol／L的NaOH 22u m滤膜 硫胺素，泛酸钙，40mg 40mg Nacl，22.46g （NH4）2SO4，11.86g 核黄素，吡哆醇，对氨基生物素，维生素40mg 40mg： 苯甲酸，1mg B12，2mg 0.4mg CaCl2·2H20，0.9g MnCl2·4H20，0.344g FeS04·7H20，0.45g ZnCl2，0.118g COCl2·6H20，0.026g 结晶紫2g NaN03，O．1％ 白色瓷盘 琼脂粉，NaHC03蛋白胨，42g ，10．0g 17．0g 碘1g 碘化钾2g 酵母粉，MgS04纤维二2．0g ·7H20，糖，20g 0.116g 沙黄2．5g 酪素水解物，20g K2HP04二氧化·3H20 碳无限0.792g 量 95％乙草酸铵醇250ml o．8g 巯基醋甲醛次琥珀酸酸钠，2g 硫酸钠，钠，1％ lg 酚红，3％～0．074mL 10％的H202 格里斯试剂 K2HP04KCI，，O．1％ 0．02％ 肉汤琼脂斜面 牛肉膏，酵母粉，乳糖，3g 3g 10g L-半胱氨酸盐酸盐0．75g 葡萄糖，Na2S203lg ，0．3g 1cm×5cm大小的500mLWhatman No．1滤纸 瓶装生理盐水

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