微生物复习资料

1. 名词解释

L型菌：细胞壁缺陷细菌，可部分或完全缺陷。G+ L型菌称为原生质体，高渗环境存活，G- L型细菌称为原生质球，低渗环境仍有一定抵抗力。

外毒素：活的G+合成分泌，化学成分为蛋白质，不耐热，毒性强，对组织有选择性作用，抗原性强，可脱毒为类毒素。

内毒素：G- 死亡后释放，化学成分为脂多糖，耐热，毒性作用大致相似（发热、WBC反应、内毒素血症、DIC），抗原性弱，不可脱毒为类毒素。 肥达反应（抗体检测）（Widal test）：用已知伤寒、副伤寒沙门菌的O、H抗原，以及副伤寒的甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌的H抗原，检测受检血清中有无相应的抗体的半定量凝集试验，能辅助诊断伤寒、副伤寒A、B和C引起的伤寒。 外-婓反应（Weil-Felix reaction）：变形杆菌属中的某些特殊菌株如X19、X2、Xk的菌体抗原（O、H抗原）与某些立克次体有共同抗原，能出现交叉凝集反应。临床上可用这些变形杆菌代替立克次体与患者血清做凝集反应，可作为立克次体病的辅助诊断试验，称为外-婓反应。

Vi抗原（表面抗原）：为不耐热的多糖抗原，由黏液或荚膜多糖的结构决定表面抗原的特异性，表面抗原存在时可阻断O抗原与相应抗体之间的反应，加热处理能消除表面抗原的阻断作用。

菌落：单个培养基在平板培养基上生长繁殖形成单一肉眼可见的细菌集团。

特征：大小、形状、边缘、颜色、气味、表面、透明度、湿润度、黏度、溶血性。 类型：光滑型（S）、粗糙型（R）、黏液型（M）。

对数期：细菌在该期生长迅速，活菌数以恒定的几何级数增长，生长曲线图上细菌数的对数呈直线上升，研究细菌的生物学性状（形态染色、生化反应、药物敏感试验等）应选用该期的细菌。

试述微生物的种类及主要特点 特点 种类 非细胞型微生物 无细胞结构，无产生能量酶，一种核酸 病毒、亚病毒、朊粒 原核细胞型微生物 拟核，无核膜、核仁，环状裸DNA，只有核糖体 细菌（狭义）、支原体、衣原体、螺旋体、立克次体、放线菌（广义） 真核细胞型微生物 细胞核，有核仁、核膜，细胞器完整 真菌、原虫 MIC（最低抑菌浓度）：完全抑制细菌生长的最低药物浓度。 卫星现象：当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌一起培养时，可见到靠近葡萄球菌菌落的流感嗜血杆菌菌落较大，而远离葡萄球菌的流感嗜血杆菌菌落较小，这种现象称为卫星现象。 选择性培养基：培养基中加入了抑制剂，目的是一直标本中的杂菌生长，有助于对所选择细菌种类的生长。 脂多糖（LPS）：G-菌细胞壁外膜组成结构，包括脂质A、核心多糖和特异多糖。 MASA：甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌。 HLARE：高水平氨基糖苷类耐药肠球菌。 D试验：克林霉素诱导耐药试验，检测对大环内酯耐药的葡萄球菌是否对克林霉素有诱导性耐药。 肠道杆菌：（肠杆菌科）栖居在人和动物肠道内的一大群形态、生物学性状相似的G-无芽孢杆菌，需氧或兼性厌氧，氧化酶：-，O/F为F型，硝酸盐试验：+。

非发酵菌：指一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式，利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧、无芽孢的G-杆菌，多为条件致病菌。

迁徙生长现象：普通变形杆菌和奇异变形杆菌的大多数菌株在普通琼脂平板或血平板上可蔓延成波纹状薄膜，布满整个培养基表面，称为迁徙现象，是本属细菌的特征。

血浆凝固酶：由葡萄球菌产生，可使血浆中纤维蛋白原变为纤维蛋白从而使血浆凝固的酶，分为结合凝固酶和游离凝固酶。

杆菌肽试验：用于溶血性链球菌的检验，A群链球菌对杆菌肽几乎全部敏感，而其它链球菌大多对其耐药。

CAMP试验：B群链球菌能产生CAMP因子，可促进金黄色葡萄球菌溶血能力，产生显著的协同溶血作用，在两菌交界处出现矢状（半月形）溶血区，可作为无乳链球菌的初步鉴定试验。

结核菌素试验：应用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对结核分枝杆菌是否能引起迟发型超敏反应（IV型变态反应）的一种试验。

卡介苗：有毒力的结合分支杆菌在甘油、胆汁和马铃薯的培养基中经13年230次传代而获得的减毒变异株。

神奈川试验：副溶血弧菌菌株95%以上在我妻琼脂（人血琼脂）上产生β溶血现象，在普通血平板上不溶血或只产生α溶血。

在含高盐（7%）的人O型血或兔血及以D—甘露醇为碳源的平板上可产生β溶血，该现象作为鉴定菌株致病与非致病的重要指标。

抗-“O”试验：A群链球菌可引起人类各种疾病，包括风湿热、链球菌性变态反应性疾病等，人感染链球菌后血清有抗链球菌溶血素O（ASO），抗-“O”试验即检测血清中的ASO。 衣壳：包绕在核酸外面的蛋白质外壳，由壳粒组成。

包膜：有膜病毒的辅助结构，主要成分是脂类和糖蛋白，对脂溶剂敏感，能被乙醚破坏，功能是保护核酸，与致病有关，是有膜病毒重要表面抗原。

病毒：是一类非细胞型微生物，体积微小、结构简单，由核酸和蛋白质构成，只含有一种类型核酸，必须在活细胞内寄生，并以复制方式繁殖，对抗菌药物不敏感，对干扰素敏感，抵抗力特殊。

反转录病毒：病毒核心中含有依赖RNA的DNA多聚酶，有包膜、球形，直径80~120nm，单正股RNA，基因组含有序列和功能相似的gog、pol、env三个结构基因和多个调节基因，两端含长末端重复序列LTR，病毒复制通过DNA中间体，病毒核酸能整合于宿主细胞染色体上的一类病毒。

Dane颗粒：即HBV大球形颗粒，是完整的感染性病毒颗粒，直径42nm，外衣壳由脂质双层与蛋白质构成，镶嵌有HBsAg和少量前S抗原，内衣壳表面为HBcAg，核心内部含有DNA及DNA聚合酶，其检出标志肝内病毒复制活跃。 朊粒：非寻常病毒的一种，其本质是传染性蛋白因子，主要成分是一种蛋白酶抗性蛋白（prp），增殖慢，病程长，抵抗力强，高压蒸汽灭菌灭活。

类病毒：RNA病毒，很小，无衣壳或包膜，在核内增殖，严格细胞内寄生，与植物疾病相关。

菌丝：真菌在适宜环境中，由孢子出芽长出芽管，逐渐延长呈丝状，称为菌丝，菌丝形态有助于真菌的鉴别。

假菌丝：类酵母菌进行出芽生殖时，子母细胞不立即分离，而已狭小的面积相连，这种藕节状的细胞串即假菌丝。

KIA试验：克氏双糖铁复合试验，以KIA斜面为培养基，以酚红为指示剂，检测细菌是否分解葡萄糖、乳糖产酸、产气和硫化氢。

O/F试验：氧化-发酵试验，以Hugh-Leifson为培养基，以BTB为指示剂，检测细菌是否能分解葡萄糖以及分解过程是否需氧。

触酶试验：过氧化氢酶试验，检测细菌是否能产生过氧化氢酶分解过氧化氢生成水并释放氧气，常用于G+的初步鉴定。

MIU试验：动力、吲哚、脲酶复合试验，以含尿素、蛋白胨成分的半固体培养基为培养基，以酚红为指示剂，检测细菌生长过程中是否有动力以及是否产生色氨酸酶和脲酶。

IMVC试验：靛基质（吲哚、I）实验、甲基红（MR、M）实验、乙二酰（VP、V）实验、枸橼酸盐利用（C）试验的合称缩写，常用于鉴定肠道杆菌。尤其对形态、革兰染色反应和培养特性相同或相似的细菌更为重要（主要用于鉴别大肠杆菌和产气肠杆菌，多用于水的细菌检验）。 2. 问答题

1. 简述质粒及特点，例举医学上重要的质粒。

质粒：微小的、染色体外的遗传物质，环状双股DNA，带有遗传信息，控制细菌某些特定性状。

特征：可自我复制，传给子代，可自然丢失、获得、转移，非细菌生长所必需。 常见：R因子、COL因子、F因子。

2. G+菌和G-菌细胞壁共有结构和特有结构。 G+菌：肽聚糖+磷壁酸 G-菌：肽聚糖+外膜。 细胞壁 强度 厚度 肽聚糖层数 肽聚糖含量 磷壁酸 外膜 G+ 较坚韧 20~80nm 15~80层 50%~80% 有 无 G- 较疏松 10~15nm 1~2层 5%~20% 无 有 3. 细菌的特殊结构及意义。

荚膜：细胞壁外包绕的粘液性物质，主要为多糖，少多肽。

功能：抗吞噬作用、粘附作用、抗有害物质的损失作用，抗原性，可用于细菌鉴定。 鞭毛：某些菌体上附有细长并呈波状完全的丝状物，运动器官，成分为蛋白质。 功能：运动器官，致病性、抗原性，鉴别。

菌毛：许多G-少数G+菌表面比鞭毛更密、更短而直硬的丝状物，与运动无关。

功能：普通菌毛：多、短而细，粘附、致病，性菌毛：少、粗而长，中空，遗传物质传递。 芽孢：某些细菌脱水形成的由多层膜包绕，通透性低的圆形或椭圆形小体，细菌休眠形式。 功能：强大抵抗力，灭菌效果判断指标，鉴定。 4. 高压灭菌效果的生物学监测方法。

指示菌株：嗜热、脂肪芽孢杆菌、ATCC7953. 培养基：溴甲酚紫葡萄糖、蛋白胨水培养基。 5. 简述细菌间基因转移与重组的方式。 转化 接合 转导 溶原性转换 基因来源 供菌体 供菌体 供菌体 噬菌体 转移方式 直接摄取 性菌毛 噬菌体为载体 整合 6. 革兰染色原理、步骤及影响因素。 原理：①通透性学说 ②化学学说 ③等电点学说。

步骤：初染、媒染、脱色、复染。

结果：粉红色的G-菌，蓝色或蓝紫色的G+菌。 影响因素：（1）操作因素：涂片太厚或太薄，固定时避免过分受热，脱色时间灵活掌握（2）细菌因素：菌龄 （3）染液因素：密封不良导致酒精浓度下降，保存时间过长，碘液避光保存（4）环境因素：温度。 7. 抗酸染色步骤及结果。

步骤：加温条件下，结核分枝杆菌经5%苯酚复红染色后，能抵抗3%盐酸酒精脱色作用（抗酸性），染色后结核分枝杆菌呈红色，背景呈蓝色。

结果：观察整个涂片或至少300个视野，结果报告为“找到抗酸杆菌”或“未找到抗酸杆菌”。 8. K-B法药敏试验的操作步骤，哪些因素可致抑菌环的扩大或缩小。

原理：含定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片周围形成抑菌环，抑菌环大小反映测试菌对测试药物的敏感程度。

操作步骤：0.5麦氏比浊管标准的菌液浓度接种（琼脂厚度4mm）——贴抗菌药物纸片（各纸片中心相距>24mm，纸片距平板内缘>15mm）——孵育（35℃16~18h，对苯唑西林和万古霉素24h）。 影响因素：（1）培养基：MHA平板（厚薄、pH7.1~7.3、硬度、拮抗物质）（2）药敏纸片（浓度、干燥、保存）（3）接种细菌的量、时间、温度（4）孵育条件、时间、温度（5）操作因素（6）抑菌圈策略工具精度（7）质控标准菌株本身的药敏特性是否合格或有变异。 9. 体外联合药敏试验的主要指针及FIC结果判定。 主要指针：

FIC指数=A药联合时MIC/A药单测时MIC + B药联合时MIC/B药单测时MIC。

结果判断：FIC<0.5为协同作用，0.5~1为相加作用，1~2为无关作用，>2为拮抗作用。 10. 产ESBL菌的耐药特点如何？CLSI规定的检测其耐药机制的方法是什么？ ESBLs（超广谱β-内酰胺酶）：指由质粒介导的能水解所有青霉素类、头孢菌素类和单环β内酰胺类氨曲南的一类酶。

耐药特点：对青霉素及一、二、三代头孢菌素及氨曲南等耐药，对头霉素、碳青霉烯及酶抑制剂（克拉维酸）敏感。

CLSI规定的检测方法：纸片扩散法，包括初筛试验和确证试验。 初筛试验：抑菌圈直径头孢泊肟≤17mm，头孢他啶≤22mm，氨曲南≤27mm，头孢噻肟≤27mm，头孢曲松≤25mm。

确证试验：每片含30μg头孢他啶、头孢噻肟单独或联合克拉维酸复合制剂纸片，任何一种复合物纸片抑菌圈直径大于或等于其单独药敏纸片抑菌圈直径5mm，可确证该菌株产ESBLs。

11. 何为MRSA？MRSA药敏试验及耐药性检测的方法及临床意义。 MRSA：甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌。 检测方法：（1）基因水平——PCR扩增——mecA基因（2）蛋白水平——PBP2a蛋白——胶乳凝聚法（3）表型水平——琼脂筛选法、K-B法（头孢西丁）、稀释法、E试验法。 临床意义：多重耐药、治疗。 12. β内酰胺酶检测法。

检测方法：头孢硝噻吩纸片法，对于G-杆菌，提取细菌裂解液涂抹头孢硝噻吩纸片，十分钟后纸片由黄色变为红色为阳性，表示产β内酰胺酶。 13. 金葡菌的鉴定依据、致病物质及所致疾病。 鉴定依据：

革兰染色：G+球菌，成簇排列成葡萄串样，无鞭毛和芽孢。

菌落特点：BAP上菌落有透明溶血环，能在10%~15%NaCl琼脂中生长，耐药性强，甘露

醇高盐平板上为黄色菌落，抵抗力比其他无芽孢细菌强，生长表现（肉汤：均匀浑浊，BAP：溶血环，普琼：脂溶性色素，孵育24h菌落直径1~3mm）

生化反应：触酶阳性：与链球菌区分，O/F试验与微球菌（O）鉴别，血浆凝固酶：+，

SPA：+，甘露醇：+。

致病物质：毒素和侵袭性酶。 所致疾病：（1）化脓性疾病：皮肤化脓性感染，各种器官的化脓性感染。

（2）毒素性疾病：食物中毒，烫伤样皮肤综合征，毒素性休克综合征，假膜性肠炎。 （3）医院感染。

14. A群链球菌、B群链球菌的鉴定依据及致病特点。 乙链鉴定依据：

（1）形态及染色性：G+，链状排列，无芽孢、无动力，幼龄菌有荚膜和黏液层。 （2）菌落特征（β溶血环）：营养要求高，35~37℃，pH7.4~7.6，BAP上形成灰白色、透明或半透明、表面光滑的小菌落。

（3）鉴定试验：触酶：—，lancefield群特异性抗原鉴定，杆菌肽敏感试验：+（A），CAMP试验：+/马尿酸钠水解试验：+（B），七叶苷试验：+，6.5%NaCl生长：—（D），（变态反应性疾病ASO） 分类：

（1）触酶：—（2）A群链球菌：杆菌肽敏感试验：+（3）B群链球菌：CAMP试验：+/马尿酸钠水解试验：+（4）D群链球菌：七叶苷试验：+ 致病特点： A群：（1）侵袭性疾病：蜂窝组织炎、淋巴管炎、扁桃体炎。 （2）毒素性疾病：猩红热。

（3）变态反应性疾病：风湿热、急性肾小球肾炎。

B群：条件致病，新生儿败血症和脑膜炎主要致病菌，可引起女性生殖道感染和肺炎。 15. 淋球菌、脑膜炎奈瑟菌的生物学特性。 脑膜炎奈瑟菌鉴定依据：

（1）形态染色：G—，肾形，成双排列。

（2）菌落特征：“露滴状”，光滑型，易乳化，盐水中无自凝。 （3）生化反应：氧化酶：+，触酶：+，葡萄糖：+，麦芽糖：+。 （4）生长特性试验： 培养基 生长温度 营养需求 结果 37℃ 5%~10%CO2 — 普琼

5%~10%CO2 — 巧克力/BAP 22℃

（5）血清学鉴定与分群：可与相应诊断血清发生凝集

淋病奈瑟菌的鉴定要点：与脑膜炎奈瑟菌相比，淋病奈瑟菌麦芽糖试验：—。 16. 铜绿假单胞菌的主要生物学特性，嗜麦芽窄食单胞菌的耐药特点。 铜绿假单胞菌的主要生物学特性：专性需氧菌，营养要求不高，可生长的温度范围为25~42℃，最适生长温度为25~30℃(35℃), 4℃不生长,有金属光泽，琼脂被染成蓝绿色，培养物有生姜气味，产生绿脓素或荧光素，在Mac和SS琼脂培养基上，形成不发酵乳糖菌落。 生化反应及鉴定特征：氧化酶：+，氧化分解葡萄糖、木糖（O型），产酸不产气，还原硝酸盐并产生氮气，吲哚阴性，利用枸橼酸盐，精氨酸双水解酶：+。典型菌落：枫叶状、灰绿色，血平板上有β溶血。

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