医学实验动物学论文综述

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正文

前言

糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病。高血糖则是由于胰岛素分泌缺陷或其生物作用受损,或两者兼有引起。糖尿病时长期存在的高血糖,导致各种组织,特别是眼、肾、心脏、血管、神经的慢性损害、功能障碍。由于遗传因素和环境因素的多重影响,糖尿病的发病趋势愈加严峻。患者严重高血糖时出现典型的“三多一少”症状,多见于1型糖尿病。发生酮症或酮症酸中毒时“三多一少”症状更为明显。2型糖尿病发病前常有肥胖,若得不到及时诊断,体重会逐渐下降。现在尚无根治糖尿病的方法,但通过多种治疗手段可以控制好糖尿病。主要包括5个方面:糖尿病患者的教育,自我监测血糖,饮食治疗,运动治疗和药物治疗。目前,中国已取代印度,成为全球糖尿病第一大国。“可以说,糖尿病在中国已成燃眉之急,希望中国人在关注经济发展的同时,关心自己的健康。”7月21日,国际糖尿病联盟主席吉恩·克劳德·穆班亚教授指出,中国糖尿病发病率6.7%,已高过世界平均水平6.4%。而且,中国糖尿病高危人群也在扩大,约有1.5亿。中国糖尿病的发病率不能走其他国家的老路。防治要从三方面着手。首先是1型糖尿病,它主要是胰岛素分泌出现障碍,因此患者必须依赖外源性胰岛素,不然会危及生命。但1型糖尿病人的病情发展是可以减缓的。比如正确用药、在营养方面加以注意等。另外,像3C研究等,也可为1型患者的管理提供更多的支持。其次,对于2型糖尿病人来说,这是一种生活方式疾病,像饮食结构、锻炼与否以及年龄,都会影响2型糖尿病的发展。穆班亚教授说:“20年前我来中国,中国没有麦当劳、肯德基,而且车也比较少,大家锻炼机会比较多,当时2型糖尿病不是大问题。但现在中国遍地都是麦当劳、肯德基,到处都是车,大家的锻炼机会少多了,因此2型糖尿病在中国已经成为燃眉之急。回归健康生活方式,就是减少发病最好的方法。”第三种是妊娠糖尿病,它不但影响母亲健康,还会促使孩子逐渐发展成糖尿病。因此,降糖类药物的研究一直都是医学领域的重点、热点和难点,设计降糖类药物的实验方案在很多方面都有着极其重要的意义。

关键字;造模、血糖值、对照组

实验动物:小鼠;

实验仪器:分光光度计、台式离心机、恒温水浴锅、天平;

实验材料:链脲佐菌素、葡萄糖氧化酶、柠檬酸、柠檬酸钠、葡萄糖、试管、生理盐水、胰岛素、蒸馏水、注射器;

测定血糖前小鼠禁食12h,断尾取血,3000rpm离心10min。精密吸取20μl血浆,加

入葡萄糖氧化酶混合试剂3.0ml,混合后置37℃水浴15min,用分光光度计在505nm处比色。同时,取蒸馏水和标准葡萄糖溶液(5.55mmol/L)各20μl作对照,与样品平行试验,用空白管调零,分别读取各管吸光度值。样品管吸光度与葡萄糖标准溶液吸光度比较,计算样品中葡萄糖含量(mmol/L)。计算公式如下

血糖(mmol/L)=(样品管吸光度/标准管吸光度) *5.55(mmol/L)

100mg/dl=5.55(mmol/L)

实验步骤

糖尿病小鼠的造模

1、 选取大小形态相似的健康小鼠50只,适应性喂养一周后禁食12h,于注射试剂

前测量血糖,记录;

2、 将链脲佐菌素溶于柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(0.1mol,pH4.5),并将溶液配置成

1%的注射液,避光、冰浴保存1h;

3、 注射前禁食不禁水,一次性小鼠腹腔注射0.1mol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液链脲

佐菌素造模,注射剂量150mg/kg;

4、 分别于造模后第3天,第7天给予模型组小鼠禁食12h,称重,断尾取血;测

量小鼠空腹血糖值,空腹血糖值高于11.1mmol/L确定为造模成功,清除模型组

中造模不成功的小鼠,对小鼠重新编号;

胰岛素对高血糖小鼠降糖效果实验

1、 从模型组中随机选取小鼠20只,随机分为对照组和实验组2组,所有小鼠禁食12h,

断尾取血测量血糖含量,并记录;

2、 向实验组注射一定剂量的胰岛素, 向对照组注射同等剂量的生理盐水;分别于

0.5h、1.0h、2.0h时断尾取血,分别测量所有小鼠的血糖含量,并记录;

胰岛素对正常小鼠降血糖效果实验

1、 选取大小形态相似的健康小鼠20只,随机分为对照组和实验组2组,所有小鼠禁

食12h,断尾取血测量血糖含量,并记录;

2、 向实验组注射一定剂量的胰岛素, 向对照组注射同等剂量的生理盐水;分别于

0.5h、1.0h、2.0h时断尾取血,分别测量所有小鼠的血糖含量,并记录;

胰岛素对正常小鼠的耐糖性实验

1、 选取大小形态相似的健康小鼠20只,随机分为对照组和实验组2组,所有小鼠禁

食12h,断尾取血测量血糖含量,并记录;

2、 向实验组注射一定剂量的胰岛素, 向对照组注射同等剂量的生理盐水;给药1.5h

后,向所有小鼠腹腔内注射葡萄糖;给药后0.5h、1.0h、2.0h时断尾取血,分别测定所有小鼠的血糖含量,并记录;

胰岛素对高血糖小鼠的耐糖性实验

1、 从模型组中随机选取小鼠20只,随机分为对照组和实验组2组,所有小鼠禁食12h,

断尾取血测量血糖含量,并记录;

2、 向实验组注射一定剂量的胰岛素, 向对照组注射同等剂量的生理盐水;给药1.5h

后,向所有小鼠腹腔内注射葡萄糖;给药后0.5h、1.0h、2.0h时断尾取血,分别测定所有小鼠的血糖含量,并记录;

对于胰岛素依赖型糖尿病,由于患者体内的胰岛素量不足,所以只有补充相应数量的外源性胰岛素才能使病情得以控制,医学上称为“替代疗法”。这种类型的糖尿病以越早使用胰岛素越好,不可久拖不决。此外,对于非胰岛素依赖性糖尿病人,如果体格明显瘦弱或有感染、发热及酮症酸中毒的症侯,或病人需进行手术治疗的疾病,或妊娠妇女等情况,也可使用胰岛素治疗。口服降血糖药目前有四大类,即磺脲类、双胍类、α─葡萄糖苷酶抑制剂以及胰岛素增敏剂。磺脲类主要是促进胰岛β细胞释放胰岛素,以发挥降血糖的作用。 最早使用的这类药物是D860(甲苯磺丁脲)——为第一代磺脲类,它在体内发挥作用的时间短;第二代有优降糖,其降血糖作用虽然强,但容易发生低血糖;以后还相继发现了达美康、美吡达、克糖利、糖适平等。后两者的降血糖作用都比D860强,口服后90%由肾脏排出。而糖适平95%通过肝脏经胆道从粪便排出,仅5%从尿排出,故此类药有胃肠道反应及肝功能损害等副作用。双胍类主要是抑制肠道对葡萄糖的吸收,增加组织对葡萄糖的利用,从而起到降低血糖的作用。这类药包括苯乙双胍(降糖灵)和二甲双胍,但可引起食欲减退、恶心、腹胀、剂量大还可引起乳酸酸中毒。α-葡萄糖苷酶抑制剂是目前应用广泛的降糖药,有拜糖平,它主要抑制小肠内淀粉酶、麦芽糖酶,使食物在小肠内消化和葡萄糖的吸收减缓,从而起到降血糖作用。目前市场上降糖西药大致分为口服降糖药物和注射降糖药物。其中目前国内常用的口服降糖药物以非胰岛素类药物为主,分为非胰岛素类促胰岛素分泌剂类、双胍类、α-糖苷酶抑制剂类、胰岛素增敏剂类。其中促胰岛素分泌剂类又分为磺脲类和非磺脲类(格列奈类)。注射降糖药物主要以胰岛素及其类似药物为主。而现代药理研究证明,很多单味中药具有降糖作用。但中医药治疗糖尿病,与治疗其他疾病一样,其特点是重视患者的个体差异性和复方的使用。中医药治疗糖尿病不仅在于降低血糖,更重要的是注重防治糖尿病并发症,起到提高生活质量和延长寿命的作用。

另一方面,某些中药对于糖尿病的防治和治疗起着很大的作用传统的中医治疗糖尿病是根据临床症状进行三消论治。随着现代医学诊断技术的发展,不能仅停留在分析三消水平上,应该纳入包括现代医学检查项目在内的,所有能反映病情多方位的指标,用中医的辨证和西医的辨病相结合。在临床治疗上,对初诊患者首先把糖尿病的自我保健措施交给他,要求饮食控制1-2个月,配合运动疗法。若血尿糖下降明显即可维持下去,如控制不满意则给予中药治疗。一般分为阴虚型、气阴两虚型和阴阳两虚型。(1)阴虚燥热(见于糖尿病的早期)表现为烦渴多饮,随饮随喝,咽干舌燥,多食善饥,溲赤便秘,舌红少津苔黄,脉滑数或弦数。采用养阴清热治疗。选用一贯煎加味(生地30克、沙参10克、枸杞子10克、麦冬10克、当归10克、川楝子10克、黄连10克、丹参30克、葛根30克)。(2)气阴两虚(见于糖尿病的中期)表现为乏力、气短、自汗,动则加重,口干舌燥,多饮多尿,五心烦热,大便秘结,腰膝酸软,舌淡或舌红暗。舌边有齿痕,苔薄白少津,或少苔,脉细弱。采用益气养阴治疗。选用生脉散加味(太子参30克、麦冬15克、五味子10克、生地30克、生黄芪30克、苍术10克、玄参15克、丹参30克、葛根30克)。(3)阴阳两虚(见于糖尿病病程较长者)表现为乏力自汗,形寒肢冷,腰膝酸软,耳轮焦干,多饮多尿,混浊如膏,或浮肿少尿,或五更泻,阳萎早泄,舌淡苔白,脉沉细无力。采用温阳育阴治疗。选用金匮肾气丸(肉桂10克、附子10克、生地10克、茯苓15克、山萸肉10克、山药10克、丹皮10克、泽泄10克、丹参30克、葛根30克)。

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本文来源:https://www.bwwdw.com/article/bomi.html

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