卡维地洛对大鼠心室肌细胞Ito的电流影响的实验研究-第1卷第1期
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卡维地洛对大鼠心室肌细胞Ito的电流影响的实验研究-第1卷第1期
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第 1卷第 1期 5 520 0 5年 8月
Chn中国现代医学杂r dcn iaJ u n lo d志 iie o r a fMo enMe
V 11 o 1 o.5 N .5Au . 0 5 g 2 0
文章编号: 10— 9 2 20 ) 5 2 6— 3 0 5 8 8 ( 0 5 1— 2 8 0
论著
卡维地洛对大鼠心室肌细胞 l电流影响的实验研究曹艳杰王海昌杜俊杰,,,张荣庆张清,,贾国良,明高,招’
(四军医大学西京医院 1心脏内科;.矫形外科研究所;第 . 2创伤 3第四军医大学基础部药理学教研室,西西安 70 3 .陕 10 2)
摘要:目的
探讨卡维地洛对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流 ( ) I的作用。方法采用胶原酶酶解法分
离得到大鼠单心室肌细胞;用膜片钳全细胞技术记录灌流卡维地洛前后 I采电流的变化。结果平I电流值也有明显减小, v曲线向下方移位。论 I—结抑制作用呈浓度依赖趋势。关键词:卡维地洛; I流;片钳技术 电膜
灌流 01 _ .mM
及 1 V卡维地洛后, . m/ 0 l I流密度分别为 (/ F: 50±1 8) ( .1 ., 0 5不同去极化电压水 电 P p)( . A 6 ., 3±O 6) P< .; 9 9 6 0
卡维地洛对大鼠心室肌细胞 I电流具有抑制作用, 此
中图分类号: R3 1 8 R5 1 3.; 4. 3 7
文献标识码:A
S ud fe f c so a v di lo t a se to wa d t y o fe t fc r e l n r n in ut r o
p tsim u r n I o e tiua o ye fr t oa s u c r e t( fv nrc lrmy c tso asC O Ya—i, A n j WAN a- h n D u -i, H N o g qn e G H ic a g, U J n j Z A G R n - ig e, Z A G Q n JA G o l n Z AO Mig go H N ig I u -i g H n- a, a, (.e ate tfC d vslg, .e at e t O hp e i, in s ilXin 1 p r n a i ao y 2 p r n r o ad s Xj gHo t,’, D m o r o o D m f o t c i pa a S a x
7 0 3, . .hn, . eat n o P am c l y S ho o B scMe ii, hn i 1 0 2 PR C ia 3D p m t " r e hr ao g, c ol ai f o f d n c e teF ut layMe i nv r t X S a g i 1 0 2 PR C ia h or h ̄ i r dc U i sy i t l a e i,饥 h n x 7 0 3, . .hn ) A s a t 0bef e T x l eteeet o avdll nt nin o ta o si urn ( o nr - bt c:【 jc v】 oepo f c f r i as t u r pt s m cr t1 f etc r i r h s c e oo r e w d a u e v i ua a i yctso rt Meh d】R t ado yct eei l e i o ae aet aq i i l yn lr r o oye f as cdm .【 to s a cri oye w r s a dwt cl gns cur s ge e - m s ot h l o e nt c l rmy c t s I u r n s r c r e s g w o e c l r c r i g p t h c a e h i u . T e i f e c s o r u a o y e . c re twa e o d d u i h l - el e o n a c l i n d mp t c n q e h n u n e f l
crei l nI w r u i . R sl】k c r n esy(A p w s (.+ . ) (.106 )rset e, hn avdl ees de【 eut ur t ni p, oo t d s e d t a:5 6 1 8,3+ ., pc vl w e 0 9 9 6 e i y 01m . M,1 avd o w sa ddt et cl l a o tn( 0 5. u etvl g eao si IV . mM crei l a d e o x a eua b t sli P< . ) C r n— o aerltnhp( ) 0 l r r h uo 0 t i— c r a h tdd w w r.【 o cuin】C rei l a i icn hbt eeet o”T eihbtee et uv w ssie o n a e f d C n l o s avd o h s g f atn i i f c nI h i i f c s l s n i i iv s n iv sa e mo e p omien n h g rc nc ta o h n i o rc
nc nr tns r r r n ti i e o en rt nst a n lwe o e ta o . i Ke y wor: c re l;I c re t a c l mp t c ni e s d a v di ol u n;p t h c a e h qu
近年来,随着对卡维地洛药理学特性研究的深入,发现它具有较为广泛的心血管保护作用:通过抑制血管平滑肌细胞增殖而改善血管重塑Ⅲ抑制高脂;血症时脂质在动脉管壁的沉积囝保护心肌梗死后的;心肌再灌注损伤,缩小梗死面积;氧化和自由抗
影响的有关特性,也进一步为临床运用于治疗心律失常提供药理学理论基础。
1材料和方法11仪器 .
基清除作用[。而卡维地洛对心肌细胞电生理学 6 1等特性影响的有关研究,尚少见报道。本文通过观察卡维地洛对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流 ( I)的影响,试图阐明卡维地洛对心肌细胞跨膜离子流收稿日期:0 4 1 - 8 2 0— 1 1
膜片钳放大器 (国 A oa h20;美 xpt 0B)数据采 e集及分析软件 (国 Ca px80及 Ca f .;美 l e . m l i 8 mpt 0)微电极探头 (国 H as g V 0 B;置显微美 edt e C 23 U)倒 a镜 (日本 NknTp 1等。 io ye 14)
2 6 2 8
卡维地洛对大鼠心室肌细胞Ito的电流影响的实验研究-第1卷第1期
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第 1期 5
曹艳杰,:等卡维地洛对大鼠心室肌细胞 I电流影响的实验研究
12试剂及溶液配制 _台氏液 ( mM) N C 4, C ., C,05: a 11 3 K 155 Mg 1 .,C C21, a 2O ., lcs ., E E .。 a 1 . N H P 403 Gu oe 50 H P S 50用 8
替代 N C,可去除 I a1№的影响;由加入到细胞外 I 液中 03 . mM的 C C阻断。电位除极水平的电 d 1所各.
流峰值与终末值之差为 I的大小, 除以该细胞的电容标化为 I的电流密度。14统计学处理 .
NO a H调节 p H值至 7;无钙台氏液除不含 c c . 4 al 外,其余与台氏液相同。K B液 ( mM) L Gua c:_ lt mia i 7 KC1 5, u i 20, c d 0, 2 Ta rne KH2 1 Mg 2 PO4 0, C1 3,
实验所
得的电生理资料,采用 Ca p t80软 lm f . i件分析、处理。数据以 (±S表示,用 E cl2 0 )采 xe 0 0
E T ., lcs 0 H P S 1, KO G A 05 Guoe 1, E E 0用 H调节 p H
值至 7。测定通道电流的液体:细胞外液: . 4Ch l h o i e 3 KC1 . Mg 2 ., C1 . o i c lrd 1 5, ne 5 4, C1 1 1 Ca 2 8, 1
统计软件进行分析。问比较采用 t组检验。卡维地洛对 I的影响,采用加药前后自身对照 t验。 P<检00 . 5被认为具有统计学意义。
C C205 Gu oe 1, E E 1, K H调节 p d 1 ., lcs 0 H P S 0用 O H
值至 7。电极内液: C 4, a T , g 1 7 . 4 K 110 N 2 P 4 M C2, AE T , E E 0 G uoe 1,用 K H调节 p G A 5 H P S 1。 lcs 0 O H
2结果2 1卡维地洛对大鼠心室肌细胞 I . 最大峰值及密度的影响
值至 72卡维地洛分别以 01 .。 .mM和 1 .mM浓度溶 0解于细胞外液中,观察其对 I电流的影响。各种液体在进行实验时均充以 10 0%氧饱和。13方法 .
细胞外液中加入 01mM及 1 M卡维地洛 . .m 0
与本研究以往的实验方法类似:取 I级健康 s D大鼠 6只,重 ( 0体 2 0±2 g雌雄不拘。采用胶 0),原酶酶解法分离并得到单心室肌细胞。在 C a e l mpx软件控制下,产生的信号经膜片钳放大器输出、滤
时,最大电流峰值及电流密度均明显小于对照组 I (< . )且 1 M卡维地洛组 I最大电流峰值 P 0 5; .m 0 0及电流密度明显小于 01 . mM组 ( 00。见表 P< . 5)1。
表 1不同浓度卡维地洛对电流最大峰值及 电流密度的影响 (=) n 6
波,再经 AD转换,/由计算机采集和处理数据。调节微电极操纵仪,阻抗为 2 4MQ内冲电极内液的使—
删对照组
k值专2 . O±2 .6 0O 8 .5 64 5 5 5 23±1 . 5 6.O±1.5 8 2 5.6土 19’ O .8) 391±0 6’ . . 6 37 8 .5 64
3 2 2 23±1.5 8 . 5±2 .6’
玻璃微电极与细胞表面形成高阻抗封接 ( 2GQ )>,破膜,记录全细胞电流。钳制心室肌细胞膜电位于一
01 52 01 . mM卡维地洛组 8 .5 64 41 . 7土3 .2” 23±1 . 5
7 V, 1 v步阶使之去极化至不同膜电位水 0m以 0m平直至+ 0m一 0mV+ 0mV)持续时间 2 0 6 V( 7 一 6 , 5
1 mM卡维地洛组
注:) 1表示与对照组相比,< . P OO 5 2)表示与 01mM卡维地洛组相比,< . . P OO 5
ms刺激频率 02H。在此测定过程中,氯化胆碱。 . z 用
6 6. A 0 p 8m s
29 s 4.1 p 8. A 7m Flp A
1 . m s 99l A 5 9.p 9
一
1
、
■ l对照组电流 O1mM卡维地洛组 I电流 . 1mM卡维地洛组 k电流
图 1卡维地洛对不同去极化水平 l 电流峰值的影响表 2卡维地洛对不同去极化电压水平 l t o电流峰值的影响 ( A) (= ) p n 6
注: )示与对照组相比 P< .5 1表 O; 0 2)示与 01表 .mM卡维地洛组相比 P< .5 OO
2 6 2 9
卡维地洛对大鼠心室肌细胞Ito的电流影响的实验研究-第1卷第1期
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中国现代医学杂志
第 1 5卷
22卡维地洛对不同去极化水平 l .电流峰值的影响
抑制作用;可使 IV曲线向下方移位; I—对电流最
不同的去极化电压水平时,照组、.mM及 1对 01
大峰值及电流密度也具有明显抑制作用,且抑制作用具有浓度依赖性趋势。因此,笔者认为,卡维地洛通过对 I电流的抑制,可引起动作电位时程的延长,并使 E P延长, R对抗心律失常。参考文献:
m M卡维地洛组的 I电流峰值具有明显差异:去极 化电压分别为一 0m 0m 3 v、0m时, 3 V、 V、Om 6 V 1
m M卡维地洛组的 I电流峰值分别小于对照组及 01 . mM组 ( O0, P< . 5)见表 2。
23卡维地洛对不同去极化水平 l .电流 lV曲线—的影响
[】 P T L MK C AN, B T E I G J e a. Ihbt n o 1 A E , H P E T R D E L,
t 1 n iio f ih ma V S U S" s oh u n a C I/ mo t an l c l r l e a o b t e o e k e el p o i r t n y h n v l f i
细胞外液中加入不同浓度的卡维地洛时,不同
mutpe a t n nt y etnie gn e re io . J lil- ci a i p r sv a e t avdll o h e Cadoa c r ivs
去极化水平 I电流峰值受到抑制, 见图 1卡维地洛;使 I电流的 IV曲线向上方移位,图 2 —见。6 o o 5 o o
P am cl 9 5 54:6 2 6 7 hr ao,19,2 () 5— 5 .[】 F U R T I Z IH R M, N N A T J e a.C rei l 2 E E S EN G,FS E U N R, t1 avdl o ihbt arc l i eoio ntehp rhls rl c rt[. n ii ot i d dp sini yec o t e a J s i p t h e e mi o 1
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图 2卡维地洛对大鼠心室肌细胞 I流 IV曲线的影响 电
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3讨论大鼠心室肌细胞复极相主要由钙内流和 I电
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[】F U S E N R,YU L oeta t f at B 0 9 5 n— 6 E R T I E T .A p t i i n,S 2 9 9,i n n odh b t o y e - a ia - d it lpd e x d t n n d y oo iiy ii s x g n r c me ae i i p r i a o a c tt xc t d l d o i
流共同参与形成, I电流在整个复极期占明显优势。 在去极化过程中已有 I通道的激活,+离子经该 K通道快速外流,形成动作电位的快速复极 1。在期人心房和心室肌以及大鼠、、等的心室肌,电狗兔 I 流是决定动作电位早期复极化的主要离子流,它的有无及强弱对动作电位的形状有重要关系。用 4一氨基吡啶阻断 I电流后, 快速复极初期抑制,期平 2
[ . hr co g(ae,19, 8 3 5 3 1 J P ama l y s】 9 4 4: 8— 9 . 1 o B )
[]曹艳杰, 7王海昌,张荣庆,卡维地洛对抗乌头碱诱发的大鼠心律等.失常作用的研究 .国心脏起搏与心电生理杂志,20,81中 0 41():4 4 5— 7.
[】C J 7 AO Y,WAN ,Z N Q ta.A trhtm ce et G HC HA G R,e 1 ni ryh f s a i co c r e i l n c o i n -i d c d rh t mis n as n d t f a v dl o a n t e n u a r y h a i r t a i o i e s
m cai[.C iee Ju a fC ri aig ad l t— eh n msI hns o rl o ada P n Ee r s .】 n c c n c o p yio, 0 4 81:4 - 7 hns hs lg 2 0,1() 5 4 .C iee oy
台抬高。 与I K相比, I电流的生理及药理特性,尤其是它对心律失常的病理生理意义,还知
之甚少。近年
[]刘千勇, 8王晓良. 6种抗心律失常药对大鼠心室肌细胞瞬间外向钾
电流的抑制作用 .药学学报, 9, (: 3 17 1 7 2 )8-8. 9 3 31[】LU Q,WA G X .T e bokn f t o i tr yh c 8 I Y N L h l ige e s fs a i r tm c c xn ah iduso as n uw r urn a etcl oy s 1 rg n t ni totad creti rtvnr ua my t[. r e n i r c e J A t hⅡl e ta S i,19,3 () 8 - 8 .C iee caP a Icui i c 9 7 23:1 3 17 hns a c n a[ C EN ,N WA R K R Y K T Y 9 H G J I , A MI A, O AMA J K D] , 0 AMA I .Ca v i l l k e e oa ii g K’ c re t d h e - y e r e l b o s t r p l r n d o c h z u r n i a t L tp s n n
来,常用抗心律失常药对该电流的可能影响,越来越引起了重视,断 I阻电流可引起动作电位平台期和时程的延长,使 E P延长,到抗心律失常的作并 R起用[1 8。, 9
C 2 urn n rb i vn iua y ̄o[.E r J P am o a+creti abt e tc l m o s f u hr e L r r c 1 c
本研究结果表明, . mM及 1 的卡维地 01 . mM 0
19,3 612:19 2 1 9 9 7 (- ) 8— 0 .
(赵梓屹编辑 )
洛对不同去极化电压水平的 I电流峰值具有明显
2 7 2 0
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