白头翁和黄连不同配比下有效成分溶出量和量效关系的研究

4 7 8 论

著

J u l y 2 0 1 3, V o 1 . 1 1, N o . 2 0

白头翁和黄连不同配比下有效成分溶出量和量效关系的研究夏娜邓雁如肖婷婷

(天津中医药大学中药化学与分析重点实验室，天津 3 0 0 1 9 3 )【摘要】目的探讨白头翁与黄连不同配比对有效成分溶出量及对肠运动性能的影响。方法回流提取不同配比的白头翁和黄连，以干浸膏量、白头翁皂苷 B 4、小檗碱含量为指标，考察白头翁和黄连不同配比对有效成分溶出量的影响；运用肠内容物推进速度实验和离体回肠

实验，以小鼠离体肠内容物推进速度和家兔离体回肠震动幅度为评价指标，考察白头翁和黄连不同配比对量效的影响，并分析量效关系。结果经方配比时浸膏和白头翁皂苷 B 的得率较其他配比高，但小檗碱的溶出率并不是最高的。肠内容物推进速度实验表明，白头翁一黄连 ( 3:1 )及单味药白头翁与空白组相比有显著性差异；离体回肠法表明白头翁一黄连 3:1、 1:1组和单味药白头翁与空白组相比有

显著性差异。结论白头翁汤经方配伍具有较高的有效成分溶出量，并对肠道收缩抑制作用明显。【关键词】白头翁皂苷 B ;小檗碱；量效关系

中图分类号：R 9

文献标识码：B

文章编号：1 6 7 1— 8 1 9 4( 2 0 1 3 )2 0— 0 4 7 8 - 0 3

Pul s a t i l l a a nd Di fe r e nt Ra ios t of Be r be r l ne Di s s o l ut i on o f t he Ac t i ve I ng r ed i e nt a nd t he Ne xt D os e 。 e fe c t Re l a t i ons hi p X/ A Na, DEN G Y a h— F u, XI AO T i n g- t i n g

( K e y L a b o r a t o r y o f C h e m i s t r ya n d A n a t y s i s o fC h i n e s e Me d i c i n e, T i a n j i n U n i v e r s i t y o fT C M, T i a n j i n 3 0 0 1 9 3, C h i nI A b s t r a c t]O b j e c t i v e T o e x p l o r e t h e d i s s o l u t i

o n o f a c t i v e i n g r e d i e n t s o f P u l s a t i l l a a n d C o p t i s t h e b e f o r e a n d a f t e r h t e i r c o m p a t i b i l i t y, nd a e v a l u a t e t h e e f e c t so f d i f e r e n t r a t i o o n i n t e s t i n l a mo t o r f u n c t i o n . Me t h o d s T h e d i f e r e n t r a t i o o f P u l s a t i l l a a n d Cc l p t i s we r e s e l e c t e d, a f t e r t h e wa t e r b o i l i n g r e l f u x e x t r a c t i o n, he t a mo u n t o f d r y e x t r a c t, P u l s a t i l l a S a p o n i n B4, b e r b e r i n e v o l u me we r e o b t a i n e d f o r he t t e s t, t o e x a mi n e t h e a c t i v e i n g r e d i e n t s i n a s p e c t s o f d i s s o l u t i o n r a t e c h a n g e s nd a c o mp a t i b i l i t y r e l a t i o n s; b a s e d o n he t i n t e s t i n a l c o n t e n t s f r o m i l e m u s p e e d t e s t nd a i l e u m e x p e i r me n t i n v i r t o, s p e e d i n mi c e a n d v i b r a t i o nat r e o f ab r b i t i l e u m we r e o b t a i n e d t o r e s e a r c h t h e e fe c t s o f he t d o s e - e fe c t r e l a t i o ns h i p . Re s u l t s T he b e s t d i s s o l u t i o n r a t e of e x t r a c t a nd P ul s a t i l l a S a po ni n

B4 wa s he t c l a s s i c a l p r e s c

r i p t i o n s, b u t t h e d i s s o l u t i o n r a t e o f B e r b e r i n e wa s n o t t h e b e s t i n hi t s r a i t o . I n t e s i t n a l c o n t e n t s or f wa r d s p e e d e x p e i r me n t s h o we d

ha t t o n l y P u l s a t i l l a C o p t i s ( 3: 1 ) nd a s i n g l e P u l s a t i l l a h a v e h t e s i g n i i f c nc a e l e v e l i n c o m p a r i s o n w i t h t h e c o n t r o l ro g u p . T h e i l e u m e x p e i r me n t i n v i r t o s h o wha t t P ul s a t i l l a: Co pt i s=3:1 . 1:1 ro g u p a n d t he s i n g l e P ul s a t i l l a ha v e he t s i ni g i f c a n c e l e v e l i n c o mp a r i s o n wi h t he t c o n ro t l ro g u p . Co nc l us i o n Th e c l a s s i c a l p r e s c ip r t i o n s o fBa i t o u we n g De c o c io t n h s a he t be s t di s s o l u t i o n o fa c i f v e i n g r e d i e n t s a n d t he s i g n i ic f a n t i n hi b i t i o n e fe c t o n i s ol a t e d d u o d e n m . u

【 Ke y wo r d s l P u l s a t i l l a s a p o n i n B 4; B e r b e r i n e; Do s e— e f f e c t r e l a t i o n s h i p

白头翁汤最早收录于张仲景的《伤寒论》,由白头翁、黄柏、黄连、秦皮四味药组成，具有清热解毒，凉血止痢的功效。该方被认为是治疗热毒血痢的代表方 1。白头翁为君，清热解毒，凉血止痢。黄连苦寒，泻火解毒，燥湿厚肠为治痢之要药，与黄柏共为臣药。经文献报道，白头翁皂苷B 4和盐酸小檗碱分别为

白头翁和黄连的有效成分。为探讨这一传统方剂的药效物质基础和药效关系，本实验选取白头翁汤中 的君药白头翁和臣药黄连为研究对象，对白头翁汤进行了拆方研究】, 阐明了不同配比对有效成分溶出量及对肠收缩的影响，从量效关系的角度考察经方配伍的合理性。 1仪器与材料 1 . 1实验仪器 C o Me t r o一 6 0 0 0高效液相色谱仪 ( 2 O L定量环 ),K D M型调温电热套 (山东鄄城永兴仪器厂 ),电子天平 (上海精密科学仪器有限公司),天平 (北京宣武区天平厂制 ), B T 1 2 5 D电子分析天平 (德国赛多利斯公司 ),电热真空干燥箱 (天津市天宇实验仪器有限公司 )。R M6 2 4 0 C型多道生理信号采集处理系统 (成都仪器厂 )、智能竖线恒温水浴锅 (巩义市于华仪器有限责任公司 )。 1 . 2药品与试剂白头翁皂苷B 4对照品 (中国药品生物制品鉴定所，批号为 1 1 1 7 6 6 . 2 0 0 6 0 1 )、盐酸小檗碱对照品 (中国药品生物制品鉴定所，批号为1 1 0 7 1 3— 2 0 0 9 1 0 );白头翁( R a d i x p u l s a t i l l a c h i n e n s i s r e g e 1 )及黄连+通讯作者：E - m a i l: d y a n r u@s i n a . C O I n

( R h i z o ma c o p t i s c h i n e n s i s r f a n c h )均购于天津协和药店，由天津中医药

大学李天祥老师鉴定为合格药材；甲醇和乙腈均色谱纯 (天津市协和吴鹏色谱科技有限公司 ),三乙胺、磷酸和盐酸均为分析纯 (天津市江天化工技术有限公司 ),娃哈哈纯净水 (天津娃哈哈有限公司 ), 台氏生理溶液 (氯化钠 0 . 8 g、氯化钾 0 . 2 g、氯化钙0 . 2 g、氯化镁0 . 1 g、 磷酸二氢钠0 . 0 5 g、碳酸氢钠 1 . 0 g、葡萄糖 1 . 0 g,溶于 1 0 0 0 mL蒸馏水中，加热溶解。随用随配，试剂均为分析纯)1 . 3动物

家兔由天津中医药大学实验动物中心提供，合格证号 S CX K (津) 2 0 0 9 . 0 0 1 1;昆明种小鼠，购于天津市山川红实验动物有限公司， 清洁级，合格证号 S C X K (津) 2 0 0 9— 0 0 0 1。动物均饲养与天津中医药大

学实验动物中心，饲养温

度2 0￣ 2 5℃,相对湿度4 0%￣ 5 0%,动物自由摄食摄水。

2方法与结果 2 . 1药材提取药材加8倍量水回流3次，每次 1 h,合并提取液，过滤，浓缩后， 减压干燥，称浸膏重量，备用。 2 . 2含量测定 2 . 2 . 1白头翁皂昔B 4含量测定色谱条件：H y p e r s i l O D S C I 8色谱柱 ( 2 5 0 r f u T l x 4 . 6 mm,5 m); 柱温：3 0" C;流动相：乙腈：水 ( 2 8: 7 2 ),流速：1 . 0 m L/ m i n,检测波长2 0 5 n m;进样量2 O L。 对照品溶液制备：取白头翁皂苷B 4对照品适量，精密称定，置

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