1999-4-22 人基因治疗申报临床试验指导原则-废止

新生物制品审批办法（局令第3号） 【废止】

1999年04月22日 发布

附件九：

人基因治疗申报临床试验指导原则

1993年5月卫生部公布《人的体细胞治疗及基因治疗临床研究质控要点》以后，国内外基因治疗的临床前及临床研究进展很快。为了我国基因治疗的正常开展管理，特起草本指导原则，作为申报人基因治疗临床试验的试行办法。凡国内单位以及国外单位或中外合资单位所研制的人基因治疗制剂在我国境内进行临床研究，均须按本指导原则进行申报和审批。

Ⅰ引言

基因治疗是指改变细胞遗传物质为基础的医学治疗。目前仅限于非生殖细胞。基因治疗的申报范围，是将外源基因或遗传物质导入人体细胞以达到防治疾病的目的，不包括应用化学药物改变基因表达。后者应纳入化学药物治疗的申报范围。

基因治疗的技术和方式日趋多样性。按基因导入的形式，分为离体基因导入后进入体内（ex vivo）及体内导入（in vivo）两种形式。前者是在体外将基因导入细胞，然后将细胞导入人体；后者则是将基因通过适当的导入系统直接用于人体。所用导入系统包括病毒与非病

毒型。因此，申报资料不可能用一个模式来概括，必须按方案及其技术路线而异。本指导原则只可能提出一个共同的原则，具体的方案应根据这些原则，确定具体申报的内容。根据国内外基因治疗的进展，基本原则：一是必须确保安全与有效，要充分估计可能遇到的风险性，并提出相应的质控要求；二是要促进基因治疗的研究，并加强创新。对一些新的治疗技术路线的相应质控要求，可有一定的灵活性，应注意到基因治疗本身的特点以及它与经典的化学合成药物或基因工程药物的差别。为此，希申请者加强咨询和论证，提出一个确保安全有效而又适合实际的申报资料。同时，对每个方案中各个阶段的操作过程、中间及最终制品的制备，务必制订标准操作规程，并予严格实施。

Ⅱ申报资料内容

一、基因治疗制剂简介 （一）申请表（见附表）

（二）国内外研究现状、立题依据和目的及预期效果：

1.应提供国内及国外已开展的同样或同类疗法的资料，包括所选择的病种、有效性、安全性及必要性。须着重指出申请方案与国外或国内已批准的方案的不同处、特点及其优越之处。凡属新的方案，应说明其优越性及安全性的依据。

2.须说明可能出现的副作用或危害，并提出如何避免和减少其危害性或副作用的措施。 3.利弊的权衡。根据该治疗方案可能达到的疗效及可能出现的风险，提出总体的利弊权衡的估价。这种估价将是该方案能否获得批准的重要依据之一。 （三）制剂的制备工艺简介：

简要说明该制剂（或产品）的制备工艺流程及其对安全性的保证。

二、基因治疗制剂的性质、制备工艺及质控 （一）治疗用的目的基因及其质粒的组建：

不论何种导入形式，首先应说明基因治疗所用的目的基因及其来源（尤其是有否涉及国内外专利问题，应有专利查询资料）、分离的材料方法、克隆步骤、DNA序列分析结果以及重组体质粒组建详细步骤及鉴定结果。 （二）基因导入系统的组建：

这是指将目的基因导入细胞的系统，包括病毒型与非病毒型系统。病毒型导入系统包括逆转录病毒载体、腺病毒载体物质、腺相关病毒载体等。非病毒型导入系统除裸DNA外，一般包括两个部分：一是哺乳动物细胞表达载体；二是其它载体物质，如脂质体、多肽或金属粒子等。为此，需说明目的基因导入系统的性质与内容。 1.病毒型基因导入系统：

（1）病毒载体及目的基因重组载体 a.载体的来源、结构及专利查询资料

包括载体DNA的限制性内切酶图谱。若有特殊的元件，如启动子、增强子及Poly A位点等，应提供详细资料。若有改变结构（如丢失片段或插入片段），须提供DNA测序结果。若属新的或改变结构的病毒载体，须提供组建的材料、方法、组建步骤及鉴定结果的全部资料。

b.目的基因的重组载体：

须包括目的基因的来源、分离方法及步骤以及DNA测序结果，并须说明目的基因的重

组载体的组建方法、包括插入的步骤、限制性内切酶图谱。

c.目的基因的稳定性：包括目的基因的重组体结构与表达水平的稳定性资料。 （2）包装细胞及产病毒的种子细胞库的建立：

a.包装细胞：来源、传代历史以及质控的材料。包括细胞形态学、染色体组型、支原体、细菌、病毒等外源因子的检测结果。若需用其它辅助病毒，须说明其来源、分离的方法步骤。 b.产病毒的种子细胞库的组建：

由病毒载体转染包装细胞所组建的能复制并产生病毒的细胞系称为产病毒细胞系，即种子细胞库。该种子细胞库的组建过程必须予以详细说明，包括材料、方法、步骤、细胞系的鉴定。申报材料包括： ●细胞形态学 ●染色体组型 ●传代次数

●病毒滴度的检测，包括检测技术及可靠性的依据 ●病毒介导目的基因的表达活性 ●外源因子检测结果

●复制型病毒的检测，包括方法、技术可靠性及结果 （3）工作细胞库的建立及质控：

须说明工作细胞扩增的方法、传代次数、倍增时间、可允许的传代次数（保持同样的病毒滴度及转导基因的活性）及工作细胞库的规模、保存条件并提供以下资料： ●细胞的均一性：包括细胞形态学、染色体组型、表型、导入基因的 存在状态及其表达。

●病毒滴度 ●转导基因的活性 ●外源因子检测结果 ●复制型病毒的检测

所有以上的项目在自检的基础上，均须由中国药品生物制品检定所检测或由国家药品监督管理局指定的单位检定。 2.非病毒型基因导入系统

非病毒型基因导入系统，均需一个能在人体细胞表达目的基因的质粒。除裸露DNA外，还须附加其它的组分进行加工，如脂质体、多肽系统、金属颗粒等。申报的资料须包括： （1）目的基因的表达载体：

提供表达载体的来源、专利查询资料。说明载体组建的方法、步骤、限制性内切酶图谱、质粒的元件构成（包括启动子、增强子、polyA位点等）。耐药基因若属耐氨苄青霉素基因，必须说明使用该基因的原因及以后采取确保安全性的措施。

（2）目的基因表达载体工程菌的种子细胞库、工作细胞库的建立，包括上述重组载体转化所用菌种的来源、基因型及表型。种子细胞库的传代次数、质粒拷贝数及基因表达量等。工作细胞库的组建包括扩增条件、传代过程中质粒的稳定性（拷贝数及表达量）、允许的传代次数、细菌的同一性、外源因子（如杂菌、真菌、噬菌体等）的检测等。 （3）DNA制备与纯化的工艺。

（4）DNA纯度（超螺旋型的含量），细菌基因组DNA、RNA、蛋白残留量及热原质检测结果。

（5）若用物理方法导入，须提供其详细方法、步骤，基因导入效率及其表达活性以及

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