郭一男 水产微生物综合实验报告 - 图文

《水产微生物学》综合实验报告

姓名：郭一男 学号：201440566102 班级：水族一班 第二组 一、目的要求

巩固、验证和综合运用微生物学理论知识和实验技能，较系统的掌握微生物实验室常用仪器的建设、使用和维护的知识，具备从事微生物实验室一般工作的能力，为今后在实验岗位开展相关工作奠定坚实的基础。

二、实验器材

接种环、玻璃刮棒、天平、酒精灯、电炉、平皿、试管、培养皿、牛肉膏、蛋白胨、NaCl、NaOH、蒸馏水、革兰氏染液、载玻片、吸水纸、药物纸片、镊子等。

三、实验安排（第二组）

1、洗涤各种玻璃器皿，配制各种培养基，灭菌。 我组配制的培养基类型：固体培养基。

配方：牛肉膏3g，蛋白胨10g，氯化钠5g，琼脂15~20g,蒸馏水1000ml,pH7.0~7.2,15磅/英寸2，灭菌20分钟。

结果：固体培养基凝固后得到的固体培养基硬度不够，在进行平板划线的时候很容易破碎。

出现问题的原因：配制培养基的时候按照普通营养琼脂的配方配制，然而就没有阅读各种配料的使用方法。实验室中琼脂的浓度为33g/1000ml,比配方中琼脂浓度低。同时实验室中的琼脂是已经用各种配料配置好的，不需要再加牛肉膏等其它配料，只要按体积称琼脂然后加水就可以了。我们配置时琼脂的量少，所以在凝固后培养基的硬度不够。 2、人工感染实验 菌种：蛙大白 注射方式：肌肉注射

注射剂量：500微升 注射部位：背鳍基部下方 实验过程：

1) 分离纯化。用细菌培养液在固体培养基上划线，培养细菌菌落。 2) 液体培养。利用培养出来的菌落转接到液体培养基中，进行液体培养。 3) 人工感染：抓鱼时用纱布遮挡鱼的眼睛，以减少应激反应。然后在注射部

位进行酒精消毒，再利用肌肉注射的方式将细菌注射到鱼体上，最后再用酒精擦拭一下。然后设置空白对照组。最后再培养观察。

3、解剖病鱼，取鳃、肝、脾、肠道等组织。将组织涂布平板，将病原菌接种到平板上，培养箱培养24小时。

注射蛙大白细菌的鱼的状态：鱼体有异味，体表黏液增多，体表出现多处出血点，嘴唇有出血点，体内内脏没有明显病变。故而用第一组注射大鱼鳃细菌的与进行实验。

注射大鱼鳃细菌的鱼的状态：鱼体表黏液增多，肌肉注射部位变黑，并且注射部位肌肉松弛糜烂，有脓水。

菌落状态：菌落为圆形白色。

4、细菌计数

方法：梯度稀释。

细菌计数实验失败，实验结果不可数。

失败原因：平板上菌落密集且不可数，菌落数都大于300cfu。因为涂布不均匀导致菌落密集不可数。同时因为军种原液浓度太大，所以稀释后平板上的菌落数多。此时应该按梯度稀释的方法再多设置几个梯度浓度，得到浓度为原液浓度10-7、10-8、10-9的细菌液体培养液，然后再涂布在固体培养基上培养。 5、革兰氏染色

染色结果：细菌被染成红色，为革兰氏阴性菌。 细菌形态：短杆状。

6、药物敏感性实验

结果（分析不同药物的抑菌效果，如抑菌圈的有无和大小等，并绘制表格展示。附照片） 抑菌圈（mm) 菌种：大鱼鳃 结果：不同药物的抑菌效果不同，福尔马林、石碳酸、链霉素、75%酒精对大鱼鳃细菌都有抑菌作用，其中石碳酸的抑菌圈最大，其抑菌作用最大，其次是福尔马林、75%酒精，链霉素是四种药物中义军去哪最低的，其抑菌作用在其中最低。

福尔马林 11.5 石碳酸 12 链霉素 10 75%酒精 11

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