高效液相色谱法分离测定废水中的苯和甲苯

高效液相色谱法分离测定废水中的苯和甲苯

一、实验目的

", 1、了解LC-20AT 高效液相色谱仪的流路和电路，学会仪器的基本操作；

", 2、掌握高效液相色谱基本的定性定量方法； ", 3、了解色谱参数N、K、R的意义和计算方法。 二、原理与技术

方法简介：高效液相色谱是色谱分析的一个重要分支，是在经典液相色谱的基础上发展起来的一种现代仪器分析方法 方法特点：高压、高效、高速、高灵敏度

分析对象：高沸点、热不稳定有机及生化、环境试样等

根据流动相和固定相的相对极性不同可以将高效液相色谱分为正相色谱和反相色谱。

正相色谱：流动相极性小，常为非极性的烷烃；固定相极性大，通常为硅胶、纤维素等；

反相色谱：流动相极性大，通常为水-甲醇溶液、水-乙腈溶液等；固定通常为键合的C18、C8、C4、Phenyl等，极性较弱。 ", 反相高效液相色谱的应用相对较广泛。

定性依据：保留值定性、峰高增量法定性、与其它方法联用。 定量参数：峰高、峰面积、相对峰高、相对峰面积等。 定量方法

：外标法、内标法、归一化法

分配系数K

在色谱法中，当样品加入后，样品中各组分在固定相和流动相间发

生的吸附、脱附，或溶解、挥发的过程叫做分配过程。在一定温度下，组分在两相间分配达到平衡时的浓度比，称为分配系数，用K 表示。如果各组分在固定相中的分配系数不同，它们就有可能达到分离。

1.一定温度下，组分的分配系数K越大，出峰越慢； 2.试样一定时，K主要取决于固定相性质； 3.每个组份在各种固定相上的分配系数K不同； 4.选择适宜的固定相可改善分离效果；

5.试样中的各组分具有不同的K值是分离的基础； 6.某组分的K = 0时，即不被固定相保留，最先流出。 分离度

分离条件的选择主要是提高“难分离物质对”的分离度 三、实验用品

LC-20AT 高效液相色谱仪超声波清洗器 微孔过滤装置 2、试剂：

甲醇（AR）、苯（AR）、甲苯（AR）、二次蒸馏水 四、操作步骤

1、液相色谱分析条件

检测器： 二极管阵列检测器

流动相：甲醇-水（体积比）=9：1 流速：1 mL/ min 检测波长：254 nm 进样量：20 μL 2、准备工作 3、方法的编辑 4、运行样品 5、注意事项 五、数据处理

采用LC-20AT 高效液相色谱仪化学工作站数据处理程序处理数据。 1、用外标直接比较法计算各物质的含量； 2、定性分析；

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