光合细菌配合面包酵母与藻粉培养轮虫的实验

光合细菌配合面包酵母与藻粉培养转曳的实脸

摘要---以面包醉母与一定量螺旋藻粉培养褶皱臂尾轮虫的过程中,添加光合细菌液进行实验。结果表明:光

合细菌作为辅助性饵料,对轮虫的生长具有明显特殊的促进作用。4组实验显示:投喂适宜量光合细菌轮虫增殖

明显加快,但与光合细菌添加量的增加不完全呈正比关系;投喂光合细菌新鲜培养液与老培养液轮虫增殖效果相

近;投喂光合细菌只能作为辅助性饵料。当配合酵母、藻粉培育轮虫时,3者在饵料上起到了良好的互补作用,培

养效果最佳。

关键词轮虫培养光合细菌面包酵母藻粉

轮虫是鱼、虾、蟹类人工育苗幼体阶段重要的活饵

料之一,培养轮虫无疑是育苗技术中的重要环节。轮虫

在工厂化培养中可利用高密度单胞藻获得高产,但目前

该技术仍有占地多、耗用人力多的问题。近年来用面包

酵母单独投喂轮虫,也可获得高产。因酵母来源广,贮

运方便,此法已广为利用。但发现轮虫培养过程中易出

现延迟期,且培养出的轮虫个体小,饵料价值有待提高。

近年来国内外开展的光合细菌(PSB)在水产养殖

的应用研究,各方面效果很好。在PSB培养轮虫方面,就

PSB单独投喂、PSB与藻液、PSB与面包酵母混合投喂轮

虫分别进行实验,取得很好的效果。本实验以PSB混合

面包酵母与螺旋藻粉投喂轮虫,并对其培养效果进行比

较详细的观察,旨在为工厂化培养轮虫从饵料方面提供

一些数据和补充。

1材料与方法

1.!材料

2.1.1光合细菌(photos押thetieBaete‘a,以下简称PSB)

由海南大学水产系微生物实验室从当地海泥中分离、培

养,属红假单胞菌属,密度为50亿celllml。实验用接种

7一14天的新鲜培养液,老培养液为接种4个月。

1.12面包酵母(Saeeharo卿eeseerevisia)市售中法合资生

产。

收稿日期:2003一01一20

1

.

1‘3螺旋藻粉海南晨光生物有限公司生产,以下简称

藻粉。

1.14轮虫(肠动角us夕Iica石方习无病、健康、活力好的褶

皱臂尾轮虫。

11.5海水盐度26,砂滤海水,水温28℃。

!.2方法

1

.

2

.

1培养方法用漂白粉消毒砂滤海水,曝气2天,用硫

代硫酸钠中和余氯,装人40L白桶中,大量充气,放入

轮虫初密度在30一100个/耐,进行实验。每日早换水

90%,换水后加水至4oL,取样进行计数,镜检。根据

轮虫总数量,计算投饵量,每日投6次,每个实验组平

行2次。

1.2.2日投喂量酵母按69/百万轮虫,藻粉按酵母量的

115(即129/百万轮虫),2者混合后用300目筛绢搓,

分6次投喂。光合细菌按酵母:PSB二19:1ml比例的

日添加量一次性投人水中。如果按100个轮虫/ml计算,

40L水体日投饵量为酵母249:藻粉4.89:PsB24ml。

1.2.3带卵率计算和观察用培养皿取10而左右的样品,

滴加碘液杀死轮虫,放在显微镜下观察轮虫的带卵情况。

带卵率计算公式如下:带卵率=视野中带卵的轮虫个体

总数/视野中轮虫个体总数x100%;带一卵率二视野中

带一卵的轮虫个体总数/视野中带卵的轮虫个体总数x

100%;并依次计算出带二卵率、带三卵率等。

1.2.4日增殖倍数和日增殖率计算日增殖倍数二末轮虫卉斗降业2003年第20卷第6期ShandongFisheries2003,20(6)

密度/初始轮虫密度(以24小时为单位计算)。日增殖率2.1投喂PsB(新鲜与老培养液)与不投喂PsB组培养轮

(r)二InN洲0’Nt:1天后的轮虫密度,N0:初始密度。虫的情况

2结果见表1。

衰1投喂Ps日与不投喂PsB组培养轮虫实验记录

最初24小时后48小时后

组别轮虫密度带卵率一卵率二卵串

(个/nil)(%)

轮虫密度

(个/nil)

OJ-月耳 b01‘J bQU,J门月才产(.A)一。55555(0A一9595外外仍95808080808080l,‘ UR‘J斑一‘IJIJ4飞 IJ内」不投PSB

(对照组)

老PSB液组

新鲜PsB组

日增殖倍数带卵率一卵率二卵率

(r)(%)(%)(%)

雨{O{丽2丫一80964

1.91(0.647)82955

2.1(0.742)936040

2.0(0.690)955644

20协.69伪985842

2.16(0.771)986347

轮虫密度

(个/血)

109

110

187

179

166

174

日增殖倍数带卵率一卵率二卵率

(r)(%)(%)(%)

丽6扣万21)819010

1.81(0.593)85928

2.23(0.802)946535

236(0.858)965842

237(0.862)985346

2,45(0.896)996()40

由以上结果分析可知,无论是新鲜还是老PsB培养

物添加到面包酵母和藻粉中培养轮虫,都能明显提高轮

虫增殖速度,差异极显著。但是这种增殖效果有个过程,

在24小时内主要是轮虫抱卵积累的过程,从镜检看在第

12小时轮虫抱卵率已经开始增加,24小时后抱卵情况明

显好转,第48小时后,轮虫增殖效果差异变得极显著,

意味着PsB的持续添加,将带来持续稳定的促长效果。另

外新鲜和老PsB培养物对轮虫的增殖效果的方差分析结

果不显著。

2.2在酵毋和藻粉中添加不同比例PsB培养枪虫的实验

见表2。

裹2添加不同比例pSB培养轮虫的实验。

酵母:PSB(91111)l:01:0.11:03751:0.751:151:2

轮虫初密度313540363838

(个/ml)士07士1.4士26土1.8土2.1士2.1

24小时后轮虫607075788083

密度(个/ml)土14土0.8土2.2土2.4士2.1士22

48小时后轮虫110128158181199209

密度(个/ml)10.7士4.8士6.2土5.8土7土8.8

48小时/24小时l,8351832,112.322.489252

轮虫的增殖倍数士003土0.05士0,06土0.06士007土0.08 ‘藻粉的添加量仍按醉母(幼:藻粉(幻二1:1。

2.3以面包酵毋为主依次添加藻粉、光合细菌培养轮虫

实验

见表3。

从表3可见,当酵母中逐次添加藻粉和PSB时,轮

虫增殖结果三合一组>二合一组>单独投酵母组。

2.4降低酵母与藻粉投喂量后投喂高浓度psB实验

见表4口

表3以面包醉母为主添加旅粉、光合细菌培养轮虫实验记录组别最初轮虫密度

(个/ml)

24小时后

轮虫密度

(个/ml)

48小时后

轮虫密度

(个/ml)

48小时/24小时

轮虫增殖倍数

(r)

Q户,‘41,‘ O41486063898400八110nn 面包酵73

母组76

面包酵母69

+藻粉组73

面包酵母十藻70

粉+玲B组66

1681.52

1861.62

内j八书,‘气一O八O八砚‘一J件

.

…

,.上1,工,白14473040,乙,‘月J门」

0‘以.了.OJ,‘O沪111,乙4飞」..且,月月五.L1.1...11.1 表4阳氏酵母与旅粉投喂t后投喂高浓度pss实验结果*

组最初轮带卵率12小时后带卵率24小时后带卵率日增殖

别虫密度轮虫密度轮虫密度倍数

(个/而)(%)(个/而)(%)(个/Inl)(%)(r)

降低组1139618060190151.05(0.054)

士1.42士3·5士5·2士2.8士7.2士0.8士0.05(0002) 原量组1109518090419902.322(0.778)

土1.96士4.3士6.3士3.2士8.6士4.6士004(0002)

,降低组为把酵母与藻粉量降低至原投喂最的30%,但每日照

常添加PSB;原量组仍按酵母与藻粉的原量投喂,添加PsB。

从表4可见,当面包酵母和藻粉的投喂量严重不足

时,即使PSB仍按600x10一‘添加,1天后轮虫的带卵率

也会明显下降,轮虫的增殖倍数比原量组小,轮虫的带

卵率仅为巧%。

3讨论

3.1光合细菌的适量添加可明显提高使用面包酵母和藻

粉培养轮虫的效果,其原因可能是3者在饵料营养上的

互补作用。表1一3三组实验发现,在一定的轮虫密度下,

无论是新、老PSB培养液均在适宜浓度下能明显提高使

用面包酵母和藻粉的培养效果。实验过程中发现,PSB投

32卉斗违业2003年第20卷第6期ShandongFisheries2003,20(6) 喂24小时后,轮虫的带卵情况明显变化,不仅带卵率增

至95%一100%,而且带2卵的较多,带2卵率能达到

40%一60%,带3卵、4卵、5卵的均有。这是没投喂PsB

组所没有的。同时还发现,投PSB组比不投PSB组所繁

殖的后代个体肥大,胃肠摄食饱满,卵巢色泽浓。另外,

每8小时就有一批轮虫卵生成;不投喂PSB组每12小时

才少量生成一批新轮虫卵。

其原因,笔者认为可能是光合细菌中含有的特殊活

性物质与酵母、藻粉的饵料价值的互补作用,这与坂本

久川、王鉴【21观点一致。光合细菌富含蛋白质,尤其

富含对动物生长发育起促进作用的特殊生理活性物质

(如辅酶Q和相当完全的B族维生素),特别是酵母中所

缺乏的维生素B.2、叶酸、生物素含量丰富。如光合细菌

中富含的维生素B,2,对面包酵母培养轮虫就有独特的互

补作用。据报告,面包酵母由于添加维生素B12,其饵料

价值得以改善,轮虫卵由很多不孵化转为全部孵化。但

光合细菌所含的其它重要活性物质对轮虫的独特的促长

作用,其机制未作进一步的研究。可推测,PSB的某些

营养成份可提高轮虫对酵母的利用率,促进卵生成的速

度和数量,而高的带卵率和数量往往带来下一代轮虫的

增殖高峰。

3、2投喂新鲜PSB比老PsB培养液培养轮虫效果略好,但

差别不大。从表1的结果我们看到2种PsB培养液的增

殖效果接近,由此可推测,PSB对轮虫的增殖促进主要

是营养方面,而改善水质方面可能属于次要作用。

3.3随着PSB液添加量的不断增加,轮虫增殖速度在增

加,但不完全成正比。首先PSB添加量要达到适宜量,

促进轮虫增殖的效果才明显。从表2中可见,按酵母:

PsB二19:0.lml时,促长效果并不明显,当2者比例

达到1:0.375时,添加组轮虫比对照组增长明显加快

但2者并不成正比,当2者比例达到1:2后,增殖率基

本稳定,轮虫带2卵率也不超过60%,也不再出现更多

的3卵、4卵,说明PsB对轮虫的增殖效果是一定的,有

限的。

3.4光合细菌促长轮虫的效果可靠,但同时如果水中有

原生动物时,同样也可促进原生动物的繁殖,所以务必

使水中轮虫为优势种。

3

.

5光合细菌虽能促长轮虫,但其单独作为饵料,价值

甚小,从表4可看到,当酵母量减少时,即使有PSB的

添加,仍不能满足轮虫正常繁殖的需要。这点和坂本久

[’]的观点一致。所以在用酵母培养轮虫的过程中,酵母

的量一定要给足,否则即使添加光合细菌也达不到预期

的很明显效果。

36虽光合细菌能有效促进酵母培养轮虫的效果,但酵

母在水中的存活时间及污染水质仍是不容忽视的问题,

如果有高浓度的藻液同时添加PSB应为培养轮虫最好的

办法。据王鉴[2]报道此时添加350xl仓‘较合适。

参考文献

坂本久等.光合成细菌、桃红英硫菌对臂尾轮虫的饵料价值.国

外水产,1984,(4):44一心s

王鉴,祝国芹.不同浓度的光合细菌对轮虫繁殖的影响水产科

学,1994,13(5):23一25

许兵等.光合成细菌对褶皱臂尾轮虫的饵料价值.海洋湖沼通报,

1992,(2):17一22

王金秋等.面包醉母添加PSB和Vc后培养轮虫的效果.水产科

技情报,1999,(l):25一31

王育锋等.用光合细菌液池塘培育淡水鱼种的试验,水产学报,

1990,14(4):347一350

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梅、王治宇联系.邮编:264001.电话:0535一62170796217078。SHANDONGFISHERIES

Vol20NO,62003

ABSTRACTSANDKEYWORDS

ExPerimentonthePondCultureofPenaeus

chinen压众intheSalinizationArea.

Sunyu比ongetal(l)

AbstraetInordertochangetheactUalitythatfish wasthemaineulturesPeeiesandmadelowProfit,as wellasseekoutthenewwaysofPreventiondiseasein

thePrawnculture,noneoftheexPerimentwasearried

out.Duringthe130daysofeulture,noneofthePrawn beingrearedinthesaliniZationPondwasinfectedwith

theWSSVvi邝5andtheProfitwas230()yuanPermu·

KeywordsPenaeuschinensis犷Pondinthe

salinizationarea;cultureexPeriment;Preventionofthe

dise韶e

temPerature一controlledseed~ng;larvaer~g

Stu勿ontheTemPerature一eont拍lledHighYield

Culturel’echniqueofPectenyessoens纽Jay

QiJingtaoetal(12)

AbstraetMeasuressuehasPurifyingand eontrollingthePhysiealandchemiealfactorsofthe

seawater,clloosingthebestbroodscalloP,eonirolling

thetemPerature,changingandaeratingthe

water,Preventingthediseaseandusingthe

Photosyntlleticl〕aeteriawereapPlied.Theaverageyield

was7600thousalldPereubiemeterofthewaterbody

KeywordsPectenyessoensisJay,.indueed

maturationoftheParentscalloP;incubation;

TheExPerimentsonCultureBrachionus

Pli亡a雄公初thPSBAddedto飞乞astandAlgaePOwder

y妞。Xuemeietal(32)

AbstractIntheProeessofeulturerotifer

BrachionusPlicatiliswithBaker,5yeastandaeertain

a们nouniofsPiralingalgaePowder,weaddPhotosyllth-

etieBacteria(PSB)inourexpenments.Theresultshow

thatasakindofsubsidiarydiet,PSBhasallextraord- inaryandobviouslyeffecttoaccelelatePoPulationof

therotifer.ThefourgrouPsofexPerimentsshow

resPeetively:(1)TherotiferfedwithaPPr0Priatedosage

ofPSB,Profiferatefaster.(2)Theefl七ctwithfreshPSB

15almostsarneasthatwithPSBculturedforalong

time.(3)AsincreaseofdosageofPSB,theaccelerationofrotiferPoPulationgrowtheouldbeo bserved,butn()t

showeomPletelydireCtratio.IntheeultureProcessof

rotifer,wecantakethisProPortiontoaddPSB(50X

10“ee11/ml)that15dryyeast(g):algae

Powder(g):PSB(nil)二1:02:05一l:0.2:1.(4)PSB15best

assubsi diaryfeed,butwhenit’5addedtoyeastand

algaePowder,threedietseancomPlementmutuallyon

thedietnulritionforrotifer

KeywordsBraehionusPlieatilis;eulture:PSB;

yeast:algaePowder

EditorandPublisher:EditorialOffieeofShandong

Fisheries(63,SimaRoad,Yantai,China)

Posteode:264001

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