槲皮素干预实验性慢性肾功能衰竭大鼠肾脏组织病理改变

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成都中医药大学学报

JournalofChengduUniversityofTCM2007年6月第30卷第2期Jun12007,Vol130,No12

槲皮素干预实验性慢性肾功能衰竭

大鼠肾脏组织病理改变

王天然　周纬　曾祥元　胡晓莉　邹自英　陈莉

(成都军区总医院　　)

摘　要:目的:。方法:给实,2;干预组口服槲皮素(100mg/Kg d×42d)治疗;;烘干法测定肾脏组织含水量;常规方法对肾脏行病理学检查;测定羟脯氨酸以观察肾组织纤维化程度;免疫组织化学染色法观察肾组织NF-κB变化。结果:与肾衰对照组比较,干预组大鼠肾脏指数和肾组织含水量均显著降低(5108%±0189%和78124%±1125%vs12163%±2194%和79129%±0190%),肾脏病理学损伤改变明显较轻,肾组织纤维化显著减轻(平均每肾羟脯氨酸含量73515μg±37717μgvs154013μg±35819μg),肾组织细胞NF-κBP65丢失情况明显减轻。结论:槲皮素对大鼠实验性慢性肾功能衰竭具有显著防治作用,治疗后肾脏病理改变显著减轻。

关键词:槲皮素;慢性肾功能衰竭;肾水肿;纤维化;NF-κB中图分类号:R25615;R69215　　文献标识码:A　　文章编号:1004-0668(2007)02-0048-03

EffectsofQuercetinontheRenalPathologicalChangesinRatswith

ExperimentalChronicRenalFailure

WangTian-ran,ZhouWei,ZengXiang-yuan,etal

(ExperimentalCentre,GeneralHospitalofChengduMilitaryArea,Chengdu,610083)

Abstract:objective:ThepreventionandcuringeffectsofQuercetinonrenalpathologicalchangesinratswithexperimentalchronicrenalfailurestudied1Methods:Theratsincontrolandtreatinggroupswerefedwith0175%adenineinfeedfor2monthtobebuildupchronicrenalfailure,andthequercetinwereadministeredorally(100mg/Kg d)for42daystotheratsintreatinggroup,beginningatthe15thday1Thebodyandkidneyweightsofthesurvivedratswerepreciselymeasuredandthekidney-indexeswerecalculatedattheendofthetreatingperiod1Therenal-moisturecapacitiesweredeterminedwithabakingmethod,andtherenalpathologicalinspectswereexecutedroutinely1Therenaltissuesclerosiswasassayedbydeterminingitshydroxyproline(Hyp)1TheNF-κBintherenalcellswereassayedwithaimmunochemicalassay1Results:Whencomparedwiththecontrolgroup,significantly(P<0101orP<01001),thekidney-indexesandtherenalmoisturecapacitiesweredecreased(5108%±0189&78124%±1125%vs12163%±2194&79129%±0190%),therenalpathologicalchangeswerelessserious,therenaltissuesclerosischangeswerereduced(meanquantityofHypperkidney,73515μg±37717μgvs154013μg±35819μg),andthelossesofNF-κBP65intherenalcellswerelessserious1Conclusion:Theresultssuggestedthatqercetinisofpreventionandcuringeffectsonchronicrenalfailureinrats,thepatholog2icalchangeswereevidentlyreducedafterquercetintreatment1

Keywords:quercetin;chronicrenalfailure;preventionandcuringeffect;renaloedema;sclerosis;NF-κB

作者简介:王天然,男,1957年生;主任技师;研究方向:药理学、临床免疫学、临床生物化学、肿瘤实验室诊断等。

第2期王天然　等　槲皮素干预实验性慢性肾功能衰竭大鼠肾脏组织病理改变　 4

9

槲皮素(Quercetin)是广泛存在于植物中的一

种黄酮类化合物,对人类具有防治多种疾病的有益作用,如祛痰、止咳、平喘、心血管保护、抗血小板聚集、抗癌、抗溃疡、抗变态反应、抗病毒、抗

[1213]

炎及白内障预防等。国内有实验研究结果显示,槲皮素对糖尿病性肾病有防治作用。我们研究了槲皮素对动物实验性慢性肾功能衰竭的干预作用,对肾脏组织、细胞病理改变的影响,现将结果报告如下。1　材料和方法111　槲皮素

[14215]

组织,分别在分析天平上称重(mg);②计算肾脏

指数:肾脏指数=平均单肾重(mg)/体重(g);③参照脑组织水份含量测定烘干法测定肾组织水份

[18]

含量(重量百分率)。11512　肾脏病理学检查上述实验肾脏称重后从中间纵向剖开并切取约1mm厚片以4%,,常规H,5(羟脯氨酸测定)

1片,约500mg,剪碎,置组织匀浆器中,以生理盐水制成10%匀浆。参照

[19]

尿液羟脯氨酸的测定方法,以分析纯明胶为标准品作标准曲线进行测定。试剂自配,所用化学试剂均为国产分析纯。11514　肾组织细胞NF-κB检测制做病理切片时另制1套白片,按免疫组织化学染色法检测肾组织细胞NF-κBP65。兔抗NF-κBP65抗体及免疫组织化学试剂盒均购自博士德公司;DAB(3,3’-二氨基联苯胺)为国产,显色底物液自配;其他试剂自备。116　统计学处理

准。。112　实验动物

SD大白鼠。购自四川抗菌素工业研究所,合格证号2001-23。雌雄兼用(各组均各半),开始实验时体重130～160g,各组基本均衡。实验环境为成都利尔药业有限公司动物实验中心,实验动物环境设施合格证书号:川实动字第2001-20号。

[16217]

113　实验性肾衰造模方法实验大白鼠喂饲含0175%腺嘌呤食物60d,其余饲养条件按常规动物实验标准进行。114　实验动物分组

分2批。第1批38只:正常对照组(不喂腺嘌呤,也不给药)8只、肾衰对照组(喂腺嘌呤造模,给生理盐水)20只、槲皮素干预组(喂腺嘌呤造模,给槲皮素干预)10只。第2批98只:正常对照组8只、肾衰对照组80只、干预组10只。

给药剂量和途径:干预组从第15d开始,经口给予槲皮素,100mg/Kg d;共喂药6周。肾衰对照组同时给等体积生理盐水。115　观察指标与方法

11511　肾脏重量、肾脏指数、肾组织水份含量

各有数据的指标都按组表示为平均值±标准差

(x ±s),应用SPSS1112统计软件,将正常组、干预组与肾衰对照组进行t检验。2　实验结果211　实验动物死亡率正常组、肾衰组与干预组依次为0184%与20%;正常组及槲皮素干预组与肾衰对照组间t检验,P<01001。212　实验动物体重、肾脏重量和水份含量(本项及以下均为各组存活鼠)

实验结果(表1)显示,肾衰组大鼠体重比正常组显著减轻,肾脏显著肿大,并出现水肿;槲皮素干预组肾脏也显著肿大,但肾脏指数比肾衰组显著减小,水肿程度明显减轻。

肾脏指数(I)

3123±0129312163±21943

3333

①实验结束时以架盘天平(最大称量500g)

称大鼠体重(g);然后处死大鼠,取双肾剔尽其它

组别正常组肾衰组干预组

n

表1　各组大鼠体重、肾脏重量、肾组织含水量

体重(g)

240±243109±1433333

平均单肾重量(mg)

776±10231354±2791228±296

33

肾组织水份含量(%)

76136±01783

79129±0190)3

33

161616

2

与体重g比值;②为实验结束时所剩大鼠。经t检验,333与对照组P<01001;3P<0105

213　肾脏病理检查结果21311　正常组

21312　肾衰组

肾小球、肾小管、血管及间质结构清析,未见

明显病变。

部分肾小球萎缩消失;残余肾小球结构不清,主要表现球囊变小。毛细血管透明变性,有的仅见内皮细胞核。间质纤维化;大量PMN、Lc浸润。

50

成都中医药大学学报2007年第30卷

肾小球囊内、肾小管、血管内充满淡绿色针状结晶(嘌呤结晶)。21313　干预组

肾小球大部分存在,结构欠清。肾小管上皮浊肿,有的嗜酸性变,胞核固缩;有的细胞脱落,在管腔内形成细胞团。间质纤维组织轻度增生;有炎细胞浸润。结晶弥漫分布。214　肾脏纤维化测定结果

实验结果(表2)显示,维化;干预组肾组织纤维化程照50%。

表2组别

正常组肾衰组干预组

n

报道。

本组研究结果表明,槲皮素干预对大白鼠实验性慢性肾功能衰竭具有明显防治效果。表现为:①干预组动物死亡率显著低于肾衰组;并且干预组存活动物体重和健康状况显著优于肾衰组。②干预组肾脏相对体重的肿胀程度、。NF-κBP65。国内有实验研究结果显、抗氧化作用,对糖尿病性肾

[14215]

病具有防治作用,与本组实验结果相符。

本组研究结果明确了槲皮素对腺嘌呤引起的实验性慢性肾功能衰竭的防治作用,可明显减轻肾脏病理性改变。但其对病理模型中肾脏损害相关因素的影响及作用机理,值得进一步研究。

参考文献

[1]宋玉乔,姚凌云,曹蔚,等1槲皮素的药理作用研究

10%(μg/mL)1419±151211314±14106613±39173

333

平均单肾(μg/mL)

10617±1001033

154013±358193

3

161616

3333

经t检验,3与肾衰组P<0105;33P<0101;333P<

215　肾组织NF-κB免疫组织化学检测结果21511　正常组

近况[J]1西北药学杂志,2002,17(1):402421

[2]单智焱,刘慧雯1Quercetin对HepG2细胞的抑制作用

肾组织全部细胞均弥漫分布P65,但几乎未见

核深染细胞。肾皮质显色深于髓质,间质深于肾小球,肾小管和血管内皮细胞较深染。细、微血管腔内常见较多核深染细胞(Lc)。各个标本基本一致。21512　肾衰组

肾自身细胞染色显著较正常组变浅,胞内P65

也为弥漫分布,未见核深染细胞。全部标本肾小球、小管均出现部分未能着染细胞;此类未着染细胞核变松散,蓝紫色变浅。全部标本均有肾小球细胞团与基底膜分离。肾小球、肾间质常见较小核深染细胞(Lc)。21513　干预组

全肾自身细胞P65染色较正常组相应组织为浅,但较肾衰组深。大多肾小球结构清楚,与基底膜分离状况轻于肾衰组,未着染细胞偶见。肾组织细胞P65主要为弥散型,有部分出现核深染而胞浆无着染(表明NF-κB活化,转移入核);不同标本核深染细胞多少不一,以间质更多见。肾小球及间质可见较小核深染细胞(Lc),但比肾衰组少。3　讨论

慢性肾功能衰竭是严重危害人类健康的一种常见病症,其防治研究仍是中西医学研究的重要课题。多年来国内不少学者不懈努力于探索中医药对慢性肾功能衰竭的防治作用,有实验研究结果显示,槲皮素对糖尿病性肾病有防治作用;但槲皮素对慢性肾功能衰竭防治效果方面的研究尚少见

[14215]

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(下转第53页)　　

第2期彭波　等　化痰降气胶囊对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠作用机理的实验研究　 5

3

四烯酸(AA)经5脂氧酶代谢生成的一簇产物,

人的肺脏细胞及炎症细胞含有丰富的脂氧酶,是LT的重要组织来源。LTs包括LTB4和CysLT(LTC4、LTD4、LTE4),这类炎症递质与许多炎性

[3]

疾病如支气管哮喘、COPD等密切相关。LTB4是引起气道变应性炎症的主要介质,是目前已知最强

[4]

的中性粒细胞催化因子和活化因子之一。LTB4亦介导内皮细胞和多型核白细胞表面粘附蛋白的表达,促进炎性细胞的渗出及迁移COPD重要的发病机制之一,炎症介质与COPD,效,该方由白芥子、白前、金沸草等组成,适用于慢性阻塞性肺疾病急性发作期和缓解期。紫苏子降肺中逆气,为降气平喘要药,而紫苏子和白芥子具有抗炎杀菌作用;金沸草、紫苏子、白前三味,皆具“温而不燥,润而不腻”之性,功擅温润肺气,止咳化痰,为治疗久咳久喘之良药。诸药合用,共收化痰降气、宣肺止咳平喘抗炎之效。化痰降气胶囊能减轻COPD炎症和改善支气管病理损伤,其治疗CDPD的部分机制是否与调低COPD气道TNF-α和LTB4,从而减轻支气管炎症是本次实验的重点。本实验的结果显示,化痰降气胶囊确能降低COPD模型大鼠支气管肺泡灌洗液中TNF-α、LTB4,从而减少中性粒细胞向气道中趋　　(上接第50页)

[12]金念祖,茅力,朱燕平,等1槲皮素对人肺癌细胞和

]

化,减轻气道炎症及其所造成的支气管肺组织损伤。

目前尚无治疗COPD气道炎症的特效药物,本实验的结果为研究治疗COPD等气道炎症疾病有效中药复方制剂提供了一定的实验依据。

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(收稿日期:2006212206)

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(收稿日期:2006210220)

本文来源：https://www.bwwdw.com/article/fht4.html