鸭肝炎看文献总结
更新时间:2024-01-03 12:48:01 阅读量: 教育文库 文档下载
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一、鸭肝病毒的分类
I 型 DHV 在分类上属于小核糖核酸病毒科,肠道病毒属。病毒粒子呈球形,大小约为 20~40nm,核衣壳二十面体对称,没有囊膜,该病毒于 1950 年在美国用鸡胚首次分离出。在 4℃存在于鸡胚病毒液中的病毒可存活六个月,-20℃可以保持活力达 9 年之久。该病毒主要通过鸡胚或者鸭胚传代致弱,连续传代后可失去对雏鸭的致病力,但是对鸡胚的致死率不断增加,也使鸡胚的死亡时间趋于一致。I 型鸭病毒性肝炎的的特征是发病急、传播迅速和急性经过,主要以 3 周龄以下的雏鸭暴发,病死鸭的独特特征是肝脏出血。
在ICTV于2009年8月召开的研讨会上,小RNA病毒科研究小组提议在该科中增设禽肝炎病毒属(Avihepatovirus)鸭甲型肝炎病毒(duck hepatitis A virus,DHAV)种,建议将现有的DHV-1及台湾、韩国分离的新型鸭肝炎病毒(N-DHV)归属其中。N-DHV中国分离株与韩国分离毒株的基因组同源性在96%左右,二者属同一基因型,而与DHV-1及台湾N-DHV毒株的同源性分别为72%~77%和80%。N-DHV的理化特性与DHV-1基本一致,台湾N-DHV对氯仿不敏感
II 型鸭肝炎病毒粒子在电子显微镜下呈星状,直径为 28~30nm。有人建议将 II 型鸭肝炎病毒归类于星状病毒,并更名为鸭星状病毒。由 II 型 DHV 引起的 DVH除英格兰外其他地区未见报道,自 20 世纪 80 年代爆发以后,该地区再未发生本病。对于污染的房舍可以用甲醛熏蒸消毒。通过鸡胚尿囊腔接种增殖病毒并传代致弱,接种 7d 内,少数胚胎死亡,大部分胚胎发育不良,肝胆淡绿色。该病毒不能在鸭或鸡的继代细胞上增殖。II 型鸭肝炎病毒用鸡胚或鸭胚的尿囊腔连续传代的方法分离比较困难,因为该病毒是星状病毒颗粒,诊断方法主要是电镜观察肝脏的匀浆。
III 型鸭 肝炎病毒属于小 RNA 病毒科,在鸭肾细胞中呈晶格状结构,病毒粒子的直径为 30nm。在美国长岛,Toth(1969)首次报道了一种免疫过 I 型鸭肝炎疫苗的雏鸭发生疑似该病的情况。该病不及 I 型 DVH 严重,雏鸭的死亡率在 30%左右。以前 III 型 DVH主要在美国发生,其它国家未见发生 III 型 DHV,但我国学者程安春等(2000)首次发现了在我国也存在 III 型 DVH。可在 10 日龄鸭胚绒毛尿囊膜上增殖,随着代数的增加鸭胚的死亡时间变短。可在鸭胚或雏鸭的肝或肾细胞培养物中增殖,该病毒对鸡胚不敏感。雏鸭感染 III 型鸭
肝炎病毒后一般不发病,死亡率较低。 二、分离培养
I型DHV经尿囊腔接种后可在鸭胚、鸡胚、鹅胚中增殖进行病毒分离时,以非免疫鸭的鸭胚为最好,因为鸡胚有时需盲传几代才出现死亡。病毒一般传至20代左右方可稳定地繁殖和致死胚。通过鸡胚连续传代的方法,可使Ⅰ型DHV逐渐失去对雏鸭的致病力程安春等报道,第79代鸡胚适应毒(QL79株)对雏鸭肝脏不产生任何组织学变化。Toth发现第80代鸡胚适应病毒在接种53h左右滴度最高,我国潘文石也得到了基本相同的结果。
取孵化良好的 9 日龄鸡胚,经尿囊腔接种 VFY 毒株,选取在接种后 56~66小时左右死亡的鸡胚,收获胚体和尿囊液,将两者混合,反复冻融三次,经尿囊腔接种孵化良好的 9 日龄鸡胚,收取接种后 56~66 小时左右死亡鸡胚的胚体和尿囊液,依次循环。
DHAV-N
采集的病料组织处理后获得上清液经尿囊腔接种鸭胚,第 1 代便出现 死亡,第 2 代后表现规律性死亡,死亡时间多集中于 48h~72h 之间;死 亡鸭胚主要表现为全身水肿,体表充血,肝脏肿大、质脆,出血或边缘坏 死。
主要抗原基因VP1的变异最为突出,高变区主要集中在180-194位和213-219位,进一步证实了该分离株与Ⅰ型 DHV 之间无交叉中和反应的结果.
Ⅱ型DHV经过尿囊腔途径接种鸭胚盲传几代后,可以在鸡胚中增殖,极少数胚胎在接种后7天内死亡,大部分感染胚表现为发育不良,肝脏淡绿色且有坏死\通过鸡胚传代可使Ⅱ型DHV的致病力减弱,根据目前的材料,Ⅱ型DHV不能在任何细胞培养物中增殖。
Ⅲ型DHV不能在鸡胚和鸭胚尿囊腔中增殖,经鸭胚绒毛尿囊膜途径接种可以增殖。第一代接种鸭胚时,胚胎死亡不规律,并且死亡时间要到接种后8~9d;随着进一步传代,死亡时间逐渐缩短,鸭胚的病变包括绒毛尿囊膜水肿,胚体发育不良、水肿、皮肤出血,肝脏、肾脏和脾脏肿大。Ⅲ型DHV可以在鸭胚肝或胚肾细胞培养物中增殖,但不能在原代鸭胚肾和鸭胚肝单层细胞上形成空斑。
由于 VP1 中含有抗原高变区,与病毒基因型和血清型的多样性有关,因此 VP1 基因的研究备受大家的关注。 三、疫苗方面
汪铭书等(1997)应用抗 DHV 的卵黄抗体治疗人工感染病鸭时,用 1 万 LD50强毒攻击时保护率可达到 100%。但是卵黄抗体有不可避免的缺点,如可能带有蛋传性疾病的病原,对养禽业存在潜在的威胁,卵黄抗体为高蛋白物质,在生产过程中极易污染细菌,生产卵黄抗体没有统一的质量标准,没有规范的操作规程,没有用于监测的质量标准。卵黄抗体十分粘稠,注射困难,吸收慢,在注射部位易形成干酪样物质、肿大或坏死等。 免疫程序:
蛋鸡的初产日龄一般在120天左右,从鸡群产蛋开始到175日龄左右达到高峰期(80%),我们称之为初产期,该阶段的产蛋特点是:产蛋率呈持续性上升趋势。189日龄进入高峰期,持续20周左右,将近半年。蛋鸡从开产到淘汰约350天左右的时间,整个饲养周期约470天左右。蛋鸡的产蛋周期一般是一年,从小鸡出壳养到120天开始见蛋,140天基本就有50%以上的鸡下蛋了。从140天龄算起,加上365天,基本就是500天。
取180日龄试验蛋鸡20只,第1次免疫油苗1ml/只;间隔10d进行第2次油苗免疫2ml/只;再间隔10d进行第3次油苗免疫2ml/只。经上述免疫后10d,采鸡血清测定抗DHV中和抗体效价,中和效价在211以上者,收集该鸡产的蛋。
产蛋鸡免疫 选健康产蛋鸡群,首次免疫每只鸡胸部肌肉注射0.5ml弱毒疫苗,14d后进行第二次免疫,每只鸡胸部肌肉注射1ml油乳剂灭活苗。21d时进行第3次免疫,每只鸡肌肉注射1ml油乳剂灭活苗。28d时进行第四次免疫,每只鸡肌肉注射1ml油乳剂灭活苗。
第4次免疫后14d采集鸡血清测定抗DHV中和抗体效价,合格者,收集该鸡群产的蛋,自来水清洗污物后用0.05%百毒杀浸泡3~5min,纱布擦干后,再用75%酒精擦一遍,晾干。无菌条件下分离蛋清,把蛋黄倒入消毒好的组织捣碎机中,加入适量生理盐水进行匀浆1~2min,加终浓度为0.01%的硫柳汞和1000U/ml的青链霉素,混匀后分装于灭菌瓶中,置4~8℃冷藏备用。
鸡卵黄抗体(IgY)来自鸡血清的IgG。
Gough等11021最早研制成功用不完全福氏佐剂乳化的灭活苗,并证实以灭活苗作基础免疫不能产生满意的抗体应答,他们通过比较发现种鸭先用活疫苗免疫,以后再用灭活苗免疫,产生的中和抗体水平比3次用灭活苗免疫或1次活苗免疫均高。
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