细胞工程学习题资料

（？题号前有问号题表示需斟酌！） 一、名词解释

1、细胞工程学（cytotechnology或cell engineering）：是以生物细胞、组织或器官为研究对象，运用工程学原理，按照预定目标，改变生物性状，生产生物产品，为人类生产或生活服务的科学。

2、转基因动植物（transgenic animal and plant）：指用细胞工程结合基因工程的方法将人们需要的目的基因导入受体动植物基因组中，使外源基因与其基因整合在一起，并随细胞分裂而增殖，在动植物体内表达，并稳定地遗传给后代。 3、原生质培养（protoplast culture）：指将微生物或植物细胞游离成原生质体，在适宜培养条件下，依据细胞全能性使其再生细胞壁，并进行细胞分裂分化，形成完整个体的技术。 4、植物胚胎培养（embryo culture）：指使胚或具胚器官（如子房、胚珠等）在离体无菌条件下发育成正常植株的技术。 5、克隆动物（cloned animal）：是动物的无性繁殖，指不经两性结合，个体不断增值、复制出外形、性能和基因型一致的个体。 6、细胞周期（cell cycle）：从细胞一次分裂结束开始，到下一次细胞分裂结束所经历的过程。 7、端粒（telomere）：端粒是由富含鸟嘌呤核苷酸的短的串联重复序列组成，伸展到染色体3’端，染色体复制一次，端粒重复序列的长度就缩短一些；端粒酶：具有合成端粒重复序列、补偿正常的端粒序列丢失的功能的酶。

？8、细胞分化（cell differentiation或cytodifferentiation）：是胚胎细胞分裂后未定型的细胞，在形态和生化组成上向专一性或特异性方向分化，或由原来较简单具有可塑状态向异样化稳定状态进行分化的过程。/ 指的是在多细胞生物中，一个干细胞在分裂的时候，其子细胞的基因表达受到调控，变成不同细胞类型的过程。 9、细胞去分化（dedifferentiation）：是指已分化的细胞失去其分化特征，回复到分化组织状态。

10、干细胞(stem cells, SC)：是一类具有自我复制能力(self-renewing)的多潜能细胞，在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞。

11、细胞系的转化：指细胞在体外培养过程中发生与原代细胞形态、核型、增殖或者其他特性的可遗传的变化。

12、细胞融合（cell fusion）：指将两个或两个以上的细胞合并成一个细胞的技术。 13、细胞系（cell line）：原代培养物经首次传代成功后即成细胞系。 14、细胞决定（cell determination）：细胞在发生形态和功能的分化之前，就已经受到约束，而具有向着特定方向分化的趋势，之一时期称为细胞决定。

15、愈伤组织：去分化的细胞，往往经过细胞分裂形成一团无特定结构和功能的松散的薄壁细胞团，称为愈伤组织。

16、植冰：在液氮中冷却后的镊子或者棉签夹住塑料细管上端，使抗冻液迅速通过-6℃左右的冰点，强制性的使细胞外液结成冰晶，叫做植冰。 17、性别控制：指通过人为干预或操作，使动物按照人们的设计繁殖出所需性别后代的技术。 二、符号题

GH(Growth hormone)/生长激素；酵母提取液/YE(yeast extract)；编程性细胞死亡/PCD（programmed cell death）；多能干细胞/PSC(pluripotent stem cell)；白血病抑制因子/LIF(leukemia inhibitory factor)；二甲基亚砜/DMSO(dimethyl sulphoxide)；细胞松弛素B/CB(cytochalasin B)；前列腺素/PG(prostaglandin)；促卵泡素/FSH(follicle stimulating hormone)；促黄体素/luteinazing hormone；牛血清蛋白/BSA（bovine serum albumin）；体外成熟/IVM（in vitro maturation）；体外受精/IVF(in vitro fertilization)；表皮生长因子

/EGF(epidermal growth factor)；胚胎干细胞/ES cell（embryonic stem cell，embryo-derived stem cell）；抗冻蛋白/AFP(antifreezing protein)；单细胞蛋白/SCP(single cell protein)；融合指数/FI（fusion index）；变性梯度凝胶电泳/DGGE（denaturing grade gel electrophoresis）；简单重复序列/SSR（single sequence repeat）；随机扩散多态性DNA/RAPD/（random amplified polymorphic DNA）；生长激素/GH(growth hormone)。 三、填空题

1、植物胚胎培养中，幼胚培养的关键技术是（培养基的配制）。

2、幼胚培养时，胚的发育方式是（正常胚胎发育、胚性发育、早熟萌发、产生愈伤组织）。 ？3、在实验操作中，确定胚囊的发育可根据（）确定。

?4、转基因产物通过（形态特征、基因、分子生物学）水平鉴定。 5、植物胚乳可分为两大类（被子植物的胚乳、裸子植物的胚乳）。

6、转基因植物的安全评价主要集中在（环境安全性、食品安全性）两方面。 ？7、胚胎超低温保存常用方法有（、、）。

8、灭菌方法（干热消毒灭菌法、湿热消毒灭菌法、过滤除菌法、射线消毒灭菌法、酒精灯消毒灭菌法、消毒剂消毒法、抗生素抑菌法）。 9、胚胎移植技术中，受体的同期发情处理常用激素是（抑制卵泡发育制剂、溶解黄体制剂）。 10、根据发育阶段，干细胞可分为（胚胎干细胞、成体干细胞）

11、根据潜能大小可将干细胞分为（全能干细胞、多能干细胞、单能干细胞）。 12、植物细胞最适Ph（5.8—6.0），动物细胞最适Ph（7.2—7.4）。 四、简答题

1、细胞工程在再生能源开发利用上的应用：①培育能高效转化太阳能的植物，即具有高效率光合作用的植物；②和基因工程相结合，培育出能高效发酵纤维素产生乙醇等替代能源的高效菌种。

2、细胞工程学研究的内容：①转基因动植物；②染色体工程；③组织、器官或细胞培养；④原生质体培养；⑤植物胚胎培养；⑥动物胚胎移植、胚胎培养和试管动物；⑦克隆动物。 3、细胞分裂方式：有丝分裂、减数分裂、无丝分裂。 4、细胞根据其分化程度分和分裂能力分为几类：

？5、细胞坏死和细胞凋亡的区别：细胞坏死是被动的、突发性的、非生理性死亡；细胞凋亡是程序性的、基因决定的。二者的引发因素与表现均不同。

6、生物生殖的方式有哪几类型：无性生殖、有性生殖、无融合生殖。

？7、细胞分裂的基本特征与意义：①细胞形态和功能间出现稳定差异，意义在于实现细胞多样性；②细胞生理状态发生改变，意义在于维持分化（特化？）状态；③细胞分化潜能逐渐变窄，意义在于使细胞趋向于分化稳定的专能细胞；④细胞核分化潜在能保持完整，意义在于保持细胞核基因组完整。

8、生物信息中表达的基因可分几类：①维持细胞生存所必须的基因；②各种组织细胞中专一性选择表达的基因。

9、细胞工程实验室有几种：基本操作室、无菌操作室、培养室、鉴定分析室、温室等。 10、细胞工程研究消毒灭菌的方法有哪些：干热消毒灭菌法、湿热消毒灭菌法、过滤楚军法、射线消毒灭菌法、酒精灯消毒灭菌法、消毒剂消毒法、抗生素抑菌法。

11、离体授粉与离体受精有什么区别：取材不同，融合方式不同，培养方法不同。

12、培养液的配制：水、无机盐、微量元素、维生素、缓冲系统、能源和碳源、氮源、激素和生长因子、添加剂。

？13、无菌操作的技术要点：无菌操作前工作人员穿好工作服、工作帽口罩，将各种金属器械浸泡在酒精中消毒，用酒精擦拭双手与前臂，在酒精灯火焰附近操作。（网答）创造无菌

空间、用具消毒灭菌、火焰封口、操作迅速。

14、植物快速繁殖的基本路线：母株制备—增殖—植株再生及鉴定—炼苗和移植。 15、比较动物细胞与植物细胞的异同： 16、植物离体无性繁殖的意义：①繁殖速度快，经济效益高；②占用空间小，不受季节限制，便于工厂化育苗；③繁殖各种珍稀、濒危苗木和突变体，为育种服务。

17、老年斑的形成原因：血液循环功能下降，新陈代谢减慢，细胞和组织逐渐退化和衰老，棕黑色的“脂褐素”沉积在细胞内。逐渐衰老的组织和细胞已无法排除这些棕黑色颗粒，它们大量堆积在皮肤内，就形成了老年斑。 18、植物体细胞融合类型和意义：

19、植物种质资源保存方法：原生境保存，非原生境保存（种植保存、贮藏保存、离体保存） 五、论述题

1、每代细胞生长曲线分哪几个时期？各期细胞有什么特点？

答：①潜伏期：细胞悬浮，细胞质回缩，胞体呈圆球形，静止一段时间后贴壁。②指数生长期：细胞数目成倍增长，细胞活力最佳，当细胞数量达到一定量后，出现细胞生长的密度抑制现象。③平台期：当细胞长满瓶底，形成连续性细胞单层后，细胞不再分裂而停止增殖（接触抑制）。④衰退期：培养液中营养物质耗尽，代谢废物累积，ph降低，使细胞发生中毒性改变，甚至脱落死亡；有些转化细胞仍可继续增殖，形成重叠多层生长状态或瘤状细胞团。

回答二：每代细胞从开始接种到分离再培养，一般要经过以下阶段：潜伏期、指数(对数)生长期和停止期(平台期)。

①细胞接种培养初期，历经悬浮、贴壁及生长加速的阶段。细胞接种培养后，先经过一个在培养液中呈悬浮状态的悬浮期。此时细胞胞质回缩，胞体呈圆球形。接着是细胞附着或贴附于底物表面上，称贴壁，贴壁出现标志悬浮期结束。细胞贴附于支持物后，会发生一系列变化，然后还要经过一个潜伏阶段，才进入生长和增殖期。细胞处在潜伏期时，可有生长活动，基本无增殖，少见分裂相。潜伏期后，细胞分裂出现，并逐渐增多，标志细胞进入指数生长期。

②此时细胞生长增殖旺盛，细胞成倍增长，活力最佳，最适合进行实验研究。细胞分裂相增多。（细胞分裂相数量可作为判定细胞生长旺盛与否的一个重要标志。）

③在细胞数量达饱和密度后，细胞停止增殖，进入停止期。此时细胞数量持平，故也称平台期。停滞期细胞虽不增殖，但仍有代谢活动，可继续存活一段时间。该时期细胞形态轮廓增强，最后开始衰退死亡。

2、多利羊是怎么培养出来的？为什么说是克隆技术的里程碑？

答：从一只普通的白羊分离乳腺细胞，从一只苏格兰黑羊摘取卵细胞并去除其核，用电脉冲法是细胞融合，然后移植进黑羊的子宫发育，经4个月妊娠，克隆羊多利出世。

回答二： 将动物体细胞经过抑制培养，使其处于休眠状态，利用细胞核移植技术将其导入去核卵母细胞，发育成胚胎后移植至受体，妊娠产仔，克隆出成体动物。 它是世界上第一例经体细胞核移植出生的动物，是克隆技术领域研究的巨大突破。在理论上证明了，分化了的动物细胞也具有全能性，在分化过程中细胞核中的遗传物质没有不可逆变化；在实践上证明了，利用体细胞进行动物克隆的技术是可行的。 它是通过特殊的体外操作（显微注射、电融合、体外培养等），对哺乳动物特定发育阶段的核供体（胚胎卵裂球或体细胞）及相应的核受体（成熟的卵母细胞）进行体外重组，从而不经过有性繁殖过程而达到扩繁同基因型哺乳动物胚胎及其种群的目的。 3、谈谈你对转基因动植物及其产品安全的认识？ 答：转基因技术作为一种高尖端的现代生物技术，在为现代人类社会作出巨大贡献的同时，

其本身也存在着许多问题，生物安全性就是其中最主要的问题之一。首先，无论是转基因植物，还是转基因动物，只要为人类所食用，就存在着“外来基因”进入人体内部所带来的不确定的风险。我们知道，人体自身的免疫系统对各种外来生物侵袭具有特异性和非特异性的抵御能力。但如果转基因的产品被食用，那么外来的基因就有可能利用人体内的“资源”（如肠道微生物）进行自身的复制、或者翻译并表达出外源蛋白，或者插入微生物基因组而影响其基因组的稳定性。事实上，外来DNA每天都通过食物或呼吸（如空气中的病原微生物）进入人体内，但迄今未见报导这些外源DNA能够整合到人类或人体内的肠道微生物基因组中。不管怎样，转基因产品的食用，其潜在的风险性是不能被忽略的。其次，是其在医疗应用上的风险性。随着人类社会的发展，人们的生活水平不断提高，但是新的疾病也不断涌现，而且传统的医疗方法对一些新的疑难病症已经束手无策，比如帕金森、糖尿病等，所以人们也在努力寻找新的、更有效的方法来治疗这些疾病，转基因治疗就是其中之一。这些病症产生，大多是因为一个或几个主要蛋白的功能缺失，或者是能合成该功能蛋白的细胞减少，由此产生疾病，而基因治疗的目的就是想通过基因的外源导入，使机体重新获得合成缺失蛋白的能力，从而治愈疾病。虽然其简单、直接，但也存在着一定风险。先撇开基因能否正确靶向的问题不说，由于病毒（主要是逆转录病毒载体）为主要介导载体，外源基因就有随机插入人体基因组的可能性。这种随机插入可能会给人体带来负面的影响，如抑癌基因的失活等。所以转基因的治疗在医学领域还有很多问题需要解决。就目前而言，转基因技术还不够成熟，存在着诸多风险，科学家们正在设法提高转基因技术和产品的安全性。例如，通过去除起源于微生物的载体DNA序列，可以防止外源DNA上基因的表达和横向转移；使转基因定向插入到目标生物基因组的无害位置，可以避免转基因随机插入对目标生物重要基因的破坏。总之，转基因技术向我们展示了光明的、充满希望的应用前景。科学家们有能力完善转基因技术，使其能最大限度地造福人类。

4、为什么说细胞工程技术的发展在为人类造福的同时，也提出了新的挑战？

答：细胞工程技术可以创造一些原来没有的有生命活性的细胞，为医学上提供恢复病变缺陷细胞的功能成为可能，为人类健康提供福音，但也会出现一些新的基因组合，可能出现一些新的病变的可能，因此，要利用其为人类造福的同时，也要能应对其潜在的威胁。

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