实验教案-温度pH值激活剂和抑制剂对酶活性的影响

实验三 温度、pH值、激活剂和抑制剂对酶活性的影响

一、目的

验证温度、pH值、激活剂和抑制剂对酶活性的影响 二、原理

酶的化学本质是蛋白质，凡是能够影响蛋白质变性的因素，都可以使酶失活。此外，温度、pH、激活剂和抑制剂对酶的活性均有显著影响。

酶的活性通常是通过测定酶所作用的底物在作用前后的变化来研究的。本实验是唾液淀粉酶作用的底物-淀粉，被唾液淀粉酶分解成糊精、麦芽糖等产物的变化来观察该酶在各种环境(温度、pH值、激活剂和抑制剂)条件下的活性.

淀粉被酶水解的变化，可以借遇碘呈不同颜色来观察，淀粉遇碘呈蓝色；糊精按分子从大到小的顺序，遇碘呈蓝、紫、红等不同颜色；最小的糊精和麦芽糖遇碘不呈现颜色反应。

三、主要仪器、材料和试剂 器材

电热恒温水浴锅、电炉、比色盘、吸管、试管、漏斗、烧杯等 试剂

0.5%淀粉溶液、碘化钾-碘溶液、1%CuSO4、0.5%NaCl溶液、pH5缓冲液、pH6.8缓冲液、pH8缓冲液、

四、操作步骤 （一）制备唾液淀粉酶

每人用自来水漱口3次，然后取20ml蒸馏水你含于口中，半分钟后吐入烧杯内，4层纱布过滤。以此酶液作如下实验

（二）温度对酶活性的影响 1.取3支试管，编号后按下表操作： 试管号 1 2 3 0.5%淀粉溶液 2ml 2ml 2ml 酶液 1ml 1ml 1ml 温度 0℃水浴 37℃水浴 沸水浴 2. 各管加入0.5%淀粉溶液后，放入各自温度的水浴，待管内温度一致时，3支试管同时迅速加入酶液，摇匀及时放回水浴中。

3. 在比色盘中，各孔中置碘液2滴，每隔1分钟从2号管中取反应液1滴与比色盘中

的碘液混合，观察颜色变化。

4.待第二管反应液遇碘不发生颜色变化（即只有碘液的颜色）时，从水浴中取出各管，向管中加入1-2滴碘液，摇匀后，观察各管颜色，说明温度对酶活性的影响。

三、pH对酶活性的影响

1.取3支试管，编号后按下表操作： 试管号 1 2 3 0.5%淀粉溶液 2ml 2ml 2ml pH5 3ml 0 0 pH6.8 0 3ml 0 pH8 0 0 3ml 酶液 1ml 1ml 1ml 2.将以上3支试管摇匀，放入37℃水浴中保温。

每隔1分钟从2号管中取1滴反应液与碘液混合观察，待遇碘不发生颜色变化时，向各管中加入碘液1-2滴，充分混匀，观察并记录各管颜色，解释pH对酶活性的影响。

四、激活剂和抑制剂对酶活性的影响 1.取3支试管，编号后按下表操作：

试管号 0.5%淀粉溶液 1％CuSO4溶液 0.5％NaCl溶液 蒸馏水 1 2 3 2ml 2ml 2ml 1ml 0 0 0 1ml 0 0 0 1ml 酶液 1ml 1ml 1ml 2.将以上3支试管摇匀，放入37℃水浴中，每隔1-2分钟在比色盘上用碘液检查2号管，待碘液不变色时，再向各管内加入碘液1-2滴，观察、记录结果，并解释原因。 五、思考与作业

1.唾液淀粉酶的最适温度、最适pH分别是多少？ 2.唾液淀粉酶的激活剂和抑制剂分别是什么？

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