CIK细胞免疫治疗原发性肝癌的研究进展

生物治疗

国际消化病杂志２，Ａ０１１年８月第３１卷第４期ＩｎｔＪＤｉｉｓｕｕｓｔ２５，２０１１，Ｖｏｌ．３１，Ｎｏ．４Ｄ·２２３·

·综述·

ＣＩＫ细胞免疫治疗原发性肝癌的研究进展

王惠成　冯　毅　戴国华

摘要：细胞因子诱导的杀伤细胞（是人外周血单个核细胞在体外经多种细胞因子刺激后获得的异ＣＩＫ）兼有Ｔ淋巴细胞的强大抗瘤活性和自然杀伤细胞（及主要组织相容性复合体（限制杀瘤质细胞，ＮＫ）ＭＨＣ）特点，被认为是一类杀瘤活性强和抗瘤谱广的新型抗肿瘤效应细胞。目前，ＣＩＫ细胞免疫治疗已成为继手术、放射治疗、化学治疗之后的第四种治疗原发性肝癌的手段，在肝癌的综合治疗方案中，ＣＩＫ细胞免疫治改善患者生活质量、延长生存期方面起重要作用，显示出良好的应用前景。此文从细疗在提高患者治愈率、

扩增培养、杀瘤机制、实验研究及临床应用的最新进展进行综述。胞因子诱导的杀伤细胞的生物学特性、

关键词：细胞因子；诱导；杀伤细胞；肝癌；细胞免疫：／ＤＯＩ１０．３９６９．ｉｓｓｎ．１６７３５３４Ｘ．２０１１．０４．０１２ｊ以下简称肝癌）是世界范围内最　　原发性肝癌（

每年大约有６常见的恶性肿瘤之一，３万的新发病而且近年来发病率有上升趋势。肝癌患者的病例，

程短，临床上较难早期发现，确诊时往往病情已进入中、晚期，病死率高。目前肝癌的治疗主要是以手术切除、肝移植、局部消融、化学治疗栓塞及其他分子靶向治疗等，但这些方法的治局部区域治疗、

疗效果并不理想，因为肝癌患者体内天然免疫、特异性免疫功能低下，根治性手术切除率低，手术后放射、化学治疗疗效差，易发生肝内播散复发率高，

及肝外转移，因此急需寻找新的有效方法来治疗肝癌。生物治疗已经成为肿瘤综合治疗中的第四种模式，越来越受到重视。目前用于肿瘤生物治疗的免疫活性细胞主要有肿瘤浸润性淋巴细胞（、ＴＩＬ）树突状细胞（以及细胞因子诱导的杀伤细胞ＤＣ）（等。ＣＣＩＫ）ＩＫ细胞是一种新型的免疫活性细胞，

其主要效应细胞的表面标志为Ｃ与其Ｄ３＋ＣＤ５６＋，他过继性免疫治疗细胞相比，具有增殖速度快、杀

１］瘤活性高、杀瘤谱广等优点［。研究表明，过继细胞

－＋

而非ＣＤ３ＣＤ５６的自然杀伤细胞。ＣＩＫ细胞的另－＋一重要来源是ＣＤ４ＣＤ８的Ｔ淋巴细胞群。此外，－－ＣＤ４ＣＤ８的Ｔ淋巴细胞经过细胞因子诱导培养

＋＋

后，其中５故Ｃ６％可同时表达ＣＤ３、ＣＤ５６，ＩＫ细－－胞也可来源于ＣＤ４ＣＤ８的Ｔ淋巴细胞。这种双

阳性Ｔ淋巴细胞按细胞受体的不同，进一步可分为

＋＋＋＋ＣＤ３ＣＤ５６αＴ淋巴细胞及ＣＤ３ＣＤ５６γＴ淋δβ

巴细胞两个亚群。利用流式细胞仪技术测定ＣＩＫ

细胞表面的Ｃ显示Ｄ分子表达情况及其百分率，

，中度表达ＣＩＫ细胞高度表达ＣＤ３、ＣＤ５４、ＣＤ１１ａＣＤ３ＣＤ５６、ＨＬＡＤＲ、ＣＤ２８ＣＤ５４、ＣＤ２８，不表达

［］

ＣＤ８６、ＣＤ８０２。１．２　ＣＩＫ细胞的增殖活性

大部分研究者均通过ＩＦＮＩＬ２和ＣＤ３单克γ、隆抗体等诱导外周血或脐血中的Ｃ经１ＩＫ细胞，４～２１ｄ扩增的ＣＩＫ细胞比例可由０．１０％～０．１３％上

细胞数量平均增加２升至１９．０％～２０．５％，５０倍，ＣＩＫ细胞的高增殖活性解决了体外扩增效应细胞

所获细胞数目少的难题。

１．３　ＣＩＫ细胞的杀瘤活性

ＣＩＫ细胞很强的细胞毒活性源于其较高的存活率和较强的增殖能力。研究发现，ＣＩＫ细胞不仅以非主要组织相容性复合体（限制杀伤靶细ＭＨＣ）胞，而且以ＭＨＣ限制的方式杀伤靶细胞，ＤＣ以ＭＨＣ限制的方式递呈抗原给ＣＩＫ细胞中的ＣＤ４＋或Ｃ使其中的细胞毒Ｔ淋巴细胞Ｄ８＋Ｔ淋巴细胞，大量扩增，激活ＣＩＫ细胞中的ＭＨＣ限制性杀伤功能，从而在抗肿瘤免疫治疗中，清除残存的肿瘤细胞，发挥更强大的细胞毒作用，更有效的阻止或延缓肿瘤复发。ＣＩＫ细胞又称自然杀伤细胞样Ｔ淋巴细胞，既具有Ｔ淋巴细胞强大杀伤活性，也具有

免疫治疗对抑制肝癌的复发和转移、提高患者治愈率、改善患者生活质量、延长生存期都具有重要作用。此文简要概述ＣＩＫ细胞免疫治疗肝癌的研究进展。

１　ＣＩＫ细胞的生物学特性

１．１　ＣＩＫ细胞表型分析

其次是外周血。ＣＩＫ细胞在肝脏中分布较多，通过表面标志分析，ＣＩＫ细胞为ＣＤ３、ＣＤ５６双阳性细胞群，但主要来源于ＣＤ３＋ＣＤ５６－的Ｔ淋巴细胞，

４０２２６０　重庆市江津区中心医院肝胆外科　作者单位：

冯毅，：Ｅｍａｉｌｃｆｅｎｉ２０００＠ｔｏｍ．ｃｏｍ　通信作者：ｑｇｙ

万方数据

生物治疗

·２２４·

国际消化病杂志２，Ａ０１１年８月第３１卷第４期ＩｎｔＪＤｉｉｓｕｕｓｔ２５，２０１１，Ｖｏｌ．３１，Ｎｏ．４Ｄ自然杀伤细胞杀伤时的非ＭＨＣ限制性，对于多种肿瘤细胞系，包括自然杀伤敏感的白血病细胞株Ｋ５６２、自然杀伤不敏感的宫颈癌细胞Ｈｅｌａ、人Ｂ淋巴瘤细胞系ＯＣＩＬＹ８等，均表现出强大的杀伤活性。

２　ＣＩＫ细胞的制备、

扩增培养及影响因素２．１　ＣＩＫ细胞的来源

目前ＣＩＫ细胞的来源主要是自体、异体、脐血、骨髓ＣＩＫ细胞。自体ＣＩＫ细胞可以避免交叉感染，而且肝癌患者的ＣＩＫ细胞和正常人ＣＩＫ细胞一样对肝癌细胞有很强的细胞毒作用，且对肝细胞无损伤。异体ＣＩＫ细胞多来自于正常人，来源广泛，但会增加意外感染的机会。脐血ＣＩＫ前体细胞含量高，容易扩增出更多的ＣＩＫ细胞，而且淋巴细胞的绝对数量较高，含有一定比例的幼稚细胞，具有较强的增殖潜力，加之脐血来源广泛，因此脐血ＣＩＫ的杀伤率可能更高。骨髓来源的ＣＩＫ细胞增殖能力较外周血来源的ＣＩＫ细胞稍差，但仍然有较高的增殖能力，而且在细胞毒方面与外周血ＣＩＫ相比，

无显著性差异［３］。

２．２　ＣＩＫ细胞的制备、

扩增培养ＣＩＫ细胞的经典培养方式是在抽取患者外周血后分离出单个核细胞，

加入多种细胞因子诱导，经过２至３周的扩增培养，产生大量具有高杀伤活性的ＣＩＫ细胞，然后将这些活性细胞回输到患者体内，使其发挥抗肿瘤作用。ＣＩＫ细胞是多种细胞因子共同诱导培养的细胞，多种细胞因子的作用是相互协同，单一因子对效应细胞的增殖及细胞毒活性无作用或者小于多种细胞因子的联合作用，在诱导ＣＩＫ细胞生成的各种细胞因子中，主要是ＩＦＮγ、ＩＬ２、抗ＣＤ３单抗，ＩＦＮγ诱导外周血单个核细胞上的ＩＬ２受体表达增加；而ＩＬ２可激活Ｔ细胞，促进细胞生长；抗ＣＤ３单抗可刺激Ｔ细胞有丝分裂，促进细胞增殖。联合作用的机制是最终共同激活静止Ｔ细胞，提高细胞表达ＩＬ２受体及产生ＩＬ２的能力，启动自分泌途径ＩＬ２依赖的Ｔ细胞激活反应。随着科技进步和研究的逐步深入，经典培养方案被研究者们逐步优化。

２．２．１　ＤＣ对ＣＩＫ细胞扩增的影响　ＤＣ是迄今新发现的抗原加工递呈能力最强的专业抗原递呈细胞（ＡＰＣ）。未成熟ＤＣ主要是摄取和加工处理抗原，成熟期ＤＣ则主要是递呈抗原并活化初始型Ｔ细胞，这是ＤＣ最大的特点。体内外研究表明，ＤＣ能诱导肿瘤宿主对特异性抗原的免疫应答，提高肿瘤宿主免疫效应细胞的细胞毒活性。ＤＣ在ＣＤ４Ｔ

万方数据

细胞与ＣＤ８Ｔ细胞之间相互作用的特异性细胞免疫诱发机制中处于中心环节。研究表明，共同培养的ＤＣＣＩＫ细胞较单纯的ＣＩＫ细胞相比，

在增殖能力、效应细胞（ＣＤ３＋ＣＤ８＋、ＣＤ３＋ＣＤ５６＋

）数量以及对肿瘤的细胞毒作用等方面都显著增强［４］。有文献报道［５］

源于健康人的ＤＣ与同源ＣＩＫ细胞共培养

后，ＤＣＣＩＫ细胞群的增殖活性和杀伤活性较单纯的ＣＩＫ细胞更高，共培养１周后，ＤＣＣＩＫ的扩增倍数比同源ＣＩＫ约高１倍。

．２．２　双特异性抗体与ＣＩＫ细胞　双特异抗体是

指具有两种抗原结合特性的人工抗体，它的两个抗原结合位点可同时结合两个不同的抗原。双特异抗体的特点是同一抗体分子上的两个抗原结合臂，一个与靶抗原结合，另一个与免疫效应细胞上的标志抗原结合。作为治疗使用的双特异抗体，一方面利用抗体高特异性结合肿瘤相关抗原的特性，另一方面和免疫效应细胞诱发分子结合，发挥其细胞毒性功能，

裂解靶向的肿瘤细胞。双特异性抗体可用于ＣＩＫ细胞的导向，增强ＣＩＫ细胞对恶性肿瘤的细

胞毒活性。支黎明等［６］研究发现，金标双特异抗体

ｎｔｉＣＤ３ｘａｎｔｉＡＦＰ可以加强ＣＩＫ细胞对ＡＦＰ阳

性肝癌细胞的杀伤作用。

．２．３　ＣＩＫ细胞与溶瘤病毒协同作用或作为新型的细胞载体　溶瘤病毒是指能特异性感染肿瘤细胞，并在肿瘤细胞内繁殖，最终裂解肿瘤细胞的一类病毒。它不感染正常细胞。这类病毒并非外源基因的载体，而是依靠病毒本身特异性的在肿瘤细胞中复制来杀死、裂解肿瘤细胞。裂解细胞后释放出来的病毒，又可以进一步感染周围的肿瘤细胞。

ｈｏｒｎｅ等［７］

利用ＣＩＫ输送溶瘤病毒，

为小鼠提供有效的抗肿瘤治疗，它直接针对肿瘤细胞而不影响

周围的正常组织，而且ＣＩＫ细胞能够在深入小鼠体内肿瘤细胞后，再释放出溶瘤病毒，提示ＣＩＫ细胞与有溶瘤作用的病毒相结合能产生强大的协同抗肿瘤作用，

可一定程度上克服靶向生物治疗中存在的递呈及定向等难题，有可能成为新的抗肿瘤方案。．２．４　转基因ＣＩＫ细胞的研究进展　通过基因转染方法将相关基因转入ＣＩＫ，改变ＣＩＫ的某些特性，包括细胞因子如ＩＬ２４、ＩＬ２、ＩＬ７等；共刺激分子如Ｂ７分子家族、细胞黏附分子和ＬＦＡ２３等，

多药耐药基因等。Ｙｕ等［８］利用ＩＬ２４基因修饰转染

的ＤＣ和ＣＩＫ细胞共同培养，发现与非转染组相比，基因转染组产生了更多的ＩＬ２４、ＩＬ１２和

ＮＦα，而且在抗肝癌细胞ＳＭＭＣ７７２１时表现出更强的裂解肝癌细胞的能力，显示出更大的抗瘤活

２ａ２Ｔ２Ｔ

生物治疗

国际消化病杂志２，Ａ０１１年８月第３１卷第４期ＩｎｔＪＤｉｉｓｕｕｓｔ２５，２０１１，Ｖｏｌ．３１，Ｎｏ．４Ｄ·２２５·

性。Ｎａｇａｒａｊ等［９］将包含人Ｉ

Ｌ２基因片段的重组质粒用电穿孔法导入ＣＩＫ细胞，体外检测发现转染后ＣＩＫ细胞在增殖率和细胞杀伤活性上均高于未转染细胞。也有报道利用电穿孔法可以成功的将多药耐药基因Ｉ转入ＣＩＫ细胞，转染后的ＣＩＫ细胞表达Ｐｇｐ（阳性率２１％～３７％），并表现出多药耐药性。转染后ＣＩＫ细胞对多柔比星的耐受性较转染前增强了２２．３～４５．８倍，对秋水仙碱的耐受性增强了６．７～１１．３５倍。转染前后ＣＩＫ细胞对ＥＣＦ７肿瘤细胞的杀伤活性在３组不同效靶细胞比的杀伤活性比较中均无改变，说明电穿孔转基因后，ＣＩＫ细胞依然保持了原有的杀伤肿瘤细胞的活性。　ＣＩＫ细胞杀伤肿瘤的作用机制

一般认为，机体的抗肿瘤免疫主要为细胞免

疫，其中ＣＤ８＋

Ｔ细胞是抗肿瘤免疫的主要效应细

胞，其杀伤肿瘤细胞的机制如下：一是通过其抗原受体识别肿瘤细胞上的肿瘤抗原并与之结合，通过溶细胞作用，直接杀伤肿瘤细胞；二是通过分泌多种细胞因子，如ＩＦＮγ、

ＴＮＦ而间接杀伤肿瘤细胞。ＣＤ４＋

Ｔｈ通过其辅助作用参与抗肿瘤细胞免疫效应，主要是释放细胞因子如ＩＬ２、ＩＦＮγ等，激活巨噬细胞、ＮＫ细胞，并激活ＣＤ８＋Ｔ细胞，

增强其杀伤能力。关于ＣＩＫ细胞杀伤肿瘤的作用机制还不是十分清楚，目前的研究显示ＣＩＫ可能通过３种途径发挥杀瘤的作用。

．１　ＣＩＫ细胞对肿瘤细胞的直接杀伤作用

ＣＩＫ细胞对肿瘤细胞的直接杀伤作用可能是通过黏附因子ＬＦＡ１／ＩＣＡＭ１途径与肿瘤细胞结合后，分泌含大量ＢＬＴ酯酶的颗粒。这些颗粒能穿

透靶细胞膜，导致肿瘤细胞的裂解［１０］

。当ＣＩＫ细胞

被激活时通过ＦｃＲ使ＬＦＡ１和ＩＣＡＭ１的结合状态由低亲和力转为高亲和力，

同时向细胞间排除ＢＬＴ的胞质毒性颗粒，而这些颗粒能够直接穿透封闭的靶细胞进行胞吐，从而导致肿瘤细胞的裂解。

进一步研究表明［１１］，ＧＡＴＡ３和Ｔｂｅｔ基因参与了

ＬＦＡ１／ＩＣＡＭ１介导的ＣＩＫ杀瘤途径。

．２　ＣＩＫ细胞可通过释放多种细胞因子杀伤肿瘤细胞

进入体内活化的ＣＩＫ细胞可分泌多种细胞因子，不仅对肿瘤细胞有直接抑制作用，而且还可通过调节免疫系统间接杀伤瘤细胞。ＣＩＫ细胞可以分泌大量的ＩＦＮγ。ＩＦＮγ是由ＣＤ４＋或ＣＤ８＋细胞产生的同源二聚体糖蛋白，可通过多种途径直接或间接发挥抗肿瘤作用，增强自然杀伤细胞（ＮＫ）、巨噬细胞（ＭΦ）以及细胞毒性Ｔ细胞（ＣＴＬ）

的活万方数据

性；ＩＦＮγ还可以促进肿瘤细胞表达ＭＨＣⅠ类分

子，有助于肿瘤抗原的递呈和激活ＣＴＬ。

Ｋｏｒｎａｃｋｅｒ等［１２］在用ＣＩＫ治疗慢性淋巴细胞白血病（ＣＬＬ）的研究中发现ＣＩＫ分泌的ＩＦＮγ能促使

ＣＬＬ细胞上ＩＣＡＭ１的表达，从而能提高细胞毒效应细胞所诱导的调亡。此外，ＣＩＫ细胞还能分泌ＩＬ２、ＩＬ６、ＴＮＦα及ＧＭＣＳＦ等一些细胞因子，增强细胞毒作用。

３．３　诱导肿瘤细胞凋亡及坏死

ＣＩＫ细胞能活化肿瘤细胞凋亡基因，使得Ｂｃｌ２、ＢｃｌｘＬ、ＤＡＤｌ和ｓｕｒｖｉｖｉｎ基因表达上调。Ｖｅｒｎｅｒｉｓ

等［１３］认为，某些肿瘤细胞（如黑色素瘤、卵巢癌）通过ＦａｓＬ介导淋巴细胞凋亡而逃脱免疫清除，但对ＣＩＫ细胞敏感，这是因为在ＣＩＫ细胞诱导的过程中，由于ＩＦＮγ等细胞因子的作用，或是活化诱导的细胞死亡机制导致对Ｆａｓ敏感的或已被活化的Ｔ细胞逐渐被选择性清除，最后诱导获得的ＣＩＫ细胞便对Ｆａｓ耐受。此外，由于细胞型Ｆａｓ相关死亡区域蛋白样ＩＬ１β转换酶抑制蛋白（ｃＦＬＩＰ）的存在及Ｆａｓ死亡区结合蛋白（ＦＡＤＤ）水平很低，影响了死亡信号的转导，再加上ＣＩＫ细胞高水平表达抗凋亡基因，这些原因共同导致了ＣＩＫ细胞可以耐受表达ＦａｓＬ的肿瘤细胞诱导的凋亡，从而对其进行有效的杀伤。

此外，ＣＩＫ细胞表达的ＦａｓＬ可诱导肿瘤细胞凋亡，但由于ＣＩＫ细胞有抗凋亡基因的表达，因此在体内能抵抗ＦａｓＬ阳性肿瘤细胞对ＣＩＫ的反作用，故ＣＩＫ能对肿瘤细胞发挥持久的溶瘤作用。４　ＣＩＫ细胞应用于治疗肝癌的临床前研究目前，ＣＩＫ细胞应用于肝癌治疗的临床前试验和动物实验已在国内外广泛开展，大量文献报道都显示了ＣＩＫ细胞良好的应用前景。据报道，正常人的ＣＩＫ细胞体外增殖明显，

具有显著的抗移植瘤活性［１４，１５］

。国内初步研究表明，源于健康人ＣＩＫ细

胞对肝癌细胞具有明显的抑制作用，并且可以抑制裸鼠肝癌移植瘤的生长。有研究者应用肝癌患者术中失血及脐血分离单个核细胞诱导培养ＤＣ细胞和ＣＩＫ细胞，诱导的ＤＣ细胞可以成功激活ＣＩＫ细胞的增殖和对肿瘤细胞的杀伤能力，有望为肝癌的免疫治疗提供一种新的途径。也有研究者选取了人肝癌高转移裸鼠模型（ＬＣＩＤ２０），通过对治疗组动物应用ＣＩＫ细胞治疗，发现对照组动物模型肝内转移率５８．３％，明显高于ＣＩＫ细胞治疗组

（１６．７％），对照组动物模型发生肺转移率为２５．０％，

而治疗组未发现肺转移，治疗组动物肝癌３３３

生物治疗

·２２６·

国际消化病杂志２，Ａ０１１年８月第３１卷第４期ＩｎｔＪＤｉｉｓｕｕｓｔ２５，２０１１，Ｖｏｌ．３１，Ｎｏ．４Ｄ组织湿重也明显小于对照组动物肝癌湿重，提示ＣＩＫ细胞通过对裸鼠体内人肝癌细胞的非特异性杀伤使肿瘤细胞数量减少，减慢肿瘤的生长速度，并有效抑制肿瘤生长，减少肿瘤转移率，降低外周血ＡＦＰ水平，

最终延长动物的生存期。５　临床应用ＣＩＫ细胞治疗肝癌的主要策略

ＣＩＫ细胞具有增殖速度快、杀瘤活性高、杀瘤谱广、不良反应小、对正常骨髓造血影响轻微等优

点，

成为新一代抗肿瘤过继免疫治疗的主力军［１６］

。临床上应用ＣＩＫ细胞治疗肝癌已取得一些实际成效，包括ＣＩＫ细胞具有提高机体免疫功能，清除肿瘤患者体内微小残余病灶，防止复发的作用，已有文献报道ＣＩＫ细胞免疫治疗可以提高肝癌患者生活质量、

延长生存期，减缓复发，降低病毒载量等作用，是继手术、放射治疗、化学治疗后的又一种新的有效的治疗肝癌患者的途径。目前临床应用ＣＩＫ细胞治疗肝癌的主要策略包括以下几种。

５．１　手术后的ＣＩＫ细胞巩固治疗

早期肝癌以手术治疗为主，手术后配合ＣＩＫ细胞输注，不仅可以消除目前影像学检查等无法检测到的残留肿瘤细胞，而且还可以帮助患者尽快恢复

和提高机体免疫力，改善生活质量［１７］

。国外有研究

者报道了１５０例肝癌患者术后ＣＩＫ细胞治疗的临床试验结果，

治疗无明显不良反应，治疗组复发率较对照组下降１８％，表明这一治疗方法能够降低术后肝癌患者的复发率，延长术后无复发的生存时间。最近有文献报道，

对肝癌患者行经皮微波消融治疗后辅以ＣＩＫ细胞为主的过继细胞免疫治疗安全有效，而且改善了外周血的淋巴细胞百分比。５．２　ＣＩＫ细胞与介入疗法的联合应用

肝动脉栓塞化学治疗（ＴＡＣＥ）被公认为中晚期肝癌的首选治疗方法，但肝癌介入治疗后存在残余癌灶是复发的主要因素，采用肝动脉栓塞化学治疗联合ＣＩＫ细胞疗法治疗中晚期肝癌可以明显提高肝癌介入治疗的疗效，

减少化学治疗药物对肝脏的毒性作用，提高局部效应细胞的浓度，增强对局部肿瘤细胞的杀伤力，提高患者的免疫力，减少复发，

延长无进展生存和总生存期［１８

］。肝癌术后补充

ＴＡＣＥ术联合ＣＩＫ细胞免疫治疗，

也能降低患者的复发率、延长生存期。在对经过肝动脉化学治疗栓塞联合射频消融术后的肝癌患者进行ＣＩＫ细胞局部灌注的治疗研究过程中，发现ＣＩＫ细胞回输后患者外周血中Ｔ淋巴细胞亚群中ＣＤ３＋、ＣＤ４＋效应细胞的比例和ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比值显著上升，

复发率比对照组降低，无复发生存率较对照组显著升高［１９］。

万方数据

５．３　中晚期肝癌的ＣＩＫ细胞治疗

中晚期肝癌患者由于肝功能严重受损或其他原因，不能接受手术、放射治疗、化学治疗甚至介入治疗，采用ＣＩＫ细胞疗法联合其他保守治疗更有利，可延长生存期，改善生活质量，而且安全可行。

Ｓｈｉ等［２０］

应用ＣＩＫ细胞治疗肝癌，

治疗后患者外周血中的ＤＣ１和ＤＣ２细胞百分比分别从治疗前的（０．５９±０．２３）％和（０．２６±０．１２）％升高到（０．８５±

０．

２７）％和（０．４３±０．１９）％，ＤＣ细胞与ＣＩＫ细胞两者相互激活、相互促进，使患者的免疫功能得到更好的改善。同时，患者临床症状和肝功能指标也有显著的好转，ＡＦＰ下降，ＡＬＴ下降，病毒载量下降，表明ＣＩＫ细胞是治疗中晚期肝癌的一种安全有效的新途径。

５．４　ＣＩＫ细胞用于慢性乙型肝炎的治疗

大部分肝癌由肝炎后肝硬化转变而来，而目前治疗慢性乙型肝炎的药物主要是ＩＦＮα和核苷类似物（拉米夫定、阿德福韦），但效果都不理想，ＩＦＮα治疗病毒清除率仅为３０％，核苷类似物虽能有效抑制病毒复制，但长期治疗容易发生病毒变异，导致病毒学反弹或乙型肝炎复发。有研究利用ＣＩＫ细胞治疗慢性乙型肝炎，结果显示乙型肝炎病毒复制受到抑制，部分患者乙型肝炎表面抗原转阴，机体的免疫功能得到恢复和提高。有临床研究结果显示联合ＣＩＫ细胞治疗组ＨＢＶＤＮＡ含量在治疗后显著下降，并有部分病例乙型肝炎表面抗原转阴，而对照组只有轻度的下降，ＨＢＶＤＮＡ含量在治疗前后有统计学意义，也表明ＣＩＫ细胞免疫治疗除了具有杀伤肿瘤细胞的作用外，还具有抗乙型肝炎病毒的作用。

在关于ＣＩＫ细胞治疗肝癌的疗程研究中，Ｈｕｉ

等［１７］

对肝癌切除术后１２７例肝癌患者进行了不同

ＣＩＫ细胞治疗疗程的研究，

结果显示，接受３次和６次ＣＩＫ细胞输入治疗组之间无瘤生存率无显著性差异。表明肝癌切除术后进行３次ＣＩＫ细胞输入治疗后可达到预防术后复发的效果，无需继续进行ＣＩＫ细胞治疗。另外，ＣＩＫ细胞免疫治疗不良反应少，从目前报道来看，低热是其最常见的不良反应，而且多数能很快自行消退，不需服药或用少量阿司匹林等退热药就能退热。

６　展望

肝癌的生物治疗是继手术、放射治疗、化学治疗后的第四种模式，既能直接清除体内的残存肝癌细胞，又能提高机体的整体免疫功能，是一种新的有效的治疗手段，虽然只经历了十多年的发展，但已证实细胞免疫治疗具有改善肝癌患者生活质量，

生物治疗

国际消化病杂志２，Ａ０１１年８月第３１卷第４期ＩｎｔＪＤｉｉｓｕｕｓｔ２５，２０１１，Ｖｏｌ．３１，Ｎｏ．４Ｄ·２２７·

延长生存期，减缓复发，降低病毒载量等作用，显示了细胞免疫治疗肝癌的良好前景。在肝癌患者的综合治疗中，细胞免疫治疗成为提高肿瘤治愈率和有效率的一个关键措施，但ＣＩＫ细胞过继免疫疗法作为一种新免疫治疗方法，尚缺乏大规模的前瞻性随机试验数据及长期的疗效观察，

没有统一的治疗标准和方案，其作用机制及不良反应都有待进一步研究。但可确信，随着基础研究的不断深入和临床应用的不断规范化，以ＣＩＫ细胞为主的免疫治疗、手术、放射治疗、化学治疗等综合治疗将为肝癌患者带来新的希望。

参　考　文　献

１　ＨｕｉＤ，ＱｉａｎｇＬ，

ＪｉａｎＷ，ｅｔａｌ．Ａｒａｎｄｏｍｉｚｅｄｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄｔｒｉａｌｏｐｏｓｔｏｐ

ｅｒａｔｉｖｅａｄｊ

ｕｖａｎｔｃｙ

ｔｏｋｉｎｅｉｎｄｕｃｅｄｋｉｌｌｅｒ

ｃｅｌｌｓ

ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙａｆｔｅｒｒａｄｉｃａｌｒｅｓｅｃｔｉｏｎｏｆｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｄｉｇ

ｌｉｖｅｒＤｉｓ，２００９，４１：３６４１．２　ＬｉｎｎＹＣ，ＬａｕＳＫ，ＬｉｕＢＨ，ｅｔａｌ．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｔｈｅ

ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｉｔｙｅｘｈｉｂｉｔｅｄｂｙｃｙｔｏｋｉｎｅｉｎｄｕｃｅｄｋｉｌｌｅｒｃｅｌｌｓｕｂｓｅｔｓａｇａｉｎｓｔａｃｕｔｅｍｙｅｌｏｉｄｌｅｕｋａｅｍｉａｔａｒｇｅｔｃｅｌｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ

，２００９，１２６：４２５４３５．３　ＮｉｓｈｉｍｕｒａＲ，ＢａｋｅｒＪ，ＢｅｉｌｈａｃｋＡ，ｅｔａｌ．Ｉｎｖｉｖｏｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇ

ａｎｄｓｕｒｖｉｖａｌｏｆｃｙｔｏｋｉｎｅｉｎｄｕｃｅｄｋｉｌｌｅｒｃｅｌｌｓｒｅｓｕｌｔｉｎｇｉｎｍｉｎｉｍａｌＧＶＨＤｗｉｔｈｒｅｎｔｅｎｔｉｏｎｏｆａｎｔｉｔｕｍｏｒａｃｔｉｖｉｔｉｙ．Ｂｌｏｏｄ，２００８，１２：２５６３２５７４．

４　ＷｅｉＸＣ，ＺｈａｉＸＨ，ＨａｎＸＲ，ｅｔａｌ．ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＡｃｔｉｖｉｔｙｏ

ｆＤＣＣＩＫｃｅｌｌｓａｎｄＩｔｓＥｆｆｅｃｔＡｇａｉｎｓｔＬｅｕｋｅｍｉａＣｅｌｌｓＩｎＶｉｔｒｏ．ＺｈｏｎｇＧｕｏＳｈｉＹａｎＸｕｅＹｅＸｕｅＺａＺｈｉ，２００８，１６：１１５０１１５３．５　ＬｉＨ，ＷａｎｇＣ，ＹｕＪ，ｅｔａｌ．Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃｃｅｌｌａｃｔｉｖａｔｅｄｃｙ

ｔｏｋｉｎｅｉｎｄｕｃｅｄｋｉｌｌｅｒｃｅｌｌｓｅｎｈａｎｃｅｔｈｅａｎｔｉｔｕｍｏｒｅｆｆｅｃｔｏｆｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙｏｎｎｏｎｓｍａｌｌｃｅｌｌｌｕｎｇｃａｎｃｅｒｉｎｐａｔｉｅｎｔｓａｆｔｅｒｓｕｒｇｅｒｙ．Ｃｙｔｏｔｈｅｒａｐｙ

，２００９，１１：１０７６１０８３．６　支黎明，颜江华，车莹等．双特异性抗体ＣＤ３ＸＡＦＰ介导ＣＩＫ

细胞对ＡＦＰ阳性肝癌细胞的杀伤应用．中国生化药物杂志，２０１０，３１：２９７３０１．

７　ＴｈｏｒｎｅＳＨ，ＮｅｇｒｉｎＲＳ，ＣｏｎｔａｇＣＨ．Ｓｙｎｅｒｇ

ｉｓｔｉｃａｎｔｉｔｕｍｏｒｅｆｆｅｃｔｓｏｆｉｍｍｕｎｅｃｅｌｌｖｉｒａｌｂｉｏｔｈｅｒａｐｙ．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００６，３１１：１７８０１７８４．

８　ＹｕＸ，ＸｉａＷ，ＺｈａｎｇＴ，ｅｔａｌ．Ｅｎｈａｎｃｅｄｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙｏ

ｆＩＬ２４ｇｅｎｅｍｏｄｉｆｉｅｄｄｅｎｄｒｉｔｉｃｃｅｌｌｓｃｏｃｕｌｔｕｒｅｄｗｉｔｈｃｙｔｏｋｉｎｅｉｎｄｕｃｅｄｋｉｌｌｅｒｃｅｌｌｓｔｏｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｌｓ．ＩｎｔＪＨｅｍａｔｏｌ，２０１０，９２：２７６２８２．

９　ＮａｇａｒａｊＳ，ＺｉｓｋｅＣ，ＳｃｈｍｉｄｔＷｏｌｆＩＧ，ｅｔａｌ．Ｈｕｍａｎｃｙ

ｔｏｋｉｎｅ万方数据

ｉｎｄｕｃｅｄｋｉｌｌｅｒｃｅｌｌｓｈａｖｅｅｎｈａｎｃｅｄｉｎｖｉｔｒｏｃｙｔｏｌｙｔｉｃａｃｔｉｖｉｔｙｖｉａｎｏｎｖｉｒａｌｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ２ｇｅｎｅｔｒａｎｓｆｅｒ．ＧｅｎｅｔＶａｃｃｉｎｅｓＴｈｅｒ，２００４，２：１２１７．

１０　ＭａｒｔｅｎＡ，ＺｉｓｋｅＣ，ＳｃｈｏｔｔｋｅｒＢ，ｅｔａｌ．Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓｂｅｔｗｅｅｎ

ｄｅｎｄｒｉｔｉｃｃｅｌｌｓａｎｄｃｙｔｏｋｉｎｅｉｎｄｕｃｅｄｋｉｌｌｅｒｃｅｌｌｓｌｅａｄｔｏａｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎｏｆｂｏｔｈｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ．ＪＩｍｍｕｎｏｔｈｅｒ，２００１，２４：５０２５１０．

１１　刘苗，吴小艳，金润铭．细胞因子诱导的杀伤细胞生物活性及

杀瘤机制．实用儿科临床杂志，２００９，２４：１１６３１１６６．

１２　ＫｏｒｎａｃｋｅｒＭ，ＭｏｌｄｅｎｈａｕｅｒＧ，ＨｅｒｂｓｔＭ，ｅｔａｌ．Ｃｙ

ｔｏｋｉｎｅｉｎｄｕｃｅｄｋｉｌｌｅｒｃｅｌｌａｇａｉｎｓｔａｕｔｏｌｏｇｏｕｓｃｅｌｌ：ｄｉｒｅｃｔｃｙｔｏｔｏｘｉｃｅｆｆｅｃｔｓａｎｄｉｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆｉｍｍｕｎｅａｃｃｅｓｓｏｒｙｍｏｌｅｃｕｌｅｓｂｙｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎｇａｍｍａ．ＩｎｔＪＣａｎｃｅｒ，２００６，１１９：１３７７１３８２．１３　ＶｅｒｎｅｒｉｓＭＲ，ＫｏｒｎａｃｋｅｒＭ，ＭａｉｌａｎｄｅｒＶ，ｅｔａｌ．Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆ

ｅｘｖｉｖｏｅｘｐａｎｄｅｄＣＤ３＋ＣＤ５６＋Ｔｃｅｌｌｓｔｏｆａｓｍｅｄｉａｔｅｄａｐｏｐｔｏｓｉｓ．ＣａｎｃｅｒＩｍｍｕｎｏｌＩｍｍｕｎｏｔｈｅｒ，２０００，４９：３３５３４５．１４　ＳａｎｇｉｏｌｏＤ，ＭｅｓｉａｎｏＧ，ＣａｒｎｅｖａｌｅｓｃｈｉａｎｃａＦ，ｅｔａｌ．Ｃｙ

ｔｏｋｉｎｅｉｎｄｕｃｅｄｋｉｌｌｅｒｃｅｌｌｓａｓａｄｏｐｔｉｖｅｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙｓｔｒａｔｅｇｙｔｏａｕｇｍｅｎｔｇｒａｆｔｖｅｒｓｕｓｔｕｍｏｒａｆｔｅｒｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃｃｅｌｌｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ．ＥｘｐｅｒｔＯｐｉｎＢｉｏｌＴｈｅｒ，２００９，９：８３１８４０．１５　ＷａｎｇＦＳ，ＬｉｕＭＸ，ＺａｎｇＢ，ｅ

ｔａｌ．Ａｎｔｉｔｕｍｏｒａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｈｕｍａｎａｕｔｏｌｏｇｏｕｓｃｙｔｏｋｉｎｅｉｎｄｕｃｅｄｋｉｌｌｅｒ（ＣＩＫ）ｃｅｌｌｓａｇａｉｎｓｔｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｌｓｉｎｖｉｔｒｏａｎｄｉｎｖｉｖｏ．ＷｏｒｌｄＪＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ，２００２，８：４６４４６８．

１６　ＯｌｉｏｓｏＰ，ＧｉａｎｃｏｌａＲ，ＤｉｒｉｔｉＭ，ｅｔａｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙｗ

ｉｔｈｃｙｔｏｋｉｎｅｉｎｄｕｃｅｄｋｉｌｌｅｒｃｅｌｌｓｉｎｓｏｌｉｄａｎｄｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃｔｕｍｏｕｒｓ：ａｐｉｌｏｔｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌ．ＨｅｍａｔｏｌＯｎｃｏｌ，２００９，２７：１３０１３９．１７　ＨｕｉＤ，ＱｉａｎｇＬ

ｉ，ＪｉａｎＷ，ｅｔａｌ．Ａｒａｎｄｏｍｉｚｅｄｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄｔｒｉａｌｏｆｐｏｓｔｏｐ

ｅｒａｔｉｖｅａｄｊ

ｕｖａｎｔｃｙ

ｔｏｋｉｎｅｉｎｄｕｃｅｄｋｉｌｌｅｒ

ｃｅｌｌｓ

ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙａｆｔｅｒｒａｄｉｃａｌｒｅｓｅｃｔｉｏｎｏｆｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａ．ＤｉｇＬ

ｉｖｅｒＤｉｓ，２００９，４１：３６４１．１８　ＨａｏＭＺ，ＬｉｎＨＮ，ＹｅＹＢ，ｅｔａｌ．Ｅｆｆｉｃａｃｙｏ

ｆｔｒａｎｓｃａｔｈｅｔｅｒａｒｔｅｒｉａｌｃｈｅｍｏｅｍｂｏｌｉｚａｔｉｏｎｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｃｙｔｏｋｉｎｅｉｎｄｕｃｅｄｋｉｌｌｅｒｃｅｌｌｔｈｅｒａｐｙｏｎｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａ：ａｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅｓｔｕｄｙ

．ＣｈｉｎＪＣａｎｃｅｒ，２０１０，２９：１８２１８９．１９　ＷｅｎｇＤＳ，ＺｈｏｕＪ，ＺｈｏｕＱＭ，ｅｔａｌ．Ｍｉｎｉｍａｌｌｙｉ

ｎｖａｓｉｖｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｃｙｔｏｋｉｎｅｉｎｄｕｃｅｄｋｉｌｌｅｒｃｅｌｌｓｔｈｅｒａｐｙｌｏｗｅｒｔｈｅｓｈｏｒｔｔｅｒｍｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅｒａｔｅｓｏｆｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａｓ．ＪＩｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ

，２００８，３１：６３７１．２０　ＳｈｉＭ，ＺｈａｎｇＢ，ＲｏｎｇＺ，ｅｔａｌ．Ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓｃｙ

ｔｏｋｉｎｅｉｎｄｕｃｅｄｋｉｌｌｅｒｃｅｌｌｔｈｅｒａｐｙｉｎｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｐｈａｓｅＩｉｓｓａｆｅｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｐｒｉｍａｒｙｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａ．ＷｏｒｌｄＪＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ，２００４，１０：１１４６１１５１．

（收稿日期：２０１１０４１６

）（本文编辑：周骏）

本文来源：https://www.bwwdw.com/article/g6un.html