分子生物学实验药品配制分班（新）

四班（周一下午）

1M Tris-Cl (pH8.0) （Tris三羟甲基氨基甲烷） 1000ml 1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。 3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。 pH值 浓HCL pH7.4 70ml pH7.6 60ml pH8.0 42ml 4. 将溶液定容至1 L。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

0.5 M EDTA·Na2 (pH8.0) 乙二胺四乙酸二钠 1000ml 0.5 M EDTA 1 L配制

1. 称取186.1 g Na2EDTA·2H2O，置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌（在磁力搅拌器上剧烈搅拌溶液）。 3. 用NaOH调节pH值至8.0（约20 g NaOH)。 注意：pH值至8.0时，EDTA才能完全溶解。 4. 加去离子水将溶液定容至1 L。 5. 高温高压灭菌后，室温保存。

酚/氯仿/异戊醇＝25:24:1 500ml x 2（配2瓶） 五班（周一晚上）

1M NaOH 100ml

1M HCl 100ml 浓HCl (11.6M)

5mol/L NaCl 300ml

生技班（周二下午）

3 mol/L NaAc (pH5.2) 200ml

用HAC调pH. （称取NaAc溶于130 ml无离子水中，先加入40 ml冰醋酸，然后 再缓慢的调pH.至5.2，最后定容至200 ml）

TE 缓冲液(pH8.0): 10mM Tris-Cl (pH8.0) 1 mM EDTA (pH8.0) 1000ml 1. 量取下列溶液，置于1 L烧杯中。 1M Tris-Cl (pH8.0) 10ml 0.5M EDTA (pH8.0) 2ml

2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，均匀混合。 3. 将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。 4. 室温保存。

70%乙醇 500ml

二班（周二晚上）

植物细胞提取液: 500ml 100mM Tris-Cl (pH8.0) 50 mM EDTA (pH8.0) 500mM NaCl 1.25%SDS

1mol/Lβ-巯基乙醇(0.1%)？（《分子生物学实验指导》P.114β-巯基乙醇为1 ml）？

5 mol/L KAc 400ml（将196.4g醋酸钾溶解于200 ml无离子水中，定容至400ml，高压灭菌后，室温保存。）

动物提取液（0.14mol/L NaCl，0.1 mol/L EDTA） 1000ml

免师班（周三下午）

LB培养基配制及分装 1600ml 分成8瓶150ml，2瓶200ml。

每升用量：

胰蛋白胨(Bacto-tryptone) 10g 酵母提取物(Bacto-yeast extract) 5g NaCl 10g pH 7.0 121℃，20min 高压灭菌

50％甘油 100ml 121℃，20min 高压灭菌 0.1 mol/L CaCl2溶液 100ml 121℃，20min 高压灭菌 25%SDS （十二烷基硫酸钠） 100ml

三班（周三晚上）

溶液Ⅰ 200ml

50mmol/L 葡萄糖 1.98g 25mmol/L Tris-Cl(pH 8.0) 5ml 1M 10mmol/L EDTA(pH 8.0) 4ml 0.5M

溶液Ⅱ 各200ml 0.4mol/L NaOH

2%SDS

临用前1:1混合贮存液即为II液.

溶液Ⅲ 200ml

5mol/L 醋酸钾 120ml 冰醋酸 23ml

水 57ml (最终pH4.8)

一班（周四晚上）

50×TAE 200ml

配制1L溶液各成分的用量如下： 2mol/L Tris碱: 242g

1mol/L 乙酸: 57.1 ml的冰乙酸（17.4mol/L）

100 mmol/L EDTA: 200ml的0.5 mol/L EDTA（pH 8.0） 水补足1L

1×TAE （50×TAE 稀释50倍）1000 ml

10X载样缓冲液: 0.25%溴酚蓝，40%蔗糖水溶液(30%甘油水溶液)

20ml

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