沉降菌碟暴露时间验证方案

沉降菌碟暴露时间验证文件

验证项目 验证方案编号 验证报告编号 验证证书编号

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沉降菌碟暴露时间 验证文件

目录

一、验证方案起草、审批 ............................................................................................. 1 二、验证报告起草审查及会审 ...................................................................................... 1 三、验证证书的批准 .................................................................................................... 1 四、引言 ...................................................................................................................... 2 五、菌种及培养基........................................................................................................ 2 六、菌液制备 ............................................................................................................... 2 七、验证方法 ............................................................................................................... 2 八、回收率计算 ........................................................................................................... 3 九、结果判断 ............................................................................................................... 3 十、验证结果和记录（附后） ...................................................................................... 3 十一、验证报告（附后） ............................................................................................. 3 十二、验证证书（附后） ............................................................................................. 3

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沉降碟暴露时间验证方案

一、验证方案起草、审批

1、验证方案起草 验证项目 使用部门 起草部门 起草人签名 沉降碟暴露时间验证 中心检验室 中心检验室 验证方案编号 验证委员会主任 YZ-13580-1 日 期 2、验证方案会审 审核人 日 期 3、验证方案批准 批准人 签名 日 期

二、验证报告起草审查及会审

1、验证报告起草 验证项目 使用部门 起草部门 起草人签名 日 期 2、验证报告会审 审核人 日 期

沉降碟暴露时间验证 中心化验室 验证报告编号 中心化验室 三、验证证书的批准

验证项目 使用部门 批准人 签名 日 期

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沉降碟暴露时间验证 中心化验室 验证证书编号 验证委员会主任

四、引言

1、验证目的：验证我公司沉降碟的暴露时间为4小时，依据《中国药典》2010年版附录无菌检查法和微生物限度检查法下灵敏度检查项进行验证，以证明沉降碟中培养基在空气暴露时间可以达到4小时。

2、概述：我公司沉降碟为普通的培养皿（φ90mm×15mm），所采用的培养基为大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA），每个培养皿含培养基20ml，根据培养基特性制订检验方法，按制定的方法进行试验，根据验证结果判断是否符合验证标准。

3、验证组织 组长：彭伟添

组员：陈杰辉，黄玉妍

五、菌种及培养基

1、菌种

金黄色葡萄球菌【CMCC（B）26003】、铜绿假单胞菌【CMCC（B）10104】、枯草芽孢杆菌【CMCC（B）63501】、生孢梭菌【CMCC（B）64941】、白色念珠菌【CMCC（F）98001】。

2、培养基

营养肉汤培养基、改良马丁培养基、硫乙醇酸盐流体培养基、大豆酪蛋白琼脂培养基

3、无菌检验仪器及相关设备

无菌室、净化工作台、恒温培养箱（30～35℃）、生化培养箱（23～28℃）、高压蒸汽灭菌器、电子天平、电冰箱、电热干燥箱、玻璃器皿。

六、菌液制备

接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中培养18～24小时；接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中培养18～24小时；接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中，培养24～48小时；上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数小于100cfu的菌悬液。

菌液制备后若在室温下放置，应在2小时内使用；若保存在2～8℃，可在24小时内使用。

七、验证方法

1、取配制好的沉降碟32个，同时灭菌后，取16个沉降碟，每3个分别接种小于100 cfu的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌、白色念珠菌，另一个不接种作为空白对照，置30℃～35℃培养3天，逐日观察结果。

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2、把灭菌后的沉降碟16个放置在无菌检查时的超净洁净台上暴露4小时后，每3个分别接种小于100 cfu的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌、白色念珠菌，另一个不接种作为空白对照，置30℃～35℃培养3天，逐日观察结果。

八、回收率计算

供试品组各的菌回收率（%）=

供试品组菌数-样品本底菌数×100%

验证加菌数九、结果判断

1、暴露前试验组的菌回收率应不低于70%。暴露4小时后试验组的菌回收率应不低于70%。

2、若暴露前试验组的菌回收率应不低于70%，说明加入的培养基能满足微生物生长，若暴露后试验组的菌回收率应不低于70%，说明培养皿暴露4小时后，培养基仍能满足微生物生长，

3、若任一次试验中试验组的菌回收率低于70%，应采用增加培养基，降低暴露时间，并重新进行方法验证，使试验组菌回收率大于70%。

十、验证结果和记录（附后） 十一、验证报告（附后） 十二、验证证书（附后）

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沉降碟暴露时间验证报告

编号：

20 年 月 日至20 年 月 日，验证小组根据批准的 “YZ-13580-1号”验证方案，对沉降碟的暴露时间进行验证，结果试验组的菌回收率均符合规定。

通过验证，证明沉降碟的暴露时间可以达到4小时。 验证小组：

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年 月 日

沉降碟暴露时间验证合格证书

编号：

经审核，“xxx”验证方案合理，验证结果符合规定要求，特此发给验证合格证书，沉降碟的暴露时间可以达到4小时。

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药业股份有限公司

验证委员会（盖章）

20 年 月 日

沉降碟暴露时间验证记录

细菌数、霉菌和酵母菌数

检品名称 配制部门 检验依据 沉降碟 中心检验室 《中国药典》2010年版附录 20 年 月 日 报告日期 20 年 月 日 检验日期： 取16个沉降碟，每3个分别接种小于100 cfu的金黄色葡萄验证方法 球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌、白色念珠菌，另一个不接种作为空白对照，置30℃～35℃培养3天。 菌种名称 金黄色葡萄球菌1 金黄色葡萄球菌2 金黄色葡萄球菌3 铜绿假单胞菌1 铜绿假单胞菌2 铜绿假单胞菌3 枯草芽孢杆菌1 枯草芽孢杆菌2 枯草芽孢杆菌3 生孢梭菌1 生孢梭菌2 生孢梭菌3 白色念珠菌1 白色念珠菌2 白色念珠菌3 菌种代数 验证加菌数（cfu） 样品本底菌数 试验组（样品+验证加菌数） 回收率（%） 供试品组各的菌回收率（%）=

供试品组菌数-样品本底菌数×100%

验证加菌数

检验人： 复核人：

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沉降碟暴露时间验证记录

细菌数、霉菌和酵母菌数

检品名称 配制部门 检验依据 沉降碟 中心检验室 《中国药典》2010年版附录 20 年 月 日 报告日期 20 年 月 日 检验日期： 取16个沉降碟，暴露4小时后，每3个分别接种小于100 cfu验证方法 的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌、白色念珠菌，另一个不接种作为空白对照，置30℃～35℃培养3天。 菌种名称 金黄色葡萄球菌1 金黄色葡萄球菌2 金黄色葡萄球菌3 铜绿假单胞菌1 铜绿假单胞菌2 铜绿假单胞菌3 枯草芽孢杆菌1 枯草芽孢杆菌2 枯草芽孢杆菌3 生孢梭菌1 生孢梭菌2 生孢梭菌3 白色念珠菌1 白色念珠菌2 白色念珠菌3 菌种代数 验证加菌数（cfu） 样品本底菌数 试验组（样品+验证加菌数） 回收率（%） 供试品组各的菌回收率（%）=

供试品组菌数-样品本底菌数×100%

验证加菌数

检验人： 复核人：

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本文来源：https://www.bwwdw.com/article/ew03.html